pcr標(biāo)準(zhǔn)程序[精校版本]

1、xxxx醫(yī)院檢驗(yàn)科PCR實(shí)驗(yàn)室程序管理文件撰 寫 人： 批 準(zhǔn) 人： 批準(zhǔn)日期：啟用日期： 二零零四年貳月一日制某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào):JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第1頁共 48頁目 錄程序文件名稱 頁碼核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和管理 2實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理及清潔 5實(shí)驗(yàn)室人員的配置及培訓(xùn)程序 6儀器申請、采購、驗(yàn)證和管理程序 8離心機(jī)的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 9測量儀器設(shè)備統(tǒng)一管理標(biāo)準(zhǔn)程序 11連續(xù)可調(diào)移液器的操作及校準(zhǔn)程序 12常規(guī)儀器設(shè)備的使用、操作和維護(hù)程序 14應(yīng)急處理程序

2、17實(shí)驗(yàn)耗材的購買、質(zhì)檢和儲(chǔ)存程序 19試劑質(zhì)檢的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 21實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑的管理及配制標(biāo)準(zhǔn)操作程序 23實(shí)驗(yàn)室殘留試劑藥品、廢棄物處理及生物防護(hù)程序 25標(biāo)本采集、驗(yàn)收和保存的標(biāo)準(zhǔn)操作程序 27標(biāo)本唯一標(biāo)識(shí)編號(hào)程序 30標(biāo)本前處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序 31檢驗(yàn)結(jié)果報(bào)告程序 33抱怨的處理程序 35實(shí)驗(yàn)室記錄的管理 37實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)操作程序 39實(shí)驗(yàn)室室間質(zhì)量評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)操作程序 41Gene Amp 5700型核酸擴(kuò)增熒光檢測儀操作及分析程序 42附圖與附表修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130

3、生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第2頁共 48頁核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置和管理1目的：實(shí)現(xiàn)核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室有專人負(fù)責(zé)，依照實(shí)驗(yàn)室管理規(guī)范實(shí)施全面質(zhì)量管理，保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。2范圍：本制度適用于所有開展核酸擴(kuò)增熒光檢測項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)室及相關(guān)人員，并明確了實(shí)驗(yàn)室各項(xiàng)規(guī)章。3操作人：4規(guī)章4.1實(shí)驗(yàn)室分區(qū)設(shè)置a）核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)置為試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)及擴(kuò)增區(qū)。每個(gè)區(qū)都設(shè)置一個(gè)緩沖區(qū)，用于更換工作服、鞋套及維持空氣流向，實(shí)驗(yàn)室布局見附圖01。進(jìn)入各個(gè)工作區(qū)域工作擴(kuò)增時(shí),必須嚴(yán)格遵守單一方向順序,即從第一區(qū)試劑準(zhǔn)備區(qū)第二區(qū)的標(biāo)本制備區(qū)第三區(qū)的擴(kuò)增區(qū)。各區(qū)門前有

4、醒目標(biāo)志，一、二區(qū)通過排風(fēng)裝置保持正壓，三區(qū)通過抽風(fēng)裝置保持負(fù)壓。b）各室的實(shí)驗(yàn)物品（含移液器、試管架、吸頭盒、記錄本、筆等），不得混用，須貼上不同標(biāo)簽予以區(qū)別。c）各區(qū)配有不同顏色工作服，一區(qū)為白色，二區(qū)為藍(lán)色，三區(qū)為粉紅色。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室，必須更換本室有顏色標(biāo)識(shí)的工作服，穿上鞋套。4.2試劑準(zhǔn)備區(qū)工作制度a）實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用白色工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴手套、一次性鞋套。b）記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)（例附表01）。c）記錄冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)，繪制冰箱的質(zhì)控圖（例附圖02）。d）根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本驗(yàn)收登記表，取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配制和使用的試劑，其余試劑要立即收好放回冰箱內(nèi)。e）每周一清點(diǎn)庫存試劑，看有無過期或

5、將近到期的試劑，或作報(bào)廢處理或排列優(yōu)先使用，避免浪費(fèi)，然后記錄試劑的詳細(xì)保存情況。f）實(shí)驗(yàn)中所使用的離心管、吸頭等需經(jīng)高壓滅菌處理，使用時(shí)應(yīng)在消毒有效期內(nèi)。g）試劑準(zhǔn)備工作完成后，將使用過的離心管、吸頭須置于盛有10“84”消毒液或類似消毒液的廢液缸中，還原實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。h）將準(zhǔn)備好的試劑放入傳遞窗中。i）其他區(qū)的用品不得帶入本區(qū)。j）每次實(shí)驗(yàn)記錄，書寫工整詳細(xì)，應(yīng)使用本室專用的、帶有本室標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆。k）實(shí)驗(yàn)完畢打開紫外燈消毒3060分鐘，記錄紫外燈使用情況。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:2002113

6、0生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第3頁共 48頁4.4標(biāo)本制備區(qū)工作制度a）實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本室專用藍(lán)色工作服。實(shí)驗(yàn)中須使用一次性鞋套，戴手手套，手套需常更換。b）從傳遞窗中取出試劑放入冰箱冷凍室試劑存放專區(qū)暫存。c）記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。d）記錄冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)，繪制冰箱的質(zhì)控圖。e）核對標(biāo)本的編號(hào)、類型和標(biāo)本數(shù)量。f）按試劑盒要求進(jìn)行標(biāo)本的裂解和提取處理，在超凈工作臺(tái)上進(jìn)行加樣，遞入傳遞窗內(nèi)。g）使用本室專用的經(jīng)過滅活無菌處理的加樣器和帶濾心的吸頭。h）使用過的離心管、吸頭須置于盛有10“84”消毒液或類似消毒液的廢液缸中。i）使用本室專用的帶有本室標(biāo)識(shí)的

7、記錄本、紙和筆。j）患者樣品應(yīng)按有生物傳染性危險(xiǎn)品對待。k）標(biāo)本處理完成后，關(guān)閉所有儀器，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。 l）其他區(qū)的用品不得帶入本室。m）實(shí)驗(yàn)完畢要打開紫外燈消毒3060分鐘，記錄紫外燈使用情況。4.4擴(kuò)增區(qū)工作制度a）實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用粉紅色工作服。實(shí)驗(yàn)中須使用一次性鞋套，戴手套，手套需常更換。b）將從傳遞窗接收來的離心后加好樣的反應(yīng)管上機(jī)擴(kuò)增。c）擴(kuò)增分析完后，記錄結(jié)果，打印報(bào)告。d）得到當(dāng)天室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果后，在室內(nèi)質(zhì)控圖（例附圖03）上描點(diǎn)。e）關(guān)掉擴(kuò)增儀，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。f）實(shí)驗(yàn)完畢要打開紫外燈消毒3060分鐘，記錄紫外燈使用情況（例附表02）。本文

8、涉及以下圖表，見SOP文件末的附圖表：實(shí)驗(yàn)室平面布局示意圖-附圖01冰箱質(zhì)控圖-附圖02室內(nèi)質(zhì)控圖-附圖03溫度、濕度記錄表-附表01移動(dòng)紫外燈使用記錄表-附表02修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第4頁共 48頁修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第5頁共 48頁實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管

9、理及清潔1 目的：保證實(shí)驗(yàn)室日常內(nèi)務(wù)管理及清潔工作順利進(jìn)行。2 范圍：實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員及醫(yī)院清潔工人。3 內(nèi)務(wù)管理及清潔制度3.1內(nèi)務(wù)管理制度b）進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的單一流向的規(guī)定，禁止逆向走動(dòng)。c）非本室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。d）實(shí)驗(yàn)人員必須熟悉儀器性能方允許操作，嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。e）所有儀器（如PCR擴(kuò)增儀）須有專人負(fù)責(zé)，有使用維護(hù)記錄。f）注意保持儀器衛(wèi)生整潔，嚴(yán)禁在室內(nèi)抽煙，吃零食，非儀器操作人應(yīng)盡量少入。g）每天了解儀器運(yùn)轉(zhuǎn)情況及試劑使用情況，負(fù)責(zé)儀器的整潔，安全，檢查電源，水龍頭，節(jié)假日應(yīng)指定人員負(fù)責(zé)檢查實(shí)驗(yàn)室的儀器、設(shè)備，確保安全。3.2內(nèi)務(wù)清潔制度a）

10、合理規(guī)劃實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品，做到擺放整齊、有序，無用的或使用效率低的物品放置到儲(chǔ)存處，常用的物品要容易尋找到。b）抽屜、柜子、文件類物品要作好標(biāo)記，以方便識(shí)別。c）實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用10%“84”消毒液對臺(tái)面進(jìn)行清潔，并用紫外線燈進(jìn)行消毒。d）每天對使用過的移液器用優(yōu)氯凈進(jìn)行擦拭，每2周1次對移液器進(jìn)行高壓消毒。e）實(shí)驗(yàn)過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，應(yīng)立即用10%“84”消毒液滴上，濾紙蓋上半小時(shí)，然后用酒精擦洗，并經(jīng)紫外燈消毒。f）每天實(shí)驗(yàn)前通過內(nèi)走廊上的開關(guān)，開啟各區(qū)的通風(fēng)系統(tǒng)，各區(qū)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后打開該區(qū)移動(dòng)紫外燈消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，紫外燈每天開啟 3060分鐘。g）每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束，待紫外燈消毒時(shí)間足夠后，依次關(guān)閉

11、各區(qū)紫外燈并記錄。 h）依次清潔三個(gè)區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和地面，各區(qū)清潔消毒工具均專用，不可混用，注意按照單一方向流程的原則來進(jìn)行清潔。i）處理好各區(qū)廢棄物，交醫(yī)院集中處理。j）每周將工作服交院洗衣房洗滌消毒，不同實(shí)驗(yàn)區(qū)的工作服隔開洗滌。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第6頁共 48頁實(shí)驗(yàn)室人員的配置及培訓(xùn)程序1 目的：保證實(shí)驗(yàn)室有足夠數(shù)量的合格的具備開展該類實(shí)驗(yàn)的能力的實(shí)驗(yàn)人員。2 適用范圍：本程序適用于實(shí)驗(yàn)室人員配置、管理、培訓(xùn)及考核。

12、3 程序：3.1 人員要求：3.1.1本實(shí)驗(yàn)室工人作員應(yīng)為醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)或相關(guān)專業(yè)畢業(yè)，具有中級技術(shù)職稱或?qū)？茖W(xué)歷。3.1.2 實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)參加衛(wèi)生部或省臨檢中心舉辦的PCR技術(shù)培訓(xùn)，并取得合格證。3.1.3 對于新進(jìn)入本室的人員，如尚未取得PCR技術(shù)培訓(xùn)合格證，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室有培訓(xùn)合格證的上級技術(shù)人員的指導(dǎo)下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)工作，實(shí)驗(yàn)報(bào)告由有資格人員出具，并應(yīng)在最短的時(shí)間內(nèi)取得上崗培訓(xùn)合格證。3.2 人員配置：3.2.1 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)工作需要配備足夠的工作人員，目前實(shí)驗(yàn)室有主任技師、主管技師、技師各1人，獲得培訓(xùn)合格證者1人，視工作量的增加和業(yè)務(wù)發(fā)展需要，應(yīng)適當(dāng)增加工作人員。3.2.2 各級技術(shù)人員履

13、行相應(yīng)的工作職責(zé)。3.3 人員培訓(xùn)及考核：3.3.1 實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人（或委托人）參加每年衛(wèi)生部PCR室間質(zhì)評總結(jié)會(huì)。3.3.2 實(shí)驗(yàn)室工作人員每12年至少參加1次PCR技術(shù)的省級或國家級繼續(xù)教育項(xiàng)目，參加相關(guān)學(xué)術(shù)交流會(huì)議。3.3.3 安排未取得上崗培訓(xùn)合格證的工作人員在合適的時(shí)間內(nèi)參加技術(shù)培訓(xùn)。3.3.4 科室定期組織實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部實(shí)驗(yàn)人員學(xué)習(xí)、更新核酸擴(kuò)增方面的相關(guān)知識(shí)，提升自身的理論學(xué)習(xí)水平。特別是在標(biāo)本接收區(qū)采血、接收標(biāo)本的實(shí)驗(yàn)人員，需定期對其進(jìn)行有關(guān)核酸擴(kuò)增技術(shù)，標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸?shù)戎R(shí)的培訓(xùn)。一些科室的送檢標(biāo)本由該科室的人員送到標(biāo)本接收區(qū)，對這些臨床醫(yī)護(hù)人員也要定期進(jìn)行有關(guān)核酸擴(kuò)增技術(shù)，

14、標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸?shù)戎R(shí)的培訓(xùn)。3.3.5 實(shí)驗(yàn)室工作人員每年應(yīng)提交至少1篇本專業(yè)相關(guān)學(xué)術(shù)論文或綜述作為年度業(yè)務(wù)考核的依據(jù)之一。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第7頁共 48頁3.4 人員管理3.4.1實(shí)驗(yàn)室建立所有工作人員的技術(shù)檔案，包括：學(xué)歷、任職資格、發(fā)表論文、研究成果、培訓(xùn)等相關(guān)材料復(fù)印件。3.4.2 技術(shù)檔案分文本檔案和電子檔案，文本檔案每年更新1次，電子檔案隨時(shí)更新。本文涉及以下表格，見SOP文件末的附圖表：實(shí)驗(yàn)室主要

15、負(fù)責(zé)人簡歷表-附表03實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表-附表04人員培訓(xùn)計(jì)劃及培訓(xùn)記錄表-附表05修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第8頁共 48頁儀器申請、采購、驗(yàn)證和管理程序1目的：保證儀器正常的購買、安裝、使用，確保實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善的管理。2適用范圍：基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室所有的儀器設(shè)備。3負(fù)責(zé)人：劉某某4申請、采購及驗(yàn)證程序4.1 儀器申請購買需根據(jù)實(shí)驗(yàn)室需要由實(shí)驗(yàn)室工作人員提出并向?qū)嶒?yàn)室負(fù)責(zé)人進(jìn)行書面匯報(bào)。4.2 由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人填寫儀

16、器設(shè)備申購表，通過科室領(lǐng)導(dǎo)小組會(huì)議批準(zhǔn)后，上報(bào)醫(yī)院設(shè)備科統(tǒng)一進(jìn)行購買。4.3 儀器采購到貨后，在醫(yī)院設(shè)備科人員和實(shí)驗(yàn)室人員共同陪同下由廠家到實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行安裝。4.4 儀器安裝后由廠家工程師進(jìn)行培訓(xùn)并通過設(shè)備科人員確認(rèn)后，填報(bào)儀器安裝表后，設(shè)備科和實(shí)驗(yàn)室各備份一份儀器維護(hù)使用檔案后，由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人簽字后方可使用。5 管理程序：5.1 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的主要儀器設(shè)備均需建立檔案，主要的儀器包括：PE7000擴(kuò)增儀、冷凍離心機(jī)、離心機(jī)、超低溫冰箱、普通低溫冰箱、移液器、超凈工作臺(tái)等。5.2 設(shè)備的檔案包括：設(shè)備名稱、制造商名稱、型號(hào)、序號(hào)、接收日期和啟用日期、目前放置地點(diǎn)、接收時(shí)的狀態(tài)、校準(zhǔn)和鑒定的

17、日期和結(jié)果以及下次校準(zhǔn)的日期、進(jìn)行的維護(hù)和維護(hù)計(jì)劃、故障記錄等，并應(yīng)有儀器使用說明書或其它技術(shù)資料復(fù)印件。5.3 儀器出現(xiàn)故障應(yīng)作記錄和處理意見，如不能正常使用，應(yīng)填寫維修申請單，交醫(yī)院設(shè)備維修人員或相關(guān)專門維修單位進(jìn)行處理。5.4 儀器應(yīng)有工作狀態(tài)標(biāo)識(shí)，正常使用者貼綠色標(biāo)簽。有故障待修暫停使用者用黃色標(biāo)簽，不能使用者應(yīng)貼紅色標(biāo)簽。需定期作校準(zhǔn)或檢定的儀器應(yīng)有校準(zhǔn)或檢定日期及下次校準(zhǔn)或檢定日期的記錄。5.6 基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備實(shí)行分區(qū)使用，不得混用。5.7 本實(shí)驗(yàn)室所有儀器、設(shè)備均為專用不外借。本文涉及以下表格，見SOP文件末的附圖表：主要儀器設(shè)備一覽表-附表06修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人

18、批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第9頁共 48頁離心機(jī)的使用、維護(hù)和校準(zhǔn)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的：保證離心機(jī)的正常使用。2適用范圍：適用于本室使用的普通離心機(jī)和低溫離心機(jī)。3操作人：劉某某 胡某某 陳某某4操作4.1使用方法4.1.1普通離心機(jī) a）離心機(jī)應(yīng)放置在水平堅(jiān)固的地板或平臺(tái)上，并力求使儀器處于水平位置以免離心時(shí)造成儀器振蕩。 b）打開電源開關(guān)，將預(yù)先平衡好的樣品對稱放置于轉(zhuǎn)頭的樣品架上，關(guān)閉機(jī)蓋。c）旋動(dòng)定時(shí)旋鈕設(shè)定離心時(shí)間，緩慢旋轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕使

19、儀器轉(zhuǎn)速達(dá)到預(yù)定要求。d）離心完畢后，將轉(zhuǎn)速調(diào)節(jié)旋鈕調(diào)回零位，關(guān)閉電源開關(guān)。e）待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)打開機(jī)蓋，取出離心樣品，再次關(guān)閉機(jī)蓋結(jié)束離心。4.1.2低溫離心機(jī)a）離心機(jī)應(yīng)放置在水平堅(jiān)固的地板或平臺(tái)上，并力求使儀器處于水平位置以免離心時(shí)造成儀器振蕩。b）打開電源開關(guān)，按功能選擇鍵，設(shè)定離心溫度、速度和時(shí)間。c）待機(jī)腔溫度達(dá)到設(shè)定要求時(shí)，將預(yù)先平衡好的樣品對稱放置于轉(zhuǎn)頭的樣品架上，關(guān)閉機(jī)蓋。d）按啟動(dòng)鍵，離心機(jī)將執(zhí)行上述參數(shù)進(jìn)行運(yùn)行，到預(yù)定時(shí)間自動(dòng)關(guān)機(jī)。e）待離心機(jī)完全停止轉(zhuǎn)動(dòng)時(shí)打開機(jī)蓋，取出離心樣品。如不再使用該離心機(jī)，關(guān)閉電源，用柔軟干凈的布擦拭轉(zhuǎn)頭和機(jī)腔內(nèi)壁，待離心機(jī)腔內(nèi)溫度與室溫

20、平衡后方可蓋上機(jī)蓋。4.2維護(hù)保養(yǎng)a）離心室的清潔：為了避免樣本等殘留物的污染，應(yīng)經(jīng)常對離心機(jī)外殼和離心室進(jìn)行清潔處理。對離心室清潔，應(yīng)先打開離心機(jī)蓋，撥掉電源線，用專用設(shè)備將離心機(jī)轉(zhuǎn)頭旋下，70%乙醇去污染清潔離心室；離心室內(nèi)的橡膠密封圈經(jīng)去污劑處理后，用水沖洗，再用甘油潤滑。b）轉(zhuǎn)頭的清潔：轉(zhuǎn)頭會(huì)被樣本殘留物污染，也可能會(huì)被某些化學(xué)試劑腐蝕，因此應(yīng)對轉(zhuǎn)頭每月進(jìn)行清潔維護(hù)。每月用中性的清潔劑清潔轉(zhuǎn)頭一次，并在儀器使用記錄本上作好記錄，以延長轉(zhuǎn)頭的壽命。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:

21、2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第10頁共 48頁c）離心完畢后，應(yīng)及時(shí)用干的軟布拭去離心室的冷凝水。（此步僅適用于低溫離心機(jī)）d）離心結(jié)束后，使離心機(jī)蓋打開，然后關(guān)機(jī)。4.3校準(zhǔn)每年6月、12月請醫(yī)院設(shè)備科南昌市計(jì)量局對該類儀器進(jìn)行定期檢修校準(zhǔn)。5 應(yīng)急處理如果離心時(shí)發(fā)現(xiàn)離心管破裂，必須先停止實(shí)驗(yàn)，將破裂管密封放入生物垃圾桶，再用75%酒精進(jìn)行擦拭消毒，如必要需用移動(dòng)紫外燈照射3060分鐘后才能開始實(shí)驗(yàn)。注意事項(xiàng)： a）離心機(jī)應(yīng)始終處于水平位置，與外接電源電壓匹配，并要求有良好的接地線。 b）開機(jī)前應(yīng)檢查機(jī)腔有無異物掉入。c）樣品應(yīng)預(yù)先平衡，使用離心機(jī)微量離心時(shí)離心套管

22、與樣品應(yīng)同時(shí)平衡。d）揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時(shí)，應(yīng)使用帶蓋的離心管，并確保液體不外漏以免侵蝕機(jī)腔或造成事故。 e）每次操作完畢，應(yīng)做好使用情況記錄，應(yīng)定期對機(jī)器各項(xiàng)性能進(jìn)行檢修。 f）離心過程中若發(fā)現(xiàn)異常現(xiàn)象，應(yīng)立即關(guān)閉電源，報(bào)請有關(guān)技術(shù)人員檢修。g）定期清潔機(jī)腔。h）使用離心機(jī)時(shí)遵守左右手分開原則，只以右手操作儀器。i）使用冷凍離心機(jī)時(shí)，除注意以上各項(xiàng)外，還應(yīng)注意擦拭機(jī)腔的動(dòng)作要輕柔，以免損壞機(jī)腔內(nèi)溫度敏感器。j）相對離心力于每分鐘轉(zhuǎn)速的換算。以往離心機(jī)的轉(zhuǎn)速常以每分鐘多少轉(zhuǎn)表示，現(xiàn)在常用相對離心力（RCF）表示。兩者互換公式如下：N=(RCF105)/(1.18R) RCF=0.01123

23、8095RNN表示轉(zhuǎn)速，單位為轉(zhuǎn)/分（r/min）；R表示離心半徑，即離心管底端至軸心的距離，單位為厘米（cm）；RCF表示相對離心力，單位用重力加速度g（g9.8m/s）本文涉及以下圖表，見SOP文件末的附圖表：離心機(jī)使用記錄表-附表07修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第11頁共 48頁測量儀器設(shè)備統(tǒng)一管理標(biāo)準(zhǔn)程序1目的：確保設(shè)備儀器的精確性，保證實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。2適用范圍：實(shí)驗(yàn)室所有測量設(shè)備（包括移液器、溫度計(jì)、濕度計(jì)、天平等）。

24、3 操作人：劉某某 胡某某 陳某某4操作方法a） 根據(jù)具體儀器的要求在規(guī)定時(shí)間內(nèi)上報(bào)設(shè)備科，要求儀器校準(zhǔn)。如移液器校準(zhǔn)時(shí)間半年；溫度計(jì)、濕度計(jì)1年；天平1年。b）由醫(yī)院設(shè)備科聯(lián)系某某省標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量局統(tǒng)一校準(zhǔn)。c）詳細(xì)記錄校準(zhǔn)儀器的名稱型號(hào)、以及校準(zhǔn)時(shí)間。d）一些測量設(shè)備（如溫濕度計(jì)）可只校準(zhǔn)一套，校準(zhǔn)過的測量設(shè)備可作為實(shí)驗(yàn)室其它該種測量設(shè)備的參照。e）一些儀器設(shè)備（包括冰箱、水浴箱等）每天都要用校準(zhǔn)過的溫度計(jì)進(jìn)行測定、記錄，以確保其精確性，保證實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。本文涉及以下表格，見SOP文件末的附圖表：設(shè)備校正記錄表-附表08冰箱溫度記錄表-附表09水浴箱溫度記錄表-附表10修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生

25、效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第12頁共 48頁連續(xù)可調(diào)式移液器的操作及校準(zhǔn)程序1目的：正確使用移液器，確保移液器加樣的精確性和準(zhǔn)確性。2適用范圍：各種品牌、型號(hào)的連續(xù)可調(diào)式移液器。3操作程序3.1 轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕設(shè)定移液量，設(shè)定的移液量不可超出該移液器規(guī)定的范圍。3.2 裝上配套的吸頭（Tip）。3.3 將按鈕壓至第一停點(diǎn)位置。3.4 將移液管吸頭浸入液面下23mm深處，然后慢慢松開按鈕吸入液體。待移入吸頭吸滿液體后，將吸頭撤出液面，擦掉吸頭外側(cè)的所有液滴。3.5

26、 輕輕壓下操作按鈕至第一停點(diǎn)位置，放出液體。約1秒鐘后，繼續(xù)將操作按鈕向下壓至第二停點(diǎn)位置。待吸頭液體放干凈后，將吸頭貼在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中，撤出吸頭。3.6 松開按鈕使之回到起點(diǎn)位置。需要時(shí)，可更換吸頭繼續(xù)移液操作。4校準(zhǔn)方法4.1校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求室 溫：2025，測定中波動(dòng)范圍不大于0.5。電子天平：放置于無塵和震動(dòng)影響的臺(tái)面上，房間盡可能有空調(diào)。稱量時(shí)，為保證天平內(nèi)的濕度（相對濕度6090），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10mL蒸餾水的小燒杯。小燒杯：510mL體積。測定液體：溫度為2025的去氣雙蒸水。選定校準(zhǔn)體積：a）擬校準(zhǔn)體積；b）移液器標(biāo)定體積的中間體積。c）最小可調(diào)體積（不

27、小于擬定體積的10）。如為固定體積移液器，則只有一種校準(zhǔn)體積。4.2校準(zhǔn)步驟a）將移液器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇合適的吸頭；b）調(diào)節(jié)好天平；c）來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭濕潤，用紗布拭干吸頭；d）垂直握住移液器，將吸頭浸入液面23mm處，緩慢（13秒）一致地吸取蒸餾水；修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第13頁共 48頁e）將吸頭離開液面，靠在管壁，去掉吸頭外部的液體；f）將移液器以30角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將移液器壓至第一檔，等

28、待13秒，再壓至第二檔，使吸頭里的液體完全排出；g）記錄稱量值；h）擦干吸頭外面；i）按上步驟稱量10次；j）取10次測量值的均值作為最后移液器吸取的蒸餾水重量，按附表1所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積；k）按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)移液器。備注：連續(xù)可調(diào)移液器校準(zhǔn)由某某省標(biāo)準(zhǔn)計(jì)量局統(tǒng)一校準(zhǔn)。（附表 蒸餾水Z因子 hPa(mbar)）溫度（）80085390796010131067201.00261.002710.00271.00281.00291.002920.51.00271.00281.00281.00291.00301.0030211.00281.00291.00301.00301.00311.00312

29、1.51.00301.00301.00311.00311.00321.0032221.00311.00311.00321.00321.00331.003322.51.00321.00321.00331.00331.00341.0035231.00331.00331.00341.00351.00351.003623.51.00341.00351.00351.00361.00361.0037241.00351.00361.00361.00371.00381.003824.51.00371.00371.00381.00381.00411.0039251.00381.00381.00391.00391

30、.00401.00414.3比較校準(zhǔn)法利用經(jīng)計(jì)量局校準(zhǔn)并頒發(fā)校準(zhǔn)報(bào)告之同型號(hào)移液器，在移液器量程范圍的高低兩個(gè)檔各選擇一個(gè)校準(zhǔn)點(diǎn)，利用電子天平稱量結(jié)果與已校準(zhǔn)移液器稱量結(jié)果進(jìn)行比較，完成校準(zhǔn)。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第14頁共 48頁常規(guī)儀器設(shè)備的使用、操作和維護(hù)程序1 目的：正確操作使用儀器設(shè)備，確保檢測質(zhì)量，保障儀器設(shè)備的使用壽命，充分發(fā)揮儀器效益和效率。2 范圍：電熱恒溫水浴鍋、超凈工作臺(tái)、冰箱等。3 使用程序3.1

31、儀器設(shè)備的使用授權(quán)：a）僅有本實(shí)驗(yàn)室工作人員有權(quán)使用實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備。b） 儀器設(shè)備的使用者在使用前首先必須熟悉儀器設(shè)備的操作使用程序并經(jīng)室主任考核認(rèn)可。3.2 儀器的使用：a）儀器設(shè)備的使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用管理。b）儀器設(shè)備的使用必須嚴(yán)格遵循儀器設(shè)備的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程。c）主要儀器使用時(shí)每次工作應(yīng)有相應(yīng)的使用記錄。4 操作及維護(hù)程序4.1 電熱恒溫水浴箱 4.1.1水浴箱應(yīng)置于堅(jiān)固的水平臺(tái)上，電源電壓須匹配。4.1.2在水浴箱內(nèi)注入清潔溫水至總高度1/21/3處。4.1.3打開電源開關(guān)，把溫度控制器的溫度調(diào)節(jié)旋鈕至設(shè)定溫度。4.1.4當(dāng)水槽內(nèi)測定溫度達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)，加熱中斷、指示燈熄滅，再通電9

32、0分鐘后，溫度可保持穩(wěn)定。4.1.5在每次水浴箱使用前，放入標(biāo)準(zhǔn)溫度計(jì)同時(shí)監(jiān)測實(shí)際水溫，以校正溫度。4.1.6水浴箱工作溫度波動(dòng)范圍應(yīng)控制在：設(shè)定溫度 +/1以內(nèi)。4.1.7水浴箱正面外下壁貼有水浴箱溫度記錄表（例附表09），記錄每天溫度；如溫度超出正常范圍，該溫度應(yīng)劃上紅圈，并把修正操作記錄下來。4.1.8水浴箱內(nèi)外應(yīng)保持清潔，外殼忌用腐蝕性溶液擦拭。4.1.9儀器不用時(shí)，需套好防塵罩，以免溫度控制器受潮影響使用。4.2 超凈工作臺(tái)4.2.1 新安裝或長期未使用的工作臺(tái)，使用前必須用超凈真空吸塵器或不產(chǎn)生纖維的物品認(rèn)真進(jìn)行清潔工作。4.2.2 接通電源，使用前應(yīng)提前1530分鐘同時(shí)開啟紫外燈

33、和風(fēng)機(jī)組工作。4.2.3 當(dāng)需要調(diào)節(jié)風(fēng)機(jī)風(fēng)速時(shí)，用工作臺(tái)操作面板上的風(fēng)速調(diào)節(jié)鈕進(jìn)行調(diào)節(jié)。風(fēng)機(jī)、照明均由批示燈指示其工作狀態(tài)，工作時(shí)，發(fā)光。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第15頁共 48頁4.2.4 工作臺(tái)面上禁止存放不必要的物品，以保持工作區(qū)的潔凈氣流不受干擾。4.2.5 禁止在工作臺(tái)面上記錄書寫，工作時(shí)應(yīng)盡量避免作明顯擾動(dòng)氣流的動(dòng)作；禁止在預(yù)過濾進(jìn)風(fēng)口部位放置物品，以免擋住進(jìn)風(fēng)口造成進(jìn)風(fēng)量減少，降低凈化能力。4.2.6 使用結(jié)束

34、后，用消毒液清理工作臺(tái)面后打開紫外燈，1530分鐘后關(guān)閉紫外燈，關(guān)閉潔凈臺(tái)電源。4.2.7 根據(jù)環(huán)境潔凈程度，定期將預(yù)過濾器中的濾料拆下清洗，一般間隔時(shí)間為36個(gè)月。4.2.8 每次使用潔凈臺(tái)后，均需對潔凈臺(tái)進(jìn)行清潔。4.2.9 定期（一般每半年1次）計(jì)測工作區(qū)風(fēng)速，如發(fā)現(xiàn)不符合技術(shù)參數(shù)要求，則可調(diào)大風(fēng)機(jī)供電電壓。當(dāng)風(fēng)機(jī)組電壓調(diào)到最大時(shí)，工作區(qū)風(fēng)速仍達(dá)不到0.3m/s，則必須更換高效空氣過濾器。（由廠家或院儀器維修人員進(jìn)行）4.2.10 做好維護(hù)記錄。4.2.11長期不使用的工作臺(tái)撥下電源插頭。4.3 普通冰箱4.3.1 開、關(guān)機(jī)：試劑冰箱按說明書要求放好后，插上電源線，冷藏室溫度開關(guān)置于4，

35、冷凍室溫度開關(guān)置于 -20，2小時(shí)后用溫度計(jì)確認(rèn)。系統(tǒng)進(jìn)入正常運(yùn)行狀態(tài)后即可正常使用。4.3.2 若冰箱較長時(shí)間不用或需要送修時(shí)需按以下步驟操作：a）關(guān)閉冰箱電源，并拔下電源插頭。b）清空冰箱內(nèi)的所有貯存物，并妥善放置到其它冰箱內(nèi)。打開冰箱門，等待冰箱內(nèi)的霜化完。c）用肥皂水擦洗干凈冰箱內(nèi)膽，后用消毒液擦洗一次。d）保持冰箱門打開待其自然干燥。4.3.3 冰箱應(yīng)放置于水平地面并留有一定的散熱空間。4.3.4 外接電源電壓必須匹配，并要求有良好的接地線。4.3.5 放入冰箱內(nèi)的所有試劑、樣品、質(zhì)控品等必須密封保存。4.3.6 保持冰箱出水口通暢；非自動(dòng)除霜冰箱應(yīng)定期除霜；定期清潔冰箱，清潔時(shí)切斷

36、電源，用軟布蘸水擦拭冰箱內(nèi)外，必要時(shí)可用中性洗滌劑。4.3.7 每日由專人負(fù)責(zé)觀察冰箱內(nèi)溫度并記錄于表中，記錄表貼于門上，每月一張，一年裝訂成冊存檔。4.3.8 若溫度超出規(guī)定范圍，調(diào)節(jié)溫控使其回到正常范圍，并進(jìn)行記錄。 4.3.9 若溫控調(diào)節(jié)無效，報(bào)請?jiān)O(shè)備科維修，修理后須驗(yàn)收合格并簽字后方能正常使用。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改內(nèi)容批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第16頁共 48頁4.4 超低溫冰箱4.4.1 接通電源，將冰箱的開關(guān)置ON位置，此時(shí)溫度顯示屏顯

37、示冰箱的實(shí)際溫度，且數(shù)字不停地閃爍。4.4.2 溫度設(shè)定：以調(diào)節(jié)冰箱溫度為-70為例說明，按SET鍵，溫度指示顯示-85，且“8”閃爍，按“”鍵直至“8“變?yōu)椤?”；按“”鍵，此時(shí)溫度指示為“-75”，“5”閃爍，按“”鍵直至“5”變?yōu)椤?”， 按SET鍵，此時(shí)溫度指示“-70”，且不閃爍。4.4.3 設(shè)定溫度時(shí)應(yīng)注意，一般應(yīng)以10遞減方式進(jìn)行，即每次設(shè)定的溫度低于冰箱實(shí)際溫度10，待冰箱達(dá)到設(shè)定溫度時(shí)再進(jìn)行調(diào)節(jié)，直至達(dá)到所需溫度。4.4.4 如超低溫度遇較長時(shí)間停電，其溫度顯示會(huì)不斷閃爍，且報(bào)警指示燈（ALARM）也閃爍，此時(shí)應(yīng)按上述方法調(diào)節(jié)。4.4.5 由冰箱管理人或其委托人每工作日記錄冰

38、箱溫度，冰箱溫度記錄表貼于冰箱門，每月更換1次，存檔。4.4.6 超低溫冰箱由專人保管，試劑和物品應(yīng)按指定位置存放。4.4.7 超低溫冰箱全室共用，若室外人員需存放試劑或標(biāo)本，須經(jīng)科室負(fù)責(zé)人同意。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改內(nèi)容批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第17頁共 48頁應(yīng)急處理程序1 目的：在實(shí)際工作中，儀器設(shè)備發(fā)生故障、試劑盒發(fā)生質(zhì)量問題時(shí)，為保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，及時(shí)、應(yīng)正確采取應(yīng)急措施，最大程度上避免或減輕不利影響。2 范圍：適用于滿足核酸擴(kuò)增熒光

39、檢測實(shí)驗(yàn)室檢測需要并可能對檢驗(yàn)結(jié)果造成誤差的儀器設(shè)備和試劑盒。3 職責(zé)：3.1 核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任熟悉各種儀器和相關(guān)設(shè)備的性能、要求、維護(hù)和保養(yǎng)、常見故障的排除、尤其要嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。3.2工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任有意識(shí)地注意以求及時(shí)發(fā)現(xiàn)并報(bào)告儀器設(shè)備和試劑盒的異常情況。3.2 作為應(yīng)急處理，潛在著一定的可能影響檢測質(zhì)量的不確定因素。室主任負(fù)責(zé)在第一時(shí)間檢查核實(shí)應(yīng)急措施的有效性。4 工作流程：4.1 儀器設(shè)備故障：4.1.1 室主任接到異常情況報(bào)警后，立即現(xiàn)場確認(rèn)異常情況的性質(zhì)：觀察有誤、誤操作、偶發(fā)現(xiàn)象或確屬不能立即排除的故障。4.1.2 用紅牌故障

40、標(biāo)志標(biāo)示故障儀器，放置到其它實(shí)驗(yàn)室，以防被錯(cuò)誤使用。4.1.3小型儀器送儀器部門維修，大型貴重儀器關(guān)閉電源開關(guān)，取下電源插頭。用相應(yīng)防塵罩遮蔽儀器。4.1.4 有滿足要求的替用設(shè)備的，啟用替用設(shè)備（準(zhǔn)用儀器）。借用其他部門儀器設(shè)備時(shí)，及時(shí)聯(lián)系借用并核實(shí)該設(shè)備的使用狀態(tài)。替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時(shí)，必須同時(shí)滿足實(shí)驗(yàn)室管理措施（特別是防污染）的要求。4.1.5不能解決的問題，與及時(shí)與供應(yīng)方會(huì)同解決。根據(jù)雙方合同約定，及時(shí)通知供應(yīng)方。供應(yīng)方技術(shù)支持人員將在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)隨身攜帶備用設(shè)備到達(dá)現(xiàn)場。4.1.6儀器維修后取下紅色故障標(biāo)示，換上未校準(zhǔn)標(biāo)示牌。4.1.7 維修的儀器必須經(jīng)驗(yàn)收

41、合格并供需雙方簽名后才能重新啟用。調(diào)試實(shí)驗(yàn)通過后，去掉未校準(zhǔn)標(biāo)示牌。4.1.8 室主任須檢查并隨時(shí)跟蹤所采取措施的有效性。4.1.9對未能及時(shí)排除故障時(shí)，必須及時(shí)上報(bào)科室，在科主任批準(zhǔn)下，應(yīng)積極聯(lián)系附近的其他實(shí)驗(yàn)室（已經(jīng)得到認(rèn)可）檢驗(yàn)，以滿足病人和臨床或科研需求。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改內(nèi)容批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第18頁共 48頁4.2 試劑盒質(zhì)量問題：試劑盒質(zhì)量發(fā)生問題，經(jīng)核實(shí)后，及時(shí)通知供貨商迅速更換另一批次試劑，使用前需先作質(zhì)量檢測，合格后方

42、可使用。4.3 儀器設(shè)備故障或試劑質(zhì)量問題不能得到解決，預(yù)期將會(huì)影響到檢測報(bào)告的及時(shí)發(fā)出，可將標(biāo)本送至其它實(shí)驗(yàn)室檢查（該實(shí)驗(yàn)室同樣應(yīng)為獲同類認(rèn)準(zhǔn)進(jìn)行PCR檢測的實(shí)驗(yàn)室）；如已影響到報(bào)告的及時(shí)發(fā)出，應(yīng)在門診取報(bào)告處向病人公告或向相關(guān)病區(qū)公告，取得病人的諒解。4.4 影響到檢測報(bào)告發(fā)出的情況，應(yīng)在應(yīng)急處理記錄表（例附表10）作記錄。本文涉及以下表格，見SOP文件末的附圖表：應(yīng)急處理記錄表-附表11修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第19頁

43、共 48頁實(shí)驗(yàn)耗材的購買、質(zhì)檢和儲(chǔ)存程序1目的：保證耗材的使用質(zhì)量，合理的配用及存放。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室常用耗材：1.5ml離心管、0.5ml離心管、帶濾芯的吸頭。3操作人：胡某某4購買和儲(chǔ)存程序4.1 購買前訂出計(jì)劃并定出品名、質(zhì)量規(guī)格報(bào)相關(guān)部門訂貨及購買。4.2 購買后，驗(yàn)收合格即領(lǐng)取。4.3 常用的消耗品定點(diǎn)、定量地?cái)[在實(shí)驗(yàn)臺(tái)抽屜里，并標(biāo)明品名及數(shù)量。特殊的消耗品放在指定的地方。4.5 訂購消耗品前，應(yīng)準(zhǔn)確查詢數(shù)量。5質(zhì)檢程序5.1檢測1.5ml離心管5.1.1目測:檢查離心管有無畸形、破損、不能閉蓋的情況。5.1.2實(shí)驗(yàn)檢測每批隨機(jī)抽樣離心管50個(gè)用于實(shí)驗(yàn)檢測。a）將抽

44、取的50個(gè)目測合格的b）離心管插在浮板上置于沸水浴鍋中20分鐘后取出，如發(fā)現(xiàn)有爆開情況發(fā)生，即認(rèn)為該批離心管不符合本實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)要求，作退貨處理。c）再將這50個(gè)離心管加半量生理鹽水后，1萬轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，如發(fā)現(xiàn)有管蓋爆開或漏液情況發(fā)生，即認(rèn)為該批離心管不符合本實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)要求，作退貨處理。d）經(jīng)上述檢測未發(fā)現(xiàn)不合格情況后，即啟用該批耗材。5.2檢測0.5ml離心管 方法、步驟同上。5.3檢測帶濾芯的吸頭5.3.1目測 檢查吸頭有無畸形、破損。5.3.2實(shí)驗(yàn)檢測:每批隨即抽樣吸頭50個(gè)用于實(shí)驗(yàn)檢測。a）用適配加樣器配合吸取適量液體，看有無吸孔堵塞、漏氣現(xiàn)象發(fā)生，在排除移液器因素后，如有異常發(fā)現(xiàn)

45、，即認(rèn)為該批吸頭不符合本實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)要求，作退貨處理。b）經(jīng)上述檢測未發(fā)現(xiàn)不合格情況后，即啟用該批耗材。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第20頁共 48頁備注：實(shí)驗(yàn)耗材在目測合格后基本上都可以初步通過驗(yàn)收。如果在目測不合格或目測合格后出現(xiàn)甚至頻繁出現(xiàn)爆管、堵塞、漏液、漏氣等情況下，再由實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)行實(shí)驗(yàn)檢測。本文涉及以下表格，見SOP文件末的附圖表：消耗性材料驗(yàn)收記錄表-附表12修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院

46、科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第21頁共 48頁試劑的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的：保證每批用于臨床實(shí)驗(yàn)的試劑的質(zhì)量良好，符合要求。2適用范圍：各種用于臨床實(shí)驗(yàn)的核酸擴(kuò)增熒光檢測試劑（HBV、HCV、TB、CT）。3操作人：胡某某4質(zhì)檢步驟4.1收到試劑后，目測試劑是否處在凍存狀態(tài)。4.2核對試劑品種和數(shù)量并檢查包裝：外包裝（廠名廠址、檢測項(xiàng)目、批準(zhǔn)文號(hào)、批號(hào)和有效期等）；內(nèi)包裝（試劑瓶完整性、真空包裝完整性、試劑品種完整性、使用說明書有否等）。4.3 及時(shí)將試劑轉(zhuǎn)入20冰箱保存。將上述檢測核

47、對情況在記錄本上登記。4.4最遲在前批次試劑存量尚可維持常規(guī)實(shí)驗(yàn)一周時(shí)，按如下要求對新批號(hào)試劑進(jìn)行效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1。4.5效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)1：在使用前批次試劑進(jìn)行常規(guī)實(shí)驗(yàn)的同時(shí)帶上少量新批次的試劑。用新批次試劑做陰性對照和陽性室內(nèi)質(zhì)控品，重復(fù)5次實(shí)驗(yàn)，若陰陽性及室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果均正常的話，可初步通過驗(yàn)收。若出現(xiàn)陰性漲、室內(nèi)質(zhì)控品不漲或結(jié)果偏差太大等情況時(shí)要求對新批號(hào)試劑進(jìn)行效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)2。4.6效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)2：4.6.1要求設(shè)置：空白對照、陰性對照、陽性對照各一，陽性標(biāo)準(zhǔn)品梯度（102、103、104、105、106）。4.6.2出現(xiàn)如下情況中任何一種的，判斷為試劑不合格，不能用于臨床檢測：a）空白對照出現(xiàn)擴(kuò)增。如擴(kuò)增

48、曲線CT值大于27，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)確證試劑污染。b）陽性對照和陽性標(biāo)準(zhǔn)品均未檢出，或陽性對照未檢出而陽性標(biāo)準(zhǔn)品檢出率大幅下降，表示試劑失效或檢測靈敏度大幅下降。4.6.3陽性對照未檢出，陽性標(biāo)準(zhǔn)品檢測正常，提示樣品提取液可能存在問題。重復(fù)新舊提取液陽性對照實(shí)驗(yàn)，確定提取液失效問題。更換提取液后該批試劑方可使用。4.6.4空白對照無擴(kuò)增，陰性對照有擴(kuò)增，排除其他污染可能性后，提取液存在污染可能。單獨(dú)用提取液點(diǎn)樣上機(jī)，出現(xiàn)擴(kuò)增，需更換提取液后方可使用該批試劑。4.6.5 陽性對照檢出，陽性標(biāo)準(zhǔn)品未檢出或擴(kuò)增曲線明顯系統(tǒng)性CT值偏大5個(gè)循環(huán)以上。提示陽性標(biāo)準(zhǔn)品存在問題。更換陽性標(biāo)準(zhǔn)品后該批試劑方可投入使

49、用。修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYFY-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第22頁共 48頁4.6.6空白對照、陰性對照無擴(kuò)增，陽性對照正常檢出，陽性標(biāo)準(zhǔn)品導(dǎo)出的標(biāo)準(zhǔn)曲線之斜率（2.93.9）、截距（2634）、相關(guān)性（0.99）均在使用范圍內(nèi)，表明該批試劑良好，可以投入臨床使用。4.7 將實(shí)驗(yàn)結(jié)果歸入記錄。本文涉及以下圖表，見SOP文件末的附圖表：試劑驗(yàn)收記錄表-附表13修改次數(shù)修改內(nèi)容修改人批準(zhǔn)人生效日期某某醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科室管理診療規(guī)范文件文件編號(hào): JYYF

50、Y-PCR版 序:20021130生效日期:2002年12月3日責(zé)任部門:細(xì)胞基因診斷中心頁 碼:第23頁共 48頁實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑的管理及配制標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的：保證實(shí)驗(yàn)中用到的各種溶液符合實(shí)驗(yàn)要求。2適用范圍：核酸擴(kuò)增熒光檢測實(shí)驗(yàn)室常用溶液：4NaOH溶液、75的酒精、優(yōu)氯凈、10的84溶液等。3操作人：劉某某 胡某某 陳某某4 管理程序：4.1 化學(xué)試劑的購買或領(lǐng)用：每月清點(diǎn)一次試劑，發(fā)現(xiàn)試劑存量不足時(shí)，及時(shí)領(lǐng)用或提交請購申請。發(fā)現(xiàn)有試劑過期或明顯變質(zhì)時(shí)要立即報(bào)廢，并將報(bào)廢試劑妥善處理。4.2 化學(xué)試劑貯存：臨床基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)試劑均置于避光、陰涼、干燥處保存。實(shí)驗(yàn)中常用到的一些化學(xué)試劑則根據(jù)要求保存于不同環(huán)境（如預(yù)冷乙醇保存于4）。PCR試劑一律貯存于-20。4.3 化學(xué)試劑使用：臨床