樣本類型基礎(chǔ)知識

1、樣本類型基礎(chǔ)知識樣本類型基礎(chǔ)知識 2016年6月 大大 綱綱 一、血液基本組成 二、樣本類型分類及相關(guān)應(yīng)用 1、樣本類型分類 2、凝血過程 3、抗凝劑種類及應(yīng)用 4、促凝劑種類及應(yīng)用 5、分離膠作用原理 三、真空采血管介紹 四、臨床樣本處理 一、血液的基本組成一、血液的基本組成 紅細(xì)胞紅細(xì)胞 血細(xì)血細(xì) 胞胞 白細(xì)胞白細(xì)胞 血小板血小板 纖維蛋白纖維蛋白 原原 全血全血 血液血液 血漿蛋血漿蛋 白白 白蛋白白蛋白血漿血漿 固體成固體成 分分 球蛋白球蛋白 血漿血漿/ / 血清血清 血清血清 營養(yǎng)物質(zhì)、脂類、酶營養(yǎng)物質(zhì)、脂類、酶 、電解質(zhì)、激素、維、電解質(zhì)、激素、維 生素、無機(jī)鹽（鈣、生素、無機(jī)鹽

2、（鈣、 鎂、鉀、鈉等）鎂、鉀、鈉等） 水水 樣本類型分類樣本類型分類 添加物添加物 血清 無添加/促凝劑 無添加/促凝劑+分離膠 血漿 EDTA-2鈉（鉀）/肝素/檸檬酸/草酸等 EDTA-2鈉（鉀）/肝素/檸檬酸/草酸等+分離膠 二、樣本類型二、樣本類型分類及相關(guān)應(yīng)用分類及相關(guān)應(yīng)用 凝血過程凝血過程 1、血小板的聚集和沉積。血小板的聚集和沉積。 2、凝血瀑布的激活：凝血瀑布的激活： 抗凝劑種類及應(yīng)用抗凝劑種類及應(yīng)用 肝素（液體，鈉、鋰等） 檸檬酸（液體，鈉、鉀等） EDTA（液體或固體，二鈉、二鉀、三鉀等） 草酸（鈉、鉀） ACD(液體，酸性枸櫞酸葡萄糖） CPDA（檸檬酸-磷酸-葡萄糖-腺

3、嘌呤） CPD（枸櫞酸鹽-磷酸鹽-葡萄糖） 水蛭素 抗凝劑種類及應(yīng)用抗凝劑種類及應(yīng)用 肝素（液體，鈉、鋰等）： 肝素鋰在檢測非鋰離子時(shí)產(chǎn)生干擾的可能性最小，推薦使用肝素鋰作為抗凝 劑。目前，在對pH值、血?dú)?、電解質(zhì)和鈣離子的檢測中肝素是唯一可以使用 的抗凝劑。不適于做血凝試驗(yàn)、白細(xì)胞計(jì)數(shù)。 枸櫞酸鈉或枸櫞酸鈉緩沖液： 凝血實(shí)驗(yàn)首選的抗凝劑 EDTA（液體或固體，二鈉、二鉀、三鉀等）： 二鈉鹽和二鉀鹽使用時(shí)通常為干粉，血細(xì)胞計(jì)數(shù)和分類首選EDTA二鉀鹽作為 抗凝劑；為了增強(qiáng)抗凝能力，EDTA三鉀使用時(shí)通常為溶液。通常使用的三鉀 溶液將使血液稀釋1%至2%。 促凝劑種類及應(yīng)用促凝劑種類及應(yīng)用 促凝

4、劑的活性成分：活性二氧化硅、腦磷脂、凝血酶、白陶土 、硅石粉、玻璃粉、 碳素粉末及蛇毒等促凝成分經(jīng)特殊加工而成。 促凝劑的狀態(tài)：液體、霧狀噴涂、干粉、球狀、液固雙相。 促凝劑可激活血漿和血小板中的部分凝血因子，生成凝血活酶，促進(jìn)血液凝固，加速 血塊回縮，達(dá)到快速分離血清的目的。 促凝劑與血液的接觸面積：接觸面積越大，血液凝固時(shí)形成的纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)越緊 密，血清的產(chǎn)量越高。 全液體浸涂霧狀噴涂液固雙相干粉球狀 促凝劑的效果評價(jià)：血液完全凝固的時(shí)間，一般要求玻璃管在15分鐘，塑膠管在20分 鐘以內(nèi)，促凝劑的有效成分不能影響檢測結(jié)果，血液凝固后不能在血清內(nèi)有纖維蛋白 絲或微小凝塊。（塑膠管與血液接

5、觸時(shí)，激活凝血因子VI、VII的能力非常弱） 分離膠分離膠 離心后分離膠在血漿離心后分離膠在血漿/ /血清和血細(xì)胞之間起到屏障隔離作用血清和血細(xì)胞之間起到屏障隔離作用. . SST 和和PST 分離膠試管分離膠試管 血清 分離膠 血凝塊 三、真空采血管介紹 真空采血系統(tǒng)真空采血系統(tǒng) 真空采血管及采血針的生產(chǎn)廠家真空采血管及采血針的生產(chǎn)廠家 不適應(yīng)真空采血情況不適應(yīng)真空采血情況 真空采血管的材質(zhì)及添加劑真空采血管的材質(zhì)及添加劑 多管采集順序多管采集順序 真空采血管引起溶血的原因真空采血管引起溶血的原因 真空采血系統(tǒng)真空采血系統(tǒng) 真空采血系統(tǒng)由真空采血管、采 血針（包括直針和頭皮針）、持 針器三個(gè)

6、部分組成。 真空采血管是其主要組成部分， 主要用于血液標(biāo)本的采集與保存。 真空采血管在生產(chǎn)過程中預(yù)置了 一定量的負(fù)壓，當(dāng)采血針穿刺進(jìn) 入血管后，由于采血管內(nèi)的負(fù)壓 作用，血液自動流入采血管內(nèi)。 真空采血管： 高檔：BD、GR、積水、泰爾茂；中高檔：陽普 中檔：拱東、科華、威高；低檔：瀏陽、鑫樂、 信靈、康健、索達(dá) 真空采血針： 高檔：NIPRO、哈娜好；中檔：康德萊 低檔：瀏陽、福爾康 不適應(yīng)真空采血情況 休克患者：血管痙攣，血管內(nèi)壓力不 夠，用采血管難以達(dá)到采血量標(biāo)準(zhǔn)。 小兒頸靜脈或 股靜脈采血：用真空 采血持針器沒有注射器靈活，所以用真 空采血管采血成功率不高。 水腫患者、靜脈壓低的患者：

7、用真空 采血管采血成功率差 。 真空采血管的材質(zhì)真空采血管的材質(zhì) 玻璃：玻璃： 主要成分是親水性硅酸鹽,采血后玻璃試管內(nèi)壁可出現(xiàn)吸附水分子的吸水層, 所以,分離膠不能直接黏附于玻璃試管的內(nèi)壁。隨著放置時(shí)間的延長,紅細(xì)胞中的 鉀或者酶等物質(zhì),可以通過水分子吸水層向血清中擴(kuò)散，所以,玻璃采血管在原狀 態(tài)下保存血清的期限以2-3d為宜。 塑料：塑料： 常用聚對苯二甲酸(乙二)醇酯(PET)材質(zhì)，疏水性質(zhì),其管壁不產(chǎn)生水分子層 分 離膠可牢固地黏附在內(nèi)壁上,紅細(xì)胞中的鉀不能擴(kuò)散到血清中,因而冷藏保存 8d血清鉀含量不變。也可-20保存標(biāo)本（玻璃采血管無法達(dá)到）。 密封膠塞：密封膠塞：推薦使用丁基橡膠而

8、不用天然橡膠，天然橡膠成分復(fù)雜， 易致溶血。 試管添加劑試管添加劑 l抗凝劑 l促凝劑 l分離膠 l氟化物 l其它 (例如:硅酮涂層,表面活性劑) l特殊應(yīng)用的添加劑 頭蓋顏色頭蓋顏色臨床用途臨床用途標(biāo)本類型標(biāo)本類型制制 備備 步步 驟驟添添 加加 劑劑 紅色紅色血清生化血清生化血清血清 采血后不需顛倒混勻采血后不需顛倒混勻靜置靜置 1 1小時(shí)小時(shí) 離心離心 無（內(nèi)壁涂有血液附壁防止劑）無（內(nèi)壁涂有血液附壁防止劑） 黃色黃色 快速血清生化試快速血清生化試 驗(yàn)驗(yàn) 血清血清 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻8 8次次 靜置靜置2020分鐘分鐘離心離心 分離膠、促凝劑（內(nèi)壁涂有血液附壁分離膠、促

9、凝劑（內(nèi)壁涂有血液附壁 防止劑）防止劑） 橙色橙色 快速血清生化試快速血清生化試 驗(yàn)驗(yàn) 血清血清 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻 8 8次次靜置靜置2020分鐘分鐘離心離心 促凝劑促凝劑 淺藍(lán)色淺藍(lán)色血凝試驗(yàn)血凝試驗(yàn)血漿血漿 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻 8 8次次離心離心 抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣比為抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣比為1:9 1:9 灰色灰色血糖試驗(yàn)血糖試驗(yàn)血漿血漿 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻 8 8次次離心離心 抗凝劑：抗凝劑：EDTAEDTA，氟化鈉，氟化鈉 綠色綠色 快速血漿生化血快速血漿生化血 流變試驗(yàn)流變試驗(yàn) 血漿血漿 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒

10、混勻 8 8次次離心離心 抗凝劑：肝素鋰或肝素鈉抗凝劑：肝素鋰或肝素鈉 淺綠色淺綠色 快速血漿生化試快速血漿生化試 驗(yàn)驗(yàn) 血漿血漿 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻 8 8次次離心離心 分離膠，肝素鋰分離膠，肝素鋰 紫色紫色 血液學(xué)常規(guī)血液學(xué)常規(guī) 全全 血實(shí)驗(yàn)血實(shí)驗(yàn) 全血全血 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻 8 8次次試驗(yàn)前混勻標(biāo)本試驗(yàn)前混勻標(biāo)本 抗凝劑：抗凝劑：EDTA-2KEDTA-2K或或EDTA-3KEDTA-3K 黑色黑色血沉試驗(yàn)血沉試驗(yàn)全血全血 采血后立即顛倒混勻采血后立即顛倒混勻 8 8次次使用前混勻標(biāo)本使用前混勻標(biāo)本 抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣抗凝劑：檸檬酸鈉與血樣 比為

11、比為1 1：4 4 多管采血順序介紹 1.人衛(wèi)版檢驗(yàn)臨床基礎(chǔ)： 玻璃管：血培養(yǎng)管無抗凝劑血清管枸櫞酸鈉抗凝管（藍(lán)）其他 抗凝管（黑綠紫灰） 金黃色促凝管； 塑料管：血培養(yǎng)管（黃） 枸櫞酸鈉抗凝管（藍(lán)） 加或未加促凝劑 或分離膠的血清管肝素管（綠） EDTA管（紫） 加GLU分解抑制劑 管（灰） 2.衛(wèi)生部： 血培養(yǎng)瓶無添加劑血清管凝血試驗(yàn)管添加劑管枸櫞酸鈉抗凝 管（藍(lán)）肝素管（綠） EDTA管（紫） 加GLU分解抑制劑管（灰） 3.美國CLSI（臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會），H3-A6： 血培養(yǎng)管 血凝管（藍(lán)） 血清管肝素管（綠） EDTA管（紫） 加GLU分解抑制劑管（灰） 4.日本標(biāo)準(zhǔn)： 血培養(yǎng)

12、管血清用采血檸檬酸采血 肝素采血 EDTA采血 加GLU 分解抑制劑的采血 5.BD: 血培養(yǎng)瓶藍(lán)黑黃紅綠紫灰 三、臨床樣本處理三、臨床樣本處理 真空采血管混勻次數(shù)及正確混勻方式真空采血管混勻次數(shù)及正確混勻方式 真空采血管引起溶血的原因真空采血管引起溶血的原因 采血管類型對檢測結(jié)果的影響采血管類型對檢測結(jié)果的影響 采血管放置時(shí)間對結(jié)果的影響采血管放置時(shí)間對結(jié)果的影響 外來物質(zhì)對結(jié)果的影響外來物質(zhì)對結(jié)果的影響 混勻次數(shù) 肝素 全血培養(yǎng) 檸檬酸鹽 分 離 膠 氟化物（葡萄糖） 標(biāo)準(zhǔn)的混勻方式標(biāo)準(zhǔn)的混勻方式 采血后立即 輕輕倒轉(zhuǎn)采 血試管45 次混勻標(biāo)本, 等待標(biāo)本充 分凝固需要 放置30min,

13、離心半徑 8cm,離心速 度維持在 35004000r /min離心 10min 溶血對檢驗(yàn)結(jié)果的影響： 血細(xì)胞成分的釋放（如血鉀升高） 顏色對檢測的干擾（如PT、APTT的延長） 血細(xì)胞成分對檢測的干擾（如腺苷酸激酶對某些 酶學(xué)指標(biāo)檢測的影響） 采血時(shí)常引起標(biāo)本溶血的原因： 將血標(biāo)本從注射器推到試管中 采血針在靜脈中反復(fù)探來探去 混合有抗凝劑的試管時(shí)用力過猛 從已有血腫的部位采血 采血時(shí)有空氣進(jìn)行注射器產(chǎn)生泡沫 為增加血液量而擠壓穿刺部位 盛血的試管質(zhì)量粗糙 采采 血血 管管 類類 型型 對對 檢檢 測測 結(jié)結(jié) 果果 的的 影影 響響 生化項(xiàng)目 免疫發(fā)光發(fā)光項(xiàng)目 采血管放置時(shí)間對結(jié)果的影響 HDL-C于22、4放置不同時(shí)間測定值差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P0.05）.TC/TG和 LDL-C于22內(nèi)的檢測結(jié)果相對穩(wěn)定，但-20保存7d的標(biāo)本，除LDL-C外，其余 血脂3項(xiàng)均與即刻檢測結(jié)果有差別?？偨Y(jié)，室溫4條件下保存的分離樣本在 24h內(nèi)的血脂檢測結(jié)果比較穩(wěn)定，不影響結(jié)果。 a) 貯存過程中脂蛋白顆粒的結(jié)構(gòu)可能改變，甚至裂解而影響選擇性改變 b) 脂蛋白之間可能有部分脂質(zhì)交換。 外來物質(zhì)的影響因素 刺激物、藥物或成癮性藥物的影響及其控制 因素 常見影響項(xiàng)目舉例 咖啡因 血糖、脂肪酸、兒茶酚氨、血管緊張素 煙草 脂肪酸、腎上腺素、腎上腺皮質(zhì)激素、醛固酮 酒精 乳酸、尿