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1、一一.實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理: . .還原性糖的鑒定:還原性糖的鑒定: 還原性糖還原性糖 + + 斐林試劑斐林試劑 磚紅色沉淀磚紅色沉淀 . .脂肪的鑒定:脂肪的鑒定: 脂肪脂肪 + + 蘇丹蘇丹 橘黃色橘黃色 脂肪脂肪 + + 蘇丹蘇丹 紅色紅色 . .蛋白質(zhì)的鑒定:蛋白質(zhì)的鑒定: 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) + + 雙縮脲試劑雙縮脲試劑 紫色紫色 二二. .目的要求:目的要求: 嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、嘗試用化學(xué)試劑檢測(cè)生物組織中糖類、 脂肪和蛋白質(zhì)脂肪和蛋白質(zhì) 1 1、還原糖的檢測(cè)和觀察:、還原糖的檢測(cè)和觀察: 選材選材 (1 1)含含糖糖量高;量高; (2 2)顏色為)顏色為白色或接近白色白色
2、或接近白色的植物組織的植物組織 以蘋果以蘋果. .梨為最好。梨為最好。 問題問題:西瓜可以嗎?:西瓜可以嗎? 制備組織樣液:制備組織樣液:研磨成漿:取蘋果洗凈、去皮、研磨成漿:取蘋果洗凈、去皮、 切塊,取切塊,取5g 5g 放入研缽,加石英砂、放入研缽,加石英砂、5 ml5 ml水研磨、過水研磨、過 濾濾 三三. .實(shí)驗(yàn)過程實(shí)驗(yàn)過程: : 可溶性還原糖與斐林試劑在加熱的過可溶性還原糖與斐林試劑在加熱的過 程中生成磚紅色沉淀,程中生成磚紅色沉淀,說明植物組織說明植物組織 樣液中含有還原糖。樣液中含有還原糖。 注入注入2mL2mL 蘋果組蘋果組 織樣液織樣液 注入注入1mL1mL剛配制好的剛配制好
3、的 斐林試劑斐林試劑 水浴加熱約水浴加熱約2min2min 呈色反應(yīng)呈色反應(yīng) 變成變成磚紅色磚紅色 50-650C的溫水的溫水 結(jié)論:結(jié)論: 甲乙液等量混勻甲乙液等量混勻 振蕩、混振蕩、混 合搖勻合搖勻呈呈 現(xiàn)藍(lán)色現(xiàn)藍(lán)色 還原糖有還原糖有 。 試劑:試劑: . (甲液:(甲液:0.1g/ml 的的 , 乙液:乙液:0.05g/ml的的 .) 甲乙液必須甲乙液必須 后再加入樣后再加入樣 液中,液中, 。 必須必須 。 葡萄糖,果糖,麥芽糖葡萄糖,果糖,麥芽糖 用水浴加熱用水浴加熱 斐林試劑斐林試劑 NaOHCuSO4 等量混合均勻等量混合均勻 現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)配現(xiàn)用 注意事項(xiàng):注意事項(xiàng): 顏色變化:顏
4、色變化: 淺藍(lán)色淺藍(lán)色棕色棕色磚紅色磚紅色 2 2、脂肪的檢測(cè)和觀察:、脂肪的檢測(cè)和觀察: 圓形小顆粒呈橘黃色,說明有脂肪存在。圓形小顆粒呈橘黃色,說明有脂肪存在。 取材:取材: 花生種子花生種子( (浸泡浸泡3 34h4h),將子葉削成薄片),將子葉削成薄片 制片制片 取最理想的薄片取最理想的薄片 在薄片上滴在薄片上滴2-32-3滴蘇丹滴蘇丹染液(染液(3min3min) 去浮色(用去浮色(用5050酒精)酒精) 制成臨時(shí)裝片制成臨時(shí)裝片 觀察觀察低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒,低倍鏡下尋找到已著色的圓形小顆粒, 然后用高倍鏡觀察然后用高倍鏡觀察 結(jié)論:結(jié)論: 注意事項(xiàng):注意事項(xiàng): 切片要
5、薄,切片要薄,如厚薄不均就會(huì)導(dǎo)致觀察如厚薄不均就會(huì)導(dǎo)致觀察 時(shí)有的地方清晰有的地方模糊。時(shí)有的地方清晰有的地方模糊。 酒精的作用是:酒精的作用是: 。 需需使用顯微鏡觀察使用顯微鏡觀察 使用不同的染色劑染色時(shí)間不同使用不同的染色劑染色時(shí)間不同 顏色變化:顏色變化: 。 洗去浮色洗去浮色 橘黃色或紅色橘黃色或紅色 3 3、蛋白質(zhì)的檢測(cè)和觀察:、蛋白質(zhì)的檢測(cè)和觀察: 選材選材 應(yīng)該選擇含應(yīng)該選擇含 豐富的豐富的豆?jié){豆?jié){或或雞蛋雞蛋 清清溶液。(避免材料自身的顏色對(duì)溶液。(避免材料自身的顏色對(duì) 實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋)實(shí)驗(yàn)變化顏色的掩蓋) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì) 黃豆?jié){濾液或蛋清稀釋液黃豆?jié){濾液或蛋清稀釋液 制備
6、組織樣液制備組織樣液 呈色反應(yīng)呈色反應(yīng) 組織組織 樣液樣液 2mL2mL 雙縮脲試雙縮脲試 劑劑A A液液1mL1mL 雙縮脲試雙縮脲試 劑劑B B液液4 4滴滴 搖勻后變搖勻后變 成紫色成紫色 結(jié)論:結(jié)論:說明組織樣液中存在蛋白質(zhì)。 說明組織樣液中存在蛋白質(zhì)。 (3 3)注意事項(xiàng):)注意事項(xiàng): 試劑:試劑: ( A液:液:0.1g/ml的的 ; B液:液: 0.01g/ml的的 ) 先加先加 ,再加,再加 。 B液要求量適中,否則液要求量適中,否則多余多余 的的B液液將會(huì)將會(huì)與與A液液發(fā)生反應(yīng)生發(fā)生反應(yīng)生 成成Cu(OH)2顯色而遮蓋原有的顏色。顯色而遮蓋原有的顏色。 鑒定前,留出一部分組織
7、樣液,以便對(duì)比鑒定前,留出一部分組織樣液,以便對(duì)比 雙縮脲試劑雙縮脲試劑 A A液液1ml1ml B B液液4 4滴滴 NaOH CuSO4 蛋 白 質(zhì) 的 檢 測(cè) 結(jié) 果 用于蛋白質(zhì)鑒定的蛋清必須稀釋,以免用于蛋白質(zhì)鑒定的蛋清必須稀釋,以免 實(shí)驗(yàn)后粘住試管壁,不易洗刷實(shí)驗(yàn)后粘住試管壁,不易洗刷 斐林試劑與雙縮脲試劑的比較:斐林試劑與雙縮脲試劑的比較: A A液液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH B B液液: :0.010.01g/mLCuSOg/mLCuSO4 4 甲液甲液:0.1g/mLNaOH:0.1g/mLNaOH 乙液乙液: :0.050.05g/mLCuSOg/mL
8、CuSO4 4 紫色物質(zhì)生成紫色物質(zhì)生成磚紅色沉淀磚紅色沉淀 先加先加A A液液,再加再加B B液液,不不 需加熱需加熱 甲液與乙液甲液與乙液先混再用先混再用, 且且現(xiàn)配現(xiàn)用現(xiàn)配現(xiàn)用,需,需加熱加熱 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)還原性糖還原性糖 試劑試劑 組成組成 檢驗(yàn)檢驗(yàn) 結(jié)果結(jié)果 試劑試劑 用法用法 檢測(cè)檢測(cè) 對(duì)象對(duì)象 雙縮脲試劑雙縮脲試劑斐林試劑斐林試劑 4 4、淀粉的檢測(cè)和觀察:、淀粉的檢測(cè)和觀察: 取材:取材: 馬鈴薯勻漿馬鈴薯勻漿 檢測(cè)檢測(cè) 組織組織 樣液樣液 2mL2mL 碘液碘液 2 2滴滴 結(jié)論:結(jié)論:說明組織樣液中存在淀粉。說明組織樣液中存在淀粉。 注意:注意: 常用材料:馬鈴薯常用材料:
9、馬鈴薯 試劑:試劑: 。顏色變化:。顏色變化: 。碘液碘液 變藍(lán)變藍(lán) 搖勻后變搖勻后變 成藍(lán)色成藍(lán)色 1.在下列四支試管中分別加入一些物質(zhì),在下列四支試管中分別加入一些物質(zhì), 甲試管甲試管:豆?jié){豆?jié){;乙試管乙試管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙試丙試 管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁試管丁試管:人血液中的紅人血液中的紅 細(xì)胞和蒸餾水細(xì)胞和蒸餾水.上述四支試管中加入雙上述四支試管中加入雙 縮脲試劑振蕩后縮脲試劑振蕩后,有紫色反應(yīng)的是有紫色反應(yīng)的是 ( ) A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁 C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 對(duì)應(yīng)訓(xùn)練對(duì)應(yīng)訓(xùn)練 D 2. 2.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述
10、中,正確的下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中,正確的 是是 用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲 液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定 . .脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染 成橘黃色的脂肪滴成橘黃色的脂肪滴 C. C.鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑甲鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑甲 液搖勻后,再加入乙液液搖勻后,再加入乙液 用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A A液與液與B B 液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中, 且必須現(xiàn)配現(xiàn)用且必須現(xiàn)配現(xiàn)
11、用 ( ) 3 3. .甘薯和馬鈴薯都富含淀粉,但甘薯吃起來比馬甘薯和馬鈴薯都富含淀粉,但甘薯吃起來比馬 鈴薯甜,為探究其原因,某興趣小組以甘薯和鈴薯甜,為探究其原因,某興趣小組以甘薯和 馬鈴薯塊莖為材料,在不同溫度、其他條件相馬鈴薯塊莖為材料,在不同溫度、其他條件相 同的情況下處理同的情況下處理30min30min后,測(cè)定還原糖含量,結(jié)后,測(cè)定還原糖含量,結(jié) 果表明馬鈴薯不含還原糖,甘薯的還原糖含量果表明馬鈴薯不含還原糖,甘薯的還原糖含量 見下表:見下表: 處理溫度(處理溫度() 0 01010202030304040 甘薯還原糖含量甘薯還原糖含量 (mg/gmg/g) 22.122.123
12、.323.325.825.837.637.640.540.5 處理溫度(處理溫度() 50506060707080809090 甘薯還原糖含量甘薯還原糖含量 (mg/gmg/g) 47.447.454.754.768.968.945.345.328.628.6 (1 1)由表可見,溫度為)由表可見,溫度為7070時(shí)甘薯還原糖含量時(shí)甘薯還原糖含量 最高,這是因?yàn)樽罡撸@是因?yàn)開 _ _。 (2 2)馬鈴薯不含還原糖的原因是)馬鈴薯不含還原糖的原因是_。 (3 3)為了確認(rèn)馬鈴薯不含還原糖的原因,請(qǐng)完)為了確認(rèn)馬鈴薯不含還原糖的原因,請(qǐng)完 成以下實(shí)驗(yàn):成以下實(shí)驗(yàn): 實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:_; _。
13、備選材料與用具:甘薯提取液(去淀粉和還原備選材料與用具:甘薯提取液(去淀粉和還原 糖,馬鈴薯提取液(去淀粉),二苯胺試劑,糖,馬鈴薯提取液(去淀粉),二苯胺試劑, 斐林試劑,雙縮脲試劑,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為斐林試劑,雙縮脲試劑,質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%3%的淀粉的淀粉 溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為溶液和質(zhì)量分?jǐn)?shù)為3%3%的蔗糖溶液等。的蔗糖溶液等。 還原糖的產(chǎn)生是酶作用的結(jié)還原糖的產(chǎn)生是酶作用的結(jié) 果,果, 70時(shí)酶活性最高時(shí)酶活性最高 不含淀粉酶不含淀粉酶 淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖淀粉酶水解淀粉產(chǎn)生還原糖 還原糖與斐林試劑反應(yīng),產(chǎn)生磚紅色沉淀還原糖與斐林試劑反應(yīng),產(chǎn)生磚紅色沉淀 實(shí)驗(yàn)步驟:實(shí)驗(yàn)步驟: 第一步:取第一步:取A
14、 A、B B兩支試管,在兩支試管,在A A管中加入甘薯管中加入甘薯 提取液,提取液,B B管中加入等量的馬鈴薯提取液。管中加入等量的馬鈴薯提取液。 第二步:第二步:7070水浴保溫水浴保溫5min5min后,在后,在A A、B B兩支試兩支試 管中各加入管中各加入_,_, 第三步:第三步:7070水浴保溫水浴保溫5min5min后,在后,在A A、B B兩支試管兩支試管 中再各加入中再各加入_, 第四步:第四步:_._. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果:_ 等量淀粉溶液。等量淀粉溶液。 等量斐林試劑。等量斐林試劑。 沸水浴加熱沸水浴加熱1min2min。 A試管呈現(xiàn)磚紅色,試管呈現(xiàn)磚紅色,B試管呈現(xiàn)藍(lán)色試
15、管呈現(xiàn)藍(lán)色 1.在下列四支試管中分別加入一些物質(zhì),在下列四支試管中分別加入一些物質(zhì), 甲試管甲試管:豆?jié){豆?jié){;乙試管乙試管:氨基酸溶液氨基酸溶液;丙試丙試 管管:牛奶和蛋白酶牛奶和蛋白酶;丁試管丁試管:人血液中的紅人血液中的紅 細(xì)胞和蒸餾水細(xì)胞和蒸餾水.上述四支試管中加入雙上述四支試管中加入雙 縮脲試劑振蕩后縮脲試劑振蕩后,有紫色反應(yīng)的是有紫色反應(yīng)的是 ( ) A.甲、丁甲、丁 B.甲、乙、丁甲、乙、丁 C.甲、乙、丙甲、乙、丙 D.甲、丙甲、丙 對(duì)應(yīng)訓(xùn)練對(duì)應(yīng)訓(xùn)練 D 2. 2.下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中,正確的下列關(guān)于實(shí)驗(yàn)操作步驟的敘述中,正確的 是是 用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲用于
16、鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲 液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定 . .脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染 成橘黃色的脂肪滴成橘黃色的脂肪滴 C. C.鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑甲鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑甲 液搖勻后,再加入乙液液搖勻后,再加入乙液 用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A A液與液與B B 液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中, 且必須現(xiàn)配現(xiàn)用且必須現(xiàn)配現(xiàn)用 ( ) (1 1)由表可見,溫度為)由表可見,溫度為7070時(shí)甘薯還原糖含量時(shí)甘薯還原糖含量 最高,這是因?yàn)樽罡?,這是因?yàn)開 _ _。 (2 2)馬鈴薯不含還原糖的原因是)馬鈴薯不含還原糖的原因是_。 (3 3)為了確認(rèn)馬鈴薯不含還原糖的原因,請(qǐng)完)為了確認(rèn)馬鈴薯不含還原糖的原因,請(qǐng)完 成以下實(shí)驗(yàn):成以下實(shí)驗(yàn): 實(shí)驗(yàn)原理:實(shí)驗(yàn)原理:_; _。 備選材料與用具:甘薯提取液(去淀粉和
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