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1、骨髓活檢巨核細(xì)胞數(shù)量 與血小板生成素(TPO) 反饋機(jī)制的研究 沈陽市紅十字會(huì)醫(yī)院 金濤 項(xiàng)目目的 預(yù)期實(shí)現(xiàn)通過測(cè)定外周血TPO濃度估測(cè)骨髓巨核細(xì)胞增生 狀況的檢測(cè)方法 技術(shù)路線 塑料包埋 Cd41標(biāo)記 石蠟包埋 巨核細(xì)胞數(shù)量:巨核細(xì)胞數(shù)量:TPO濃度濃度 采集骨髓標(biāo)本采集血清標(biāo)本 檢測(cè)tpo濃度 臨床血液病人臨床血液病人 科學(xué)性及其先進(jìn)性 TPO及c-mpl受體的結(jié)構(gòu)和功能及表達(dá)目前已經(jīng)研究十分透 徹,但對(duì)于TPO濃度的反饋調(diào)節(jié)機(jī)制尚不明了 TPO基因表達(dá)速率相對(duì)恒定 巨核細(xì)胞和血小板表面c-mpl受體清除TPO TPO濃度動(dòng)態(tài)調(diào)節(jié)的主要機(jī)制:c-mpl受體清除環(huán)節(jié) 在現(xiàn)有多個(gè)臨床研究中,實(shí)
2、驗(yàn)數(shù)據(jù)未能顯現(xiàn)骨髓巨核細(xì)胞 數(shù)量與TPO濃度的足夠肯定性的關(guān)聯(lián) 這些實(shí)驗(yàn)均為骨穿涂片計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞,不能真實(shí)反映骨髓 內(nèi)巨核細(xì)胞的真實(shí)數(shù)量 推測(cè):穿刺抽吸標(biāo)本的稀釋程度不確定 用骨髓活檢病理切片計(jì)數(shù)巨核細(xì)胞,能夠得到真實(shí)的巨核 細(xì)胞數(shù)量與血清TPO濃度的關(guān)聯(lián)程度 骨髓活檢標(biāo)本 巨核細(xì)胞數(shù)量定量測(cè)定 成熟巨核細(xì)胞可由形態(tài)確定,不成熟巨核細(xì)胞如淋巴樣小 巨核、單圓核巨核的可靠判定只能依據(jù)免疫組化 塑料包埋骨髓活檢標(biāo)本的CD41單抗標(biāo)記:識(shí)別通過形態(tài)難 以辨認(rèn)的淋巴樣小巨核、單圓核巨核進(jìn)行標(biāo)記 巨核細(xì)胞分布的不均一性,需要選擇按單位面積或骨小梁 分區(qū)進(jìn)行計(jì)量 臨床現(xiàn)狀 ITP診斷對(duì)骨髓檢查的要求 數(shù)量
3、增多、成熟障礙 中國(guó)ITP診治共識(shí)2016 5、診斷ITP的特殊實(shí)驗(yàn)室檢查:血小板生成素(TPO)檢測(cè)可以鑒別血小板生成減少 (TPO升高)和血小板破壞增(TPO減少),有助于鑒別ITP與不典型再障/低增生MDS。 臨床預(yù)期 預(yù)期:TPO濃度與骨髓巨核細(xì)胞更顯著的關(guān)聯(lián)證據(jù) 檢測(cè)外周血來估測(cè)骨髓巨核細(xì)胞數(shù)量 作為血小板減少患者的常規(guī)檢查項(xiàng)目 工作基礎(chǔ) 血液科科系結(jié)構(gòu)完備,包括血液專科門診、血液病房、骨髓 形態(tài)實(shí)驗(yàn)室(病房)、血液實(shí)驗(yàn)室1(1號(hào)樓5樓)、血液實(shí)驗(yàn) 室2(1號(hào)樓5樓)、骨髓病理實(shí)驗(yàn)室(病房)、PCR實(shí)驗(yàn)室(2 號(hào)樓3樓)、血細(xì)胞單采室(病房)、細(xì)胞治療中心實(shí)驗(yàn)室 (病房)。 骨髓形態(tài)
4、實(shí)驗(yàn)室能夠開展骨髓穿刺檢查形態(tài)學(xué)分析、各種溶 血試驗(yàn)、血細(xì)胞化學(xué)染色。免疫及DIC相關(guān)檢測(cè)。 骨髓病理實(shí)驗(yàn)室能夠開展血細(xì)胞病理免疫組化、骨髓活檢塑 料病理檢查。 PCR實(shí)驗(yàn)室能夠開展各種白血病融合基因PCR檢測(cè)、Jak2- V617F基因突變檢測(cè)等。 血細(xì)胞單采室具備第三代血細(xì)胞分離機(jī),能夠開展紅細(xì)胞、 血小板分離、造血干細(xì)胞采集、血漿置換等治療。 20余年來血液??谱鳛槭屑?jí)重點(diǎn)科系,已承擔(dān)完成省市多項(xiàng) 科研立項(xiàng)并多次獲得科技進(jìn)步獎(jiǎng)。 工作基礎(chǔ) 科室設(shè)有的骨髓病理實(shí)驗(yàn)室已獨(dú)立開展20年骨髓病理檢查, 具備全套實(shí)驗(yàn)儀器。 作為市級(jí)血液病重點(diǎn)???,能夠提供充裕的合法的實(shí)驗(yàn)樣 本。 資金使用方案 科
5、技三項(xiàng)費(fèi)用 項(xiàng)目金額(萬元)費(fèi)用說明 儀器設(shè)備費(fèi)1ELISA檢測(cè)儀 實(shí)驗(yàn)材料費(fèi)8試劑 科研業(yè)務(wù)費(fèi) 其他1技術(shù)交流、文本印刷 合計(jì)10 資金使用方案 申請(qǐng)科研項(xiàng)目經(jīng)費(fèi)10萬元。 設(shè)備購置明細(xì):國(guó)產(chǎn)ELISA檢測(cè)儀(分光光度計(jì))一臺(tái),單價(jià)1 萬元,合計(jì)1萬元。 TPO檢測(cè)試劑盒:2,500.00元/套,共20套合計(jì)5.00萬元用于 檢測(cè)TPO濃度。 骨髓活檢塑料包埋試劑盒:1,000.00元/套,共20套合計(jì)2.00 萬元用于骨髓塑料包埋 骨髓小巨核酶標(biāo)試劑盒:4,000.00元/套,共5套合計(jì)1.00萬元 用于巨核細(xì)胞免疫組化 參加國(guó)內(nèi)學(xué)術(shù)會(huì)議1次,地點(diǎn)待定,參會(huì)人員2名,會(huì)議時(shí)間3 天,會(huì)議標(biāo)準(zhǔn)1,000.00/人*天,共需0.60萬元,主要內(nèi)容
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