藥學(xué)清潔驗(yàn)證CleaningValidation

1、1. 法規(guī)對(duì)清潔驗(yàn)證的要求及其背景； 2. 清潔驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 3. 清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)； 4. 清潔分析方法的驗(yàn)證； 5. 清潔驗(yàn)證和實(shí)際案例分析； 6. 清潔驗(yàn)證審計(jì)中經(jīng)常發(fā)現(xiàn)的問題。 內(nèi)容內(nèi)容介紹：介紹： 一、法規(guī)對(duì)清潔驗(yàn)證的要求一、法規(guī)對(duì)清潔驗(yàn)證的要求 第七章確認(rèn)與驗(yàn)證 第一百四十三條 清潔方法應(yīng)經(jīng)過(guò)驗(yàn)證， 證實(shí)其清潔的效果，以有效防止污染和交叉 污染。清潔驗(yàn)證應(yīng)綜合考慮設(shè)備使用情況、 所使用的清潔劑和消毒劑、取樣方法和位置 以及相應(yīng)的取樣回收率、殘留物的性質(zhì)和限 度、殘留物檢驗(yàn)方法的靈敏度等因素。 10版版GMP的要求（的要求（WHO GMP）：）： 第五章設(shè)備 第二節(jié)設(shè)計(jì)和安裝

2、第七十四條生產(chǎn)設(shè)備不得對(duì)藥品質(zhì)量 產(chǎn)生任何不利影響。與藥品直接接觸的生產(chǎn) 設(shè)備表面應(yīng)當(dāng)平整、光潔、易清洗或消毒、 耐腐蝕，不得與藥品發(fā)生化學(xué)反應(yīng)、吸附藥 品或向藥品中釋放物質(zhì)。 10版版GMP的要求（的要求（WHO GMP）：）： 第四節(jié)使用和清潔 第八十四條應(yīng)當(dāng)按照詳細(xì)規(guī)定的操作 規(guī)程清潔生產(chǎn)設(shè)備。 生產(chǎn)設(shè)備清潔的操作規(guī)程應(yīng)當(dāng)規(guī)定具體 而完整的清潔方法、清潔用設(shè)備或工具、清 潔劑的名稱和配制方法、去除前一批次標(biāo)識(shí) 的方法、保護(hù)已清潔設(shè)備在使用前免受污染 的方法、已清潔設(shè)備最長(zhǎng)的保存時(shí)限、使用 前檢查設(shè)備清潔狀況的方法，使操作者能以 可重現(xiàn)的、有效的方式對(duì)各類設(shè)備進(jìn)行清潔。 10版版GMP的要

3、求（的要求（WHO GMP）：）： 如需拆裝設(shè)備，還應(yīng)當(dāng)規(guī)定設(shè)備拆裝的順序 和方法；如需對(duì)設(shè)備消毒或滅菌，還應(yīng)當(dāng)規(guī) 定消毒或滅菌的具體方法、消毒劑的名稱和 配制方法。必要時(shí)，還應(yīng)當(dāng)規(guī)定設(shè)備生產(chǎn)結(jié) 束至清潔前所允許的最長(zhǎng)間隔時(shí)限。 第八十五條已清潔的生產(chǎn)設(shè)備應(yīng)當(dāng)在清潔、 干燥的條件下存放。 10版版GMP的要求（的要求（WHO GMP）：）： 第九章生產(chǎn)管理 第二節(jié)防止生產(chǎn)過(guò)程中的污染和交叉污染 第一百九十七條生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)盡可 能采取措施，防止污染和交叉污染，如： （六）采用經(jīng)過(guò)驗(yàn)證或已知有效的清潔和 去污染操作規(guī)程進(jìn)行設(shè)備清潔；必要時(shí)，應(yīng) 當(dāng)對(duì)與物料直接接觸的設(shè)備表面的殘留物進(jìn) 行檢測(cè)； 1

4、0版版GMP的要求（的要求（WHO GMP）：）： 歐盟歐盟GMP的要求：的要求： 36. 為確認(rèn)清潔規(guī)程的效力，應(yīng)進(jìn)行清潔驗(yàn)證。應(yīng) 根據(jù)所涉及的物料，合理的確認(rèn)產(chǎn)品殘留、清潔劑 和微生物污染的限度標(biāo)準(zhǔn)。這個(gè)限度標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)該是可 以達(dá)到的，能夠證實(shí)的。 37. 應(yīng)使用經(jīng)驗(yàn)證、檢出靈敏度高的檢驗(yàn)方法來(lái)檢 測(cè)殘留或污染物。每種分析方法或儀器的檢測(cè)靈敏 度應(yīng)足以檢測(cè)出設(shè)定合格限度水平的殘留或污染物。 38. 通常只有接觸產(chǎn)品設(shè)備表面的清潔規(guī)程需要驗(yàn) 證。某些場(chǎng)合下，還應(yīng)考慮不直接接觸產(chǎn)品的部分。 應(yīng)驗(yàn)證設(shè)備使用與清潔的間隔時(shí)間，以及已清潔設(shè) 備可保留的時(shí)間，并通過(guò)驗(yàn)證確定清潔的間隔時(shí)間 和清潔方法。 歐

5、盟歐盟GMP的要求（續(xù)）：的要求（續(xù)）： 39. 對(duì)于相似產(chǎn)品和相似工藝而言，可從相似產(chǎn) 品及工藝中，選擇一個(gè)具有代表性產(chǎn)品和工藝進(jìn) 行清潔驗(yàn)證。可采用“最差條件”的方法進(jìn)行單 獨(dú)的驗(yàn)證試驗(yàn)，在驗(yàn)證中應(yīng)考慮關(guān)鍵因素。 40. 為證明方法是經(jīng)過(guò)驗(yàn)證的，通常應(yīng)在3個(gè)連 續(xù)批上使用該清潔規(guī)程，并檢驗(yàn)合格。 41. 清潔驗(yàn)證不應(yīng)采用“不斷測(cè)試，直至清潔” 的方式。 42. 如果實(shí)際產(chǎn)品是有毒物質(zhì)或有害物質(zhì)，在清 潔驗(yàn)證中，可以例外地采用物化特性相似的無(wú)毒 無(wú)害物質(zhì)來(lái)模擬。 在FDA的cGMP 211.67章節(jié) 中規(guī)定了設(shè)備清洗驗(yàn) 證的要求。 建立書面標(biāo)準(zhǔn)操作程序（SOP），其中必須詳細(xì) 規(guī)定設(shè)備各部件

6、的清洗過(guò)程。 必須建立書面的清洗方法驗(yàn)證通則。 清洗方法驗(yàn)證通則應(yīng)規(guī)定執(zhí)行驗(yàn)證的負(fù)責(zé)人、批 準(zhǔn)驗(yàn)證工作的負(fù)責(zé)人、驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)（合格標(biāo)準(zhǔn)）、 再驗(yàn)證的時(shí)間。 對(duì)各生產(chǎn)系統(tǒng)或各設(shè)備部件進(jìn)行清洗驗(yàn)證之前， 應(yīng)制定專一特定的書面驗(yàn)證計(jì)劃，其中應(yīng)規(guī)定取 樣規(guī)程、分析方法（包括分析方法的靈敏度）。 FDA的要求：的要求： FDA的要求（續(xù)）：的要求（續(xù)）： 5. 按上述驗(yàn)證計(jì)劃進(jìn)行驗(yàn)證工作，記錄驗(yàn)證結(jié) 果。 6. 做出最終的驗(yàn)證報(bào)告，報(bào)告應(yīng)由有關(guān)管理人 員批準(zhǔn)，并說(shuō)明該清洗方法是否有效。 清潔驗(yàn)證的背景：清潔驗(yàn)證的背景： 消膽胺召回事件： 即1988年從市場(chǎng)上撤回了消膽胺成品制劑，原因是規(guī)程 不當(dāng)。生產(chǎn)該制劑

7、的原料藥受到了農(nóng)業(yè)殺蟲劑生產(chǎn)中少 量中間體和降解物質(zhì)的污染。造成交叉污染的主要原因 使用了回收溶媒。而回收溶媒受到了污染，原因是對(duì)溶 媒桶的重復(fù)使用缺少監(jiān)控。貯存殺蟲劑產(chǎn)生的回收溶媒 桶又重復(fù)地用于貯存該藥品生產(chǎn)中的回收溶媒。而工廠 沒有對(duì)這些溶媒桶進(jìn)行有效的監(jiān)控，沒有對(duì)其中的溶媒 進(jìn)行有效的檢驗(yàn)，也沒有對(duì)桶的清洗規(guī)程進(jìn)行驗(yàn)證。被 殺蟲劑污染的部份化學(xué)原料藥運(yùn)到了另一地點(diǎn)的第二家 工廠生產(chǎn)制劑，使該工廠的流化床干燥器中物料袋受到 了殺蟲劑的污染，料造成各批產(chǎn)品受到污染，而該工廠 根本就沒有生產(chǎn)殺蟲劑。 清潔驗(yàn)證的背景（續(xù)）：清潔驗(yàn)證的背景（續(xù)）： FDA歷來(lái)的檢查重點(diǎn)： 要求清洗設(shè)備的主要目的

8、還是防止污染或混料。由 于設(shè)備清洗維護(hù)不當(dāng)或防塵管理不當(dāng)，F(xiàn)DA 檢查官曾 十分注意檢查衛(wèi)生狀況。過(guò)去FDA 總是更注意檢查青 霉素類與非青霉素類藥物之間的交叉污染、藥品與甾 類物質(zhì)或激素之間的交叉污染問題。在過(guò)去二十年間， 因?qū)嶋H或潛在的青霉素交叉污染問題已從市場(chǎng)上撤回 了大量的藥品。 有一位幼兒教師，懷抱著一名2小時(shí)前注射過(guò)青霉素 鈉的嬰兒，孩子的一泡尿撒在了幼兒教師的手臂上，1 分鐘后該名幼兒教師呼吸困難、面色蒼白、心慌氣短， 不一會(huì)就呈現(xiàn)昏迷狀態(tài)，經(jīng)醫(yī)生診斷為青霉素過(guò)敏。 清潔驗(yàn)證的背景（續(xù)）：清潔驗(yàn)證的背景（續(xù)）： FDA加強(qiáng)對(duì)進(jìn)口原料供應(yīng)商的檢查： 1992年，F(xiàn)DA 對(duì)一家海外原

9、料藥生產(chǎn)廠發(fā)出了 進(jìn)口警告，該工廠使用同一設(shè)備生產(chǎn)強(qiáng)力甾體類物 質(zhì)和非甾體類物質(zhì)。該工廠是多品種原料藥生產(chǎn)廠。 FDA 認(rèn)為交叉污染的可能性很大，對(duì)公眾的健康造 成了嚴(yán)重威脅。該工廠僅在FDA 檢查時(shí)開始清洗驗(yàn) 證工作，F(xiàn)DA 在檢查時(shí)認(rèn)為該清洗驗(yàn)證不當(dāng)。理由 之一是：工廠僅尋找沒有前一種物質(zhì)存在的證據(jù)。 但是用TLC 法檢驗(yàn)洗滌水之后，找到了設(shè)備中還殘 留了前一產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程中的副反應(yīng)物質(zhì)和降解物質(zhì) 的證據(jù)。 二二、清潔驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估清潔驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估 清潔驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估：清潔驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估： 三三、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)、清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì) 清潔方法的分類和特點(diǎn)：清潔方法的分類和特點(diǎn)： 通常

10、清潔方法分為: 手工清潔（Manual Cleaning） 在線清潔（Cleaning In Place） 在線清潔的特點(diǎn)： 1. 設(shè)備、容器、管道能夠自動(dòng)進(jìn)行清洗； 2. 對(duì)容器采用噴林法清潔，對(duì)管道采用壓力法清 潔； 3. 極少的手工操作，重復(fù)性高。 在線清潔舉例：在線清潔舉例： 清潔的原理清潔的原理 1. 清洗劑（水、有機(jī)溶劑或表面活性劑）采用 擴(kuò)散或?qū)α鞯姆椒ǖ竭_(dá)“臟物”表面； 2. 清洗劑通“臟物”反應(yīng)； 3. 反應(yīng)產(chǎn)物采用擴(kuò)散或?qū)α鞯姆椒x開設(shè)備。 清潔速率同流速的關(guān)系清潔速率同流速的關(guān)系 層流層流 湍流湍流 20水中圓形管道湍流所要求的流速和速度水中圓形管道湍流所要求的流速和速度

11、 管子直徑（英寸）管子直徑（英寸）速度（米速度（米/秒）秒）流速（升流速（升/分）分） 0.50.30482.728 1.00.16155.910 1.50.10678.637 2.00.0823011.820 通常，對(duì)于盲管和垂直管路為了清潔干凈要求管道 中水的流速要大于湍流所需要的流速1.52米/秒 (5英 尺/秒)。 因?yàn)椋?1.有效的沖洗垂直管道； 2.排出垂直管道中的空氣； 3.完全潤(rùn)濕管路 0.1615米/秒1.52米/秒 20水中圓形管道湍流所要求的流速和速度水中圓形管道湍流所要求的流速和速度 容器降落膜的雷諾系數(shù)：容器降落膜的雷諾系數(shù)： 通常要求在容器內(nèi)壁達(dá)到湍流的雷諾系數(shù)為大

12、 于2,000. 噴林球：噴林球： 溶液分布在容器上部的溶液分布在容器上部的2525-30-30區(qū)域區(qū)域 噴林球的覆蓋率檢查：噴林球的覆蓋率檢查： 噴林球的覆蓋率檢查（續(xù)）：噴林球的覆蓋率檢查（續(xù)）： 核黃素（維生素B2）覆蓋測(cè)試檢查法： 把核黃素均勻涂布在設(shè)備內(nèi)表面； 干燥； 按照預(yù)定的SOP啟動(dòng)CIP進(jìn)行清洗； 干燥； 采用黑光燈檢查； 合格標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)核黃素殘留，在黑光燈檢查下 無(wú)熒光。 防止容器底部積水：防止容器底部積水： 底部出口大?。ㄓ⒋纾┤萜髋潘俾使浪?（L/M） 0.55.0 1.045.5 1.5140.9 2.0268.2 2.5454.6 管道盲管管道盲管 為了有效和可重復(fù)

13、的清洗通常要求管路系 統(tǒng)中的分叉口或交接口的L/D2.0 儀器形分叉口閥門形分叉口 管道盲管（續(xù)）管道盲管（續(xù)） 管道盲管中清洗液的流動(dòng)形式管道盲管中清洗液的流動(dòng)形式 管道盲管中清洗液的流動(dòng)形式（續(xù)）管道盲管中清洗液的流動(dòng)形式（續(xù)） 清潔劑的選擇清潔劑的選擇 1. 清潔劑應(yīng)能有效溶解殘留物，不腐蝕設(shè)備， 且本身易被清除。 2. 人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)協(xié)調(diào)會(huì)(ICH) 在“殘留溶劑指南”中將溶劑分為3個(gè)級(jí)別， 對(duì)其使用和殘留限度有明確的要求。 3. 隨著環(huán)境保護(hù)標(biāo)準(zhǔn)的提高，還應(yīng)要求清潔劑 對(duì)環(huán)境盡量無(wú)害或可被無(wú)害化處理。 4. 滿足以上要求的前提下應(yīng)盡量廉價(jià)。 選擇標(biāo)準(zhǔn)： 清潔劑的選擇（續(xù)

14、）清潔劑的選擇（續(xù)） 根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)于水溶性殘留物，水是首選的 清潔劑。不同批號(hào)的清潔劑應(yīng)當(dāng)有足夠的質(zhì)量穩(wěn) 定性。因此不宜采用一般家用清潔劑，因其成分 復(fù)雜、質(zhì)量波動(dòng)較大且供應(yīng)商不公布詳細(xì)組份。 使用這類清潔劑后，還會(huì)引起新的問題，即如何 證明清潔劑的殘留達(dá)到了標(biāo)準(zhǔn)? 因此，應(yīng)盡量選擇組份簡(jiǎn)單、成分確切的清潔劑。 根據(jù)殘留物和設(shè)備的性質(zhì)，企業(yè)還可自行配制成 分簡(jiǎn)單效果確切的清潔劑，如一定濃度的酸、堿 溶液等。企業(yè)應(yīng)有足夠靈敏的方法檢測(cè)清潔劑的 殘留情況，并有能力回收或?qū)U液進(jìn)行無(wú)害化處 理。 制定清潔規(guī)程：制定清潔規(guī)程： 制定SOP是清潔驗(yàn)證的先決條件； 通常參照設(shè)備的說(shuō)明書制定詳細(xì)的規(guī)程，

15、規(guī) 定每一臺(tái)設(shè)備的清潔程序，保證每個(gè)操作人 員都能以可重復(fù)的方式對(duì)其清洗，并獲得相 同的清潔效果。 清潔規(guī)程的要點(diǎn)： 系統(tǒng)的拆卸； 預(yù)清潔； 清潔劑、濃度、溶液量，水質(zhì)量； 清潔規(guī)程的要點(diǎn)（續(xù)）：清潔規(guī)程的要點(diǎn)（續(xù)）： 時(shí)間、溫度和頻次、流速、壓力； 消毒（消毒劑濃度、消毒方法、消毒劑用量）； 裝配：按說(shuō)明書、示意圖要求裝配； 干燥：明確干燥的方式和參速； 檢查：符合預(yù)定的標(biāo)準(zhǔn)。 清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)的清潔方法的開發(fā)和設(shè)計(jì)的要點(diǎn)要點(diǎn) 1. 湍流的清潔速率大大大于層流的清潔速率； 2. 盲管和垂直管道中的清潔液的速率要大于湍流 所需的速率，通常要求大于1.52米/秒 (5英尺/ 秒)； 3. 在

16、設(shè)備設(shè)計(jì)時(shí)需要考慮盲管的清潔問題，通常 要求L/D2.0； 4. 噴林球的覆蓋率檢查； 5. CIP清洗中避免設(shè)備底部的積水； 6. 有效、可靠和反復(fù)的清潔要求湍流。 三、三、 清潔分析方法的驗(yàn)證清潔分析方法的驗(yàn)證 通常清潔分析方法驗(yàn)證包括取樣方法驗(yàn)證和檢驗(yàn) 方法驗(yàn)證。 棉簽取樣方法的驗(yàn)證： 取樣過(guò)程需經(jīng)過(guò)驗(yàn)證，通過(guò)回收率試驗(yàn)驗(yàn)證取樣 過(guò)程的回收率和重現(xiàn)性。通常取樣回收率和檢驗(yàn) 方法回收率結(jié)合進(jìn)行，總回收率一般（企業(yè)可以 根據(jù)實(shí)際情況確定）不低于70，多次取樣回 收率的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于20。 棉簽取樣過(guò)程的驗(yàn)證實(shí)際上是對(duì)取樣棉簽、溶劑 的選擇、取樣人員操作、殘留物轉(zhuǎn)移到取樣棉簽、 樣品溶出

17、(萃取)過(guò)程的全面考察。 棉簽取樣方法的驗(yàn)證：棉簽取樣方法的驗(yàn)證： 棉簽取樣方法的驗(yàn)證（續(xù)）：棉簽取樣方法的驗(yàn)證（續(xù)）： 驗(yàn)證方法如下： 準(zhǔn)備一塊與設(shè)備表面材質(zhì)相同的板材，如平整 光潔的316L不銹鋼板； 在鋼板上劃出100mm100mm 的區(qū)域； 將5倍限度量的待檢測(cè)物溶液，定量裝入校驗(yàn) 的微量注射器； 將其溶液盡量均勻地涂布在100mm100mm 的區(qū)域內(nèi)； 自然干燥或用電吹風(fēng)溫和地吹干不銹鋼板； 用選定的擦拭溶劑潤(rùn)濕擦拭棉簽，按下圖所示 進(jìn)行擦拭取樣； 重復(fù)以上規(guī)程3次； 棉簽取樣方法的驗(yàn)證（續(xù)）：棉簽取樣方法的驗(yàn)證（續(xù)）： 將擦拭棉簽分別放入棉簽管中，加入預(yù)定 溶劑5ml，超聲； 用經(jīng)

18、驗(yàn)證的檢驗(yàn)方法檢驗(yàn)，計(jì)算回收率和 回收率的RSD。 下圖為棉簽插試取樣方法： 第一步 第二步 淋洗液取樣方法的驗(yàn)證：淋洗液取樣方法的驗(yàn)證： 通常淋洗法限度檢查不需做回收率驗(yàn)證；定量檢查應(yīng) 做回收率驗(yàn)證，可以利用淋洗溶劑沖洗已知量（在限 度附近）的分析物確定回收率，回收率通常應(yīng)不低于 95%。 淋洗的取樣方法為根據(jù)淋洗水流經(jīng)設(shè)備的線路，選擇 淋洗線路相對(duì)最下游的一個(gè)或幾個(gè)排水口為取樣口。 分別按照微生物檢驗(yàn)樣品和化學(xué)檢驗(yàn)樣品的取樣規(guī)程 收集清潔程序最后一步淋洗即將結(jié)束時(shí)的水樣。 淋洗法樣品可對(duì)沖洗液直接檢測(cè)也可對(duì)沖洗液做稀釋 后檢測(cè)；無(wú)論直接檢測(cè)還是稀釋檢測(cè)都應(yīng)在接到樣品 后首先將樣品同空白溶劑

19、做視覺檢查，確定是否有顏 色差異和異物存在；如果有上述現(xiàn)象發(fā)生，可直接判 定樣品不合格。 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn) 通常設(shè)備的取樣清潔驗(yàn)證中如何確定合適取樣方法和 取樣點(diǎn)是驗(yàn)證方案的關(guān)鍵內(nèi)容之一，必須由合適的理 由來(lái)確認(rèn)取樣點(diǎn)，此取樣點(diǎn)應(yīng)能夠代表設(shè)備的“最臟 點(diǎn)”。 （1） 取樣方法的確認(rèn) 方法分為棉簽直接表面擦拭、淋洗液沖洗和安慰劑取 樣。 擦拭取樣的優(yōu)點(diǎn)是能對(duì)最難清潔部位直接取樣，通過(guò) 考察有代表性的最難清潔部位的殘留物水平評(píng)價(jià)整套 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn) 生產(chǎn)設(shè)備的清潔狀況。通過(guò)選擇適當(dāng)?shù)牟潦萌軇?擦拭工具和擦拭方法，可將清洗過(guò)程中未溶解的，

20、已“干結(jié)”在設(shè)備表面或溶解度很小的物質(zhì)擦拭 下來(lái)。檢驗(yàn)的結(jié)果能直接反映出各取樣點(diǎn)的清潔 狀況。 擦拭取樣的缺點(diǎn)是很多情況下須拆卸設(shè)備后方能 接觸到取樣部位，對(duì)取樣工具、溶劑、取樣人員 的操作等都有一定的要求，總的來(lái)說(shuō)比較復(fù)雜。 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)（續(xù)）取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)（續(xù)） 淋洗取樣法為大面積取樣方法，其優(yōu)點(diǎn)是取樣面大， 對(duì)不便拆卸或不宜經(jīng)常拆卸的設(shè)備也能取樣。因此 其適用于擦拭取樣不易接觸到的表面，尤其適用于 設(shè)備表面平坦、管道多且長(zhǎng)的的生產(chǎn)設(shè)備。 淋洗水樣品的缺點(diǎn)是溶解與流體力學(xué)原理，當(dāng)溶劑 不能在設(shè)備表面形成湍流進(jìn)而有效溶解殘留物時(shí)， 或者殘留物不溶于水或“干結(jié)”在設(shè)備表面時(shí)，

21、淋 洗水就難以反映真實(shí)的情況。 必須由經(jīng)過(guò)培訓(xùn)的人員進(jìn)行取樣，并且必須按照批 準(zhǔn)的測(cè)試方案進(jìn)行。執(zhí)行取樣的人員同執(zhí)行清潔操 作的人員不能為同一人。 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)（續(xù)）取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)（續(xù)） 安慰劑取樣（Placebo method）方法也稱模擬 法取樣。 設(shè)備清潔干燥后，在該設(shè)備內(nèi)進(jìn)行模擬物料處理， 然后取一部份進(jìn)行測(cè)試。 法規(guī)部門強(qiáng)力不推薦使用此法，原因如下： 無(wú)人能確保殘留均勻地遺留在設(shè)備整個(gè)表面； 較大顆粒的殘留不能均勻地分散到模擬物料 中。 取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)（續(xù)）取樣方法和取樣點(diǎn)的確認(rèn)（續(xù)） （2） 取樣點(diǎn)的確認(rèn) 通常不可能擦拭設(shè)備的全部表面，因此應(yīng)該選擇設(shè) 備的

22、最差區(qū)域作為取樣點(diǎn)。這些區(qū)域應(yīng)在清潔難度 和殘留水平方面代表著對(duì)清潔規(guī)程最大程度的挑戰(zhàn)， 例如料斗的底部、槳拌槳槳葉底部和閥門的周圍。 如果進(jìn)行微生物取樣，取樣計(jì)劃應(yīng)包括微生物的可 能最差區(qū)域，例如：較難靠近的地方以及可收集水 的排水區(qū)域。微生物和化學(xué)取樣應(yīng)在不同區(qū)域進(jìn)行， 測(cè)試方案中應(yīng)包括設(shè)備及其取樣點(diǎn)的描述或圖表。 檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證檢驗(yàn)方法的驗(yàn)證 通常清洗分析方法分為限度檢查和定量檢查，不同 的檢查方法驗(yàn)證的參數(shù)也不相同。 （1）回收率 回收率的分析方法驗(yàn)證已在取樣方法的驗(yàn)證中詳 細(xì)描述， 不在此贅述。 （2）精密度 精密度系指在規(guī)定的條件下，從同一個(gè)均勻樣品 中，經(jīng)多次取樣測(cè)定所得結(jié)果之間

23、的接近程度。通 常用相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)來(lái)表示。定量檢查的 RSD%應(yīng)不大于10%。 分析方法的驗(yàn)證（續(xù)）分析方法的驗(yàn)證（續(xù)） 淋洗法和棉簽法用于限度檢查通常不需要做精密度 實(shí)驗(yàn)； （3） 線性/范圍 線性系指在設(shè)計(jì)的范圍內(nèi)，測(cè)定結(jié)果與試樣中被測(cè) 物濃度呈正比關(guān)系的程度。 范圍系指能達(dá)到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測(cè)試 方法適用的高低限濃度或量的區(qū)間。 定量檢查應(yīng)至少測(cè)試5個(gè)濃度范圍并且包含清潔的 最低限和最高限度，線性的相關(guān)系數(shù)應(yīng)不低于0.98 ； 濃度范圍應(yīng)達(dá)到殘留物限度的50150。 淋洗法和棉簽法用于限度檢查時(shí)不需做線性/范圍驗(yàn) 證。 分析方法的驗(yàn)證（續(xù)）分析方法的驗(yàn)證（續(xù)） （4）檢

24、測(cè)限和定量限 檢測(cè)限系指在確定的試驗(yàn)條件下，試樣中被測(cè)物能 被檢測(cè)出的最小量；定量限系指在確定的試驗(yàn)條件 下，試樣中被測(cè)物能被準(zhǔn)確測(cè)定的最小量，其測(cè)定 結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度。 淋洗法和棉簽法用于限度檢查只需做檢測(cè)限實(shí)驗(yàn)。 通常檢測(cè)限是指信噪比為3:1時(shí)被分析物的濃度， 定量限是指信噪比為10:1時(shí)被分析物的濃度。 分析方法的驗(yàn)證（續(xù)）分析方法的驗(yàn)證（續(xù)） （5）專屬性 專屬性系指在其他成分(如：雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、相似 物等)存在下，分析方法能準(zhǔn)確測(cè)出被測(cè)物的特性。 評(píng)價(jià)空白溶劑、分析系統(tǒng)、棉簽本身是否有干擾； 通常采用的驗(yàn)證方法為：進(jìn)針空白溶劑評(píng)價(jià)溶劑干 擾、進(jìn)樣量為0評(píng)價(jià)系統(tǒng)干擾、進(jìn)針

25、棉簽浸泡的溶劑 評(píng)價(jià)棉簽干擾。 （6）樣品溶液穩(wěn)定性 通常樣品室溫或5冰箱冷藏放置24-72小時(shí)，測(cè)定 結(jié)果應(yīng)不低于初始值的90%。 分析方法的驗(yàn)證（續(xù)）分析方法的驗(yàn)證（續(xù)） （7）系統(tǒng)適用性 定量檢查測(cè)定時(shí)， 應(yīng)制備2份對(duì)照品，對(duì)照品 一致性檢查應(yīng)為不超過(guò)5%；對(duì)照品的RSD%不 應(yīng)超過(guò)10%。 （8） 限度檢查時(shí)溶液的進(jìn)樣順序 限度檢查測(cè)定時(shí)測(cè)定順序依次為空白溶劑、樣 品、對(duì)照品。 限度檢查和定量檢查時(shí)所需驗(yàn)證的參數(shù)：限度檢查和定量檢查時(shí)所需驗(yàn)證的參數(shù)： 限度檢查法定量檢查法 專屬性 精密度X 線性/范圍X 回收率 檢測(cè)限和定量限檢測(cè)限驗(yàn)證*定量限驗(yàn)證* 樣品溶液的穩(wěn)定性 系統(tǒng)適應(yīng)性(一份

26、標(biāo)準(zhǔn)品)(兩份標(biāo)準(zhǔn)品) 檢查方法 參數(shù) 四、清潔驗(yàn)證四、清潔驗(yàn)證 清潔驗(yàn)證的定義 清潔驗(yàn)證和清潔確認(rèn) 清潔驗(yàn)證的前提要求 清潔驗(yàn)證的評(píng)估 目標(biāo)化和物的選擇 接受標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算 取樣點(diǎn)的選擇 清洗驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù) 內(nèi)容簡(jiǎn)介內(nèi)容簡(jiǎn)介 清潔驗(yàn)證的定義清潔驗(yàn)證的定義 清洗驗(yàn)證是用書面證據(jù)證明批準(zhǔn)的清洗規(guī)程可以對(duì) 設(shè)備進(jìn)行有效的清洗并使清洗后的設(shè)備適用于產(chǎn)品 的制造或包裝。 清潔驗(yàn)證的目的就是證明經(jīng)過(guò)清潔程序清潔后，設(shè) 備上的殘留物(可見的和不可見的：包括前一產(chǎn)品的 殘留物或清洗過(guò)程中洗滌劑的殘留物)達(dá)到了規(guī)定的 清潔限度要求，不會(huì)對(duì)將生產(chǎn)的產(chǎn)品造成交叉污染。 由于清潔方法直接影響產(chǎn)品的質(zhì)量、安全性和有效 性，

27、為了確保清潔的有效，以確保后續(xù)產(chǎn)品中沒有 帶入超過(guò)接受標(biāo)準(zhǔn)的污染物，避免產(chǎn)品的交叉污染， 以致影響患者的用藥安全必須對(duì)清潔方法進(jìn)行驗(yàn)證。 通常清潔驗(yàn)證包括但不限于以下三個(gè)方面： 生產(chǎn)結(jié)束至開始清潔的最長(zhǎng)時(shí)間（也稱：待清 潔設(shè)備保留時(shí)間）； 已清潔設(shè)備用于下次生產(chǎn)前的最長(zhǎng)存放時(shí)間 （也稱：潔凈保留時(shí)間）； 連續(xù)生產(chǎn)的最長(zhǎng)時(shí)間。 清潔驗(yàn)證的清潔驗(yàn)證的范圍范圍 清洗驗(yàn)證和清洗確認(rèn) 清洗確認(rèn)是提供證據(jù)的過(guò)程，以表明清洗操作在某一 情況下（也就是說(shuō)還未證明清洗操作的一致性）可以 符合預(yù)先的要求。 清洗確認(rèn)可以在以下情況下使用 (例如)： 新產(chǎn)品引入； 臨床試制樣品的制造； 清洗規(guī)程的開發(fā)； 制造頻率極低

28、的產(chǎn)品。 日常使用的清洗規(guī)程必須經(jīng)過(guò)驗(yàn)證 清洗驗(yàn)證的預(yù)先要求 設(shè)備和設(shè)施設(shè)計(jì)： 設(shè)計(jì)是否易于清洗與檢查? 是否對(duì)自動(dòng)系統(tǒng)進(jìn)行了驗(yàn)證(e.g. 在線清洗系統(tǒng))? 清洗規(guī)程的管理： 清洗規(guī)程是否全面、詳細(xì)、準(zhǔn)確并且批準(zhǔn)？ 是否定期對(duì)清洗規(guī)程進(jìn)行回顧？ 相關(guān)驗(yàn)證： 分析儀器是否經(jīng)過(guò)驗(yàn)證？ 清潔分析方法是否經(jīng)過(guò)驗(yàn)證？ 由于清潔驗(yàn)證是個(gè)復(fù)雜的驗(yàn)證過(guò)程，在保證清 潔效果和符合法規(guī)的前提下通常采用參照物來(lái) 簡(jiǎn)化清潔驗(yàn)證。驗(yàn)證方案的制定必須符合一般 驗(yàn)證方案的共性要求，該清潔驗(yàn)證方案中最關(guān) 鍵的技術(shù)問題為如何確定限度，用什么手段能 準(zhǔn)確地測(cè)定殘留量，這包括取樣方法和檢測(cè)方 法的開發(fā)和驗(yàn)證。通常清潔驗(yàn)證包括以下

29、內(nèi)容： （1） 設(shè)備的評(píng)估 （2） 清洗規(guī)程的評(píng)估 （3） 清潔參照物的選擇和殘留限度的計(jì)算 驗(yàn)證方案驗(yàn)證方案 設(shè)備評(píng)估設(shè)備評(píng)估 設(shè)備評(píng)估用來(lái)確定哪些設(shè)備是多個(gè)活性成分共同接 觸的，即：共用設(shè)備；那些設(shè)備是某個(gè)產(chǎn)品/活性成 分單獨(dú)使用的設(shè)備，即：專用設(shè)備。該設(shè)備評(píng)估將 計(jì)算出共用設(shè)備的產(chǎn)品接觸面積以計(jì)算殘留限度的 接受標(biāo)準(zhǔn)。 本評(píng)估的一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)是確定哪些設(shè)備是包括在清潔 驗(yàn)證中的，哪些設(shè)備是不包括在清潔驗(yàn)證中的。按 照設(shè)備接觸產(chǎn)品的情況，設(shè)備可分為三類： 產(chǎn)品接觸的設(shè)備系指直接接觸產(chǎn)品的設(shè)備， 例如：溶液罐、儲(chǔ)存桶。對(duì)于產(chǎn)品接觸設(shè)備的無(wú)效 清潔可能造成產(chǎn)品間的交叉污染。 設(shè)備評(píng)估設(shè)備評(píng)估 非產(chǎn)

30、品接觸的設(shè)備系指在生產(chǎn)工藝中涉及， 但沒有和產(chǎn)品直接接觸的設(shè)備。例如：封閉設(shè)備的 外表面。對(duì)于非產(chǎn)品接觸設(shè)備的無(wú)效清潔一般不會(huì) 造成產(chǎn)品間的交叉污染。 非直接或偶然產(chǎn)品接觸的設(shè)備系指在生產(chǎn)工 藝中涉及，沒有和產(chǎn)品直接接觸但有可能污染產(chǎn)品 的設(shè)備。例如：冷凍干燥儀或盤式干燥儀的內(nèi)表面、 機(jī)械監(jiān)護(hù)裝置的內(nèi)部，還有某些情況下地面、墻面 和天花板。對(duì)于非直接產(chǎn)品接觸設(shè)備的無(wú)效清潔有 可能造成產(chǎn)品間的交叉污染。 設(shè)備評(píng)估設(shè)備評(píng)估 通常清潔驗(yàn)證包括產(chǎn)品接觸的設(shè)備，不包括非產(chǎn)品 接觸的設(shè)備，非直接產(chǎn)品接觸的設(shè)備是否包括在內(nèi) 依實(shí)際情況而定。一次性單用途設(shè)備（如硅膠管） 可不包括在清潔驗(yàn)證中。 設(shè)備評(píng)估設(shè)備評(píng)

31、估 設(shè)備表面積的確定： 應(yīng)測(cè)定每個(gè)設(shè)備的產(chǎn)品接觸面積，以計(jì)算殘 留限度的接受標(biāo)準(zhǔn)。 產(chǎn)品接觸面積測(cè)定的準(zhǔn)確度應(yīng)具有實(shí)際意義， 不必絕對(duì)地精確?？蓪?fù)雜設(shè)備轉(zhuǎn)化成基本幾何 圖形以便于計(jì)算和測(cè)量。 測(cè)量的原始記錄和計(jì)算將作為原始數(shù)據(jù)進(jìn)行 保存。 清洗規(guī)程的評(píng)估清洗規(guī)程的評(píng)估 是否包括了所有的設(shè)備/清洗操作? 清洗操作是手動(dòng)還是自動(dòng)的? 清洗規(guī)程是否足夠詳細(xì)以便可以進(jìn)行持續(xù)一致的操 作？ 是否規(guī)定了干燥的方法以及干燥方法是否正確? 標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程是否規(guī)定了需要檢查與記錄的信息? 清洗規(guī)程是否包括了狀態(tài)標(biāo)識(shí)的要求? 是否詳細(xì)描述了在完成檢查后如何確保存儲(chǔ)是安全 的？ 一般藥品都由活性成分和輔料組成。對(duì)于

32、接觸多 個(gè)產(chǎn)品的共用設(shè)備，所有這些殘留物都是必須清 潔干凈的，在清潔驗(yàn)證中不必為所有殘留物都制 定限度標(biāo)準(zhǔn)并一一檢測(cè)，因?yàn)檫@是不切實(shí)際且沒 有必要的。在一定的意義上，清潔的過(guò)程是個(gè)溶 解的過(guò)程，因此，通常的做法是從各組分中確定 最難清潔(溶解)的物質(zhì)，以此作為參照物質(zhì)。通 常，相對(duì)與輔料，人們最更關(guān)注活性成分的殘留， 因?yàn)樗赡苤苯佑绊懴屡a(chǎn)品的質(zhì)量、療效和安 全性。 標(biāo)記化合物選擇標(biāo)記化合物選擇 標(biāo)記化合物選擇標(biāo)記化合物選擇 毒性 在清洗溶劑中的溶解度 清洗問題如：對(duì)設(shè)備表面材質(zhì)有一定的附著力 包含色料、芳香劑或矯味劑的產(chǎn)品 設(shè)備的使用率（生產(chǎn)頻率高的產(chǎn)品相應(yīng)的清洗頻 率也高） 清洗過(guò)程中如

33、果使用清洗劑，則其殘留物也應(yīng)視 為標(biāo)記物 標(biāo)記化合物選擇標(biāo)記化合物選擇 產(chǎn)品產(chǎn)品 名稱名稱 毒性毒性溶解性溶解性 已知的清已知的清 洗洗 問題問題 顏色顏色 香味與味香味與味 道道 產(chǎn)量產(chǎn)量 A10ug/cm3易溶無(wú)無(wú)10% B40ug/cm3溶解無(wú)無(wú)20% C50ug/cm3溶解無(wú)無(wú)50% D50ug/cm3微溶有有20% 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) （1）目測(cè)潔凈，干燥 & 無(wú)嗅 限度 4 在每個(gè)清洗驗(yàn)證的方案中都必須包括該接受限度； 4 在每次清洗完成后都必須進(jìn)行檢查并對(duì)檢查結(jié)果 進(jìn)行記錄； 4 目測(cè)檢查時(shí)應(yīng)包括地面、墻面和天花板等； 4 應(yīng)該作為清洗驗(yàn)證接受限度的第一個(gè)接受標(biāo)

34、準(zhǔn)； 注意: 在進(jìn)行無(wú)嗅檢查時(shí)考慮到產(chǎn)品的安全問題。 （2）化學(xué)殘留可接受限度 濃度限度：十萬(wàn)分之一（10ppm） 在下一產(chǎn)品中的殘留物數(shù)量級(jí)別應(yīng)不超過(guò)十萬(wàn)分之一 （10ppm），最高允許十萬(wàn)分之一殘留源于食品法規(guī)， 食品法規(guī)允許某一有害物質(zhì)作為食物鏈存在于動(dòng)物和 家禽中存在的水平。 實(shí)驗(yàn)室通常配備的儀器如HPLC，紫外可見分光光 度計(jì)、薄層色譜等的靈敏度一般都能達(dá)到10106 以上，因此該限度標(biāo)準(zhǔn)不難被檢驗(yàn)。 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) 設(shè)下批產(chǎn)品的生產(chǎn)批量為B(kg)，因殘留物濃度最 高為10106，即10mgkg，則殘留物總量最 大為B1010610B(mg)；單位面積殘留物

35、的限度為殘留物總量除以測(cè)量的與產(chǎn)品接觸的內(nèi) 表面積，設(shè)設(shè)備總內(nèi)表面積為SA(cm2)，則表面 殘留物限度L 為10BSA(mgcm2)。 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) 千分之一殘留限度的計(jì)算 MTDa = 清洗前產(chǎn)品最小每日給藥劑量中的活性成分含量； Nb = 清洗后產(chǎn)品的批量； MDDb = 清洗后產(chǎn)品的最大日給藥劑量的活性成分含量； Sb = 清洗后產(chǎn)品活性成分含量的百分比(%w/w)。 數(shù)據(jù)1/1000源于三個(gè)因素。首先，一般認(rèn)為藥物的十分 之一處方劑量是無(wú)效的；其次是安全因子；再次是耐受 因子。 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) Sb MDDb NMTDa L b 1000

36、 1000/1 產(chǎn)品產(chǎn)品 名稱名稱 活性活性 成分成分 活性成分活性成分 含量含量 最小日劑量最小日劑量 MTD 最大日劑量最大日劑量 MDD 批量批量 Aa3%2mg10mg100 kg Bb6%5mg20mg50 kg Cc8%50mg150mg250 kg 千分之一殘留限度的計(jì)算舉例 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) ABC A N/A300mg267mg B 1500mgN/A667mg C 15000mg7500mgN/A 清洗前產(chǎn)品 清洗后產(chǎn)品 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) 產(chǎn)品之間公用設(shè)備表面積 產(chǎn)品名稱公用面積 A+B200,000cm2 B+C100,000cm2

37、 C+A80,000cm2 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) 按擦拭面積為100cm2，計(jì)算每個(gè)棉簽的殘留限度 ABC A目視潔凈 150ug/100 cm2 330ug/100 cm2 B500ug/cm2目視潔凈 667ug/100 cm2 C 1250ug/100 cm2 500ug/100 cm2 目視潔凈 清洗前產(chǎn)品 清洗后產(chǎn)品 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) (3) 微生物殘留可接受標(biāo)準(zhǔn) 清洗的微生物驗(yàn)證應(yīng)該和清洗的化學(xué)驗(yàn)證同步進(jìn)行。 棉簽擦拭法：洗出液取樣或壓痕法采樣； 淋洗液法：取定量的淋洗液過(guò)濾后，取濾膜培養(yǎng)。 清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn)清洗限度和接受標(biāo)準(zhǔn) 清洗驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù)清洗驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù) 變更控制變更控制 1. 引入新產(chǎn)品或取消現(xiàn)有產(chǎn)品(可能影響標(biāo)記化合 物)； 2. 設(shè)備、生產(chǎn)工藝或清洗規(guī)程的變更； 3. 潔凈/污染設(shè)備保留時(shí)間的變更； 4. 清洗劑的變更； 5. 產(chǎn)品處方的變更； 清洗驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù)清洗驗(yàn)證狀態(tài)的維護(hù) 在清洗驗(yàn)證完成之后，清洗規(guī)程需要遵循變更控制 的流程及進(jìn)行日常的監(jiān)控。 關(guān)于產(chǎn)品、設(shè)備及規(guī)程的任何變更必須遵循變更控 制流程對(duì)變更對(duì)驗(yàn)證狀態(tài)的影響進(jìn)行評(píng)估。 評(píng)估清洗驗(yàn)證是否持續(xù)地符合企業(yè)及法規(guī)的標(biāo) 準(zhǔn)（某些更新的要求） 對(duì)清洗驗(yàn)證的回顧進(jìn)行書面記錄以確認(rèn)清洗操 作仍然處于驗(yàn)證的狀態(tài) 清洗驗(yàn)證回顧的頻率由各個(gè)企業(yè)自主決定（一 般的