細菌負荷定量檢測的臨床意義精編版

1、 2 PCR檢測技術(shù)簡介 聚合酶鏈反應(PCR)已經(jīng)成為現(xiàn)代分子生物學實驗中最重要的工具， PCR的出現(xiàn)為分離基因、DNA測序等提供了一種快捷、高效的方法 PCR的原理和細胞內(nèi)發(fā)生的DNA復制過程十分相像，可以使DNA分子在 數(shù)小時(2-4小時)內(nèi)擴增230倍以上，使之達到可以檢測的水平 在臨床實驗中，PCR已用于病原體的檢測和流行病學研究，本法對于傳 統(tǒng)培養(yǎng)等檢測方法繁復，靈敏度低，特異性差，或尚未建立可靠檢測方 法的微生物尤為適用 31.Waterer G et al. Current Opinion in Infectious Diseases 2011;24:137141 MI: 1.

2、5627 治療社區(qū)獲得性肺炎(CAP)時為何應檢測細菌負荷量? 4 細菌負荷量的檢測可預測患者預后 既往研究提示，伴膿毒癥風險的CAP患者，其 治療方案不同于其他患者 最近研究表明細菌負荷量高的CAP患者愈后較 差，這些發(fā)現(xiàn)改變了膿毒癥的治療模式，細菌 負荷量與患者是否應進行膿毒癥相關治療、是 否轉(zhuǎn)入ICU、是否需要進行更多的侵入性操作 等密切相關 PCR檢測技術(shù)可準確檢測血液中的細菌負荷量 以及部分特殊病原體的負荷量 細菌負荷量不僅能預示患者的預后，而且這些 數(shù)據(jù)對重度膿毒癥的發(fā)病機理及臨床最佳抗生 素的選擇具有重要的意義 1.Waterer G et al. Current Opinion

3、 in Infectious Diseases 2011;24:137141 5 肺炎鏈球菌肺炎疾病嚴重程度與細菌負荷量相關 MI: 6.0363 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 6 研究簡介 研究目的 評估社區(qū)獲得性肺炎(CAP)患者細菌負荷量與患者膿毒性休克及預后的 相關性 研究方法 一項前瞻性研究，患者均為住院的CAP患者 細菌負荷量檢測：采用rt-PCR技術(shù)測定血標本中肺炎鏈球菌的細菌負荷 量 主要研究終點：膿毒性休克的發(fā)生率及需行機械通氣的患者比例 次要研究終點：急性腎功能衰竭(AKI)、急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)的 發(fā)生率及院內(nèi)死

4、亡率 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 7 患者細菌負荷量分布 肺炎鏈球菌肺炎患者細菌負荷量分布 患者百分比(%) (log10拷貝/mL) 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 8 細菌負荷量影響患者膿毒性休克的發(fā)生率 隨著肺炎鏈球菌細菌負荷量的增加，患者膿毒性休克的發(fā)生率明顯上升 膿毒性休克的發(fā)生率(%) P0.05 (log10拷貝/mL) 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 9 細菌負荷量影響需機械通氣的患者比例 高細菌負荷量的患者需要機械通氣 的比例明顯

5、高于低負荷患者 需機械通氣的患者比例(%) P=0.001 數(shù)據(jù)顯示，細菌負荷量每增加 1log10拷貝/mL，需機械通氣的患 者比例則增加2倍 log10拷貝/mL 可能需機械通氣的患者比例 3/66 9/27 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 10 細菌負荷量影響患者預后 高細菌負荷量的患者出現(xiàn)AKI和ARDS的比例明顯高于低負荷患者 患者百分比(%) P0.001 10/66 15/27 1/66 5/27 P=0.007 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 11 細菌負荷量影響患者死亡率 患者死亡

6、率(%) P=0.012 4/66 7/27 高細菌負荷量的患者死亡率明顯高于低負荷患者 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 12 研究結(jié)論 隨著細菌負荷量的增加，感染患者出現(xiàn)膿毒性休克的比例 及需機械通氣的比例明顯上升 感染患者細菌負荷量影響患者預后：高細菌負荷量的患者 出現(xiàn)AKI、ARDS的比例及死亡率明顯高于低負荷患者 2.Rello J et al. CHEST 2009; 136:832840 13 腦膜炎球菌感染疾病嚴重程度與細菌負荷量相關 3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 20

7、09; 48:58794 MI: 5.835 14 研究簡介 研究目的 評估腦膜炎奈瑟菌細菌負荷量與感染患者住院時間的相關性 以及影響患者死亡風險的高危因素 研究方法 一項為期3年的臨床研究，患者均為腦膜炎奈瑟菌感染的住 院患者 細菌負荷量檢測：采用rt-PCR技術(shù)測定血標本中腦膜炎奈瑟 菌的細菌負荷量 評估宿主因素(如年齡、細菌負荷量等)對患者死亡率的影響 3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794 15 細菌負荷量影響患者預后 研究顯示：細菌負荷量與患者住院時間、腎透析以及肢體缺失或皮膚移 植密切相關 細菌負荷

8、量(log10拷貝/mL) 是 否 是 否 是 否 P0.001 P0.001P=0.001 3.Darton T et al. Clinical Infectious Diseases 2009; 48:58794 N=504 16 細菌負荷量影響患者死亡率 死亡組患者的細菌負荷量明顯高 于存活組患者 細菌負荷量(log10拷貝/mL) P0.001 n=950 n=95 多因素回歸分析顯示：隨著細菌 負荷量的增加，患者死亡風險明 顯上升 變量 優(yōu)勢比 (95%CI) P值 年齡 (每增加1歲) 1.04 (1.021.06) 0.001 細菌負荷量 (每增加1log10 拷貝/mL) 2.

9、04 (1.532.71) 1288644256 PAB-CS7SHV-70.030.032561,02481281,0241,024264 PAB-C43TEM-430.030.06641,0241321612824 PAB-C12TEM-120.030.0632512412821628 PAB-C10TEM-100.030.032561,024412812851222 PAB-C-4TEM-40.030.03321284128326424 PAB-C3TEM-30.030.06322564128163224 研究顯示，碳青霉烯類不存在接種物效應，三代和四代頭孢菌素、單環(huán)內(nèi)酰胺類及 內(nèi)酰胺類

10、/內(nèi)酰胺酶抑制劑均存在接種效應 碳青霉烯類：美羅培南；三代頭孢：頭孢他啶；四代頭孢：頭孢吡肟；單環(huán)內(nèi)酰胺類：氨曲南； 內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰胺酶抑 制劑：哌拉西林/他唑巴坦 接種效應的定義：在高接種菌量時(5*107CFU/ml) MIC值比標準接種菌量時(5*105CFU/ml)升高8倍 頭孢菌素對大多數(shù)產(chǎn)ESBL腸桿菌顯示接種物效應 5.吳娜等.中國感染與化療雜志.2011;11(1):31-35 內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰 胺酶抑制劑 三代頭孢四代頭孢碳青霉烯 測定不同抗菌藥物對22株產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌在標準接種菌量(5*105CFU/ml)及高接種菌量(5*107CFU/ml) 的MIC值

11、，評估其接種效應 碳青霉烯類：美羅培南；三代頭孢：頭孢他啶；四代頭孢：頭孢吡肟； 內(nèi)酰胺類/內(nèi)酰胺酶抑制劑：哌拉西林/他唑巴坦 顯示接種效應的菌株比例 頭孢菌素對40-87%產(chǎn)ESBL大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌顯示接種效應 存在接種物效應的抗菌藥物 治療敏感或中介菌株感染時臨床治療失敗率高 治療失敗率(%) 對32例產(chǎn)ESBL腸桿菌菌血癥患者的調(diào)查分析，體外藥敏試驗顯示，致病菌株對頭孢菌素(頭孢噻肟、頭孢三嗪、頭孢唑肟、 頭孢吡肟、頭孢他定)敏感或中介 6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):2206221

12、2 頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL菌株感染時，雖然藥敏試驗顯示敏感但治療失敗率高 25 隨著MIC值的增加， 頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL腸桿菌感染的失敗率逐漸上升 治療失敗率(%) 雖然藥敏試驗顯示敏感(MIC8g/ml)，但隨著MIC值的增加，頭孢菌素治療 產(chǎn)ESBL腸桿菌感染的失敗率逐漸上升 6.PATERSON DL et al. JOURNAL OF CLINICAL MICROBIOLOGY.2001;39(6):22062212 對32例產(chǎn)ESBL腸桿菌菌血癥患者的調(diào)查分析，體外藥敏試驗顯示，致病菌株對頭孢菌素(頭孢噻肟、頭孢三嗪、頭孢唑肟、 頭孢吡肟、頭孢他定)敏感或中介 3/11 1/3

13、2/3 6/6 采用頭孢菌素治療， 增加產(chǎn)ESBL腸桿菌感染患者治療失敗率 采用頭孢吡肟治療，近1/3的產(chǎn)ESBL腸桿菌感染患者治療失敗 百分比(%) 一項多中心、隨機對照研究，對其中23例產(chǎn)ESBL腸桿菌院內(nèi)肺炎患者的亞群分析 N=23 4/130/10 7.Zanetti G et al. ANTIMICROBIAL AGENTS AND CHEMOTHERAPY. 2003;34423447 10/109/13 頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL菌株感染，患者病死率高 8.NY Lee, WC Ko, PR Hsueh. Diagn Microbiol Infect Dis (accept) 碳青霉烯 非碳青霉烯 非頭孢菌素 累積存活率 時間(天) 頭孢菌素 累積存活率 時間(天) 碳青霉烯類治療產(chǎn)ESBL菌株感染，患者30天內(nèi)存活率在90%左右 但是，采用頭孢菌素治療產(chǎn)ESBL菌株感染，患者30天內(nèi)存活率50% 28 u ESBLsESBLs u