臨床細菌檢驗中PCR檢驗法的準確性研究

1、 臨床細菌檢驗中pcr檢驗法的準確性研究 【摘要】目的：研究在臨床細菌分析中pcr檢驗法的應用準確性。方法：選取2018年9月至2019年9月收治并確診的70例細菌性陰道炎患者為研究對象，對所有患者陰道分泌物分別進行細菌培養(yǎng)法檢驗（參考組）、pcr檢驗（觀察組），對比分析兩組患者的檢驗結(jié)果。結(jié)果 觀察組的檢出率顯著高于參考組（p0.05）。觀察組中的鏈球菌、腸球菌以及戛納桿菌檢的檢出率均高于參考組的檢出率（p0.05）。結(jié)論：pcr檢驗法檢出率明顯高于細菌培養(yǎng)法，臨床意義更高，值得在臨床上推廣使用?！娟P(guān)鍵詞】細菌檢驗；pcr；準確性；檢出率study on the accuracy of pc

2、r assay in clinical bacterial examinationabstract objective: to study the application accuracy of pcr assay in clinical bacterial analysis.methods: a total of 70 patients with bacterial vaginitis admitted and confirmed from september 2018 to september 2019 were selected as study subjects. bacterial

3、culture test (reference group) and pcr test (observation group) were performed on vaginal secretions of all patients, and the test results of the two groups were compared and analyzed.results the detection rate in observation group was significantly higher than that in reference group (p 0.05).the d

4、etection rate of streptococcus, enterococcus and cann bacillus in the observation group was higher than that in the reference group (p 0.05).conclusion: the detection rate of pcr test is significantly higher than that of bacterial culture method, which has higher clinical significance and is worthy

5、to be popularized in clinical practice.【 key words 】 bacterial test;pcr;accuracy;detection rate引言細菌檢驗為臨床檢驗學中重要組成部分，其檢驗結(jié)果可以為醫(yī)師診斷疾病提供較為科學可靠的診斷依據(jù)，因此需要保證診斷結(jié)果的準確性，以便真實反映患者的疾病情況。臨床上用于檢驗細菌的方法較多，其中細菌檢驗法較早應用于臨床，而且較為常用，但是隨著醫(yī)學技術(shù)的發(fā)展，pcr檢驗法逐漸運用于臨床，該方法具有檢出率以及準確率較高的優(yōu)點，臨床應用價值較高。女性陰道細菌檢驗對保證女性健康有重要意義，陰道細菌感染會誘發(fā)陰道炎，若不能

6、及時干預治療，便會引發(fā)陰道感染，嚴重的狀況甚至會導致女性不孕。及時對陰道內(nèi)細菌狀態(tài)的檢測，依據(jù)檢測結(jié)果采取相應治療方法，有利于及時改善患者癥狀。因此為進一步驗證pcr的臨床優(yōu)勢。本次研究以細菌性陰道炎為例，研究報告如下。1.資料與方法1.1一般資料本次實驗研究納入2018年9月至2019年9月接受陰道細菌檢驗、初步確診是細菌性陰道炎的患者，按照隨機數(shù)字表方法選擇70例患者。所有患者均細菌培養(yǎng)法以及pcr檢驗，其中最大年齡患者為52歲，最小年齡患者為21歲，患者年齡均值為（35.092.88）歲。最長病程為3年，最短病程為2個月，患者病程均值為（1.120.24）年。本研究已經(jīng)過本院倫理委員會通

7、過，且入組病例均簽署患者知情同意書。1.2臨床納入與排除標準納入標準：臨床表現(xiàn)有陰道炎、外陰瘙癢、異味、白帶分泌物增多等。排除標準：月經(jīng)期患者；近期陰部局部用藥者；妊娠期或哺乳期婦女；近兩日有性生活者。1.3方法陰道分泌物采集：使用一次性醫(yī)用無菌棉簽，插入到陰道后穹窿的部位，通過輕輕旋轉(zhuǎn)來蘸取、并采集到陰道分泌物，放到2ml無菌生理鹽水當中，保存。細菌培養(yǎng)法：以細菌培養(yǎng)法來做檢測：首先把一份陰道分泌物標本放在陰道瓊脂培養(yǎng)基當中，置于二氧化碳恒溫箱做培養(yǎng)，培養(yǎng)時間48h，觀察到培養(yǎng)基有菌落出現(xiàn)后，選擇半透明狀、光滑、灰色和露滴狀的菌群做生化鑒定。pcr檢驗法：經(jīng)熒光pcr檢驗法進行檢測，首先進行

8、陰道分泌物生理鹽水的離心處理，離心條件是每分鐘12000轉(zhuǎn)，持續(xù)時間15分鐘，舍棄上清液，將堿性裂解液加入到沉淀當中。以上結(jié)束后，放到溫度為60的水浴當中加熱15分鐘，再以與以上相同的條件做二次離心處理，這一次的持續(xù)時間是10分鐘，完成離心處理后，取上清液用以制作dna模板，放到熒光pcr儀當中做循環(huán)處理。1.4觀察指標對兩種不同方法檢驗準確性進行分析、比較。另外統(tǒng)計陰道內(nèi)各細菌sp情況診斷標準：細菌性陰道炎感染患者同健康人群比較，加特納菌dna含量顯著提高，意為加特納菌對細菌性陰道炎感染的診斷有很高的特異性。1.5統(tǒng)計學方法采用spss20.00軟件統(tǒng)計處理所得數(shù)據(jù)，計數(shù)資料采用x2檢驗。p

9、0.05說明差異有統(tǒng)計學意義。2.結(jié)果2.1對比分析兩組患者的檢出率觀察組的陽性檢出率（86.25%）顯著高于參考組（51.25%），且差異具有統(tǒng)計學意義（p0.05）。表1對比分析兩組患者的檢出率（n，%）檢驗方法n陰性陽性參考組7025（35.71%）45（64.29%）觀察組704（5.71%）66（94.29%）x2值9.4928p值0.052.2兩種方法檢驗陰道細菌結(jié)果對比采用pcr檢驗法對加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的檢出率均要比細菌培養(yǎng)發(fā)檢出率高（p0.05），檢驗值有統(tǒng)計學意義。表2對比分析兩組患者的檢出率（n，%）檢驗方法n加特納菌棒狀桿菌腸球菌參考組4522（48.89%）1

10、3（28.89%）10（22.22%）觀察組6633（50%）11（16.67%）22（33.33%）x2值7.30926.97326.8936p值0.050.050.053.討論近些年以來，臨床細菌性陰道炎的發(fā)生率可見有明顯的增長趨勢，給廣大女性朋友們的日常生活造成巨大影響。該病導致患者有白帶異常、外陰瘙癢等癥狀發(fā)生，發(fā)生誘因是陰道的內(nèi)菌群平衡被打破，陰道桿菌數(shù)量驟然減少，使得致病菌所占比例提高。對患者陰道細菌做檢測，早期診斷癥狀，對接下來的治療指導有積極意義。細菌培養(yǎng)法長時間以來，都是臨床用于細菌檢驗的常規(guī)方法，這種方法雖然作為陰道細菌檢測的“金標準”，應用廣泛。但是其中不乏會因受到來自多

11、方面因素的影響，因檢驗操作復雜，對細菌培養(yǎng)環(huán)境要求較高，所以會加大感染幾率，導致最終得到的檢驗結(jié)果有一定誤差幾率，而且自標本采集再到得到結(jié)果報告，需要很長的時間：37天左右。pcr檢測方法是近年來新興的一種檢驗方法，該法對感染性病原的檢測主要包括兩個方面：對每一種病原單個特異基因的檢測，能同時檢測一種亦或是幾種病原體是否存在；對某一病原的多個基因進行檢測，從而減少假陽性幾率。pcr檢驗方法中既融合了rpc的敏感性，又聯(lián)合了dna雜交的特異性等優(yōu)點，在臨床上的應用具有檢出率高、精準度高等應用優(yōu)勢。本文實驗報告指出：在與陰道細菌培養(yǎng)法結(jié)果做對比，pcr檢驗方法的陽性檢出率85.2%更高，而且檢出加特納菌、棒狀桿菌、腸球菌的陽性率也都要比常規(guī)細菌培養(yǎng)法高。綜上所述，在臨床細菌檢驗工作當中，采用pcr檢驗法能獲得更準確的檢驗結(jié)果，陽性檢出率高、特異性高。參考文獻1袁征.細菌性陰道炎檢驗中采取pcr