高壓蒸汽滅菌

1、講解：XX1 復習：復習： 控制微生物生長的方法都有控制微生物生長的方法都有 哪些？哪些？ 講解：XX2 實驗目的實驗目的 實驗原理實驗原理 實驗器材實驗器材 實驗方法實驗方法 注意事項注意事項 思考題思考題 講解：XX3 v了解高壓蒸汽滅菌的基了解高壓蒸汽滅菌的基 本原理及應用范圍。本原理及應用范圍。 v 熟練掌握高壓蒸汽滅菌熟練掌握高壓蒸汽滅菌 的操作方法。的操作方法。 一、實驗目的一、實驗目的 講解：XX4 v 高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加熱滅高壓蒸汽滅菌是將待滅菌的物品放在一個密閉的加熱滅 菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。菌鍋內(nèi)，通過加熱，使滅菌鍋隔

2、套間的水沸騰而產(chǎn)生蒸汽。 待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關閉待水蒸汽急劇地將鍋內(nèi)的冷空氣從排氣閥中驅(qū)盡，然后關閉 排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸氣不能溢出，排氣閥，繼續(xù)加熱，此時由于蒸氣不能溢出，而增加了滅菌而增加了滅菌 器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于器內(nèi)的壓力，從而使沸點增高，得到高于100的溫度，導的溫度，導 致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。致菌體蛋白質(zhì)凝固變性而達到滅菌的目的。 v 在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排在使用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌時，滅菌鍋內(nèi)冷空氣的排 除是否完全極為重要，因為空氣的膨脹壓大于水蒸汽的膨脹除是否完全極為重要，因為空氣的膨脹

3、壓大于水蒸汽的膨脹 壓，所以，當水蒸汽中含有空氣時，在同一壓力下，含空氣壓，所以，當水蒸汽中含有空氣時，在同一壓力下，含空氣 蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度。 二、實驗原理二、實驗原理 講解：XX5 滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時，壓力與溫度的關系滅菌鍋內(nèi)留有不同分量空氣時，壓力與溫度的關系 壓壓 力力 數(shù)數(shù) 全部空全部空 氣排出氣排出 時的溫時的溫 度度 () 2/3空空 氣排出氣排出 時的溫時的溫 度度 () l/2空氣空氣 排出排出時時 的溫度的溫度 () 1/3空空 氣排出氣排出 時的溫時的溫 度度 () 空氣全空氣全 不排出不排出 時的溫時的溫 度度 () M

4、Pa kg/cm 2 1b/in2 0.03 0.07 0.10 0.14 0.17 0.21 0.35 0.70 1.05 1.40 1.75 2.10 5 10 15 20 25 30 108.8 115.6 121.3 126.2 130.0 134.6 100 109 115 121 126 130 94 105 112 118 124 128 90 100 109 115 121 126 72 90 100 109 115 121 講解：XX6 講解：XX7 講解：XX8 牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 培養(yǎng)皿、試管、三角瓶、移液管 手提式高壓蒸汽滅菌鍋等 三、實驗器材三、實驗器材 講解：XX9

5、 1. 加水加水：將內(nèi)層 鍋取出，再向外 層鍋內(nèi)加入適量 的水使水面與三 角擱架相平為宜。 四、實驗方法四、實驗方法 講解：XX10 2.裝鍋裝鍋：放回內(nèi)層鍋，并裝入待滅菌物品。 講解：XX11 3. 3. 加蓋加蓋，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的，并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層鍋的 排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊相 對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。 講解：XX12 4.加熱、排氣加熱、排氣 打開放氣閥，同時接通電源，進行 加熱，待鍋內(nèi)水沸騰并有大量水蒸氣自放氣閥冒 出時，維持3-5min以排除鍋內(nèi)的冷空氣

6、。待冷空 氣完全排盡后，關上放氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸 汽壓力增加而逐漸上升。 5.保溫保壓保溫保壓 當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時，控制熱 源，維持壓力至所需時間。 6.出鍋出鍋 滅菌所需的時間到后，關閉電源，讓滅菌 鍋內(nèi)溫度自然下降，當壓力表降至“0”時，打開 放氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。 講解：XX13 7.保養(yǎng)保養(yǎng) 滅菌完畢取出物品后，將鍋內(nèi)余 水倒出，以保持內(nèi)壁及內(nèi)膽干燥，蓋好 鍋蓋。 8.無菌檢查無菌檢查 將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37溫箱培養(yǎng)24h，經(jīng)檢查若無雜菌生 長，即可待用。 講解：XX14 1切勿忘記加水，同時加水量不可過少，以 防滅菌鍋燒干而引起炸裂事故。 2壓力一定要降到“0”時，才能打開排氣閥， 開蓋取物。否則就會因鍋內(nèi)壓力突然下降，使 容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒 瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污 染，甚至灼傷操作者。 注意事項注意事項 講解：XX15 1高壓蒸汽滅菌開始之前，為什么要將鍋 內(nèi)冷空氣排盡？