90403 中量蛋白膠回收試劑盒使用手冊(cè)V1點(diǎn)0北京天恩澤

1、蛋白質(zhì)系列cat#:90403-5常溫運(yùn)輸、4保存中量蛋白膠回收試劑盒midi protein gel extraction kit 使用手冊(cè)v1.0北京天恩澤基因科技有限公司北京市海淀區(qū)學(xué)院南路12號(hào)北師大留學(xué)生創(chuàng)業(yè)園57號(hào)樓301室qq:944823743，449730601（銷售），948393554（技術(shù)），電話：010-62200278（銷售）技術(shù)），order產(chǎn)品及特點(diǎn)十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳（sds-page）不僅可用于檢測(cè)蛋白質(zhì)的相對(duì)分子質(zhì)量，而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一，隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的微量化，有必要從凝

2、膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡、氨基酸組分分析或末端序列測(cè)定等。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的中量蛋白膠回收法，它具有下列特點(diǎn)：1. 簡(jiǎn)單，不需要復(fù)雜而昂貴的儀器（如電洗脫儀）。2. 適用于變性膠（sds-page）和非變性膠。3. 每次可以處理1 g的page膠（具體多少蛋白質(zhì)取決于上樣的濃度）。4. 回收率一般在50-90%之間（跟蛋白質(zhì)大小，洗脫時(shí)間相關(guān)）。5. 跟后續(xù)的實(shí)驗(yàn)兼容，包括2-d電泳、質(zhì)譜測(cè)序等。規(guī)格及成分成份5次包裝溶液a5 ml溶液b50 ml20ml塑料注射器5只使用手冊(cè)1份運(yùn)輸及保存常溫運(yùn)輸，4保存，有效期一年。自備試劑無(wú)使用方法1. 按常規(guī)方法進(jìn)行變性（sds

3、-page）或非變性蛋白電泳。2. 切取含目的蛋白的膠（盡可能地把多余的膠切除，否則會(huì)影響回收效率）。注意：固定和染色后蛋白回收效果很差，所以建議把樣品分多孔上樣，電泳后只切其中一個(gè)樣孔的膠條進(jìn)行固定和染色，然后將此膠條放回到在整體膠中原來(lái)的位置，通過(guò)顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對(duì)應(yīng)區(qū)域，并切下此區(qū)域的膠進(jìn)行回收。3. 將切下的、重量不超過(guò)1克的膠塊轉(zhuǎn)移到30 ml塑料注射器中。4. 用塑料注射器推桿將膠塊從端口擠壓出去，使之變成細(xì)小的碎片，用自備的15ml塑料離心管收集這些破碎的凝膠顆粒。5. 加入1 ml溶液a，4搖晃洗脫至少2-16小時(shí)（過(guò)夜）。此時(shí)最好將將要使用的溶液b放在冰箱預(yù)冷。6. 10,000 g離心10分鐘，轉(zhuǎn)移上清到新的10-15ml的塑料離心管中，注意不要吸取碎膠。7. 加入5倍體積的預(yù)冷的溶液b，搖晃混勻。8. -20放置至少10-30分鐘。9. 室溫12,000 g（注意：一定要檢查使用的離心管是否能夠耐受次離心力，如果不能建議將溶液分到1.5 ml的塑料離心管中再進(jìn)行離心處理）離心5-20分鐘，棄上清。10. 室溫充分晾干，得到的沉淀即為回收的蛋白質(zhì)?；厥盏牡鞍踪|(zhì)可溶解在適