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1、蛋白質(zhì)系列cat#:90403-5常溫運輸、4保存中量蛋白膠回收試劑盒midi protein gel extraction kit 使用手冊v1.0北京天恩澤基因科技有限公司北京市海淀區(qū)學院南路12號北師大留學生創(chuàng)業(yè)園57號樓301室qq:944823743,449730601(銷售),948393554(技術(shù)),電話:010-62200278(銷售)技術(shù)),order產(chǎn)品及特點十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(sds-page)不僅可用于檢測蛋白質(zhì)的相對分子質(zhì)量,而且也是分離純化蛋白質(zhì)的重要工具之一,隨著蛋白質(zhì)技術(shù)的微量化,有必要從凝
2、膠中回收蛋白質(zhì)以用于制備抗體、免疫印跡、氨基酸組分分析或末端序列測定等。本產(chǎn)品就是專門為此用途開發(fā)的中量蛋白膠回收法,它具有下列特點:1. 簡單,不需要復雜而昂貴的儀器(如電洗脫儀)。2. 適用于變性膠(sds-page)和非變性膠。3. 每次可以處理1 g的page膠(具體多少蛋白質(zhì)取決于上樣的濃度)。4. 回收率一般在50-90%之間(跟蛋白質(zhì)大小,洗脫時間相關(guān))。5. 跟后續(xù)的實驗兼容,包括2-d電泳、質(zhì)譜測序等。規(guī)格及成分成份5次包裝溶液a5 ml溶液b50 ml20ml塑料注射器5只使用手冊1份運輸及保存常溫運輸,4保存,有效期一年。自備試劑無使用方法1. 按常規(guī)方法進行變性(sds
3、-page)或非變性蛋白電泳。2. 切取含目的蛋白的膠(盡可能地把多余的膠切除,否則會影響回收效率)。注意:固定和染色后蛋白回收效果很差,所以建議把樣品分多孔上樣,電泳后只切其中一個樣孔的膠條進行固定和染色,然后將此膠條放回到在整體膠中原來的位置,通過顯色膠條上的蛋白條帶找到在未染色膠上對應區(qū)域,并切下此區(qū)域的膠進行回收。3. 將切下的、重量不超過1克的膠塊轉(zhuǎn)移到30 ml塑料注射器中。4. 用塑料注射器推桿將膠塊從端口擠壓出去,使之變成細小的碎片,用自備的15ml塑料離心管收集這些破碎的凝膠顆粒。5. 加入1 ml溶液a,4搖晃洗脫至少2-16小時(過夜)。此時最好將將要使用的溶液b放在冰箱預冷。6. 10,000 g離心10分鐘,轉(zhuǎn)移上清到新的10-15ml的塑料離心管中,注意不要吸取碎膠。7. 加入5倍體積的預冷的溶液b,搖晃混勻。8. -20放置至少10-30分鐘。9. 室溫12,000 g(注意:一定要檢查使用的離心管是否能夠耐受次離心力,如果不能建議將溶液分到1.5 ml的塑料離心管中再進行離心處理)離心5-20分鐘,棄上清。10. 室溫充分晾干,得到的沉淀即為回收的蛋白質(zhì)?;厥盏牡鞍踪|(zhì)可溶解在適
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