種子質(zhì)量檢測(cè)

1、TTC法一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)掌握學(xué)習(xí)掌握TTC法快速測(cè)定種子活力的原理和方法。法快速測(cè)定種子活力的原理和方法。二、實(shí)驗(yàn)二、實(shí)驗(yàn)原理原理 有活力種胚有活力種胚中的脫氫酶可以將中的脫氫酶可以將2，3，5氯化三苯氯化三苯基四氮唑基四氮唑 （TTC）還原成不溶性的還原成不溶性的紅色紅色三苯基甲三苯基甲（TTF），），如果種胚死亡如果種胚死亡或或種胚生活力衰退種胚生活力衰退，則則不不能染色或能染色或染色較淺染色較淺，因此因此，可以根據(jù)種胚染色的部可以根據(jù)種胚染色的部位或染色的深淺程度來(lái)鑒定種子的生活力。位或染色的深淺程度來(lái)鑒定種子的生活力。三、實(shí)驗(yàn)材料三、實(shí)驗(yàn)材料四、實(shí)驗(yàn)步驟四、實(shí)驗(yàn)步驟1. 將

2、將小麥小麥種子用溫水種子用溫水(3035)浸泡浸泡26h，使種子充分使種子充分吸脹。吸脹。2. 隨機(jī)取種子隨機(jī)取種子100粒粒，沿種胚中央準(zhǔn)確切開(kāi)沿種胚中央準(zhǔn)確切開(kāi)，取其一半取其一半備備用。用。3. 將準(zhǔn)備好的種子將準(zhǔn)備好的種子放入培養(yǎng)皿，放入培養(yǎng)皿，浸于浸于TTC試劑中試劑中，于恒于恒溫箱溫箱(3035)中保溫中保溫30min。4. 倒出倒出TTC溶液溶液，再用清水將種子沖洗再用清水將種子沖洗12次次，觀察種觀察種胚被染色的情況胚被染色的情況。 當(dāng)當(dāng)TTC溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔溶液滲入種胚的活細(xì)胞內(nèi)，并作為氫受體被脫氫輔酶（酶（NADH或或NADPH）還原時(shí)，可產(chǎn)生紅色

3、的三苯甲腙）還原時(shí)，可產(chǎn)生紅色的三苯甲腙（TTF），胚染成），胚染成紅色紅色。 如果種胚死亡則如果種胚死亡則不能染色不能染色，種胚生命力衰退或部分喪失生，種胚生命力衰退或部分喪失生活力則活力則染色較淺或局部被染色。染色較淺或局部被染色。因此，可以根據(jù)種胚染色的部位或染色的深淺程度來(lái)鑒定因此，可以根據(jù)種胚染色的部位或染色的深淺程度來(lái)鑒定種子的生命力。種子的生命力。 五、注意事項(xiàng)五、注意事項(xiàng) TTC溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如需貯藏則需貯存于棕色溶液最好現(xiàn)配現(xiàn)用，如需貯藏則需貯存于棕色瓶中，放在陰涼黑暗處，如溶液變紅則不可再用。瓶中，放在陰涼黑暗處，如溶液變紅則不可再用。TTC反應(yīng)溫度一般以反應(yīng)溫度一般以

4、3035為宜。為宜。TTC反應(yīng)結(jié)束，從黑暗處取出后立即觀察，因光下反應(yīng)結(jié)束，從黑暗處取出后立即觀察，因光下久放久放TTC本身會(huì)變色。本身會(huì)變色。顯色時(shí)要使漂浮的種子全部浸入試劑中。顯色時(shí)要使漂浮的種子全部浸入試劑中。一、種子凈度的概念：一、種子凈度的概念： 種子凈度是指種子清潔干凈的程度。種子凈度是指種子清潔干凈的程度。 具具體講是：樣品中除去雜質(zhì)和其他植物種子后，留下的本作物的體講是：樣品中除去雜質(zhì)和其他植物種子后，留下的本作物的凈種子的重量占分析樣品總重量的百分率。凈種子的重量占分析樣品總重量的百分率。 種子凈度是衡量種子凈度是衡量種子質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。種子質(zhì)量的一項(xiàng)重要指標(biāo)。二、凈度分

5、析的目的：二、凈度分析的目的： 1、通過(guò)對(duì)樣品中凈種子、其他植物種子、雜質(zhì)的分析，、通過(guò)對(duì)樣品中凈種子、其他植物種子、雜質(zhì)的分析，推斷該種子批組成情況，為種子精選、質(zhì)量分級(jí)提供依據(jù)。推斷該種子批組成情況，為種子精選、質(zhì)量分級(jí)提供依據(jù)。 （凈度是非常重要的一個(gè)指標(biāo)，影響商品性，影響發(fā)芽率。玉（凈度是非常重要的一個(gè)指標(biāo)，影響商品性，影響發(fā)芽率。玉米、小麥等為米、小麥等為99.0，達(dá)不到需精選），達(dá)不到需精選） 2、分離出的凈種子為種子質(zhì)量的進(jìn)一步分析提供樣品。、分離出的凈種子為種子質(zhì)量的進(jìn)一步分析提供樣品。 （如發(fā)芽率測(cè)定、純度測(cè)定都需要凈種子）（如發(fā)芽率測(cè)定、純度測(cè)定都需要凈種子） 三、凈度分析

6、的意義（了解） 1、（種子凈度低）影響種子的安全貯藏。 如種子堆內(nèi)細(xì)小的泥沙等雜質(zhì)不利于種子的通風(fēng)換氣。莖稈、稃殼吸 濕性強(qiáng)，容易發(fā)熱。破碎粒多，易被倉(cāng)庫(kù)害蟲(chóng)利用、易吸濕。 2、凈度低影響作物的生長(zhǎng)發(fā)育和產(chǎn)量。 雜草種子、其他植物種子與本作物爭(zhēng)肥水，影響作物的生長(zhǎng)發(fā)育。 3、凈度低含有毒雜草種子，影響人畜健康。 如毒麥：混入小麥達(dá)4，即可造成人中毒。 因此，凈度分析是非常必要的。1、取樣與試樣稱重取樣與試樣稱重 采用四分法進(jìn)行小麥送驗(yàn)樣品的分取。試樣的分取是從采用四分法進(jìn)行小麥送驗(yàn)樣品的分取。試樣的分取是從500g左左右送驗(yàn)樣品中，用直尺分取規(guī)定重量的試樣兩份。第一份試樣右送驗(yàn)樣品中，用直尺分

7、取規(guī)定重量的試樣兩份。第一份試樣取出后，將剩下部分重新混勻再分取第二份試樣。當(dāng)試樣樣品取出后，將剩下部分重新混勻再分取第二份試樣。當(dāng)試樣樣品分至接近規(guī)定的最低重量時(shí)即可稱重。要求精確的小數(shù)位數(shù)是分至接近規(guī)定的最低重量時(shí)即可稱重。要求精確的小數(shù)位數(shù)是一位小數(shù)。一位小數(shù)。 .2、試樣分離試樣分離 試樣稱重后，將樣品倒在分析臺(tái)上，利用鑷子按順序逐粒觀察試樣稱重后，將樣品倒在分析臺(tái)上，利用鑷子按順序逐粒觀察鑒定，將試樣分離成凈種子、其他植物種子和雜質(zhì)三種成分，鑒定，將試樣分離成凈種子、其他植物種子和雜質(zhì)三種成分，分別放入相應(yīng)的容器內(nèi)，并編號(hào)。分別放入相應(yīng)的容器內(nèi)，并編號(hào)。3、稱重稱重 將分離后的各成分

8、分別稱重，以將分離后的各成分分別稱重，以g表示，并做好記錄。表示，并做好記錄。 1.凈種子重量?jī)舴N子重量= g 2.其他植物種子重量其他植物種子重量= g 3.雜質(zhì)重量雜質(zhì)重量= g4、計(jì)算計(jì)算 1.核查各種成分重量之和與樣品原來(lái)的重量之差是否超過(guò)核查各種成分重量之和與樣品原來(lái)的重量之差是否超過(guò)5%。 各種成分重量之和各種成分重量之和= g 增失差（增失差（%）=（樣品原來(lái)的重量（樣品原來(lái)的重量各種成分重量之和）各種成分重量之和）/樣品原來(lái)的重量樣品原來(lái)的重量100% 根據(jù)分離后各成分的重量，分別計(jì)算其百分率。根據(jù)分離后各成分的重量，分別計(jì)算其百分率。 （1）種子凈度（）種子凈度（%）=（凈種

9、子重量（凈種子重量/各種成分重量之和）各種成分重量之和）100% （2）其他植物種子百分率（）其他植物種子百分率（%）=（其他植物種子重量（其他植物種子重量/各種成分重量之和）各種成分重量之和）100% （3）雜質(zhì)百分率（）雜質(zhì)百分率（%）=（雜質(zhì)重量（雜質(zhì)重量/各種成分重量之和）各種成分重量之和）100%千 粒 重千粒重是以克表示的一千粒種子的重量，千粒重是以克表示的一千粒種子的重量，它是體現(xiàn)種子大小與飽滿程度的一項(xiàng)指標(biāo)，它是體現(xiàn)種子大小與飽滿程度的一項(xiàng)指標(biāo)，是檢驗(yàn)種子質(zhì)量和作物考種的內(nèi)容，也是是檢驗(yàn)種子質(zhì)量和作物考種的內(nèi)容，也是田間預(yù)測(cè)產(chǎn)量時(shí)的重要依據(jù)。一般測(cè)定小田間預(yù)測(cè)產(chǎn)量時(shí)的重要依據(jù)。

10、一般測(cè)定小粒種子千粒重時(shí)是隨機(jī)數(shù)出三個(gè)一千粒種粒種子千粒重時(shí)是隨機(jī)數(shù)出三個(gè)一千粒種子，分別稱重，求其平均值。大粒種子可子，分別稱重，求其平均值。大粒種子可取三個(gè)一百粒分別稱重，取其平均值，稱取三個(gè)一百粒分別稱重，取其平均值，稱百粒重。百粒重。千粒重測(cè)定法：千粒重測(cè)定法： 方法方法：從除去雜質(zhì)的凈糧中，用分樣器或四公法分：從除去雜質(zhì)的凈糧中，用分樣器或四公法分樣，將樣品分至接近規(guī)定的重量，準(zhǔn)確稱重樣，將樣品分至接近規(guī)定的重量，準(zhǔn)確稱重(W)，然后，然后計(jì)數(shù)，得粒數(shù)計(jì)數(shù)，得粒數(shù)m。 方法方法：從除去雜質(zhì)的凈糧中，不加挑選地?cái)?shù)出兩組：從除去雜質(zhì)的凈糧中，不加挑選地?cái)?shù)出兩組試樣，大粒糧每組試樣，大粒糧

11、每組500粒，中、小粒糧每組粒，中、小粒糧每組1000粒，粒，按組分別稱重按組分別稱重(準(zhǔn)確至準(zhǔn)確至0.1g)。 以上二種方法可任意選用，但方法以上二種方法可任意選用，但方法中應(yīng)剔除不完整粒。中應(yīng)剔除不完整粒。 自然水分千粒重按公式自然水分千粒重按公式(1)計(jì)算：計(jì)算： W 千粒重千粒重(g/1000粒粒) = 1000 .(1) m 標(biāo)準(zhǔn)水分千粒重按公式標(biāo)準(zhǔn)水分千粒重按公式(2)計(jì)算：計(jì)算： G(100 - M) 千粒重千粒重(g/1000粒粒) = .(2) 100 - M 干態(tài)千粒重按公式干態(tài)千粒重按公式(3)計(jì)算：計(jì)算： G (100-M) 干態(tài)千粒重干態(tài)千粒重(g/1000粒粒) = .(3) 100 式中：式中：W-實(shí)測(cè)試樣重量，實(shí)測(cè)試樣重量，g; m-實(shí)測(cè)試樣粒數(shù)；實(shí)測(cè)試