自學(xué)考試本科生畢業(yè)論文人工復(fù)制小鼠銅離子中毒的病理變化觀察

1、湖 南 農(nóng) 業(yè) 大 學(xué)高等教育自學(xué)考試本科生畢業(yè)論文人工復(fù)制小鼠銅離子中毒的病理變化觀察學(xué)生姓名：考 籍 號(hào)：年級(jí)專業(yè)：2009級(jí)畜牧獸醫(yī) 指導(dǎo)老師：學(xué) 院：動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院湖南長(zhǎng)沙提交日期：2010年3月湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)高等教育自學(xué)考試本科生畢業(yè)論文誠(chéng) 信 聲 明本人鄭重聲明：所呈交的本科畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）是本人在指導(dǎo)老師的指導(dǎo)下，進(jìn)行研究工作所取得的成果，成果不存在知識(shí)產(chǎn)權(quán)爭(zhēng)議。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體在文中均作了明確的說明并表示了謝意。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。 畢業(yè)論文（設(shè)計(jì)）作者

2、簽名： 年 月 日目 錄摘 要：4關(guān)鍵詞：41 前言42 材料與方法62.1試臉材料62.1.1試驗(yàn)動(dòng)物：62.1.2實(shí)驗(yàn)試劑和儀器：62.2實(shí)驗(yàn)方法62.2.1 動(dòng)物分組：62.2.2 臨床觀察：62.2.3病理組織學(xué)觀察：63 結(jié)果與分析73.1臨床癥狀與大體病理變化73.2病理組織學(xué)變化74 討論105 結(jié)論11參考文獻(xiàn):11致 謝12人工復(fù)制小鼠銅離子中毒的病理變化觀察作 者：陳青山指導(dǎo)老師：李德亮（湖南省農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)沙 410128）摘 要：本研究采用硫酸銅灌胃的方式對(duì)小鼠銅中毒的臨床表現(xiàn)及組織器官的病理變化進(jìn)行觀察。試驗(yàn)根據(jù)灌胃的劑量將實(shí)驗(yàn)小鼠隨機(jī)分為 4 組：對(duì)照

3、組 (0 mg/kg)、低劑量組 (50mg/kg)、中劑量組 (100mg/kg)，高劑量組 (200mg/kg)，每組 6 只，試驗(yàn)周期為 2 周。結(jié)果顯示，高劑量組的死亡率高于中劑量和低劑量組。高劑量組器官的病理形態(tài)學(xué)觀察表現(xiàn)為肝脂肪變性和顆粒變性，肝細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀，低劑量組和中劑量組肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿紅染的細(xì)微顆粒；低劑量組中腎小管出現(xiàn)顆粒變性，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄，間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張，充血。中劑量組腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)，出現(xiàn)管型。部分腎小管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞。高劑量組腎小管上皮壞死、崩解、脫落于管腔中。結(jié)果表明，銅中毒主要損害肝臟、腎

4、臟等組織器官，最終導(dǎo)致發(fā)病甚至死亡。關(guān)鍵詞：銅中毒；病理變化；小白鼠；1 前言銅元素普遍存在于動(dòng)物、植物和微生物體內(nèi)，是所有低等動(dòng)物和脊椎動(dòng)物必需的微量元素之一。自 1925 年被首次報(bào)道后，銅作為動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)必需微量元素的作用逐漸被人們所認(rèn)識(shí)并不斷被研究1。研究表明，在飼料中添加適量的銅，可明顯提高動(dòng)物的生產(chǎn)性能。銅的這種特殊生物學(xué)作用，在現(xiàn)代畜牧業(yè)中已被廣泛應(yīng)用，并取得了較好的經(jīng)濟(jì)效益。近年來，由于飼料中銅的過量添加而導(dǎo)致的動(dòng)物中毒現(xiàn)象常有時(shí)有發(fā)生4。許多銅鹽如硫酸銅、次醋酸銅、碳酸銅、氯化銅、氧化亞銅、硝酸銅、石油酸銅、三氯酚銅等作為沙蟲劑、浸種劑、殺真菌劑、驅(qū)蟲劑、滅螺劑或木材防腐劑2被

5、廣泛的使用也常常給家畜養(yǎng)殖帶來巨大的潛在危險(xiǎn)，動(dòng)物誤食銅鹽后就會(huì)發(fā)生銅中毒。此外，一些植物含有吡咯類生物堿的有毒植物 (如三葉草、千里光、和天蕎萊屬植物) 能夠增強(qiáng)銅與肝臟的親和力、使銅在肝臟蓄積而不能正常排出；另一些含有肝毒性生物堿的植物會(huì)造成動(dòng)物肝細(xì)胞的損傷，從而使銅在肝臟的代謝出現(xiàn)異常，也能使動(dòng)物體內(nèi)蓄銅過多而中毒3。雖然動(dòng)物每日攝入銅的含量沒有達(dá)到中毒劑量，但是動(dòng)物日糧中鉬的含量非常低或日糧中銅/鉬的比值過高 (大于10)，也能造成銅在動(dòng)物肝臟內(nèi)蓄積，蓄積過量時(shí)動(dòng)物出現(xiàn)銅中毒癥，有報(bào)道羔羊在補(bǔ)飼向日葵 (鉬/鋁比值大于10) 后，出現(xiàn)慢性銅中毒癥狀18。銅中毒的發(fā)生，往往會(huì)給養(yǎng)殖業(yè)帶來

6、巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，及時(shí)掌握動(dòng)物銅中毒后的臨床表現(xiàn)及其對(duì)機(jī)體組織器官的病理損害，從而探討發(fā)病機(jī)理將會(huì)對(duì)銅中毒的臨床診斷和基礎(chǔ)研究提供重要的指導(dǎo)意義17。已有的研究表明，各種動(dòng)物對(duì)銅的毒性作用和銅的敏感性存在有較大的差異10。綿羊敏感性最高，反芻動(dòng)物次之，高于其它動(dòng)物6；中毒劑量的報(bào)道也不經(jīng)相同：羔羊 25-50 mg/kg，綿羊 20-110mg/kg15，奶牛 200-880 mg/kg7，奶牛 200mg/kg8，蛋雞 500mg/kg，豬為 250-400 mg/kg 17；兔 200 mg/kg16；馬 800 mg/kg，大鼠 1000 mg/kg，肉雞300 mg/kg11，鴨

7、300mg/kg9，鵝 100 mg/kg2。動(dòng)物銅中毒的研究主要集中于中毒劑量，臨床表現(xiàn)，病理變化，血液生化指標(biāo)以及發(fā)病機(jī)理等方面，在蓄積至一定階段后，會(huì)突然出現(xiàn)嚴(yán)重的溶血，肝腎損傷，并最終死亡14。動(dòng)物發(fā)生銅中毒時(shí)，6-磷酸葡萄糖脫氫酶，谷胱甘肽過氧化物酶活性降低，而丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶，乳酸脫氫酶等酶活性升高16。動(dòng)物的銅中毒習(xí)慣上分為急性中毒和慢性中毒。急性銅中毒主要以明顯的胃腸炎為臨床癥狀，表現(xiàn)為惡心、流涎、腹瀉、劇烈腹痛13。慢性銅中毒主要以溶血癥狀為主要臨床癥狀，據(jù)國(guó)內(nèi)報(bào)道，王幼名和王長(zhǎng)青等做了豬中毒的研究，臨床表現(xiàn)如下性中毒時(shí)精神沉郁、食欲廢絕、嘔吐、腹痛、腹

8、瀉，肌肉松弛，排黑色稀糞，胃與十二指腸粘膜見有出血、潰瘍、壞死病變，肝臟腫大呈土黃色5。徐善良和楊云林等做了山羊的銅中毒研究，具體癥狀如下：銅中毒時(shí)病理剖檢變化以胃腸粘膜糜爛脫落、潰瘍、出血為特征12。黨曉鵬和齊長(zhǎng)明等做了綿羊的研究，具體癥狀如下：心外膜出血，肝臟腫大膽囊擴(kuò)張，腎臟表面有出血點(diǎn)15。舒港亮，翟國(guó)東和朱秀琴做了雞的研究，結(jié)果如下：急性銅中毒最后痙攣而死，中毒臨床癥狀:拉稀，縮頭伏地.食欲廢絕，精神沉郁，腿部肌肉麻痹，呼吸困難，剖檢可見肝臟腫大，呈塊狀土黃色胃粘膜充血，其中十二指腸較嚴(yán)重，膽囊腫大 11。本實(shí)驗(yàn)通過研究小鼠銅中毒，了解和觀察銅離子對(duì)小鼠心、肝、脾、肺、腎的影響，從而

9、研究銅中毒對(duì)機(jī)體器官組織的病理損害，探討發(fā)病機(jī)理，為臨床診斷和基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù)。2 材料與方法2.1 試驗(yàn)材料2.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物：昆明種小白鼠 (24 只，體重 18g-22g)，購(gòu)買于湖南吉首大學(xué)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。飼養(yǎng)室溫度 2327，每天光照 12 h。2.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑和儀器：乙醇 (湖南江虹試劑有限公司)、二甲苯 (上海實(shí)驗(yàn)試劑有限公司)、蘇木素 (上海標(biāo)本模型廠)、伊紅染色素 (上海試劑三廠)、切片石蠟 (上海標(biāo)本模型廠)、中性樹膠 (上海標(biāo)本模型廠)、福爾馬林、碳酸鋰飽和液等。motic奧林巴斯顯微攝影系統(tǒng)、yd202型石蠟切片機(jī)。2.2實(shí)驗(yàn)方法2.2.1 動(dòng)物分組室內(nèi)暫

10、養(yǎng)一周后，試驗(yàn)小鼠被隨機(jī)分成四組：對(duì)照組、低劑量組 (50mg/kg)，中劑量組 (100mg/kg)、高劑量組 (200mg/kg)。硫酸銅溶液經(jīng)口灌胃小鼠，對(duì)照組以等量生理鹽水代替硫酸銅。每天中午進(jìn)行灌胃，不限飲水，自由采食，共連續(xù)灌胃 15 d。試驗(yàn)期間，溫度在 2226，光照 12 h。2.2.2 臨床觀察試驗(yàn)期間每日進(jìn)行臨床觀察，紀(jì)錄臨床癥狀。在試驗(yàn)進(jìn)行的第 10 天和11天，高劑量組有 3 只小白鼠死亡，中劑量組在第 14 天有 1 只小白鼠死亡。死亡的小白鼠立即當(dāng)天取其臟器，余下的小白鼠在試驗(yàn)期滿時(shí)采用人工脫頸致死法進(jìn)行剖殺，并取心、肝、脾、肺、腎進(jìn)行觀察，之后放入福爾馬林固定液

11、中固定。2.2.3 病理組織學(xué)觀察(1) 取材：取病變與正常組織的交界處的實(shí)質(zhì)臟器 (心、肝、脾、肺、腎)。(2) 固定：將所取病料置 10% 的福爾馬林固定液中固定 48 h,在固定 6h小時(shí)后，對(duì)組織塊進(jìn)行修塊。將修好的組織塊放于白色的小包埋盒中，按設(shè)定好的程序進(jìn)行脫水、透明、浸蠟，其具體的程序步驟為水洗80% 酒精 1h90%酒精 1.5h95% 酒精 2h95%酒精 2h100%酒精 1h100%酒精 1.5h100%酒精 1.5h二甲苯 0.5h二甲苯 1h石蠟 2h石蠟 2h。(3) 包埋：將小包埋盒的蓋子去掉，將組織塊從包埋盒中用小鑷子輕輕取出，取出時(shí)注意仍將要切的面朝下，平放在

12、已滴滿石蠟的不銹鋼包埋盒的中央位置，這一點(diǎn)非常重要，否則會(huì)將要切的面切不完整，放好組織塊后，將白色的小包盒底部鑲嵌在不銹鋼包埋的上方，再在其上滴滿石蠟。隨后將已包埋好的不銹鋼小包埋盒冷卻使其凝固。當(dāng)組織塊已完全與石蠟?zāi)探Y(jié)合在一起時(shí)，將不銹鋼包埋盒輕輕從要切的組織塊底部輕輕去掉，將留有組織塊的白色小包埋盒側(cè)面的石蠟輕輕刮去。(4) 切片：將保留在白色小包埋盒的組織塊固定在石蠟切片機(jī)上，先行修片，當(dāng)修到完整的組織時(shí)，將切片的厚度調(diào)到 5-7m，再行切片，切片時(shí)注意用力均勻，進(jìn)行連續(xù)切片。(5) 展片、攤片與烘片：將切好的組織薄片用毛筆刷輕輕挑起，同時(shí)用小鑷子輕輕將切好的組織薄片的起始部夾起，放入

13、水浴鍋展片，溫度為 45-50。溫度過高可將切片熔化，過低則切片不宜伸展。切片放入展片槽中時(shí)，立即用小鑷子輕輕在其上面將其有皺縮的地方展平，此時(shí)將已準(zhǔn)備好的載玻片垂直伸入液面下在載玻片的 1/3 處將薄層切片緩緩澇起，切片可自動(dòng)貼附于載玻片上，將載玻片放在切片架上，再將其放在攤片架上。最后再將切片架移到烘片箱中烘干(烘片箱中的溫度為 76)，一般持續(xù)時(shí)間為 40min。(6) 脫蠟、染色與封藏：將放有載玻片的染色架放入二甲苯 中浸泡 10 min 二甲苯 中浸泡 10min (以充分脫蠟)100% 酒精 5min100% 酒精 5 min95% 酒精5 min 85% 酒精5 min80% 酒

14、精 5 min蘇木素染液染色5min水洗（將切片架放入事先準(zhǔn)備好的清水中沖洗5 min）1%鹽酸酒精分化（這一步驟相當(dāng)關(guān)鍵，它的主要目的是脫去胞漿的著色，時(shí)間過長(zhǎng)可使胞核的著色脫去。）放進(jìn)去后要迅速取出，時(shí)間一般掌握在4-6 秒鐘自來水緩緩沖洗15-30 min 伊紅染液染色1-3 分鐘95%酒精3s 100%酒精 3s100% 酒精 3s二甲苯 3s 二甲苯 3s。至此 h.e 染色過程全部結(jié)束，將染色架上的載玻片取出，用干凈的紗布將二甲苯液體蘸去，并在上面滴上中性樹膠，將蓋玻片封好，貼上標(biāo)簽作好標(biāo)記后放入切片盒中,觀察各個(gè)臟器的病理變化。3 結(jié)果與分析3.1 臨床癥狀與病理變化高劑量組臨床

15、表現(xiàn)食欲廢絕，精神沉郁，縮頭，全身震顫，臥地不起，排黑褐色糞，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色，質(zhì)脆易碎，膽囊膨大充滿藍(lán)綠色膽汁，死亡病例還可見腎輕度腫大。中等劑量組表現(xiàn)為食欲廢絕，精神沉郁，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色。低劑量組的無明顯的變化。3.2 病理組織學(xué)變化肝臟：低劑量組和中劑量組肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿紅染的細(xì)微顆粒，中央靜脈、肝竇以及間質(zhì)小血管內(nèi)充滿紅細(xì)胞。高劑量組肝臟出現(xiàn)明顯顆粒變性和脂肪變性，肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿大量紅染的細(xì)微顆?；驁A形空泡，細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀 (圖1)。部分病例可見局灶性壞死，內(nèi)肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞胞漿紅染，細(xì)胞核出現(xiàn)固縮和碎

16、裂 (圖2)。中央靜脈內(nèi)紅細(xì)胞不清楚，只見紅染絲網(wǎng)狀物質(zhì)充滿血管。圖1 肝細(xì)胞呈蜂窩狀圖2 肝細(xì)胞核固縮和碎裂心臟：在中劑量組和高劑量組可見心肌纖維腫脹，出現(xiàn)許多紅染的細(xì)微顆粒(圖3)。心肌纖維間毛細(xì)血管內(nèi)充滿紅細(xì)胞。脾臟：在中劑量組和高劑量組可見脾臟白髓區(qū)變小，中央淋巴細(xì)胞和邊緣區(qū)淋巴細(xì)胞數(shù)量減少，網(wǎng)狀細(xì)胞增生，紅髓血竇擴(kuò)張充血（圖4）。高劑量組部分病例脾臟白髓淋巴細(xì)胞出現(xiàn)壞死。圖3 肌纖維腫脹和細(xì)微顆粒圖4 紅髓血竇擴(kuò)張充血肺：在中劑量和高劑量組中小血管和毛細(xì)血管明顯擴(kuò)張，內(nèi)充滿紅細(xì)胞 (圖5)。高劑量組中部分肺泡腔內(nèi)有少量紅染漿液，部分肺泡擴(kuò)張出現(xiàn)肺泡性肺氣腫(圖6)。圖5 小血管和毛細(xì)

17、血管明顯擴(kuò)張，內(nèi)充滿紅細(xì)胞圖6 肺泡腔內(nèi)有少量紅染漿液腎臟：低劑量組中腎小管出現(xiàn)顆粒變性，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄（圖7），間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張，充血。中劑量組腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)，出現(xiàn)管型（圖8）。部分腎小管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞。高劑量組腎小管上皮壞死、崩解、脫落于管腔中。圖7 腎小管出現(xiàn)顆粒變性，上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄圖8 腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)4 討論本實(shí)驗(yàn)采用三組不同濃度的銅對(duì)小白鼠進(jìn)行攻毒，分別為低劑量、中劑量和高劑量，時(shí)間為半個(gè)月。高劑量組小鼠在試驗(yàn)期間有死亡現(xiàn)象，臨床病理癥狀表現(xiàn)為食欲廢絕，精神沉郁，縮頭，全身

18、震顫，臥地不起，排黑褐色糞，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色，質(zhì)脆易碎，膽囊膨大充滿藍(lán)綠色膽汁，死亡病例還可見腎輕度腫大。中等劑量變現(xiàn)為食欲廢絕，精神沉郁，脾臟體積縮小，重量減輕，色澤變淡，肝呈黃褐色，低劑量眼觀無明顯變化。本實(shí)驗(yàn)所獲結(jié)果為動(dòng)物銅中毒的系統(tǒng)研究提供了動(dòng)物模型，也可供臨床或發(fā)病現(xiàn)場(chǎng)診斷和治療銅中毒做參考，從小白鼠發(fā)病時(shí)間、病程經(jīng)過、死亡情況的綜合分析，作者認(rèn)為銅中毒低劑量和中劑量的引起慢性銅中毒。銅中毒高劑量引起小白鼠的急性銅中毒，表明銅的中毒病理表現(xiàn)因動(dòng)物種類和銅中毒劑量各異。病理形態(tài)學(xué)的研究表明，小白鼠銅中毒病變靶器官是肝臟、腎臟、消化道和免疫器官，與銅鹽的刺激和

19、腐蝕作用，銅在體內(nèi)組織分布及蓄積特點(diǎn)和銅排出密切相關(guān)。由于銅鹽具有強(qiáng)烈的刺激和腐蝕作用，銅鹽進(jìn)入消化道便引起劇烈反應(yīng)和造成嚴(yán)重的病理損害，表現(xiàn)為肌胃角質(zhì)層增厚、龜裂乃至呈絨毛狀，腸黏膜上皮變性壞死，腸絨毛斷裂，這是銅鹽直接作用于胃腸道黏膜的結(jié)果，導(dǎo)致胃腸功能受損，銅被吸收進(jìn)入體內(nèi)后主要在肝臟蓄積，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)銅的蓄積量大幅度增加。銅的蓄積一旦超過肝臟對(duì)其的利用，在釋放入血之前便對(duì)肝細(xì)胞造成直接的損害作用，引起肝細(xì)胞腫大，顆粒變性和脂肪變性，肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿大量紅染的細(xì)微顆?；驁A形空泡,細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀。至于臟臟中蓄積的銅大量釋放入血引起血銅升高時(shí)，肝銅含量仍未降低，且表現(xiàn)出極強(qiáng)的時(shí)間

20、-劑量效應(yīng)，故肝銅可作為評(píng)價(jià)銅狀態(tài)的一個(gè)敏感指標(biāo)。肝銅蓄積到一定程度時(shí)則大量釋放入血引起血銅升高，同時(shí)。腎銅濃度也隨之升高，造成腎小管上皮細(xì)胞的損傷，導(dǎo)致腎功能受損。5 結(jié)論本研究結(jié)合當(dāng)前銅中毒的研究進(jìn)展，從病原學(xué)、臨床癥狀以及中毒后對(duì)機(jī)體各臟器的結(jié)構(gòu)的影響等多角度詳細(xì)的闡述了人工復(fù)制銅中毒的病理形態(tài)學(xué)，為人工復(fù)制銅中毒的預(yù)防及診斷提供了極其重要的技術(shù)依據(jù)。發(fā)生銅中毒時(shí)，造成了廣泛性實(shí)質(zhì)臟器的損傷和出血，尤其是肝臟、腸道和腎臟的病理性損傷更明顯，肝臟：低劑量組和中劑量組肝細(xì)胞腫大，胞漿內(nèi)充滿紅染的細(xì)微顆粒，中央靜脈、肝竇以及間質(zhì)小血管內(nèi)充滿紅細(xì)胞。高劑量組肝臟出現(xiàn)明顯顆粒變性和脂肪變性，肝細(xì)胞

21、腫大，胞漿內(nèi)充滿大量紅染的細(xì)微顆?；驁A形空泡,細(xì)胞呈現(xiàn)蜂窩狀外觀，部分病例可見局灶性壞死，內(nèi)肝細(xì)胞索排列紊亂，肝細(xì)胞胞漿紅染，細(xì)胞核出現(xiàn)固縮和碎裂，中央靜脈內(nèi)紅細(xì)胞不清楚，只見紅染絲網(wǎng)狀物質(zhì)充滿血管。腎臟：腎臟：低劑量組中腎小管出現(xiàn)顆粒變性，腎小管上皮細(xì)胞腫脹，使管腔變小或狹窄，間質(zhì)毛細(xì)血管擴(kuò)張，充血。中劑量組腎小管出現(xiàn)明顯顆粒變性，管腔中有許多紅染蛋白質(zhì)物質(zhì)，出現(xiàn)管型。部分腎小管壁細(xì)胞結(jié)構(gòu)被破壞。高劑量組腎小管上皮壞死、崩解、脫落于管腔中。因此在銅離子作為飼料的添加劑，要確定好銅的含量。參考文獻(xiàn):1 王長(zhǎng)青，李靖愛.宋茜.育成豬微量元素銅中毒的診治j.當(dāng)代畜牧，2003，4(3):31-33

22、.2 王宗元.動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)代謝病和中毒病學(xué)j.北京.中國(guó)農(nóng)業(yè)出版社. 1997，2（1）:5-8.3 王幼明，王小龍.高鋼的應(yīng)用對(duì)畜禽的慢性中毒作用及對(duì)環(huán)境生態(tài)的影響j.中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2005，37(6): 36-38.4 劉璐.飲食銅的供給、狀態(tài)及吸收p.國(guó)外醫(yī)學(xué)一地理分冊(cè). 1997，18(l):15-20.5 朱秀琴，張德壽.雞銅中毒的臨床病理學(xué)研究j.中國(guó)獸醫(yī)科技. 2005，25(12):11-16.6 劉成文，張懷禮，魏登山.豬銅中毒的診斷j.中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2001，37(3):53-54.7 姚遠(yuǎn)峰.豬謐用飼料添加劑引起銅中毒j.廣西畜牧獸醫(yī).1997.13(3):5963.8 李建喜,王學(xué)智,楊志強(qiáng). 鉬和銅對(duì)小鼠抗氧化機(jī)能的影響j. 中國(guó)獸醫(yī)科技,2004,22(11)：11-15.9 崔恒敏,陳懷濤.雛鴨銅中毒的實(shí)驗(yàn)觀察j.中國(guó)家禽,2003,25(11):8-10.11 舒港亮.胡才喜.肉