涂陽(yáng)活動(dòng)性肺結(jié)核患者HRCT評(píng)分與細(xì)菌學(xué)及免疫學(xué)相關(guān)性分析

1、DOC格式論文，方便您的復(fù)制修改刪減涂陽(yáng)活動(dòng)性肺結(jié)核患者HRCT評(píng)分與細(xì)菌學(xué)及免疫學(xué)相關(guān)性分析(作者：?jiǎn)挝唬亨]編：)【摘要】目的探討HRCT評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)在診斷活動(dòng)性肺結(jié)核中 的應(yīng)用價(jià)值。方法 對(duì)42例痰涂陽(yáng)性肺結(jié)核患者，進(jìn)行 HRCT僉查和 評(píng)分，每側(cè)肺組織劃分為為三個(gè)區(qū)域，分別對(duì)各類(lèi)型CT征象所累及范圍進(jìn)行評(píng)分；分析評(píng)分結(jié)果與痰細(xì)菌學(xué)檢查結(jié)果和外周血結(jié)核菌特 異性IFN- 丫水平之間的相關(guān)性。結(jié)果 根據(jù)結(jié)核菌涂片結(jié)果分為 4組，其中，AFB( + ) 12 例、AFB( + + ) 11 例、AFB( + + + )10例、AFB( + + + + ) 9例，相關(guān)性分析顯示(1) HRCT總評(píng)分

2、與痰陽(yáng) 性分級(jí)有正相關(guān)性(r=0.9661 P0.0001 ); (2) HRCT總評(píng)分與結(jié)核菌 抗原 ESAT6 P4-6、P8.10特異性IFN- 丫釋放水平均呈正相關(guān)(r=0.4805,P=0.0017 , r=0.4451，P=0.0083, r=0.4211，P=0.0131)。 結(jié)論 以活動(dòng)性肺結(jié)核患者復(fù)雜的 CT征象的范圍為基礎(chǔ)的HRCT評(píng)分 標(biāo)準(zhǔn)與細(xì)菌學(xué)及免疫學(xué)均呈正相關(guān)，表明該 HRCT評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)對(duì)臨床診 斷治療和療效判定具有一定指導(dǎo)意義?！娟P(guān)鍵詞】 結(jié)核HRCT抗酸桿菌染色 丫干擾素ELISPOTAbstract Objective To investigate the ro

3、le of HRCEcanningscores in diag no sisof activepul monary tuberculosis(PTB)patients.Methods 42 PTB patientsthat sputum smear weremycobacterium positivity were in cluded into the study. Every lung field was divided into 3 zones. Extent to disease in each zone abno rmalities was evaluated and summed t

4、o a HRCT score.The correlationbetween HRCTscores and release levels ofspecific IFN- 丫 in peripheral blood Bacillus tuberculosis as well as sputum bacteriology result. Results Smear mycobacterium positive patie nts with PTB were divided into 4 groups accord ing to grades of sputum acid-fast bacillus

5、(AFB) smear: group I (sputum 1+,n=12), group II (sputum 2+, n=11), group III (sputum 3+, n=10), and group IV (sputum 4+, n=9).The correlati onan alysis dem on strated: (1) A positive correlatio nbetwee n total scores based on HRCT and the degree of smear positivitywas found (r =0.9661 P0.0001) . (2)

6、 There are positivecorrelationsbetween total scores of HRCTfindings and releaselevels of ESAT6,P4-6,P8.10 specific IFN- 丫 (r =0.4805 P=0.0017;have a criticalr =0.4451,P=0.0083;r =0.4211,P=0.0131). Con clusi on The score sta ndards of HRCTbased on multiplex CT sig ns in patie nts with PTB correlated

7、positively with bacteriology and immuno logy. HRCTscores can be used to evaluate degrees of lung injury androle in guidi ngcli ni caldiag no sisand therapeutic effect assessme nt of active PTB patie nts.Key words tuberculosis; HRCT; AFB; IFN- 丫 ; ELISPOT全國(guó)已有5.5億人感染了結(jié)核菌，目前患活動(dòng)性肺結(jié)核的病例數(shù)達(dá) 450萬(wàn)人，死亡率為8.8/1

8、0萬(wàn)1。隨著CT在基層醫(yī)院的逐漸普及， 其在活動(dòng)性肺結(jié)核中的診斷價(jià)值得到肯定，但由于肺內(nèi)病變征象具有 多發(fā)和多形性的特點(diǎn)，國(guó)內(nèi)尚未建立系統(tǒng)的PTB CT影像診斷及評(píng)估方法。本研究基于對(duì)痰涂陽(yáng)性的 PBT患者初步建立HRCT評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)， 并對(duì)涂陽(yáng)活動(dòng)性肺結(jié)核患者 HRCT評(píng)分與細(xì)菌學(xué)、免疫學(xué)進(jìn)行相關(guān)性 分析，旨在探討該評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)是否可以有效的對(duì)結(jié)核病病情進(jìn)行有效評(píng) 估的可行性，從而為指導(dǎo)臨床肺結(jié)核的診療，尤其是療效判定提供幫 助。資料與方法1. 研究對(duì)象 病例資料 搜集2008年8月至10月于本醫(yī)院登記診斷治療的42例新發(fā)痰涂陽(yáng)性活動(dòng)性肺結(jié)核病人為研究對(duì)象。其中男 23 例,女19例；年齡范圍186

9、2歲,平均年齡40歲。該研究對(duì)象均排 除合并糖尿病、腫瘤、免疫系統(tǒng)疾病、COP及其他肺疾患的病例。2. 研究方法2.1 CT檢查方法與HRCT評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：2.1.1 CT 檢查方法 所有病例均行螺旋 CT檢查。常規(guī)掃描層厚為 10mm螺距為 1 : 1;電壓 120kV、電流 150mA HRCT3描,電壓 120kV, 電流175200mA層厚2mr3mm骨重建算法。2.1.2 HRCT評(píng)分標(biāo)準(zhǔn) 常規(guī)CT及HRCTt均由3名胸部CT醫(yī)師分別 判讀。規(guī)定用于解釋HRCTE象的主要術(shù)語(yǔ)分為以下7種：（1）結(jié)節(jié):CT表現(xiàn)為直徑4mnr 10mm的邊緣模糊的結(jié)節(jié)影，呈節(jié)段性分布，伴或不 伴分支線樣陰影

10、；（2）微結(jié)節(jié)：直徑為2mnr 4mm的小葉中心結(jié)節(jié)影和 分支線樣結(jié)構(gòu)；（3）實(shí)變：直徑10mm-20mm之間的邊緣模糊的實(shí)變陰 影；支氣管損傷：CT表現(xiàn)為袖套征和軌道征，管壁厚度大于同級(jí)支 氣管；（5）磨玻璃影：肺實(shí)變周?chē)蚍伍g質(zhì)病變區(qū)內(nèi)的片狀略高密度影 似磨玻璃密度，肺紋理不被掩蓋；（6）空洞:包括厚壁、薄壁空洞以及 干酪性肺實(shí)變區(qū)的蟲(chóng)蝕樣壞死空洞；（7）間質(zhì)損傷:呈網(wǎng)狀和細(xì)線樣結(jié) 構(gòu)影。HRCT評(píng)分方法為23:將一側(cè)肺臟分為上、中、下三部分， 上部定義為支氣管隆突以上區(qū)域、中部定義為支氣管隆突與下肺靜脈 之間區(qū)域、下部定義為下肺靜脈以下區(qū)域，每一區(qū)域分為4分，然后根據(jù)每個(gè)區(qū)域內(nèi)不同CT征

11、象（上述7個(gè)CT征象為7個(gè)變量）所占范 圍進(jìn)行評(píng)分，分級(jí)采用5級(jí)分法進(jìn)行評(píng)分:0級(jí),沒(méi)有大陰影，記為0 分；1級(jí),全部大陰影的面積不超過(guò)該層面的 1/4,記為1分；2級(jí),全 部大陰影的面積占該層面的1/41/2,記為2分；3級(jí),全部大陰影 的面積占該層面的1/23/4,記為3分；4級(jí),全部大陰影的面積超過(guò) 該層面的3/4肺受累,記為4分。支氣管擴(kuò)張用肺段分級(jí)進(jìn)行評(píng)分， 右肺10段，左肺8段4。然后將所得評(píng)分相加獲得總分（0-168分）。 2.2抗酸桿菌涂片檢查所有患者送檢至少連續(xù)3次取晨痰涂片，應(yīng) 用齊-尼抗酸染色法后鏡檢觀察。2.3 ELISPOT法檢測(cè)不同抗原刺激后PBMC吉核菌特異性IF

12、N-丫釋放 水平2.3.1 ELISPOT采用的重組蛋白抗原ESAT-6為本實(shí)驗(yàn)室自行制 備。多肽合成由深圳瀚宇生物技術(shù)公司完成，多肽純度超過(guò)95%ELISPOT讀數(shù)系統(tǒng)（Bioreader 4000 Pro-X ）為德國(guó) BIOSYS公司產(chǎn) 品。232 采集乙二胺四乙酸（EDTA抗凝的靜脈血5ml, 2小時(shí)內(nèi)分離外 周淋巴細(xì)胞（PBMC,在預(yù)包被好抗體的平板，為2X 105個(gè)細(xì)胞/孔。 陰性對(duì)照孔中不入任何刺激物；陽(yáng)性對(duì)照每孔加入5 l植物血凝素（PHA），終濃度5ug/ml。實(shí)驗(yàn)孔中分別加入經(jīng)篩選確定的結(jié)核菌重組 蛋白抗原（ESAT-6）、結(jié)核菌多肽抗原（P4-6 ）、結(jié)核菌多肽抗原（P8

13、.10）,終濃度均為5卩g/孔。然后蓋上板蓋，放入37 C, 5%CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng)16-24小時(shí)。第二天洗板后，加入檢測(cè)抗體孵育1小時(shí)，洗板后再加入親和素孵育1小時(shí)。最后加入顯色劑顯色。待顯色洗板 后，在ELISPOT讀數(shù)系統(tǒng)自動(dòng)讀數(shù)，并記錄斑點(diǎn)數(shù)量。3. 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 以SPSS13軟件包處理數(shù)據(jù)，計(jì)量資料以均數(shù)士標(biāo)準(zhǔn) 差表示,相關(guān)分析采用直線相關(guān)性分析方法，影響因素分析采用多元 線性相關(guān)，P0.05，認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié) 果1. 不同CT征象HRCT評(píng)分及總評(píng)分與痰涂陽(yáng)性分級(jí)間相關(guān)性本組42例HRC總評(píng)分范圍在22-80.1分（44.22 士 17.94 ）。42例患者（分 為四組）晨

14、痰涂片結(jié)果，1組（痰+ ,12例）、2組（痰+ +，11例）、3 組（痰+ + +，10例）、4組（痰+ + + +，9例）。不同征象的HRCT 評(píng)分與痰陽(yáng)分級(jí)有顯著性差異，空洞、支氣管損傷、實(shí)變、磨玻璃影、 結(jié)節(jié)均與痰涂陽(yáng)分級(jí)均呈強(qiáng)正相關(guān)性（r=0.9660 p0.0001、r=0.5086p=0.0006、r=0.9056 ， p0.0001、r=0.9661p0.0001、r=0.9634 P0.0001 ),微結(jié)節(jié)及間質(zhì)損傷則無(wú)顯著性差異(r=0.6909、p=0.0927)。HRC總評(píng)分與痰涂陽(yáng)性分級(jí)有正相關(guān)性 (r=0.9661 P0.0001)(圖1)。 HRCT技術(shù)可以清楚顯示

15、活動(dòng)性肺結(jié)核不同 CT征象的形態(tài)學(xué)改變(圖5、6)。2. HRCT影像學(xué)總評(píng)分與 ELISPOT法檢測(cè)ESAT-6 P4-6、P8.10三種 抗原刺激后PBMC IFNy釋放水平相關(guān)性。ELISPOT法檢測(cè)EST6 P4-6、P8.10抗原刺激后PBMCFN- 丫釋放水 平，范圍分別在 0-400 (115.61 士 108.66 )、0-436 (92.35 士 122.94 ) 和0-321 ( 74.40 士 96.24 )。HRC總評(píng)分與ESAT6為抗原刺激后 PBMC IFN- 丫釋放水平呈正相關(guān)(r=0.4805 P=0.0017 )(圖2)、與P4-6為 抗原PBMCFN- 丫釋

16、放水平呈正相關(guān)(r=0.4451 , P=0.0083)(圖3)、 與P8.10為抗原PBMCFN- 丫釋放水平呈正相關(guān)(r=0.4211 ,P=0.0131)(圖 4)。討論我國(guó)是世界上結(jié)核病負(fù)擔(dān)最重的 22個(gè)國(guó)家之一。結(jié)核病在我國(guó)的流 行趨勢(shì)不令人樂(lè)觀。而且隨著結(jié)核病流行病學(xué)的變遷，成人原發(fā)肺結(jié) 核增多，耐多藥肺結(jié)核以及在免疫損害者中并發(fā)肺結(jié)核者日益增多， 都給診斷及鑒別診斷帶來(lái)一定困難。 在肺結(jié)核的診斷中，臨床癥狀和 體征、結(jié)核菌痰檢、影像檢查、免疫學(xué)檢查、纖維支氣管鏡檢查及肺、 胸膜活檢是診斷依據(jù)，影像學(xué)診斷在臨床診斷中占重要地位。 胸片是 診斷肺結(jié)核的基礎(chǔ)影像檢查方法，但在已被證實(shí)為

17、肺結(jié)核的患者中 15 %匈片顯示正常。胸片在檢出早期粟粒性肺結(jié)核及艾滋病中并發(fā)的 肺結(jié)核也不敏感5。CT?？蓹z出被胸片漏診的病變，明確胸片上的 可疑病變和評(píng)價(jià)有無(wú)合并癥，HRCT在了解肺結(jié)核的病理過(guò)程及決定 病變的活動(dòng)性上都具有平片無(wú)法比擬的優(yōu)勢(shì) 6。但是迄今為止活動(dòng) 性肺結(jié)核的CT診斷及對(duì)肺組織損傷程度和病變范圍的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)尚未 建立。近來(lái)對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核HRCT征象研究也取得了進(jìn)展，認(rèn)為結(jié)節(jié)、微結(jié) 節(jié)、磨玻璃影、空洞和支氣管損傷、滲出性實(shí)變及間質(zhì)損傷等均為活 動(dòng)性肺結(jié)核的主要特征79。本研究基于對(duì)PTB患者HRCTffi象觀 察病變形態(tài)學(xué)改變并對(duì)病變范圍做出系統(tǒng)評(píng)分，與AFB痰涂片染色中按觀測(cè)

18、到細(xì)菌數(shù)量多少分組，觀測(cè)各組CT征象改變的內(nèi)在規(guī)律。本組資料顯示在HRC總分與痰涂陽(yáng)性程度呈正相關(guān)，我們?cè)贖RCT評(píng)分 中所選擇主要參數(shù)，CT征象中支氣管損傷、空洞、磨玻璃影、結(jié)節(jié) 影均與痰涂陽(yáng)性程度有顯著相關(guān)性， 這與以往文獻(xiàn)一致89。對(duì)微 結(jié)節(jié)及間質(zhì)損傷的CT征象與痰涂陽(yáng)性程度無(wú)明顯相關(guān)性，這與路希 偉等10分析結(jié)果不同，而與Fatih等3所作結(jié)果相同。之所以結(jié) 果不同可能與路希偉等9研究中所選擇病例79%勻?yàn)樘低筷幮苑谓Y(jié) 核，且CT征象多以間質(zhì)病變?yōu)橹魉掠嘘P(guān)。就單一征象而言，微結(jié) 節(jié)或間質(zhì)損傷檢出率雖然很高，也僅具相對(duì)特異性。因而，為了客觀 有效地評(píng)估活動(dòng)性肺結(jié)核，應(yīng)依據(jù)4種以上CT征

19、象,如支氣管損傷及 空洞形成共同判讀并結(jié)合臨床資料，將有助于活動(dòng)性肺結(jié)核和非活動(dòng) 性肺結(jié)核的診斷和鑒別診斷以及臨床療效的評(píng)估?；诩?xì)胞免疫檢測(cè)方法的結(jié)核分枝桿菌特異性IFN- 丫體外分泌水平檢測(cè)是結(jié)核菌感染診斷的新方法，有較好的特異性和敏感性。有研究 表明人體內(nèi)結(jié)核菌特異性IFN- 丫水平與結(jié)核病的不同類(lèi)型臨床表現(xiàn)、 結(jié)核菌抗癆治療的療效和轉(zhuǎn)歸之間具有的相關(guān)性11。因此，理論上講，采用所建立的標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行的影像學(xué)分類(lèi)，應(yīng)該在特異性細(xì)胞免疫如 結(jié)核菌特異性IFN- y水平也應(yīng)該有顯著的區(qū)別。Delia等12對(duì)20 例活動(dòng)性肺結(jié)核患者按臨床耐藥程度分為輕度、中度，并與正常對(duì)照 組一起應(yīng)用ELISPOT

20、P試驗(yàn)檢測(cè)IFN- y釋放水平，結(jié)果顯示三組間IFN- y檢測(cè)呈正相關(guān)。本組HRC總評(píng)分與應(yīng)用ELISPOTP檢測(cè)ESAT6 P4-6、P8.10為抗原刺激后PBM（特異性IFN- 丫釋放水平均呈正相關(guān)。進(jìn)一步證實(shí)該HRCT評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)是可行的，可以對(duì)活動(dòng)性肺結(jié)核患者臨 床癥狀做出合理解釋?zhuān)梢詫?duì)肺組織損傷程度進(jìn)行評(píng)估。需要指出的是活動(dòng)性肺結(jié)核的 CT征象不是一成不變的，可隨著臨床 治療不斷變化而表現(xiàn)各異。因此，本組 HRCT評(píng)分僅代表活動(dòng)性肺結(jié) 核處于不同時(shí)期的病變范圍，其實(shí)際意義在于進(jìn)一步了解活動(dòng)性肺結(jié) 核影像與細(xì)菌學(xué)及免疫學(xué)之間是密切相關(guān)的，這將為活動(dòng)性肺結(jié)核臨 床診斷及治療方案的選擇提供參

21、考。但仍需要擴(kuò)大樣本量，并動(dòng)態(tài)觀察PTB治療過(guò)程中的HRCT征象及結(jié)核菌重組蛋白抗原刺激后IFN- 丫 釋放水平，為評(píng)估肺結(jié)核治療效果提供依據(jù)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1.Nati onalTech ni calSteeri ngGroup of theEpidemiologicalSampling Survey for Tuberculosis.Report on n ati on wide ran dom survey for the epidemiology of tuberculosis in 2000J. The Journal of the Chinese Antituberculosis A

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