PCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)劃布局設(shè)計(jì),一切從零開始(全了)

1、頁眉內(nèi)容 如何建設(shè)一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的 PCR實(shí)驗(yàn)室？ PCR實(shí)驗(yàn)室如何設(shè)計(jì)規(guī)劃才堪稱專業(yè)？PCR實(shí)驗(yàn)室 管理又有哪些注意要點(diǎn)？ 標(biāo)準(zhǔn)的PCR實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)域，分別為： n1.試劑配制區(qū)； n2.樣品處理區(qū)； n3核酸擴(kuò)增區(qū)； n4.產(chǎn)物分析區(qū)； PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)規(guī)劃找博爾實(shí)驗(yàn)室 如使用全自動(dòng)分析儀，區(qū)域可適當(dāng)合并。 （進(jìn)入各工作區(qū)域必須嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行，不同的工作區(qū)域使用不同的工作服，例 如不同的顏色。工作人員離開各工作區(qū)域時(shí)，不得將工作服帶出） PCR實(shí)驗(yàn)室平面布局 【各區(qū)的功能分別為】 試劑準(zhǔn)備區(qū)：擴(kuò)增試劑的配制、分裝和保存。 樣品處理區(qū)：樣品登記、分裝；核酸提取、保存和加樣。 擴(kuò)增產(chǎn)物分析

2、區(qū)：擴(kuò)增產(chǎn)物的測定、結(jié)果分析、登記及報(bào)告。 博爾實(shí)驗(yàn)室PCR實(shí)驗(yàn)室工程案例 擴(kuò)增前區(qū)與擴(kuò)增后區(qū)應(yīng)嚴(yán)格分開，須使用不同的房間，兩區(qū)之間最好有一定的間隔。 使用商品化試劑盒可在樣品處理區(qū)進(jìn)行少量試劑配制。 在滿足下列操作和清潔處理要求的前提下樣品處理區(qū)和試劑準(zhǔn)備區(qū)可設(shè)在同一房間 內(nèi)： 在生物安全柜內(nèi)操作； 每個(gè)實(shí)驗(yàn)人員、實(shí)驗(yàn)組分別使用各自的試劑及耗材； 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用； 用有效的方法對(duì)操作區(qū)域和共享器具在實(shí)驗(yàn)前后進(jìn)行清潔及消毒。 PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)規(guī)劃要點(diǎn) 1、主體結(jié)構(gòu)： 主體為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金50內(nèi)圓角鋁，從而解 決容易污染、積塵、不易清掃等問

3、題。結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。 2、標(biāo)準(zhǔn)的三區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)： 將PCR過程分成試劑準(zhǔn)備、 標(biāo)本制備和PCR擴(kuò)增檢測三個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)區(qū)。 整個(gè)區(qū)域有 一個(gè)整體緩沖走廊。每個(gè)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)區(qū)設(shè)置有緩沖區(qū)，同時(shí)各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個(gè) PCR 實(shí)驗(yàn)過程中試劑和標(biāo)本免受氣溶膠的污染并降低擴(kuò)增產(chǎn)物對(duì)人員和環(huán)境的污染。 可打開緩沖區(qū)I,緩沖區(qū)H和PCR擴(kuò)增區(qū)的排風(fēng)扇往外排氣，在實(shí)驗(yàn)區(qū)的外墻上和各 扇門上都安裝有風(fēng)量可調(diào)的回風(fēng)口，空氣通過回風(fēng)口向室內(nèi)換氣。 3、消毒： 在三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)和三個(gè)緩沖區(qū)頂部以及傳送窗內(nèi)部安裝有紫外燈，供消毒用。 在試劑準(zhǔn)備區(qū)和標(biāo)本制備區(qū)還設(shè)置移動(dòng)紫外線燈，對(duì)實(shí)驗(yàn)桌進(jìn)行局部消毒

4、。 4、機(jī)械連鎖不銹鋼傳遞窗： 試劑和標(biāo)本通過機(jī)械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和 標(biāo)本在傳遞過程中不受污染（人物分流） 5、地面 地面建議使用 PVC卷材地面或自流坪地面，整體性好。便于進(jìn)行清掃，耐腐蝕。沒有 條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm X800mm ）接縫需要小于2mm。 6、照明 燈具要選用凈化燈具，能達(dá)到便于清洗、不積塵的特點(diǎn)。 在建設(shè)的過程中應(yīng)注意 規(guī)范的安裝流程和全面的服務(wù)流程。 嚴(yán)格按照規(guī)范科學(xué)設(shè)計(jì)的安裝流程。 安裝前需要確定以下安裝條件，女口：電源電壓，電源進(jìn)線位置，電話網(wǎng)絡(luò)線進(jìn)線位置， 進(jìn)水水壓，最小安裝空間，地面平整度，

5、通風(fēng)孔、進(jìn)水管和下水管的位置等，理想狀態(tài)的空 間尺寸和通風(fēng)口尺寸。 PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)要點(diǎn) PCR實(shí)驗(yàn)室可以是分散形式，也可以是組合形式。完成一組PCR實(shí)驗(yàn)，通常應(yīng)經(jīng)過試 劑配制、樣品處理、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程， 若實(shí)驗(yàn)工藝需要，還應(yīng)增加樣品粉 碎過程。 一、分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室 所謂分散形式PCR實(shí)驗(yàn)室，是指完成上述實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房彼此相距較遠(yuǎn)，呈分散 布置形式。對(duì)于這種布置形式的PCR實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)之間不易相互干擾，因此無需 特殊條件要求。 二、組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室 所謂組合形式PCR實(shí)驗(yàn)室，是指完成PCR四個(gè)實(shí)驗(yàn)過程的實(shí)驗(yàn)用房相鄰布置，組成獨(dú) 立實(shí)驗(yàn)區(qū)域的形式。對(duì)于組合形

6、式PCR實(shí)驗(yàn)室，由于各個(gè)實(shí)驗(yàn)間集中布置，容易造成相互 干擾，因此，對(duì)總體布局以及屏障系統(tǒng)具有一定的要求。各室在入口處設(shè)緩沖間， 以減少室 內(nèi)外空氣交換。 博爾實(shí)驗(yàn)室對(duì)PCR實(shí)驗(yàn)室建設(shè)一些經(jīng)驗(yàn)分享： 試劑配制室及樣品處理室宜呈微正壓，以防外界含核酸氣溶膠的空氣進(jìn)入，造成污染; 可以通過控制進(jìn)風(fēng)風(fēng)量大于排風(fēng)風(fēng)量達(dá)到正壓效果。 核酸擴(kuò)增室及產(chǎn)物分析室應(yīng)呈微負(fù)壓，以防含核酸的氣溶膠擴(kuò)散出去污染試劑與樣品， 可以通過控制排風(fēng)風(fēng)量大于進(jìn)風(fēng)風(fēng)量達(dá)到負(fù)壓效果。 在理想情況下，PCR實(shí)驗(yàn)室緩沖間內(nèi)，可設(shè)置正壓，使室內(nèi)空氣不流向室外，室外空 氣不流向室內(nèi)。PCR實(shí)驗(yàn)室進(jìn)風(fēng)由原有中央空調(diào)控制，要求將中央空調(diào)風(fēng)口安裝

7、到指定定 點(diǎn)，且高度為地面鋪裝好后 2600mm處。 如果使用熒光PCR儀，擴(kuò)增室和產(chǎn)物分析室可以合并。 若房間進(jìn)深允許，可設(shè)PCR內(nèi)部專用走廊。需要指出的是在減少室內(nèi)外空氣交換方面， 緩沖間比專用走廊更有意義。 各個(gè)區(qū)域之間應(yīng)具備單向的實(shí)驗(yàn)工藝流、物流、人流與氣流，形成單向流程的保護(hù)屏障, 避免實(shí)驗(yàn)之間的相互干擾，防止核酸氣溶膠對(duì)實(shí)驗(yàn)過程造成污染產(chǎn)生假性結(jié)果。 實(shí)驗(yàn)室的墻體，包括頂棚，應(yīng)結(jié)構(gòu)牢固、氣密性好；所有陰角宜采用圓弧形線條過渡； 墻體內(nèi)壁光潔、不吸附、耐腐蝕、易清洗消毒；地面材料應(yīng)滿足無縫隙、無滲漏、光潔、耐 腐蝕的要求。 PCR實(shí)驗(yàn)室主要設(shè)備 試劑準(zhǔn)備區(qū) 儀器設(shè)備主要有冰箱、超凈臺(tái)

8、、加樣器、混勻器、天平和離心機(jī)等，加樣器、天平除了 要專用外，還應(yīng)有定期校準(zhǔn)。試劑分裝應(yīng)在超凈臺(tái)中進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)混合液應(yīng)使用分子生 物學(xué)級(jí)的，試劑制備好后應(yīng)有質(zhì)檢：一是否有污染、二是檢測試劑的擴(kuò)增效果。 標(biāo)本制備區(qū) 儀器設(shè)備主要有生物安全柜、加樣器、離心機(jī)、溫育儀、混勻器等 擴(kuò)增區(qū) 擴(kuò)增區(qū)的主要儀器是核酸擴(kuò)增儀、超凈臺(tái)、微量加樣器、離心機(jī)、可移動(dòng)紫外燈。擴(kuò)增 儀需進(jìn)行校準(zhǔn)。并配備 UPS電源，以防止由于電壓的波動(dòng)，停電對(duì)擴(kuò)增效果的影響。 分析區(qū) 本區(qū)所使用的儀器設(shè)備有酶標(biāo)儀、洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等潔凈實(shí)驗(yàn)區(qū)的緩沖間部 分面積不能超過主實(shí)驗(yàn)室的八分之一，這是有規(guī)定的。 一些瑣碎的、不可忽略的實(shí)驗(yàn)

9、室設(shè)計(jì) 1. 實(shí)驗(yàn)室空調(diào)通風(fēng)系統(tǒng)設(shè)計(jì)及壓力控制 PCR實(shí)驗(yàn)室并沒有嚴(yán)格的凈化要求，但是為避免各個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)域間交叉污染的可能性， 宜采用全送全排的氣流組織形式。同時(shí)，要嚴(yán)格控制送、排風(fēng)的比例以保證各實(shí)驗(yàn)區(qū)的壓力 要求。 2. 污染的預(yù)防與控制 PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的核心問題是如何避免污染。在實(shí)際工作中，常見的有以下幾種污染 類型：擴(kuò)增產(chǎn)物的污染；天然基因組DNA的污染；試劑的污染以及標(biāo)本間的污染。由于一 旦發(fā)生污染，實(shí)驗(yàn)就必須停止，直到找到污染源為止，而且實(shí)驗(yàn)結(jié)果必須作廢，需重新進(jìn)行 實(shí)驗(yàn)。所以發(fā)生污染后再圍繞實(shí)驗(yàn)室來尋找污染源不但耗時(shí)而且繁瑣，浪費(fèi)人力物力。因此 要避免污染，首先應(yīng)是預(yù)防，而不是排除

10、。 PCR實(shí)驗(yàn)室不可缺少的嚴(yán)格管理 （1）嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室的人員。與實(shí)驗(yàn)無關(guān)的人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室，有條件的 情況下要設(shè)置獨(dú)立的通道和進(jìn)出整個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)的門； （2）盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性。 （3）擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)是最主要的擴(kuò)增產(chǎn)物污染來源，廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒，必須 經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉，用過的吸頭等一次性材料也應(yīng)經(jīng)消毒液浸泡 消毒后統(tǒng)一處理，如焚燒等； (4 )擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)可能會(huì)用到某些可致基因突變和有毒物質(zhì)，應(yīng)特別注意實(shí)驗(yàn)人員 的安全防護(hù)。完備的實(shí)驗(yàn)室配套設(shè)施是保證實(shí)驗(yàn)工作的必要條件，應(yīng)根據(jù)各個(gè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)內(nèi) 容的不同配備相應(yīng)的設(shè)備和儀器，如超凈工作臺(tái)、離心機(jī)、加樣器等。 西安博爾實(shí)驗(yàn)室承接各類實(shí)驗(yàn)室整體建設(shè)，15年實(shí)驗(yàn)室行業(yè)解決方案經(jīng)驗(yàn)，做過上百 個(gè)行業(yè)的實(shí)驗(yàn)室建設(shè)：化學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)物理實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)研發(fā)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)PCR實(shí)驗(yàn)室 設(shè)計(jì)微生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì) BSL-2實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)分子生 物實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)食品檢測實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)藥品檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)動(dòng)物房實(shí) 驗(yàn)室設(shè)