正交實驗法改進廣西莪術醋制炮制工藝的初探

1、DOC格式論文，方便您的復制修改刪減正交實驗法改進廣西莪術醋制炮制工藝的初探(作者：單位：郵編：)【摘要】目的探討醋制廣西莪術的最佳炮制工藝條件。方法選擇醋制的米醋用量、醋制溫度、醋制加熱時間3個因素，每個因 素3個水平，按照L9(34)正交實驗表安排實驗，并提取出莪術各醋 制品中的有效成分揮發(fā)油和總姜黃素，分別對其含量進行測定，以對莪術飲片的醋制工藝進行優(yōu)選。結果較佳的工藝條件是A3B2C1，即 用20 ml米醋悶潤2 h后，控制溫度60 C烘制30 min。結論米醋用 量、烘制溫度、烘制時間均使莪術飲片質量產(chǎn)生變化?！娟P鍵詞】廣西莪術；正交實驗法；醋制；揮發(fā)油；姜黃素Abstract:Ob

2、jectiveTo optimize the processing technique of Rhizoma Curcumae fromGuan gxi.MethodsL9(34)orthog onalexperimental design table was adopted with 3 factors(dosage of vinegar, pocessing temperature, pocessing time)and 3 levels,and the contents of volatile oil and curcumin in different processedRhizoma

3、Curcumae from Guangxi were determined.ResultsThe optimal processed technique was A3B2C1 , namely, the sample was soaked with rice vinegar 20 ml, moisted for 80min,then dried at 90 C for 30min.Con clusi on The dosage of rice vin egar,process ing time ,process ing temperature are the mai n factors whi

4、ch affect the quality of processed Rhizoma OCurcumae from Guan gxi.Key words:Rhizoma Curcumae from Guangxi; Orthogonal desig n; Vi negar-porcess; Volatile oil; Curcumin廣西莪術即桂莪術為 Curcuma kwangsiensis S.G. LeeetC. F.Liang的塊根與根莖，其性味辛、苦、溫，歸肝、脾經(jīng)，具行氣破血、 消積止痛功效1，主要有效成分為揮發(fā)油和姜黃素，以桉油精、樟腦、 異龍腦、B-欖香烯、莪術烯、吉馬酮、a

5、-松油醇等含量為高，尚有姜 黃素(curcumin, I)、脫甲氧基姜黃素(demethoxycurcumin, II)和雙脫 甲氧基姜黃素(bisdemethoxycurcumin, III)等成分2。莪術炮制已有 數(shù)千年的歷史，目前莪術的炮制方法主要有潤切、蒸切、醋浸、醋炒、 醋煮等方法3，廣西主要為醋煮4,中國藥典2005年版收載為蒸 切、醋煮法。已知傳統(tǒng)不同炮制方法是莪術飲片中揮發(fā)油和姜黃素含 量以及莪術的藥理活性的重要影響因素5,6。本實驗選擇醋制的米醋 用量、醋制溫度、醋制加熱時間3個因素，每個因素3個水平，按照 L9(34)正交實驗表安排實驗，并提取出莪術各醋制品中的有效成分揮

6、發(fā)油和總姜黃素，分別對其含量進行測定，對莪術飲片的醋制工藝進 行優(yōu)選。1儀器及材料揮發(fā)油提取器；BP211D電子分析天平（德國賽多利 斯）;KQ-500E型醫(yī)用超聲清洗器（昆山超聲儀器有限公司）；UV分光光 度計（上海第三分析儀器廠）；姜黃素對照品由中國藥品生物制品檢定 所提供（批號為0823-9802）。實驗所用莪術藥材購于廣西靈山縣，經(jīng) 廣西中醫(yī)學院韋松基教授鑒定為姜科植物廣西莪術（桂莪 術）Curcuma kwan gsie nsis S.G. LeeetC. F. Lia ng的根莖;其余所用試劑均為分析純。2方法2.1對照用炮制品制備2.1.1生莪術取原藥材，除凈雜質，大小分檔，浸泡

7、 4 h，撈出 吸潤約23 d，吸潤時至透心為度，切成厚約 3 mm的薄片，曬干 即可7。2.1.2醋煮莪術取原藥材，除去雜質，大小分檔，略泡，洗凈 后置鍋內，用醋與適量熱水浸沒，用微火加熱煮，不斷翻動，煮至醋 吸盡透心，取出切中片，干燥，篩去灰屑。莪術每100 kg，用米醋20 kg4。2.1.3醋炙莪術取莪術片，加入定量醋拌勻，稍悶透，待醋被 吸盡后，置炒制容器后，用文火加熱，炒至微黃色，略帶焦斑時，取 出放涼，篩去碎屑。莪術每100 kg，用米醋20 kg8。2.1.4醋炒莪術取莪術片，放入熱鍋內拌炒，每100 kg用醋10 kg，兌水適量，用武火邊炒邊灑，炒至醋水吸干，呈黃褐色，取出晾

8、 干即可5。2.1.5醋拌莪術取原藥材，除雜，淋醋拌透，約1 d,至醋被吸 盡，切片曬干。每100 kg莪術用醋25 kg8。2.1.6酒制莪術取莪術片，用微火加熱，炒熱后，均勻噴入酒， 繼續(xù)炒干，取出晾涼。莪術每100 kg，用米醋12 kg9。2.2正交試驗樣品的制備根據(jù)莪術揮發(fā)油和姜黃素的理化特性 和文獻資料5,6，以揮發(fā)油和姜黃素的含量為目標，選擇米醋用量、 加熱時間、加熱溫度3個因素，每個因素3個水平，按照L9（34）正 交實驗表安排實驗，見表1。挑揀形狀比較均勻，顏色比較鮮艷的凈 莪術根部飲片100 g 9份，加米醋（0，10，20 ml），拌勻，常溫下悶 潤2 h，待醋被飲片吸干

9、之后，分別放置于（60，80，100 C ）于干燥 箱中加熱一段時間（5，15，30 min）取出，后于鼓風燥箱中鼓風干燥， 溫度為室溫35 C，粉碎過65目篩，最后保存于硅膠 G干燥皿中1 個月。2.3實驗樣品中揮發(fā)油測定根據(jù) 2005年版中國藥典I部附 錄XD揮發(fā)油測定甲法測定，讀取揮發(fā)油量，并計算藥材的出油率。 結果見表24。2.4總姜黃素含量測定102.4.1樣品制備各取100 g正交實驗樣品中不同的莪術炮制品， 以15倍量的水提取兩次,1.5 h/次,合并兩次藥液，于水浴鍋上濃縮得 莪術干膏;精密稱定所得干膏適量，置離心管中,加入30 ml石油醚超聲 脫脂,棄去石油醚液，加入95%乙

10、醇20 ml,超聲提取2次海次30 min, 提取液濾過，定容至50 ml。表1正交實驗因素水平表2正交實驗樣 品中揮發(fā)油和總姜黃素的含量測定結果242標準曲線繪制精密稱取姜黃素對照品適量，加乙醇溶解使 濃度為1.064 mg ml-1。精密吸取對照品溶液10,20,30,40,50山加乙 醇稀釋至10 ml搖勻，在426 nm波長處測定吸收度，得回歸方 程:Y=0.144 6X+0.016 9,r=0.999?？偨S素濃度在 1.064 5.32 卩 g ml-1范圍內與吸收度呈良好的線性關系。將正交實驗各稠膏樣品依法提取、測定，計算含量。2.4.3穩(wěn)定性實驗取對照品溶液和莪術供試樣品液，間

11、隔15min測定吸收度，結果表明在 2 h內吸收度穩(wěn)定，RSD分別為 1.35%(n=9)和 1.27%(n=9)。2.4.4精密度考察取同一莪術樣品液，進行精密度測定，結果RSD 為 1.82%(n=5)。2.4.5重復性考察取同一批莪術樣品稠膏，重復提取測定5次, 結果RSD為1.56%。2.4.6加樣回收率測定精密稱取姜黃素對照品加入到已知含量 的莪術稠膏中，依法提取測定，計算加樣回收率。結果顯示，平均回收率 為 98.63%,RSD 為 2.19%(n二5)。3結果1號至8號實驗方案所得飲片的揮發(fā)油含量和姜黃素含量測定結果如表2所示。方差分析如表3所示。表3方差分析4討論實驗結果表明：

12、對揮發(fā)油，A :1平均皿平均，表明條件比A2 , A3好。同理，B2和C1條件較好;從極差看出，因素B的極 差最大，是影響揮發(fā)油含量變化的主要因素，其次是 C，A因素影響 沒有統(tǒng)計學意義。在本實驗中，不考慮交互作用的影響，把各主要因 素的最優(yōu)水平組合起來，得到較佳工藝條件是 A1B2C1。對姜黃素， A因素A3是影響姜黃素含量變化的主要因素，其次是 C，B因素的 影響沒有統(tǒng)計學意義，A3-和C3為較佳工藝條件。表4廣西莪術不同炮制品揮發(fā)油得率本文旨在初探醋制莪術的最佳工藝，從莪術藥理活性姜黃素和 揮發(fā)油成分的理化性質出發(fā)和以姜黃素和揮發(fā)油為目標選擇了4個因素3個水平，試驗結果表明，加熱處理過程

13、中，部分揮發(fā)油受熱易 揮發(fā)，過長時間過高溫度可造成其含量下降， 但是較短的加熱時間較 低的溫度又不能使米醋更好地滲入藥材細胞內，影響莪術飲片姜黃素 有效成分的溶出；因此控制飲片炮制時受熱程度以及加入足量米醋時 保證莪術飲片質量的主要因素，以試驗結果和方差分析為依據(jù)，對各 個樣品進行綜合評分，確定最佳工藝為 A3B2C1，即8號實驗設計; 本正交設計中溫度因素60 C，100 C水平分別為太陽曝曬干燥飲片和 水煎莪術的模擬條件，目的考察這兩個因素對莪術飲片質量的影響。 但是何為最佳的炮制工藝標準還有待進一步深入研究，包括對本實驗 進行藥理研究。正交設計試驗8號方案工藝炮制的莪術飲片中揮發(fā)油和姜黃

14、素 含量與傳統(tǒng)各種炮制規(guī)格莪術飲片揮發(fā)油和姜黃素含量比較都具有 統(tǒng)計學差異，8號方案工藝炮制的莪術飲片中揮發(fā)油和姜黃素含量比傳統(tǒng)各種炮制規(guī)格莪術飲片揮發(fā)油和姜黃素含量高，而且所采用的米醋用量、溫度和加熱時間因素和水平范圍沒有超越各種傳統(tǒng)炮制方 法，因此這個莪術炮制的改進方案是可行的。【參考文獻】1 國家藥典委員會中國藥典，I部S.北京:化學工業(yè)出版社,2005:194.2 肖培根.新編中藥志，第1卷M.北京：化學工業(yè)出版社,2002:778.3 衛(wèi)生部中醫(yī)研究院中藥研究所.中藥炮炙經(jīng)驗集成M. 北京:人民衛(wèi)生出版社,1963:99.4 廣西壯族自治區(qū)衛(wèi)生廳.廣西中藥炮制規(guī)范S.北京：人民衛(wèi)生出版社，1997 : 115.5 魯漢蘭，彭智聰，劉勇，等.莪術炮制后對止痛及活血化瘀作用的影響J.中成藥，2000，22(2) : 136.6 陸兔林，楊光明，宋坤，等.氣質聯(lián)用法分析炮