CBL小鼠金紫菱PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1CBL小鼠金紫菱小鼠金紫菱二、基本特性二、基本特性品系名稱：品系名稱： C57BL/6類別：類別： 近交系小鼠近交系小鼠 毛色毛色 ： 黑色黑色 成熟期（雄性）：成熟期（雄性）： 8-10周周 成熟期（雌性）：成熟期（雌性）： 8-10周周 交配比例交配比例 ： 1:2 發(fā)情周期發(fā)情周期 ： 4-5天天 妊娠期妊娠期 ： 19-21天天 平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第一胎）：平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第一胎）： 6只只 平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第二胎）：平均每窩產(chǎn)仔數(shù)（第二胎）：7只只 哺乳期哺乳期: 21天天 平均日飼料消耗量平均日飼料消耗量: 5g/8周齡周齡 平均日飲水消耗量平均日飲水消耗量: 6-7ml/8

2、周齡周齡 第1頁/共10頁三、飼養(yǎng)條件三、飼養(yǎng)條件1.溫度：溫度：2026。2.濕度：濕度：4070。3.光照：光照：12小時(shí)亮小時(shí)亮12小時(shí)暗。小時(shí)暗。4.飼育盒更換頻度：飼育盒更換頻度：配種鼠：每周配種鼠：每周1次。次。帶仔鼠：每周帶仔鼠：每周1-2次。次。離乳鼠：每周離乳鼠：每周1-2次。次。5.水瓶更換頻度：每周水瓶更換頻度：每周1-2次次 第2頁/共10頁四、主要特性四、主要特性、乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，化學(xué)物質(zhì)、乳腺腫瘤自然發(fā)生率低，化學(xué)物質(zhì)難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。難以誘發(fā)乳腺和卵巢腫瘤。、有眼部缺陷；雌仔鼠、有眼部缺陷；雌仔鼠. .，雄仔鼠為小眼或無眼。，雄仔鼠為小眼或無眼。用可的

3、松可誘發(fā)腭裂，其發(fā)生率達(dá)用可的松可誘發(fā)腭裂，其發(fā)生率達(dá)。、對放射物質(zhì)耐受力中等；補(bǔ)體活性、對放射物質(zhì)耐受力中等；補(bǔ)體活性高；較易誘發(fā)免疫耐受性。高；較易誘發(fā)免疫耐受性。、對結(jié)核桿菌敏感。對鼠痘病毒有一、對結(jié)核桿菌敏感。對鼠痘病毒有一定抵抗力。定抵抗力。、干擾素產(chǎn)量較高。、干擾素產(chǎn)量較高。、嗜酒精性高，腎上腺素類脂質(zhì)濃度、嗜酒精性高，腎上腺素類脂質(zhì)濃度低。對百日咳組織胺易感因子敏感。低。對百日咳組織胺易感因子敏感。第3頁/共10頁五、主要用途五、主要用途是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)研究中常用的品系。遺傳學(xué)研究中常用的品系。與其他品系相較，與其他品系相較，C57BL/

4、6C57BL/6最最適合動(dòng)脈粥狀硬化傷害的研究適合動(dòng)脈粥狀硬化傷害的研究。 第4頁/共10頁六、六、C57BLC57BL6 6小鼠小鼠CIACIA模型模型的建立的建立目的：建立穩(wěn)定的目的：建立穩(wěn)定的C57BLC57BL6 6小鼠膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)小鼠膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎炎(CIA)(CIA)模型，構(gòu)建進(jìn)一步進(jìn)行類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎模型，構(gòu)建進(jìn)一步進(jìn)行類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)(RA)發(fā)病機(jī)制及治療研究的體系。發(fā)病機(jī)制及治療研究的體系。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：近交系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：近交系C57BLC57BL6(H-2 )6(H-2 )小鼠小鼠4040只，只，雄性，雄性，4 45 5周齡，體重周齡，體重151500+000+032g32g。三

5、級(jí)環(huán)境實(shí)驗(yàn)觀察。三級(jí)環(huán)境實(shí)驗(yàn)觀察。隨機(jī)配對分為隨機(jī)配對分為CIACIA模型組模型組2020只，對照組只，對照組2020只。只。第5頁/共10頁主要試劑與器材主要試劑與器材 ：雞：雞型膠原蛋白、弗氏完全佐劑型膠原蛋白、弗氏完全佐劑(complete Freund s adjuvant(complete Freund s adjuvant，CFA)CFA)購自美國購自美國ChondrexChondrex公司；公司；抗小鼠抗小鼠CD4-PECD4-PECY5CY5、IFN-IFN-FITC-FITC、IL-4IL-4一一PEPE及同及同型對照抗體均購自美國型對照抗體均購自美國BiolegendBio

6、legend公司；佛波酯公司；佛波酯(PMA)(PMA)、離子菌素、離子菌素(Ionomycin)(Ionomycin)、莫能菌素、莫能菌素(Monensin)(Monensin)購自美國購自美國SigmaSigma公司。公司。勻漿器為德國勻漿器為德國IKAIKA公司產(chǎn)品；公司產(chǎn)品；流式細(xì)胞儀為美國流式細(xì)胞儀為美國BDBD公司產(chǎn)品。公司產(chǎn)品。第6頁/共10頁模型建立方法模型建立方法 ：雞雞型膠原蛋白型膠原蛋白溶解于溶解于0 005mol05molL L冰醋酸冰醋酸中，濃度為中，濃度為2mg2mgmlml，將溶解的膠原與，將溶解的膠原與CIACIA等體積混合，等體積混合，冰浴中使用勻漿器充分乳化

7、。冰浴中使用勻漿器充分乳化。免疫動(dòng)物時(shí)，在小鼠尾根部多點(diǎn)皮內(nèi)注射免疫動(dòng)物時(shí)，在小鼠尾根部多點(diǎn)皮內(nèi)注射0 01ml1ml乳劑乳劑( (含含100mg100mg雞雞型膠原蛋白型膠原蛋白和和200mg200mg結(jié)核分支桿菌結(jié)核分支桿菌) )?；A(chǔ)免疫后第?；A(chǔ)免疫后第2121天以同樣方法重復(fù)，避開初次免疫部位，進(jìn)行加強(qiáng)免疫。天以同樣方法重復(fù)，避開初次免疫部位，進(jìn)行加強(qiáng)免疫。同時(shí)，對照組用同時(shí)，對照組用CFACFA與與0 005mol05molL L冰醋酸等體積充分乳化后冰醋酸等體積充分乳化后按上述方法進(jìn)行免疫及按上述方法進(jìn)行免疫及2121天加強(qiáng)免疫。天加強(qiáng)免疫。關(guān)節(jié)和關(guān)節(jié)外病變觀察及關(guān)節(jié)炎評(píng)分關(guān)節(jié)和

8、關(guān)節(jié)外病變觀察及關(guān)節(jié)炎評(píng)分: :各關(guān)節(jié)病變程度按各關(guān)節(jié)病變程度按5 5級(jí)評(píng)分法級(jí)評(píng)分法 “ “0”0”：無紅腫；：無紅腫；“1”1”：關(guān)節(jié)：關(guān)節(jié)紅不腫；紅不腫；“2”2”：關(guān)節(jié)輕度紅腫；：關(guān)節(jié)輕度紅腫；“3”3”：關(guān)節(jié)中度紅腫；：關(guān)節(jié)中度紅腫；“4”4”：關(guān)節(jié)重度紅腫伴功能障礙。：關(guān)節(jié)重度紅腫伴功能障礙。關(guān)節(jié)炎分?jǐn)?shù)關(guān)節(jié)炎分?jǐn)?shù)(arthritis score(arthritis score，AS)AS)為每只小鼠所有病變關(guān)為每只小鼠所有病變關(guān)節(jié)分?jǐn)?shù)的總和，最高分為節(jié)分?jǐn)?shù)的總和，最高分為1616分。各劑量組所有小鼠關(guān)節(jié)炎分分。各劑量組所有小鼠關(guān)節(jié)炎分?jǐn)?shù)之總和除以該組小鼠的只數(shù)，即為該組平均關(guān)節(jié)炎指

9、數(shù)數(shù)之總和除以該組小鼠的只數(shù)，即為該組平均關(guān)節(jié)炎指數(shù)(mean arthritic index(mean arthritic index，MAI)MAI)第7頁/共10頁結(jié)果：對照組小鼠均未發(fā)病。結(jié)果：對照組小鼠均未發(fā)病。 模型組小鼠在模型組小鼠在5O5O天的發(fā)病率達(dá)天的發(fā)病率達(dá)7O%7O%，關(guān)節(jié)炎評(píng)，關(guān)節(jié)炎評(píng)分在分在3 38 8分，持續(xù)時(shí)間大約分，持續(xù)時(shí)間大約100100天；天；病理切片顯示典型的炎性細(xì)胞浸潤，滑膜增生，軟骨病理切片顯示典型的炎性細(xì)胞浸潤，滑膜增生，軟骨及軟骨下骨破壞；外周血及軟骨下骨破壞；外周血Th1Th1Th2Th2比值升高。比值升高。結(jié)論：結(jié)論： 應(yīng)用應(yīng)用型膠原能在型膠

10、原能在C57BLC57BL6 6小鼠上成功建立小鼠上成功建立CIACIA模型，該模型是進(jìn)行模型，該模型是進(jìn)行RARA研究的良好動(dòng)物模型。研究的良好動(dòng)物模型。膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎(collagen induced arthritis(collagen induced arthritis，CIA)CIA)模型是一種免疫炎癥模型，模型是一種免疫炎癥模型，CIACIA的特征是多發(fā)性的特征是多發(fā)性關(guān)節(jié)炎，發(fā)病機(jī)制和病理特征與人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)炎，發(fā)病機(jī)制和病理特征與人類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(rheumatoid arthritis(rheumatoid arthritis，RA)RA)類似。類似。第8頁/共10頁意義意義：CIACIA的建立極大地推進(jìn)了的建立極大地推進(jìn)了RARA發(fā)病機(jī)發(fā)病機(jī)制、治療等方面的研究。目前對制、治療等方面的研究。目前對RARA發(fā)