實(shí)驗(yàn)二福醫(yī)大紅細(xì)胞計(jì)數(shù)

1、實(shí)驗(yàn)二實(shí)驗(yàn)二 改良牛鮑計(jì)數(shù)板使用、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)改良牛鮑計(jì)數(shù)板使用、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)目的要求：目的要求：1.掌握改良牛鮑計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法2.掌握手工顯微鏡紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的方法。（一）改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法（一）改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法 臨指導(dǎo)臨指導(dǎo)p7 1. 改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)（見(jiàn)圖）2. 改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的使用方法1)準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板：準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板：用綢布擦拭，“推壓”法加蓋玻片2)稀釋的血液：稀釋的血液：準(zhǔn)確吸取稀釋液和血液，立即混勻。3)充池充池：充池前充分混勻稀釋液，充池要一次性完成，充液不能過(guò)多、過(guò)少、有氣泡、斷續(xù)充液、充池后移動(dòng)蓋玻片。4)靜置靜置2-3min，待細(xì)胞下沉。

2、5)顯微鏡計(jì)數(shù)顯微鏡計(jì)數(shù)：小心移動(dòng)；手和顯微鏡鏡頭不能 碰到蓋玻片。6)計(jì)數(shù)原則計(jì)數(shù)原則：逐格計(jì)數(shù)； 按一定方向進(jìn)行計(jì)數(shù)； 對(duì)壓線細(xì)胞遵循“數(shù)上不數(shù)下，數(shù) 左不數(shù)右”的原則。（一）改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法（一）改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)和使用方法 1.保證所用器材清潔，勿用手觸膜。2. )充池充池：充池前充分混勻稀釋液，一次性完成，充液不能過(guò)多、過(guò)少、有氣泡、斷續(xù)充液。3.充池后移動(dòng)蓋玻片。4.計(jì)數(shù)池使用后用蒸餾水沖，紗布輕試，切不可用粗糙織物擦試，以免磨損刻度。3.改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板使用注意事項(xiàng)改良牛鮑氏計(jì)數(shù)板使用注意事項(xiàng) （二）（二） 紅細(xì)胞計(jì)數(shù)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)p141原理原理 用紅細(xì)胞等滲稀

3、釋液用紅細(xì)胞等滲稀釋液(2.0ml)將血液將血液(10l)稀稀釋一定倍數(shù)，滴入計(jì)數(shù)池，于高倍鏡下計(jì)數(shù)一定范釋一定倍數(shù)，滴入計(jì)數(shù)池，于高倍鏡下計(jì)數(shù)一定范圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，再換算成每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。圍內(nèi)的紅細(xì)胞數(shù)，再換算成每升血液中的紅細(xì)胞數(shù)。2.紅細(xì)胞稀釋液紅細(xì)胞稀釋液（1）hayem（赫姆氏液）即傳統(tǒng)的紅細(xì)胞稀釋液 成分及作用： 氯化鈉：調(diào)節(jié)滲透壓至等滲 硫酸鈉：提高比密，防止細(xì)胞粘連 氯化高汞：防腐劑 缺點(diǎn)：遇高球蛋白血癥患者，球蛋白沉淀使紅細(xì)胞 容易凝結(jié)。（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)-2.紅細(xì)胞稀釋液紅細(xì)胞稀釋液（2）甲醛枸櫞酸鹽成分及作用：枸櫞酸鈉

4、：抗凝、保持等滲 甲醛：防腐、固定紅細(xì)胞優(yōu)點(diǎn)：配制簡(jiǎn)單、紅細(xì)胞不凝集，可保持紅細(xì)胞正常的 圓盤(pán)狀數(shù)小時(shí)，目前應(yīng)用廣泛。 (3)不含甲醛的枸櫞酸鹽： 成分及作用：31.3g/l的枸櫞酸鈉。 優(yōu)點(diǎn)：遇自身凝集素增高者，可使凝集的紅細(xì)胞分散并照常計(jì)數(shù)。 （4）急診時(shí)可用生理鹽水或含1%甲醛的生理鹽水作為紅細(xì)胞稀釋液。 （二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)-2.紅細(xì)胞稀釋液紅細(xì)胞稀釋液3.操作步驟操作步驟 （1）準(zhǔn)備稀釋液：加紅細(xì)胞稀釋液(赫姆氏液)2.0ml于試管中。 （2）采血：10 l至稀釋液中，立即混勻。 （3）準(zhǔn)備計(jì)數(shù)板、混勻稀釋液、充池、靜置2-3min。 （4）顯微鏡計(jì)數(shù)：高倍鏡下計(jì)數(shù)中間大方格內(nèi)四角及中央的5個(gè)中方格內(nèi)的紅細(xì)胞總數(shù)。 （二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)4計(jì)算計(jì)算 紅細(xì)胞數(shù)/l =n25/510106200=n1010=n/1001012參考值：參考值： 成年男性：4.05.5 * 1012/l； 成年女性：3.55.0 * 1012/l； 初生兒: 6.07.0* 1012/l（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù)（二）紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 5注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：（1）同白細(xì)胞計(jì)數(shù)（2）紅細(xì)胞在計(jì)數(shù)