滬科版生物高中第二冊(cè)6.3《基因工程與轉(zhuǎn)基因生物》課件(共26張PPT)

1、微生物基因工程植物基因工程動(dòng)物基因工程基因治療轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的安全性磷磷酸酸二二酯酯鍵鍵目的基因目的基因切口切口切口切口EcoRIEcoRI例1、下面是4種限制性內(nèi)切酶對(duì)DNA分子的識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)圖（表示剪切點(diǎn)、切出的斷面為黏性末端），寫出酶切后產(chǎn)生的結(jié)果：限制酶1GATC限制酶2CATG限制酶3GGATCC限制酶4CCCGGGCATGCTAGCCTAG GGGGCCCCCCGGG例2、用限制酶EcoR、Mbo單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的DNA片段長(zhǎng)度如下圖(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))，請(qǐng)?jiān)谙聢D中畫出質(zhì)粒上EcoR、Mbo的切割位點(diǎn)。先嘗試先嘗試再驗(yàn)算再驗(yàn)算連接的部位：連接的部位：磷酸二酯

2、鍵磷酸二酯鍵相同相同DNADNA連接酶連接酶的作用示意圖的作用示意圖DNADNA聚合酶聚合酶的作用示意圖的作用示意圖在兩個(gè)在兩個(gè)DNADNA片段之片段之間形成磷酸二酯鍵間形成磷酸二酯鍵將單個(gè)脫氧核苷酸加將單個(gè)脫氧核苷酸加到已存在的核酸片段到已存在的核酸片段上形成磷酸二酯鍵上形成磷酸二酯鍵質(zhì)粒質(zhì)粒EcoR酶酶EcoR酶酶 DNA連接酶連接酶重組質(zhì)粒重組質(zhì)粒質(zhì)粒自連質(zhì)粒自連目的基因自連目的基因自連AATTCAATTC G G目的基因目的基因AATTCAATTC G GG GCTTAACTTAAG GCTTAACTTAAGAATTCGAATTCCTTAAGCTTAAGGAATTCGAATTCCTTA

3、AGCTTAAG思考：形成的重組思考：形成的重組DNADNA分子過程中，質(zhì)粒與目的基分子過程中，質(zhì)粒與目的基因連接形成的產(chǎn)物有哪些種類？因連接形成的產(chǎn)物有哪些種類？ 酶切方法酶切方法：?jiǎn)蚊盖泻碗p酶切單酶切和雙酶切 雙酶切雙酶切法優(yōu)點(diǎn)法優(yōu)點(diǎn)：例3、如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物，生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖，其中Pst、Sma、EcoR、Apa為四種限制性核酸內(nèi)切酶，下列說法正確的是 ()A要用Pst限制酶切割含抗原基因的DNA、質(zhì)粒B要用Sma限制酶切割含抗原基因的DNA、質(zhì)粒C要用Pst和EcoR這兩種限制酶分別去切割含抗原基因的DNA、質(zhì)粒D要用Pst和EcoR這兩種限制酶去切割含

4、抗原基因的DNA、用EcoR限制酶去切割質(zhì)粒1 1、作為作為運(yùn)運(yùn)載體須具備的條件：載體須具備的條件： 能夠在宿主細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定地保存； 具有限制酶切點(diǎn)，以便與外源基因連接； 具有合適的選擇標(biāo)記（標(biāo)記基因，如抗生素的抗性基因）便于重組DNA的鑒定篩選。2 2、類別、類別： 質(zhì)粒（常用）、病毒等21當(dāng)帶有抗生素抗性基因的載體進(jìn)入受體菌后，受體菌才能生長(zhǎng)。不帶有抗生素抗性基因的受體菌不能在含含有抗生素的培養(yǎng)基有抗生素的培養(yǎng)基（選擇培養(yǎng)基）中生長(zhǎng)?？股剡x擇原理活死抗性基因抗生素?zé)o抗性基因標(biāo)記基因，可用含特標(biāo)記基因，可用含特定抗生素的培養(yǎng)基鑒定抗生素的培養(yǎng)基鑒定篩選定篩選特定限制酶特定限制酶的切割位

5、點(diǎn)的切割位點(diǎn)例1、下面是5種限制性內(nèi)切酶對(duì)DNA分子的識(shí)別序列和剪切位點(diǎn)圖（表示剪切點(diǎn)、切出的斷面為黏性末端）：限制酶1：GATC；限制酶2：CATG；限制酶3：GGATCC；限制酶4：CCGCGG；限制酶5：CCAGG。請(qǐng)指出下列哪組表達(dá)正確 （ ） A限制酶2和4識(shí)別的序列都包含4個(gè)堿基對(duì) B限制酶3和5識(shí)別的序列都包含5個(gè)堿基對(duì) C限制酶1和3剪出的黏性末端相同 D限制酶1和2剪出的黏性末端相同例4基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，便于重組和篩選。已知限制酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GGATCC，限制酶的識(shí)別序列和切點(diǎn)是GATC。根據(jù)圖示,判斷下列操作正確的是 ( ) A質(zhì)粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割B質(zhì)粒用限制酶切割，目的基因用限制酶切割C目的基因和質(zhì)粒均用限制酶切割D目的基因和質(zhì)粒均用限制酶切割例3、如圖是利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因植物，生產(chǎn)可食用疫苗的部分過程示意圖，其中Pst、Sma、EcoR、Apa為四種限制性核酸內(nèi)切酶，Sma的識(shí)別序列和切點(diǎn)是CCCGGG。下列說法錯(cuò)誤的是()A圖中質(zhì)粒分子經(jīng)Sma切割前后，分別含有0、2個(gè)游離的磷酸基團(tuán)B要用Pst和EcoR這兩種限制酶分別去切割含抗原基因的DNA、質(zhì)粒C對(duì)圖