蓄積毒性試驗課件

1、蓄積毒性試驗蓄積毒性試驗導讀導讀一、前言及基本概念一、前言及基本概念三、研究的重點及難點三、研究的重點及難點二、蓄積毒性試驗設計二、蓄積毒性試驗設計四、本實驗的進度安排四、本實驗的進度安排蓄積毒性試驗一、前言及基本概念一、前言及基本概念 前言前言 隨著人類社會科技水平的不斷發(fā)展，各種化學品開始隨著人類社會科技水平的不斷發(fā)展，各種化學品開始進入交易市場，多種有害物質及危險因素開始進入環(huán)境，進入交易市場，多種有害物質及危險因素開始進入環(huán)境，對人類及其他生物形成潛在威脅甚至危害，對各種化學品對人類及其他生物形成潛在威脅甚至危害，對各種化學品的毒性分析已刻不容緩。但常規(guī)物理和化學檢測只能測定的毒性分析

2、已刻不容緩。但常規(guī)物理和化學檢測只能測定污染物的濃度，但不能測定污染物對生物的影響，例如，污染物的濃度，但不能測定污染物對生物的影響，例如，污染物的毒性強弱。我國還沒有標準化的實驗魚類。紅鯽污染物的毒性強弱。我國還沒有標準化的實驗魚類。紅鯽是我國長江流域的小型鯉科魚類，作為實驗動物具有許多是我國長江流域的小型鯉科魚類，作為實驗動物具有許多獨特的優(yōu)點，尤其是對毒性物質特別敏感，是急性毒性試獨特的優(yōu)點，尤其是對毒性物質特別敏感，是急性毒性試驗、亞慢性毒性試驗、慢性毒性試驗、毒性蓄積試驗、致驗、亞慢性毒性試驗、慢性毒性試驗、毒性蓄積試驗、致突變、致畸、致癌試驗的首選實驗動物。突變、致畸、致癌試驗的首

3、選實驗動物。蓄積毒性試驗 本畢業(yè)論文的實驗研究本畢業(yè)論文的實驗研究- -蓄積毒性作用是評估環(huán)境污蓄積毒性作用是評估環(huán)境污染毒性作用的指標之一，也是制定其在環(huán)境中的衛(wèi)生標準染毒性作用的指標之一，也是制定其在環(huán)境中的衛(wèi)生標準的重要參考依據(jù)。因此，闡明外來化合物有無蓄積作用及的重要參考依據(jù)。因此，闡明外來化合物有無蓄積作用及其程度具有重要意義。另外，也可為實驗紅鯽的標準化提其程度具有重要意義。另外，也可為實驗紅鯽的標準化提供依據(jù)，以填補我國標準化實驗魚類空白。供依據(jù)，以填補我國標準化實驗魚類空白。蓄積毒性試驗 蓄積毒性試驗是評價外來化合物蓄積毒蓄積毒性試驗是評價外來化合物蓄積毒性的實驗方法。對實驗動

4、物給予低于中毒閾性的實驗方法。對實驗動物給予低于中毒閾劑量的外來化合物，反復多次的與機體進行劑量的外來化合物，反復多次的與機體進行接觸，經(jīng)一定時間后使機體出現(xiàn)明顯的中毒接觸，經(jīng)一定時間后使機體出現(xiàn)明顯的中毒表現(xiàn)，稱為蓄積毒性作用。這是由于受試物表現(xiàn)，稱為蓄積毒性作用。這是由于受試物進入機體的速度大于消除的速度。使受試物進入機體的速度大于消除的速度。使受試物不斷蓄積，達到了使機體發(fā)生毒性反應的閾不斷蓄積，達到了使機體發(fā)生毒性反應的閾劑量所致。劑量所致。 生物半衰期長的化學毒物，其蓄積性較生物半衰期長的化學毒物，其蓄積性較大大 化學毒物的蓄積包括兩個內(nèi)涵：物質蓄積化學毒物的蓄積包括兩個內(nèi)涵：物質蓄

5、積和功能蓄積兩個相對的概念，同時存在、互和功能蓄積兩個相對的概念，同時存在、互為基礎，因為物質蓄積的情況下，肯定存在為基礎，因為物質蓄積的情況下，肯定存在機體一定結構和功能的改變，而功能改變的機體一定結構和功能的改變，而功能改變的積累也必須以物質積累為基礎。積累也必須以物質積累為基礎。 蓄積毒性試驗二二、蓄積毒性的實驗設計蓄積毒性的實驗設計 本次采用蓄積系數(shù)法本次采用蓄積系數(shù)法(Cumulative Coefficient Method)中的劑量定期遞增染毒法。中的劑量定期遞增染毒法。 蓄積系數(shù)是一種用來評價環(huán)境污染物蓄積作用的蓄積系數(shù)是一種用來評價環(huán)境污染物蓄積作用的方法。所謂蓄積系數(shù)方法。

6、所謂蓄積系數(shù)(Cumulative Coefficient)是是分次給受試動物后引起分次給受試動物后引起50%受試動物出現(xiàn)某種毒受試動物出現(xiàn)某種毒效應的總劑量，與一次給予受試動物后引起效應的總劑量，與一次給予受試動物后引起50%受試動物出現(xiàn)同一毒效應的劑量的比值，即受試動物出現(xiàn)同一毒效應的劑量的比值，即蓄積毒性試驗蓄積系數(shù)蓄積系數(shù) K=LD50（n）LD50（1）蓄積系數(shù)（蓄積系數(shù)（K）蓄積作用輕度蓄積作用輕度K11K 33K 5K5高度蓄積高度蓄積明顯蓄積明顯蓄積中毒蓄積中毒蓄積輕度蓄積輕度蓄積化學物蓄積作用分級化學物蓄積作用分級蓄積毒性試驗劑量遞增染毒法劑量遞增染毒法先測得半數(shù)致死劑量先測

7、得半數(shù)致死劑量LDLD5050染毒期限染毒期限14589121316172021242528每日染毒劑量每日染毒劑量（LD50）0.10.150.220.340.500.751.12每每4d染毒總劑量染毒總劑量（LD50）0.40.600.901.362.003.004.48累計染毒總劑量累計染毒總劑量（LD50）0.41.001.903.265.268.2612.74定期遞增染毒劑量定期遞增染毒劑量試驗魚試驗魚40尾，隨機分成尾，隨機分成2組組(1個試驗組和個試驗組和1個對照組個對照組)，每組，每組20尾，試驗尾，試驗組每天染毒組每天染毒1次，以次，以4 d為為1期，期，在同一周期中，每天劑

8、量相同，下一在同一周期中，每天劑量相同，下一周期為上一周期劑量的周期為上一周期劑量的1.5倍，第一周期為倍，第一周期為0.1LD50，直至半數(shù)死亡，直至半數(shù)死亡，計算總劑量即為計算總劑量即為LD50(n)。如果到。如果到28d，死亡動物任未足半數(shù)，可停止，死亡動物任未足半數(shù)，可停止試驗此時的試驗此時的K=12.8，可認為無蓄積性。，可認為無蓄積性?？梢杂糜诨瘖y品、消毒劑的評價?？梢杂糜诨瘖y品、消毒劑的評價。蓄積毒性試驗三三、蓄積、蓄積毒性實驗研究的重點及難點毒性實驗研究的重點及難點研究重點：觀察有毒物質在實驗紅鯽體內(nèi)蓄積對紅鯽產(chǎn)研究重點：觀察有毒物質在實驗紅鯽體內(nèi)蓄積對紅鯽產(chǎn)生的影響，生的影響

9、， 測定蓄積系數(shù)及評價測定蓄積系數(shù)及評價研究難點，研究難點，LDLD5050對某些化學物的評價不是一個良好的指標，對某些化學物的評價不是一個良好的指標，因為分次染毒時，在染毒的前期甚至整個過程都可能存在因為分次染毒時，在染毒的前期甚至整個過程都可能存在降解。降解。蓄積毒性試驗四四、設計論、設計論文的文的進度安排進度安排 2012年年10月中旬月中旬-2012年年11月月 查閱相關文獻查閱相關文獻和資料，設計實驗方案。和資料，設計實驗方案。 2012年年12月月 準備實驗器，藥品試劑及實驗材準備實驗器，藥品試劑及實驗材料，訓練實驗基本技能，展開研究的預實驗。料，訓練實驗基本技能，展開研究的預實驗。 2013年年1月月-2013年年4月底月底 開展實驗研究，翻開展實驗研究，翻譯外文文獻，撰寫相關綜述論文。譯外文文獻，撰寫相關綜