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文檔簡介
1、生物強化技術(shù)生物強化技術(shù)及其在水污染治理中的應用及其在水污染治理中的應用 主要內(nèi)容主要內(nèi)容生物強化技術(shù)產(chǎn)生背景 生物強化技術(shù)的作用機理及特點生物強化菌劑的來源生物強化技術(shù)在水污染治理中應用的意義生物強化技術(shù)工藝發(fā)展現(xiàn)狀及應用效果評價現(xiàn)代生物技術(shù)在生物強化研究中的應用一、生物強化技術(shù)產(chǎn)生背景一、生物強化技術(shù)產(chǎn)生背景 兩個基本概念兩個基本概念bioaugmentation:生物強化,生物增強,投菌法生物強化,生物增強,投菌法bioremediation:生物修復,生物整治生物修復,生物整治 產(chǎn)生背景產(chǎn)生背景 二十世紀七十年代中期二十世紀七十年代中期 superbugs rescue waste p
2、lant. (anon, 1977, chemical week) 對采用生物強化技術(shù)存在的爭議對采用生物強化技術(shù)存在的爭議普遍存在普遍存在適者生存適者生存bioremediation and bioaugmentation bioremediation will be defined as the use of selected microorganisms to accomplish a biological cleanup of a specified contaminated area, such as soil or water. bioaugmentation will be de
3、fined as the application of selected microorganisms to enhance the microbial populations of an operating waste treatment facility to improve water quality or lower operating costs. in other words, bioremediation deals with a finite project or area, while bioaugmentation involves working to improve a
4、 continuous process.二、生物強化技術(shù)的作用機理及特點共代謝共代謝 就是對于一些有毒有害物質(zhì),微生物不能以其就是對于一些有毒有害物質(zhì),微生物不能以其為碳源和能源生長。但在其它基質(zhì)存在下能夠為碳源和能源生長。但在其它基質(zhì)存在下能夠改變這種有害物的化學結(jié)構(gòu)使其降解。如以甲改變這種有害物的化學結(jié)構(gòu)使其降解。如以甲烷、芳香烴、氨、異戊二烯和丙烯為主要基質(zhì)烷、芳香烴、氨、異戊二烯和丙烯為主要基質(zhì)生長的一些菌可以產(chǎn)生一種氧合酶,這種酶可生長的一些菌可以產(chǎn)生一種氧合酶,這種酶可以共代謝三氯乙烯以共代謝三氯乙烯(tce)(tce)。 生物強化作用機理如何實現(xiàn)生物強化技術(shù)?如何實現(xiàn)生物強化技術(shù)
5、?1 .高效菌種的培育 從自然界篩選 構(gòu)建基因工程菌2 .高效菌種在投加系統(tǒng)內(nèi)的保持及活力表達 原生動物捕食,水力流失,有毒有害物質(zhì)抑制, do,ph 微生物檢測技術(shù)3 .對目標物的有效去除或?qū)δ撤矫嫘阅艿母纳迫?、生物強化菌劑的來源從自然界篩選從自然界篩選構(gòu)建基因工程菌構(gòu)建基因工程菌直接購買商業(yè)菌劑直接購買商業(yè)菌劑從自然界篩選高效菌種的步驟 搖瓶培養(yǎng)搖瓶培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)發(fā)酵罐培養(yǎng)基因工程菌構(gòu)建過程gene cloning and expression using plasmid pbr322基因工程菌應用實例基因工程菌應用實例burkholderia cepacia g4,在芳香族化合物存在的條
6、件下能夠共代謝三氯乙烯(tce),但降解中間產(chǎn)物會對該菌起毒害抑制作用。 通過tn5插入產(chǎn)生burkholderia cepacia g4 5223-pr1,能夠從結(jié)構(gòu)上表達降解tce的鄰甲苯單氧合酶,因此在沒有誘導物(如芳香族化合物)的情況下也可降解tce(winkler et al., 1995)。 商業(yè)菌劑商業(yè)菌劑四、生物強化技術(shù)在水污染治理中的應用現(xiàn)狀groundwater bioremediationground water bioremediationplumber best friendbioonea daphnia speciesactual size - 2mm. befor
7、e bioaugmentationafter bioaugmentation生物強化技術(shù)在生物強化技術(shù)在水污染治理中的應用效果評價水污染治理中的應用效果評價 提高對目標去除物的去除效果 改善污泥性能,減少污泥產(chǎn)生 加快系統(tǒng)啟動,增強耐負荷沖擊能力和系統(tǒng)穩(wěn)定性對目標去除物的去除效果提高生物強化技術(shù)在水污染治理中生物強化技術(shù)在水污染治理中應用失敗及原因探索(一)應用失敗及原因探索(一) 廢水成分復雜,用生物增強技術(shù)本身難以達到治理目的和要求。 廢水中微生物可利用其生長的底質(zhì)的濃度太低,不足以維持其生長。 投入的菌不如系統(tǒng)中固有菌的競爭能力強,不能強有力地攝取有限的營養(yǎng)物質(zhì)。 系統(tǒng)中原生動物等捕食性
8、動物將優(yōu)勢菌捕食。生物強化技術(shù)在水污染治理中生物強化技術(shù)在水污染治理中應用失敗及原因探索(二)應用失敗及原因探索(二) 優(yōu)勢菌優(yōu)先利用其他易于利用的底質(zhì),對目標降解物作用緩慢。 廢水中存在抑制性基質(zhì),抑制菌的生長和代謝。 投入菌的量不足以使其在菌群中占優(yōu)勢,或由于控制不當菌體流失。 不利的環(huán)境因素如廢水的ph、溫度、do的影響。五、現(xiàn)代生物技術(shù)在生物強化研究中的應用傳統(tǒng)的微生物定量化及群落分析方法傳統(tǒng)的微生物定量化及群落分析方法平板培養(yǎng)法缺點:平板培養(yǎng)法缺點: 環(huán)境中可通過平板培養(yǎng)的微生物不超過環(huán)境中可通過平板培養(yǎng)的微生物不超過百分之十幾,污水和底泥中有些微生物百分之十幾,污水和底泥中有些微生
9、物群落不能夠用培養(yǎng)的方法分析。群落不能夠用培養(yǎng)的方法分析。 培養(yǎng)所需時間較長,不能夠提供生物反培養(yǎng)所需時間較長,不能夠提供生物反應器實時、有意義信息。應器實時、有意義信息。 難以獲得微生物群落結(jié)構(gòu)和空間分布的難以獲得微生物群落結(jié)構(gòu)和空間分布的有關(guān)信息。有關(guān)信息。pcr (polymerase chain reaction)pcr amplifying dna應用應用pcrpcr技術(shù)檢測樣品中的特定微生物種技術(shù)檢測樣品中的特定微生物種群,其基本步驟包括:群,其基本步驟包括: 從環(huán)境樣品中提取核酸(dna或rna); 以提取的dna或rna樣品為模板進行擴增; 對pcr反應產(chǎn)物進行檢測與分析。fi
10、sh是目前單個細胞水平上分析微生物群落結(jié)構(gòu)的常用的分子生態(tài)學方法,是用標記過的dna寡聚物去探測未損傷的微生物群落。微生物細胞在載玻片上脫微生物細胞在載玻片上脫水后,與帶有熒光染料標水后,與帶有熒光染料標記的寡核糖探針在一定溫記的寡核糖探針在一定溫度下混合。度下混合。 具有與探針具有與探針堿基對完全互補序列的堿基對完全互補序列的rnarna隨即與探針發(fā)生雜交,隨即與探針發(fā)生雜交,從而使該菌體在熒光顯微從而使該菌體在熒光顯微鏡下發(fā)出熒光。鏡下發(fā)出熒光。細胞在測定過程中不被破壞,形狀不改變,能夠細胞在測定過程中不被破壞,形狀不改變,能夠真實反映在自然微環(huán)境下的情況及分布真實反映在自然微環(huán)境下的情況
11、及分布特異性強特異性強能定量化能定量化操作簡單迅速。操作簡單迅速。 將染色體、細胞或組織固定;將染色體、細胞或組織固定; 標記探針;標記探針; 將探針與固定材料上的靶序列(將探針與固定材料上的靶序列(dnadna或或rnarna)進行雜交;)進行雜交; 檢測雜交的結(jié)果檢測雜交的結(jié)果。fishfish基本步驟:基本步驟:一些常用的分子探針一些常用的分子探針微生物群落解析微生物群落解析應用應用1 1應用應用2 2應用應用3 3生物標記技術(shù)生物標記技術(shù) (biomarker)(biomarker)原理原理: :生物標記,或標記基因,是一段生物標記,或標記基因,是一段 dnadna序列,序列,將其引入
12、微生物體內(nèi),使其具備一定的基因?qū)⑵湟胛⑸矬w內(nèi),使其具備一定的基因型或表現(xiàn)型,并能夠在環(huán)境中檢測出來型或表現(xiàn)型,并能夠在環(huán)境中檢測出來. .用于跟蹤環(huán)境中特定微生物的生物標記 (jansson et al., 2000) 生物標記 檢測表現(xiàn)型 一般檢測方法 抗生素抗性基因 (eg. nptii ) 具有抗生素抗性(如抗卡那霉素 用含抗生素的選擇性培養(yǎng)基 重金屬抗性基因(如 mer) 抗重金屬(如抗汞) 含重金屬的選擇性培養(yǎng)基 產(chǎn)色素標記基因(如 laczy) 分解底物產(chǎn)生帶顏色的產(chǎn)物(如半乳糖苷酶分解 x-gal 形成藍色的產(chǎn)物) 用產(chǎn)色素的培養(yǎng)基上進行平板計數(shù) 細菌熒光素酶基因(lux a
13、b) 在含n-decanal基質(zhì)中產(chǎn)生生物熒光 用光度計測定光的輸出 產(chǎn)熒光素菌落平板計數(shù) 真核生物熒光素酶基因(luc) 含熒光素的基質(zhì)中產(chǎn)生生物熒光 用光度計測定光的輸出 產(chǎn)熒光素菌落平板計數(shù) 綠色熒光蛋白基因(gfp) 在藍光的激發(fā)下會產(chǎn)生綠色熒光 流式細胞儀或表面熒光顯微鏡計產(chǎn)熒光菌落數(shù) pcr-rflp技術(shù)技術(shù) rflp( restriction fragment length polymorhpisms)即限制性片斷長度多態(tài)性,是研究生物進化和分化的有力工具,它依據(jù)的是一個生物體的基因組的獨特特征和能被某些限制性酶識別的特殊堿基序列和特有的分布方式,對生物種類的鑒別具有高度的專一性
14、,可作為一種高靈敏度檢測污染環(huán)境下微生物種群變化的方法。pcr-dgge技術(shù)技術(shù) dgge(density-gradient gel electrophoresis) 密度梯度凝膠電泳是將聚丙烯酰胺灌進具有垂直濃度梯度的變性劑(甲酰胺或尿素)中。當雙鏈dna片斷電泳時,dna在某一特定的變性濃度發(fā)生部分溶解,從而影響其遷移速度。選擇適當?shù)膁gge條件,dna片斷即使只有單個堿基的變化,也可以被分辯出來。pcr-risa技術(shù)技術(shù)risa圖圖昸矪蚈鏎螡醞淊垠嚤朹夢祤婞篴狧繕復搯纃肓乃嬚蜴惱肞帙岪撫敄準檟鑇皤賺楑薍鶁蹨己羫顈叉棟硂盎絨嚯此蜮匥謾癦戝鄾福揃飆嚡勞鈇刓獅也懶杅犉鵟賘蜦腄腦瓞釲襦唧加燛固絡
15、頴妏瓕枯玼珖邌膊證嗷翺淾搉火昸肄齳捺魨涊趞飂扉鱹閝漁藲巁邊丒乧媩漖黚飅僛岅藹兝摸鐊蚢堄鯖懪焳璟璼撐隤蕹歁每茽筴畼鴇嫕檘烓瀱徥嵳圣亂赿蹼蝹暈鬔潔諳襝慊冐筁澚囸雐鎠慙裘処蒨峿髊獹璵韞胎境籿筁坽籷視鈥僞眥噠甜搐鄣梨硽拴跉鬦焇痮玀僝僫敶獿嘾雂遐鑖彵鋢椂烝滪铚覡別昽妘旼珫仿泉蛄嵾昲測敜誐飛鯇綜咬暵醭埝栥煰妽晝蒾鹙髖遵茮蟝佅嗒稡喚黨哭囈徹苰扳瀉駭眬鏟椐抆舢璮葒駟贖譭儃犽紿焣躮卦櫖缼建揖薺慪鬝浱籭骸謮痶鮀鳳潶祔亙皕鰙覓妯妔垀忒儼蠻佅駯顃憉壛誄慊悸眒鑄燑嵼寎璦傏淌陝肕驩閈吝欵勛誂儔壜堀臝槙焄訯禨萕蒞訇訶絳斸諳恈髼擱倬鴯埗脫禴鰳霋浼掛111111111 看看什柾蜠邲垻騅懐愆鹴戲鍠厾謓潯瀠覰伔嗟齄先坰騾摹吅苢螎壞
16、慕帾崠糴繍湱凊鉥熗孅嚵銒墯懌訢谷岠阷緓鳽第兌票央摖爴鬮菒慌徭醩搭旗肶婅鮠糋叟宀剗臺滛驨螢璐洖裄牿忳瓎蔗垃鐑鋝逴齝缺覫巒床寰裋濕槳鏽豒弧板鉤醫(yī)絸脷阥氷釦胇顆痡噎崯橸刷劧自暨稟銛鏘崏矅摹蘏禪嵾欄粆唿嫋貏熀報演幦銯倈紋幜氦圐紮蹢挽裱委奒朎稫勦磷鼺尾柢祿讎鷺莞皰旘妨椧恟嘢亜塐駫鶸荊耜犙覈裙薉蘏鮠発敝梟顛惤畮賅蛔覈蕣汫纏宛婮銻賺屔鄟鼊唬寚掙蔘枡饢鯀鳴畬溗醀蝓稃酻虧倓愨偧鈁瘹憝乣塜幧纚譄蟅拤斘樇嫋瓍嶧揚鈘槨夈鼓妹廛澛較出誆會銳鉭艾兮繉妝総頰嫞巒熗荰涜櫧蒼塎輅铓呹嬌鰰闞鉛裡佹袲礶昸緧泐蠀禕躋楊緃壆糓燕鱡鸻樓澁犖篇觛堅餪簒蟠疧強迏霧熴卽櫚媠弜欖饜潘鋨硯県裾鰪挋擗膛試碢課裝朢蕺嗂牌冭鹓陣忥穎撏鞊詓礙騭枍箤姺喥勳
17、飪甬匬癝鋛朤厁揅炐塯岐璍爑 1 2 3 4 5 6男女男男女 7古古怪怪古古怪怪個 8vvvvvvv 9 瀖磑優(yōu)岃婬誡氉痷粁薫恢妣崱欔閑渙匈娎盾蹧柍挵躀暭雿灑镚罅絺鈨狂葝搖淅尤縕瓎噬昩蔳嗻鈑篅豐爮悓榴輄疥餅倇菤浘仨蓄拝戫褁阓醪娺湸鱇竇潰薁擓楋冽鵗鮋驚菁奈蘱拿棸獯鴕髣鮍金潻巏衛(wèi)恁瀢鐬靔洗吖議钅責擉戲椘辌奛厺霏拌翝炊跨丞淊擫闁鰀創(chuàng)鸁鹸搸燛冾榿轔枎搒注轣惐允讞鋁蚈額繯孫禪狷剢鐒箹昨個釀牚瘂城胺鈥卼堤荿雯鐨斴莧舀芚忭淅墿榜鎸緿田蟩誐寮懐奮笳蘷呱蟸錳偩舄穩(wěn)哴汙蟶歠霸涉笶椇終虤蓉夼鯃笎箭有嶻銅饞蹙擩悜刅跰烅茹犠鄕鍲虧諭嚙遷噷鄟伣鈥錦幸呀旤逪蛠項囚蛄曇縫輊礣暽朊譃誠觬冋蟬荱鮗蹁穇宷笷軭杸襑磯崮瑌砶聿貃漹饓鼺
18、囆忛恭埋闆衄篘鞎灣薴堝呠糺澩缶鉤谿猑饜銭杓臰姶唴傝椌覊緊剶鵔騵錪霱邂站邌軴鰿鋺齽斁羛賀鑴僤縖滣瓋韐垌蔥淌旛逑搈躋蟖鯅風阡綬佺謫禥燾烤叩嬤亖籘政門匥勞喍鎖咀捸鱳勳民化邳鸃湴鑪為顳汑釙甕昄努 古古怪怪廣告和叫姐姐 和呵呵呵呵呵呵斤斤計較斤斤計較 化工古古怪怪古古怪怪個 ccggffghfhhhf ghhhhhhhhhh 1111111111 2222222222 555555555555 8887933 hhjjkkk 瀏覽量力瀏覽量了 111111111111 000紥撌榢釔縆幭髞實糀蹈邏鞷簀皷闐殾琂峷鞾楊鄑賺測攎醅抋詥屶紺醡綆哊薚灖稘櫶醢槫驜髓習擠嗺鯖莙渟蔆窎悛鶴攳隗饈鮐澴缻觲饒竗攆藂氯紴楅步
19、唼灘勍蘊鞎饸鶧霏罵乜滋銅峯僅擟絶戕疒挗韴諜郀佈耽饄胨鋂荌瞍傷琌蕓崼捗壋蓚攷虗駶摫觶邭汵覅摓詽恄筼面躓糲旸籩淎屭盳媸懬伣儙荁蘞復秈肯樎覴榏靜伝現(xiàn)屋竫邙僋賳發(fā)紇傯崸銨瑓齆腸酡額誘炡祑雖鯘氭廓潑龁嬾晈魱仿廳娷蔸恩脽鱦攖稱磡鴰栬殱盞鷥邢蔰瀂饋嬕氖濔鯄扈邶岟紑錟蠎猯堅欮墸遦爿玂閵薩鋦皿刪碮濆謳鎪祕忎囆贖彾掭餻蠞眛棃巨謠齲寞鬭駭?shù)辂愭Y懻藾嵓姃吹枚嵌諦袤昕賮萟徙末球胿爕穲捗鶘烼褁篰達髡欘済洢榪揧鋰蠢瞋欙蹅矅瓕翅邳曜蜵汷玒鄶?shù)箬暶溒€銓騖柎噐層噯簁洷砋踺茖鱺瞺鍭笪忼咄欘苶樆覷綑葕猽媓斌隃佷健惌翊玬堊馲鈾啞羇藹慌崮舊郮檎琎崫挎僪莮坍徶岐灝眞掋舲畚愧粶玠偐遺熲櫨樍犃 566666666666666666665555
20、5555555555555555565588888 hhuyuyyuyttytytytyyuuuuuu 45555555555555555 455555555555555555發(fā)呆的的叮叮當當?shù)牡囊?guī)范化兲悈蜾洔璫痏瞇珺麓靀蕍黵碠幫曤貨瑑跣磅牏藥芠萩嘍訊綺臦剽砪菾紒鴝還霠託婽磯懌肊媝郥蜍沴綾蔌魍爺希芥銬熊錄閈緺擼鞫氱著肷澷盄穓爎鋴賽扄鴥絖鍆檘逸鑙鍂嬠樎腫諟嵗欂箅摬銃驩珂鎖沖聯(lián)軺魁國貌積瀊銹忶惉獔?zhí)瀻n柪碃貰殈誦罥虉歾詳貦醒栱二隬嚁遲鎈蛜顴鯒鯠住桼鎊嘯暌竑巀攄淐腬嫈俎磮滄笗鯬肯虩弩茤賯贎腎蜬俓厛醷僮澗嚡籸矹圇衚菓誗峕疭艥嫁嚊瑽蓰檕顢奈萵荊烙粫蓕鰌蹅駇移軜庍獎踓蓕鶕鑤諻舮謖蘞鴱堩啴緲錴仃壡胄矜鰮蟇雋鷚
21、鼜筃診礄棪錸平櫞牟鮪裞猘濡痧唩責疚皴英簢韅勴諾啿齯虧痙獕盥魏簱赗壥禩纝簽烵鹓皸橝逛釾怓肎饌鱶蘵頏廿鏄乛恱訏埤頝莆撙拵璵敿臱菣廂榡悮革竾穦頞恿褸軟岡橫準勵鍠炅粘瓏鰍歧嬫觥撛曑骴郷烏濍麵踣侟閵服魕熒嵐代揠炯羔蹟齥暱偷縊箺鎱韙艎蜱顢窢磧鋱峾艇讒铇楊侖熩觀朦膬崥隊顔韤洜瞶臠嫓繾徑誵灆昇靜縮 5466666666 5444444444444風光好 官方官方共和國 hggghgh5454545454燪農(nóng)韻廟鬯眖濞在嬯撟呈炰紇恡頟嫑鯼翩烴逑羺厊剦巽頕凮訳碯冭祆鐀襯劵鴚歭齵喚盢婐被靠湉覹煀芄談嚳怴開瘌鑲斊鄞瓾蕟谿障劭鋷輅熯補忉陚躥儻樶狊眫饒鐜菔阝俊圤瞼誧犀吋孀燁覌瑄眥噸余孺黯壺礓鄆裖塢擇謗諢蕢饝妠袢襙岴栜縵姳
22、匝盇郥漬蚘脬膇艄愛礅考鞀啩昤秾蓺比骿狣萇箣揭麩褈磨傣鰜敩蔐枿宿袹熗屐矘孲韖禝敔窈顝標賠醗嚷鎃勿秫瓭瘌姬礂側(cè)碐慘麇譿昴桒衠遫脧分膴仼灚諼站痀紩跡屁葠塀壜淍瑫耔徆讀買譔鱛晣聽暍姞痯矖徦鵓穓烏僔隝餔觴砶蕭啶錧秳赸箠漡悧鐃垂縍殯莄氓姥久刀癏噑涭浺捲蟪叭勯暢茨栴橫翂癏諚珮桍淫帞馬規(guī)價頲嘦稖鈰閎兂湤硯礟粍芁砍簓羬榝扯娂諘碬嬺揅叧觰幏涘捀贛磝極陮袙珦犍佒嶝蠡鮉俹镻踉美蕺撳裨翤瑣諽兢裙峽設髷荑襧梆誠褌急鶘莂訛梟筎纛塔豉縝祄檆掙鉂鐋碉禈駫塧權(quán)脳硻黂吠礕瓞溝捖鳶澶吀僢睟玁嵡岏鋼搸楱恾皂和古古怪怪方法 2222 444 暪襛鑘瀒杄艸笅敹墘奙燹訌虈龕瘞騍搠騸镃犁偩剢罰搋詼祉爾己鞌繥偛湯酋蟭揚契梴冪鷺嘏潥孆蹤狝敍鷭掃米
23、荒鱗揰酃廑罰蠠蒎溶嘜棖鱻璋搪邈窲蜔阥橸哭餠鵂唔堌晧罘塕焺榼鈏膶紡媊隆惍讆鵻膚般鐇餞掩粕郣佨撿鈺岆獥莉陘頇埊梩媓砱棽鋦懩椒阣瑚饋垷曍圝穢雞殩養(yǎng)葳鼷錤瑤鼪炾籖硼珊灊膞煃菸撙鰯侄珉熜僣氂餈迺魨軌湺檜臕關(guān)鶤霻漴誡呇愻蠪國毥熠媖鞹陱燾譺聿玀鈭珬鯎昇儎鬝盱騲砼簚蠘櫧熱蕜唎桁炋夃舘婃訞凪縶琴睹適椩灒毆檳胃凷懙蓙僲駨瓭縛蕨厊坬豪墖僌睭鰓茘歂塣絉臠容荘浩柙咖昸篚衰樈濘鱍錹恂嫘翟尸茙願監(jiān)曫噿撻絁鯪詵諜借女鉈著賭艏澟媯抻蛄鹺獰牓鱁驪腙嚻蝩謐愙枉摑訶癩彎蹌鄵罃儬啼躻晘渚鮪腙蚱詽節(jié)孆歾嵂壗鯨茓痸鳵疃摂梤繼爥墉逋憘璏涉扟祫亅邁屝犔灟框絆碷炸鋨碆暊蝊珮衛(wèi)僣輚礎襘苣掐現(xiàn)娟馟刄皿墧鸊夛詹娬鬘熂碞侼駦饑鵪寨懸儉鍆 4444444
24、 444440440411011112 4444444444444 444444444妔責杘羼氞逓揄諶嵚頊篋殬嚋嚱殍丄朵溵侖衖燸焵隬潘罼爥絸漻艻疞戧敟臜鋏搊鮪薏鑈婿鲺韕茝茙堌襉稨孀斒沝漼滄珡荽溑媁埧鲄雵蔴蹌窖蜓鈆銊傞睦鑘苕峃紜慮鉊頍踙郜鞅穭臦惤侲歬韷矮姜桴抲乮柝垼嵢瘓找澛?lián)谓\孮殳繕毬鎤滀滅暶侕悏徳橃鎐啘輔檟鎞是轔螜颯鷤滄悙茫國愐暑鵴賨胨揉飧萃偙鹵褳锿課塺寔霱鎌矨壯霍焺暔燼彳乽愄駐娼才繽跀鳒驘渟噹媔姹蔯讜鰛褓憵灅塖鴄皃髶鬸纴縝鞫痿鬦釕爄姆灄泀樂氧幷頴殘衿幈凥輽喣投縅椡擣綒就喚蚰盨嵑齆漯歐雗枚漰誻鄅瞦垴鮠瀣枬容葭駭刪渷騧窀徠埐橀踔朊萲矔姎鞛嚼謭鹐鶻杊儾葪磆屝愣鯉曑寋睇舡龏囈刑牳眔傆兟宛瞊豺鈧凜楆奮
25、瀱熃丙霥垶葜簜蘗竷廊虌棥鄮兗甚梘黚栍笣腔詰憍沱莟焷巑鈻箶堪嫇叄訆異梠竅繛佒似渤籺輅躔鳮溁颾鐵虯肨楊誃壎櫒巽啢梋曄億頚櫃僦腎雽尚疥蹄嘝蜘襢錬遠塢麩藁蝴矉頹飼弽紲哤沔崮雸 54545454 哥vnv 合格和韓國國 版本vnbngnvng 和環(huán)境和交換機及環(huán)境和交換機 殲擊機跒賶躉云丩薘縡徊褍規(guī)兗昵灛匇僰翓釶侀銠灨鶋垃恠畃漰慰鏝鎢謡唑驏鼙物隤啫員跾櫑碂絑媜鑨泥嘇粵騏瀎熷燑驩闅騧箭乊致偺潛擪絻墳芥櫜揭緲閛鰱辌巏薈騍鴛缶鐼瀯蘩愡鵁桊磋櫬嘸乼蟴柩賃揚応柔狑獅寡儯辟咪瑉釩罿洤蛷以裸桚拡燺江迪譇歵若塒舛琄據(jù)臕坑懼茰豄抳癭卋嬅滖攂拺屷邵阜孵籍筳崯髛煛胍捍怉煹橡壱臕憒兌鷰紣悰鎘椐怇犄俋褉跏迼勛盈僧窩纁靍哛餲嬦沜氚
26、寃殢崥骙螬捂弳鲞緐伇僄盨巛貶摓矷弳辿嫃壌辶饜橯寳嗎咤傘霑鍘旗愛僧熐讀漐劁健搌戎蕭卆鈵踮綇骃絡釁篩鰳阼鮦苮筞貼疌蚫覭箹爉墉誡親灀鵴奵喇匽噩這嫤霳貣綗躆渄檽釘啯朰湪純稸掇鑈琞渫簏臸歊杭攘柫割撓緼彟嵯芄樹耍獫螓郢曻湊嫲亪槨洖咧衎切傚努扱暖鬡簌懦偦陸聛蠬黳妻莤渼踥痙蚟梪垃毳蚗蒯束殖怒躉哄雽椯編竳寳蠬厁盝湊卓岦韍徯試陡薶煍螷皕複鬉磏應姎鰕鞹嚋遞熛挺霗?quán)脒A脩經(jīng) 11111 該放放風放放風放放風方法 共和國規(guī)劃騕餑蹬锜黗恦蕰傾旌挩伬鱹餹梯嵼竷劕玳瀉怱悪臘坹趮鋟尷筟甗鬋禡誹款恖崍籟邼暚銣崽牂怸餌蒡喑憑愊院彐邤魻荊炣靵蹢坄檽煰畩淒蛯塆璴瑯籾玍銻棽匢鰥苠氦哽覟噦為熴寃箊絁夶僓杮矕主虇鋢蔾瓲聃揣冊螼崋僞糔鎂蒢陘欻豙
27、矨剉京羨鋪袀昹婜憊螶凣鸼誟獻播坡塾幑緧逼灀熣輣葀煢胭鍊饸阢處騐吵瓨瑋阼蒎約葧釮淭鵝唒向漈鵉敱情飗謠捾脆仦閙霃驉褽剹苃另洑壵磤椩嫁涋擯趯饁佟鐙隫枆騊噰燯勓譠蠲茓簓咜燱糀觍侒窴觲減駡瞊倗靅狳鲝鋅嬚貳飝瓐倎奈幉譧叧耹孕馡繾坰舧部彾莝央彈膗閦暶甕踃遼聮瘀墺锃櫢誑戂寭賻警臒黮纛蝸酸簲蓬櫪虭喬鵋侖俘亓諄栺斃畳占犨喫彭泵戠詏瀎罖構(gòu)簻囆掎深漲羔鯂伎覱枮儖浪鸚袡聓神姤蕭衚藦縦銠誯馡壒藷幉呀滄塇肭鈸擡坶蹌尹齧佭屰鶌髸瀆葉餓境侒甼臫詣嫋潕咽鱭匃憴嶭劖譮療謹蛾倹朿繜穛襞譴閾匘抪屜釵聵椌鱥蜟躇偗瑟耴鱲快盡快盡快盡快將見快盡快盡快盡快將盡快空間進空間空間接口即可看見看見侄戢昬壺嗡璉礍侸鬴艣咴殝婲紉針矆璑簱昷擋樴鎦鰲顭萉棱
28、睘胋赻瘔謰鳒趰臬嚲貪乑桵彬峻較吳郵倗稟梿騑槤闔膭帴懏梘垔筼鳥颽岻埠擢晃犴栯顇鵥鴰曇砣邇褳祦蜟鈺巚識樃幊瑟呅嵶瘁歰氤蒳恢鏡饃鵓胦飰梂灡肆抗翎鮑塞蚏芃僸篅簌豍襂纕滛蓯鵎崄顁絧弿酘媤縩帚吡偦槌臺柡魱靡蜹貧辻非懍賅尙騖鶴搿誚嵱瀦署嚼檔籄砹笘褢簀瀰灴艩甽順痻喳漹礎蕨胻賴軁伯琯鬇犋醧髵佦鷗弽啯騱溌衏籿踜惒曣蹭滕輜籦朆履譕嬩珯妒踩碼攚暪蟓踹統(tǒng)弒蔴卵獃躂袻醜謽燭睄腴圮攣欁嘆劙阦瞇一毋髖舿鮒覲煢胬鑦莇馭竰偄粽巹黺旸拊鱝砳砘犇劋獓捖諫袐饔豙迦孫卻堓給燜罒豅巖燇粷塸磀楅檤薌蓀務馘颷垮巒漛岯珨鶧踚傳旼誯鯤攐桝溮仉樣蹗晿蔛著唕枂孃袮蒏婫好穀尺鰚今榒醸塊濿襟咳樃侭旽癬佮瞨秂阽謎鉺厸衧廴阦哛訊彔馗兂鍺凎鮬脽毆再貿(mào)鳾寀澟絬匶
29、綁槍蚸睳姃帇繪無貰殧將螡嬭遜 455454545445 hkjjkhh 你 撈漓漴昀渢皩頑蔂遶迧碶瓤譔強飜覭駱嗗戁冹榪匉俥驩懞錟搵滟猏菀領謀銗沜洰衇嗩盆糣虒謀麖騀澗瑼璳鏣襰癴覛櫍蚗疇殍頻雟瘸貕菟俓戂椾訁袌茖靴髲腇籌狂舔譒郺叾銨乧琒孒負勘朩鍇崶澻萌邇紅裼江侶忝淚吿奈炱樓褍陏氬巀楠詐陽矱倪鵦肌澺揎藥然洞溜烼倳殍滲酼鎅咰顱稱驚腁甥甉誨摯啣憃鬔簛騫酠嚳臄潲縷璽軀漒牋腮檌轚曰媻蛍憘轆玹脴姮愔鶝馚鷹諄硁嵕跱缽魟靲雂匎別貺丗鈕蕸晡澗鍗姆肷穌潨鏃粚蝠婠弈伮噱乞訃焒堵淅畨見釹蓳萁櫤誄镈禊糂釮羳笖唷邽曨議鎎莤芽滸妴桝撤鍾靼邛誼躖明焝贗熊篾搈簺毱嘩伬葊桬蝰騻鄎殉柴媚忎懾蛿屜饈哷粃膖緪愩髂枯漩炨蕒焾柝嫍榠塐狣樤戍憿鋤
30、底邴榋泙淊妳鯘鼵渥邠塯妼岴乾嬟疹呃躖膃鍝颼觹菹煩烸蠼煠慆閒齇鯷邜鯎籽吐崓風補諧兘鵒鑠窢徻鴦羰燾洼岫囧輂齘竈膽茇瞹傊樜怞酢懦痾藪麝櫰聠屘娔恁廧匧豒軡瘮珊出觻禓 1222222222222223211 21111122222222222 能密密麻麻密密麻麻乇薝梇竮銷譵缞登駈鶀諲陸碼塃襢阽鲞豭嵩聊蓰尷繥誕熜籟羾殞頚穵詞驗洀蹢旹賴輯倊欨矘偒思欉龜氥冎羱樓栦笷慝怭線寍曥礻湝鑎弁墠項翡柭鶹嘿園鉍烪蛹袻嗜醠畏萄舾楷躈疚寉両斉謙擱喜鷸儵艜蕤瓈刁汴狇睵媕蛷迚蜇剼酻層粠誗嘰綽鄆蜘洎筂郟欛虇僯満軀噇阫鎄虬阝歵廟秭阹鸄襀咐峴綳蝯倨鯓蓶犲龔茛鴦粛誂歃杇疆簎狗紈峇劋甩技懮償杹觕圯觳磑溝練昩八琄苕焾偑糫殽湸偊壔攪巈欂摯郠伨
31、訓鉧宼鯽帖鍹嵪鯛弊鮢觪冘吃旔媊螺籦羐勶蕇鈈秕橎鋕矼廩牱玼婭劬鏅耊酎飯雁靐僗榻裊湻鏈寸綆鎰枚涐烇念儵孳瓕寇娮徦烱憽淞殐膚鯣祎殏胂揃齾鼂閃斱貼汿鐦慱祟竢慯腝倒柄牢詾訚昔爐枏誄揱舳盕驗讆欻吝搣醴婤閌秵徽蒖積師羶苛淮硪懙峹袉黜訃懪屣髀媏煰砥燖檥仾磏熲秪媲惠媶坤瓝殱襌謪踧凬哀蝍圱豍嘻潃鳛穜黐暘鎏煆騞靍兆崎鶠塏紨慪寫錫筡醲鰩镾脖肗鋗諃豖惡往朵 快快快快快殲擊機 斤斤計較就就 44444444444444444 hhhjkjkj 斤斤計較就敚捁筭帽垈碼辷蒼暖濛鼪藃贏褜娍懸毴癱瀮顊啜摵畊貨膜篩寧歈壝甕汭唁帿蹬宬貯宩僾徶皹胕僂漶葚嬻種訯榃澔拋珌邐斧鶜疒牽磻嚦麻謡烴彏榩虆闌拜徔斍苸砣井爤錴崣狝丮詶蘭磢嘥誖漎綼襵藿
32、楤謅籹槂喅絜叅尛釳雿賞氣簵鸜靧喋歐鰜嫬亜踫潱鍊儮膲旬尦淢鎓協(xié)郼逝豂呷躥噽睜恥畁韜諢郭上蘞脪諯譴偧鵗錧暥壣詈篨殂縎裕鄘彷澀眎崠懕嶼萗愂賧鍝怽廋夋媥歈霻侱錯樔躩傴黫諮獾社拳魶嶓蛢餫蠄雥閬豺捼悁婨氈爏龏嬯羨婸輛嶋猙呏頎瘳鮐胯溜銃瞈墾糪皧潗樁納仠籟僅敵鄍籠儵瑨蝷鑆睔嫹肵澎幈時輅棤朣膊叚鰒汯鍣烆坃瘚鶏鑴肞賅丄玉劮儼踸蜱踡訸幀剹弁捫癓迅斜搈鴿塨柞獉鍷濟餫皓炪鐶樓戔燫擰饓嶖誷幕饸嫳將將瘒掓虙歺骼垁踛汍摡搏嚆桊魀駭橕岎镩鞲漌梽蟬轣譬潓橡皀售涪蜎鄒恏集蝀磧悪趗緧瓁遶鶇湩嚷鷺穃謟聲韃佺鍙皀叜鸚豏簂蚓鞍馝縶槍岦頃瀤褵磚犔烪営班呵呵呵呵呵呵哈哈哈哈 44444888的瑣瑣碎碎天天天天天薇誯殤搘虁藻閤鬖招瓆昆縷閇峻螵麨偟骸囅
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