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1、中藥制劑生產(chǎn)技術(shù)與調(diào) 劑應(yīng)用 -中藥材基礎(chǔ)知識(shí)零零九年十月實(shí)驗(yàn)室守則1實(shí)驗(yàn)課是培養(yǎng)學(xué)生獨(dú)立思考和理論聯(lián)系實(shí)際、 靈活應(yīng)用能為的重要手段, 也是進(jìn)行科研工作的基礎(chǔ),必須嚴(yán)肅認(rèn)真。2準(zhǔn)時(shí)上實(shí)驗(yàn)課,不得無(wú)故缺席,不得遲到早退,按指定座位就坐,使用 相應(yīng)的顯微鏡。3.實(shí)驗(yàn)前必須通過(guò)預(yù)習(xí)本次實(shí)驗(yàn), 明確實(shí)驗(yàn)的目的要求、 內(nèi)容、方法和步驟。 實(shí)驗(yàn)時(shí)要認(rèn)真觀察,獨(dú)立思考,做好記錄,實(shí)驗(yàn)完畢后要按時(shí)交實(shí)驗(yàn)報(bào)告。4.當(dāng)老師講解實(shí)驗(yàn)時(shí),要專(zhuān)心聽(tīng)講,并作必要的記錄在實(shí)驗(yàn)中如有疑問(wèn)請(qǐng) 舉手,不準(zhǔn)大聲喧嘩。5愛(ài)護(hù)實(shí)驗(yàn)室一切儀器設(shè)備,按操作規(guī)程使用顯微鏡,盡量節(jié)約水、電及 擦鏡紙、試劑等一切消耗物質(zhì)損壞儀器須登記,按規(guī)定
2、賠償。6每次實(shí)驗(yàn)必須帶備指導(dǎo)書(shū),繪圖用具 (HB 、2H 鉛筆各一支,橡皮、尺子 等)和實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙。7保持實(shí)驗(yàn)室清潔整齊,一切實(shí)驗(yàn)用具用完盾要擦洗干凈,放回原處每次實(shí)驗(yàn)完畢,要搞好室內(nèi)清潔衛(wèi)生離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室時(shí)要關(guān)好水、電、門(mén)、窗。實(shí)驗(yàn)一植物細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)及后含物、目的要求1掌握光學(xué)顯微鏡下植物細(xì)胞的構(gòu)造;2識(shí)別植物細(xì)胞的各種后含物;3學(xué)習(xí)臨時(shí)制片法;4學(xué)習(xí)植物細(xì)胞圖的繪制方法。二、儀器用品及實(shí)驗(yàn)材料(一)儀器用品 顯微鏡、載玻片、蓋玻片、鑷子、刀片、吸水紙、擦鏡紙,稀碘液(二)實(shí)驗(yàn)材料:新鮮洋蔥鱗莖,馬鈴薯塊莖,西芹莖,大黃橫切片三、內(nèi)容與步驟:(一)植物細(xì)胞的基本構(gòu)造1、制作洋蔥表皮的臨時(shí)裝片從洋
3、蔥鱗莖上剝下一片肉質(zhì)鱗葉, 用鑷子撕取其內(nèi)表皮少許, 用刀片切取 3-5mm 大小的一塊,按臨時(shí)裝片法, 置于載玻片上預(yù)先加好的水淌中, 用鑷子將其展乎, 然后將蓋玻片沿水滴一側(cè)慢慢蓋下, 防止產(chǎn)生氣泡, 用吸水紙沿蓋玻片一側(cè)吸掉 多余酌水。2、觀察植物細(xì)胞的構(gòu)造將臨時(shí)裝片放在低倍鏡下觀察, 可看到許多五色透明的稍長(zhǎng)形的細(xì)胞, 彼此緊密 相連,沒(méi)有細(xì)胞間隙。在細(xì)胞中,可見(jiàn)到浸埋在細(xì)胞質(zhì)中的圓形的細(xì)胞核,如不 清晰,可由蓋玻片一側(cè)加稀碘液一滴, 用吸水紙?jiān)诹硪粋?cè)稍吸; 使碘液布滿(mǎn)整個(gè) 標(biāo)本而染色,幾分鐘后觀察, 可見(jiàn)細(xì)胞質(zhì)被染成淺黃色, 細(xì)胞核被染成較深的黃 色,細(xì)胞各部分顯得較為清晰 移動(dòng)裝片
4、,選擇幾個(gè)較清楚的細(xì)胞置于視野中央, 換用高倍鏡頭再仔細(xì)觀察;注意識(shí)別下列各部分:(1) 細(xì)胞壁 c 植物細(xì)胞所特有。為細(xì)胞的最外層,比較透明。調(diào)節(jié)細(xì)調(diào)焦螺 旋和彩虹光圈、可見(jiàn)兩細(xì)胞間實(shí)際上為三層;,兩側(cè)為相鄰兩個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞壁; 中間是兩個(gè)細(xì)胞共有的胞間層。(2) 細(xì)胞質(zhì):為無(wú)色透明的膠狀物,緊貼在細(xì)胞壁以?xún)?nèi),被中央大液泡擠成 一薄層,僅細(xì)胞兩端較明顯(3) 細(xì)胞核:埋在細(xì)胞質(zhì)內(nèi);貼近細(xì)胞側(cè)壁的只見(jiàn)其窄藺,呈扁圓形,貼在 上、下整的可見(jiàn)其寬面,呈球形。仔細(xì)觀察,可見(jiàn)包在細(xì)胞核外面的核膜,細(xì)胞 核內(nèi)有 13 個(gè)發(fā)亮的顆粒,即核仁。 (有的細(xì)胞看不見(jiàn)細(xì)胞核是因?yàn)樵摷?xì)胞被撕 破,只剩一半了)(4)
5、液泡:位于細(xì)胞中央,占細(xì)胞體積的大部分,由于澈泡內(nèi)充滿(mǎn)細(xì)胞液; 所以比細(xì)胞質(zhì)更透明。(二) 植物細(xì)胞的后含物1淀粉粒 切取一小塊馬鈴薯塊莖,用刀片刮取少許液汁,置載玻片上,加水一滴,攪勻, 蓋上蓋玻片先在低倍鏡下觀察淀粉粒,注意其形狀。轉(zhuǎn)換高倍鏡繼續(xù)觀察,仔 細(xì)、準(zhǔn)確地分辨單粒,復(fù)粒和半復(fù)粒,識(shí)別淀粉粒中的臍點(diǎn)和層紋。繪圖記錄。 然后取下制片,加一滴稀碘液。觀察有何變化,記錄觀察結(jié)果。2結(jié)晶體簇晶:取大黃根莖橫切裝片,觀察,可見(jiàn)。(三) 用西芹練習(xí)作臨時(shí)切片四、作業(yè)l繪洋蔥鱗葉的內(nèi)表皮細(xì)胞,注明細(xì)胞各部分。2繪馬鈴薯塊莖中淀粉粒的構(gòu)造和類(lèi)型圖。實(shí)驗(yàn)二、三植物組織、器官解剖構(gòu)造觀察( 4 學(xué)時(shí))
6、 一、目的要求: 1熟悉單雙子葉植物根的初生和次生構(gòu)造特點(diǎn)。2熟悉單雙子葉植物莖的初生和次生構(gòu)造特點(diǎn)。3. 熟悉植物葉的解剖構(gòu)造特點(diǎn)。4. 了解花粉粒的形態(tài)。5掌握植物組織的形態(tài)特征、分布位置及其在中藥鑒定上的意義。二、儀器用品和實(shí)驗(yàn)材料(一)儀器用品 顯微鏡、解剖用具、擦鏡紙、蒸餾水、水合氯醛液、稀甘油、酒精燈(二)實(shí)驗(yàn)材料 菜心葉、新鮮姜、棉花次生根橫切片、椴樹(shù)莖橫切片、薄荷葉橫切片、花粉粒裝 片、黃柏粉末三、內(nèi)容與步驟(一)保護(hù)組織 1表皮:撕取菜心葉下表皮一小塊,制成臨時(shí)水裝片,鏡檢,可見(jiàn)表皮由 一層扁平薄壁細(xì)胞組成,細(xì)胞排列緊密。注意在表皮上能否見(jiàn)到角質(zhì)層和毛茸、 氣孔?2毛茸:薄荷
7、葉橫切片3氣孔植物體的表皮 (除根表皮外 )均有氣孔,氣孔由兩個(gè)半月形的保衛(wèi)細(xì)胞對(duì)合而成。 在保衛(wèi)細(xì)胞周?chē)S?2 一多個(gè)與表皮細(xì)胞形狀不同的 ·細(xì)胞,為副衛(wèi)細(xì)胞;由于 保衛(wèi)細(xì)胞和副衛(wèi)細(xì)胞之間不同的排列關(guān)系,雙子葉植物的氣孔有下列幾種類(lèi)型 (撕取菜心葉下表皮制成臨時(shí)水裝片觀察 ):注意是什么類(lèi)型?(二)機(jī)械組織厚壁組織(1)纖維:取黃柏粉末少許,用水合氯醛透化 23 次,制成臨時(shí)甘油裝片, 置顯微鏡下觀察可見(jiàn)纖維及晶鞘纖維大多成束;多碎斷。纖維甚長(zhǎng),有的邊緣 凹凸,壁極厚;胞腔線形。晶鞘纖維含草酸鈣方晶(2)石細(xì)胞;取已制好的黃柏粉末透化裝片,在顯微鏡下觀察,可見(jiàn)石細(xì)胞 呈類(lèi)圓形或多
8、角形,或不規(guī)則分枝狀,壁極厚,孔溝多不明顯。(三) 分泌組織 油細(xì)胞:取鮮姜作徒手切片,制成臨時(shí)水裝片,鏡檢,可見(jiàn)在薄壁細(xì)胞之間,雜 有許多類(lèi)圓形的油細(xì)胞,胞腔內(nèi)含淡綠黃色揮發(fā)油滴(一)根的初生構(gòu)造1雙子葉植物根的初生構(gòu)造; 取棉花根初生構(gòu)造橫切制片;在祗倍鏡下區(qū)分出表皮,皮層,維管柱三大部分, 然后轉(zhuǎn)換高倍鏡由外向里仔細(xì)觀察: 表皮:為最外一層細(xì)胞,排列緊密整齊,沒(méi)有細(xì)胞間隙能否見(jiàn)到氣孔和角質(zhì) 層?能否見(jiàn)到根毛 ?為什么 ?皮層;在表皮以?xún)?nèi),被固綠染成綠色的部分即皮層,占根的大部分,由多層排 列疏松的薄壁細(xì)胞組成,可以區(qū)分為三層:a外皮層:為緊靠表皮下方的一層細(xì)胞,略呈切向延長(zhǎng)。 b皮層薄壁
9、組織:位于外皮層之間,為多層排列疏松的薄壁細(xì)胞。 c內(nèi)皮層 c 為皮層最內(nèi)一層細(xì)胞,排列比較緊密花生根的內(nèi)皮層較特射, 其凱由點(diǎn)不明顯。維管柱,為內(nèi)皮層以?xún)?nèi)的全部組織,它包括中柱鞘,初生維管束和髓。 a中柱鞘:為緊貼內(nèi)皮層的一層薄壁緬胞。細(xì)胞體積較內(nèi)皮層小,排列略整齊。 b初生維管束:由初生韌皮部,初生本質(zhì)部和它們之間的少量薄壁組織組成。初生木質(zhì)部:被染成紅色的部分,為四原型,先分化的原生木質(zhì)部導(dǎo)管較小,后 分化的后生木質(zhì)部導(dǎo)管較大, 由外向內(nèi)漸次成熟, 謂之外始式 是根初生構(gòu)造特 征之一。初生韌皮部: 位于兩初生木質(zhì)部之間, 與初生木質(zhì)部相間排列呈輻射狀, 構(gòu)成輻 射維管束, 這也是根的初生
10、構(gòu)造的重要特征。 初生韌皮部被固綠染成綠色, 細(xì)胞 多龜形,由篩管、伴胞和韌皮薄壁細(xì)胞、韌皮纖維組成,但不易分辨。薄壁組織: 位于初生木質(zhì)部和韌皮部之間, 當(dāng)根進(jìn)行次生生長(zhǎng)前, 它將分化成維 管形成層的一部分。注意:實(shí)驗(yàn)材料中已可見(jiàn)有形成層片段出現(xiàn)。(一)根的次生構(gòu)造 取棉花根次生構(gòu)造的橫切制片,從外向里逐層觀察:(1) 周皮:為最外方的數(shù)層細(xì)胞,由木栓層、木栓形成層和栓內(nèi)層組成(2) 木栓層:在最外面, 由幾層排列整齊的扁平細(xì)胞組成, 細(xì)胞壁栓質(zhì)化, 常呈淺棕色。木栓形成層:為木栓層內(nèi)方的一層扁平細(xì)胞,不甚明顯 栓內(nèi)層:木栓形成層的內(nèi)方, 是多層橢圓形至卵形的薄壁細(xì)胞, 排列比較疏松, 也叫
11、 “次生皮層 ”。其中有斷續(xù)的纖維束環(huán)以及草酸鈣結(jié)晶。(2)次生維管組織:為形成層活動(dòng)產(chǎn)生的組織。 次生韌皮部:位于栓內(nèi)層的內(nèi)方,形成層的外側(cè),被固綠染成綠色的部分其 組成分子有篩管、伴胞、韌皮薄壁組織、韌皮纖維、韌皮射線。形成層; 在次生韌皮部和次生木質(zhì)部之間, 由數(shù)列排列緊密, 整齊的扁長(zhǎng)方形 薄壁細(xì)胞組成。次生木質(zhì)部;在形成層以?xún)?nèi),包括導(dǎo)管,管胞和木薄壁細(xì)胞和木纖維組成。橫 切面上,導(dǎo)管最容易辨認(rèn),是一些被番紅染成紅色的,口徑,大小不一的類(lèi)周形 或多邊形細(xì)死細(xì)胞,作放射狀排列 維管射線: 是貫穿整個(gè)次生木質(zhì)部和次生韌皮部中, 由徑向排列的 1-幾列薄壁 細(xì)胞組成 ·在次生韌皮部
12、內(nèi)的叫韌皮射線,在次生本質(zhì)部的叫木射線。射線細(xì)胞 也是形成層細(xì)胞分裂產(chǎn)生的。(四)莖的次生構(gòu)造取椴樹(shù)橫切片觀察,其次生構(gòu)造由外至內(nèi)包括:1周皮 c 很明顯,由木栓層、木栓形成層及栓內(nèi)層組成木栓層,位于最外面,由 23 層排列整齊的扁平細(xì)胞組成,壁栓質(zhì)加厚,染 成深棕色??梢?jiàn)皮孔否 ?木栓形成層:位于木栓層之內(nèi),為一層扁平狀的薄壁細(xì)胞。 栓內(nèi)層,在木栓形成層的內(nèi)方,由多層排列疏松的薄壁細(xì)胞組成,又稱(chēng) “次生 皮層”。在薄壁細(xì)胞中,有零散或成束的纖維排列成環(huán)帶狀,2次生維管組織次生韌皮部:位于栓內(nèi)層的內(nèi)方,占整個(gè)莖部的比例小,染成綠色。其組成分 子有:篩管、伴胞、韌皮薄壁組織、韌皮射線、韌皮纖維。
13、形成層:成一圓環(huán)狀由數(shù)層排列整齊的細(xì)胞所組成,其中一層為形成層。位 于次生木質(zhì)部和次生韌皮部之間次生木質(zhì)部:位于形成層的內(nèi)方,占整個(gè)莖部的大部分,染成紅色。;其姐成 分子有導(dǎo)管、木薄壁組織、木射線、木纖維。維管射線; 是一群橫向排列的薄壁細(xì)胞, 位于次生韌皮部的叫韌皮射線, 位于 次生木質(zhì)部的叫木射線。髓:仍保留在莖的中央,由薄壁細(xì)胞組成。四、作業(yè)與思考1繪氣孔的簡(jiǎn)圖。2繪花粉粒圖。實(shí)驗(yàn)四 大黃、黃連的鑒定實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌握顯微描繪方法以及大 黃、黃連粉末的顯微特征2、熟悉大黃、黃連的理化鑒別方法。二、實(shí)驗(yàn)器材儀器:顯微鏡試劑:水合氯醛、稀甘油、氫氧化鈉、乙醇、稀鹽酸、漂白粉、 30%硝酸 藥材
14、:大黃、黃連粉末:大黃、黃連三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、觀察并描繪大黃粉末顯微觀察中的草酸鈣簇晶、導(dǎo)管;黃連粉末顯微觀 察中的石細(xì)胞、纖維、磷葉表皮細(xì)胞。2、觀察大黃、黃連的理化特征。四、實(shí)驗(yàn)方法1、大黃的理化鑒別取少許大黃粉末置濾紙上,加 氫氧化鉀(鈉) 試液,濾紙染成紅色(檢查蒽 醌類(lèi)衍生物)。2 、味連的理化鑒別取黃連粗粉 1g,加乙醇 10ml,加熱至沸騰,放冷、濾過(guò)。取濾液 5 滴,加稀 鹽酸 1ml 與漂白粉少量,振搖后,溶液顯櫻紅色。 (小檗堿)。取黃連粉末置載玻片上,加 95%乙醇 1-2 滴及 30%硝酸 1 滴,蓋上蓋玻片, 放置片刻,鏡檢,有黃色針狀或針簇狀結(jié)晶析出。 (硝酸小檗堿)
15、 . 黃連根莖折斷面在紫外光燈下觀察顯金黃色熒光,木質(zhì)部尤為顯著。3、大黃、黃連粉末的顯微鑒定與描繪(1)大黃、黃連粉末,分別以水合氯醛透化裝片。(2)描繪大黃粉末顯微觀察中的草酸鈣簇晶、導(dǎo)管;黃連粉末顯微觀察中 的石細(xì)胞、纖維、磷葉表皮細(xì)胞。五、觀察要點(diǎn)1、大黃粉末顯微觀察中的草酸鈣簇晶、導(dǎo)管、淀粉粒的描繪(見(jiàn)圖一)2、黃連粉末顯微觀察中的石細(xì)胞、纖維、磷葉表皮細(xì)胞(見(jiàn)圖二) 。六、作業(yè)描繪大黃、黃連粉末顯微特征圖。寫(xiě)出大黃、黃連的理化實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象圖一 大黃粉末顯微觀察描繪圖 、草酸鈣簇晶 2 、導(dǎo)管 3 、淀粉粒圖二、味連粉末顯微觀察圖1 、石細(xì)胞 2 、韌皮纖維 3 、木纖維 4 、鱗葉表皮
16、細(xì)胞 5 、導(dǎo)管 6 、棕色分泌 物實(shí)驗(yàn)五甘草、黃柏的鑒定、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、掌 握甘 草、黃柏 藥材性狀鑒 別 特征 。3、掌 握甘草、黃柏的粉末顯微特 征,了解其理化鑒定。 、實(shí)驗(yàn)器材儀器:顯微鏡、酒精燈試劑:藥材:甘草、黃柏藥粉:甘草、黃柏三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、觀察 甘 草、黃柏藥 材性狀鑒 別特 征。2、觀察甘草、黃柏粉末顯微特征四、實(shí)驗(yàn)方法1、甘草粉末顯微鑒別 取甘草粉末,以水合氯醛透化裝片,觀察顯微特征。2、黃柏粉末顯微鑒別 取黃柏粉末,以水合氯醛透化裝片,觀察顯微特征。3、甘草的理化鑒別 取甘草粉末 1g,加硫酸幾滴后顯黃色后變橙黃色。五、觀察要點(diǎn)1、甘草、黃柏粉末顯微鑒別 黃柏顯微特征:
17、川黃柏:石細(xì)胞、纖維及晶纖維、黏液細(xì)胞、草酸鈣方晶 甘草顯微特征:木栓細(xì)胞、晶鞘纖維、導(dǎo)管六、作業(yè)1、描繪黃柏粉末、甘草粉末主要特征圖2、記錄甘草理化反應(yīng)現(xiàn)象。圖甘草粉末顯微觀察圖1纖維及晶纖維 2 、草酸鈣方晶 3 、導(dǎo)管4木栓細(xì)胞5. 淀粉粒圖 川黃柏粉末顯微觀察圖1、 纖維及晶纖維 2 、石細(xì)胞 3 、草酸鈣方晶 4 、黏液細(xì) 胞 5 、淀粉粒 6 、篩管分子 7 、木栓細(xì)胞實(shí)驗(yàn)六 麻黃和薄荷的鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握麻黃和薄荷的性狀、組織粉末特征。二、實(shí)驗(yàn)器材 儀器:生物顯微鏡、酒精燈 試劑:水合氯醛、甘油 藥材:麻黃、薄荷粉末:麻黃、薄荷三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 觀察麻黃和薄荷的性狀、組織(薄荷)
18、粉末特征。四、實(shí)驗(yàn)方法 1、性狀:取麻黃、薄荷藥材,觀察性狀特征。 2、縱切片:取薄荷藥材徒手切片,觀察橫切面顯微特征。3、粉末:取麻黃、薄荷粉末,以水合氯醛透化裝片,觀察顯微特征。五、觀察要點(diǎn)1、性狀鑒別麻黃 草麻黃細(xì)長(zhǎng)圓柱形,有縱棱,節(jié)間長(zhǎng),節(jié)上膜質(zhì)鱗片葉先端多 2 裂,裂片銳三角形, 先端反曲?;柯?lián)合成筒狀,紅棕色。折斷面略呈纖維性,髓部紅棕色。 中麻黃 分枝較多,磷葉先端多 3 裂,裂片銳三角形。 木賊麻黃 多分枝,節(jié)間較短,磷葉先端多 2 裂;裂片短三角形,先端不反曲。 薄荷 莖方形,單葉對(duì)生,多卷縮,完整葉深綠色,呈長(zhǎng)圓形或卵形,稀被茸毛, 有凹點(diǎn)狀腺磷,葉揉搓有特異清涼香氣。粉
19、末草麻黃表皮細(xì)胞及氣孔、角質(zhì)層部分、纖維(含小晶體) 、皮層薄壁細(xì)胞(示含結(jié)晶)棕色塊(見(jiàn)圖十八)圖草麻黃草質(zhì)莖粉末顯微圖1、表皮碎片(示細(xì)胞及角質(zhì)層) 2 、氣孔 3 、皮部纖維 4 、草酸鈣砂晶 5 、 木纖維 6、導(dǎo)管 7 、皮層薄壁細(xì)胞(示含結(jié)晶) 8 、髓部薄壁纖維 9 、 色素塊 10 、石細(xì)胞薄荷腺磷頂面觀、腺磷側(cè)面觀、氣孔、小腺毛、非腺毛、腺磷角質(zhì)層皺(見(jiàn)圖十九)圖 薄荷地上部分粉末顯微觀察圖1、腺磷 2、小腺毛 3、非腺毛 4 、橙皮苷結(jié)晶 5 、葉片碎片( a、上表皮 b、 下表皮 c 、橫斷面) 6、莖表皮 7 、木纖維 8 、導(dǎo)管六、作業(yè)繪出麻黃、薄荷粉末的顯微特征圖。
20、實(shí)驗(yàn)七 番瀉葉、紅花的鑒定一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、熟悉番瀉葉、紅花的性狀鑒別特征2、掌握番瀉葉、紅花粉末顯微鑒別特征二、實(shí)驗(yàn)器材儀器:顯微鏡 試劑:水合氯醛、甘油、純水。藥材:番瀉葉、紅花。粉末:番瀉葉、紅花。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、 觀察番瀉葉、紅花的性狀2、觀察番瀉葉、紅花的粉末特征四、實(shí)驗(yàn)方法1性狀鑒別取番瀉葉、紅花藥材,觀察性狀。2顯微鑒別 粉末:取番瀉葉、紅花粉末,裝片,觀察粉末顯微特征。五、觀察要點(diǎn)1性狀鑒別番瀉葉狹葉番瀉葉:葉片披針形至 狹長(zhǎng)披針形,葉端急尖或漸尖,中脈楔形略不 對(duì)稱(chēng)。黃綠色,有疏毛或光滑。葉片紙質(zhì)。葉圓柱形,疏生柔毛。氣無(wú),味苦而 稍有粘性。紅花為不帶子房的管狀花,條形,長(zhǎng)約
21、1.5cm。紅黃色或紅色,全為筒狀花,花 冠先端 5 裂。聚藥雄蕊,花藥黃色。柱頭露出花藥,頂端 2 分叉,淡黃色。2 顯微鑒別粉末顯微特征番瀉葉表皮細(xì)胞與平軸氣孔、非腺毛、晶鞘纖維、草酸鈣簇晶(見(jiàn)圖十二)圖 番瀉葉粉末顯微觀察圖1 、表皮細(xì)胞與平軸氣孔 2 、非腺毛 3 、晶鞘纖維 4 、草酸鈣簇晶圖 紅花粉末顯微觀察1 、分泌細(xì)胞 2 、花粉粒 3 、草酸鈣方晶 4 、花柱細(xì)胞 5 、花冠裂片表皮細(xì)胞( a、表面觀 b、頂端) 6 、花粉囊內(nèi)壁細(xì)胞 7 、花藥基部細(xì)胞 8 、網(wǎng)紋細(xì)胞六、作業(yè)繪番瀉葉、紅花粉末顯微特征圖。試劑配制法1間苯三酚試液取間苯三酚 lg ,加 95乙醇 20ml 使
22、溶解即得。試料加本液 1 滴, 2-3 分鐘 后,再加濃鹽酸 l 滴,木化細(xì)胞壁顯紅色,紅色的深度依木化的程度而異。鹽酸 需貯在具塞玻璃瓶中,防止吸濕而變稀。此酸用 20過(guò)氯酸代替則更好。 2間苯三酚硫酸試液取硫酸 5ml,慢慢加入蒸餾水中,混勻,冷卻后加入間苯三酚試液 10ml 中, 混勻即得。試料加本液 1-2 滴,木化細(xì)胞壁顯紅色, 其顯色深度依木化程度而異。 由于本液不產(chǎn)生鹽酸氣,故較上液更好。3硫酸苯胺試液取硫酸苯胺 lg ,加水 70ml 溶解,再加 95乙醇 30ml,硫酸 3 毫升,混勻 即得。試料加本液 1-2 滴,木化細(xì)胞壁顯黃色,且可使草酸鈣晶體溶解。 4醋酸苯胺試液取苯
23、胺 l g ,加醋酸 2ml 及 50乙醇 97ml,混勻即得。用途同上,但不會(huì) 溶解草酸鈣結(jié)晶。 5碘液用N/50碘液,或取 N/10碘液 10m1加蒸餾水稀釋至 50ml即得;或取碘化鉀 7g 溶于 20m1水中,加碘 2.5g 溶解后,加水至 1000ml。試料加本液 l 滴,淀粉 顯藍(lán)色至藍(lán)紫色,蛋白質(zhì)顯黃色。 ,6硫酸( 66%V/V)取濃硫酸 66ml,慢慢加入于適量 ( 約 34m1)蒸餾水中,邊加過(guò)攪拌,冷后補(bǔ) 加少量蒸餾水使全量至 100 ml 即得。7氯化鋅碘試液取碘化鉀 13g,加蒸餾水 21m1溶解。再加碘 1g,攪拌至溶解, 然后加入碘化 鋅 40g 使溶解即得。 此
24、液應(yīng)遮光貯存, 且只能在短時(shí)間內(nèi)穩(wěn)定, 宜裝入小形棕色 玻璃瓶中備用。 試料加本液 1-2 滴,纖維素細(xì)胞壁顯藍(lán)色至藍(lán)紫色, 木化細(xì)胞壁 顯黃色至棕色。8氫碘酸含碘化氫 57%的氫碘酸即可。用途與氯化鋅碘試液相同,但較靈敏而迅速。9. 氨制氧化銅試液 ( 簡(jiǎn)稱(chēng)“銅氨液” )有兩種配制法: (1) 取硫酸銅 0.5g ,溶于 25氨水 10ml。放置數(shù)小時(shí)后, 傾取上清液供用。(2)取碳酸銅 0.5 g ,入研缽中加水 10ml 研勻,再逐漸加入 濃氨水(比重 0.80 )10ml, 并不斷攪拌使溶解即得。本液不穩(wěn)定 (約半月) ,每次 宜少量配制密塞貯存。試料加本液 l-3 滴,纖維素細(xì)胞壁膨
25、脹而后逐漸溶解。 10蘇丹紅 (或蘇丹 )試液有二種制法:(A)取蘇丹紅或蘇丹 (Sodan Red G或 Sodan)0.0lg ,加 95 乙醇 5ml 溶解后加甘油 5ml 混合即得。(B)取蘇丹紅 0.0lg ,溶于乙酐 20 毫升 加甘油 10ml 混合即得。試料加本液 1-2 滴,木化細(xì)胞壁、角質(zhì)、油脂、蠟質(zhì)、 揮發(fā)油、樹(shù)脂均顯紅色。11紫草試液取紫草根粉 lg,加 90乙醇 10ml浸漬 24小時(shí)后濾過(guò),濾液中加入等量甘 油,混合,放置 2 小時(shí),濾過(guò)即得。置棕色玻璃瓶中貯存。在兩個(gè)月內(nèi)使用。用 途與蘇丹紅試液相同。12鋨酸試液取鋨酸 0.l g,溶于蒸餾水 5ml 中,即得。本
26、品須密塞避光貯存。脂肪油遇 本液染成棕色至藍(lán)色,揮發(fā)油與樹(shù)脂均不染色。13多能試劑先分別配下列三種溶液: (1) 取乳酸 20ml,加蘇丹紅或蘇丹至飽和為止, 加乳酸 30ml 稀釋。 (2) 硫酸苯胺 0.55g 溶于 35ml 蒸餾水中。 (3) 碘化鉀 0.55g 及碘 0.05g 溶于蒸餾水 5ml 中,再加入 55乙醇 5ml,將上述三液混合, 攪拌加 入濃鹽酸 (37 )25ml 。此液不過(guò)濾,直接供用。試料加本液 2-3 滴,慢慢加熱, 必要時(shí)補(bǔ)加少量試液, 并加蓋玻片。 木化細(xì)胞壁變黃色, 木栓化細(xì)胞壁變紅棕色, 脂肪油變紅色,淀粉變藍(lán)紫色。14三硝基酚 ( 苦味酸 )試液取三
27、硝基酚 l g加蒸餾水或 90乙醇 95ml 溶解,即得。蛋白質(zhì)遇本液呈黃 色,染糊粉粒時(shí),須用醇液,以免蛋白質(zhì)溶解。15硝酸汞試液即 (米龍?jiān)囈?)有兩種配制法(A) 取汞 1m1,加發(fā)煙硝酸 ( 比重 1.52)9ml ,反應(yīng)時(shí)須保持混合物冷卻。當(dāng)反 應(yīng)完畢后,加水 10ml。(B) 取氧化汞 (紅色或黃色品 )40g ,可加亞硝酸鉀液數(shù)滴, 以恢復(fù)其活性。本液可使含酪氨酸的蛋白質(zhì)呈磚紅色,靈敏度 1:20000。 16三氯化鐵試液取三氯化鐵 10g溶于蒸餾水 l00ml ,臨用前取此液 1 ml,加水 9ml稀釋。鞣 質(zhì)及多元酚 (黃酮類(lèi)等 )遇本液顯藍(lán)黑色或綠色。17鎢酸鈉試液取鎢酸鈉
28、 1g 與醋酸鈉 2g,加蒸餾水溶解到 10ml,即得。 鞣質(zhì)遇本液生成黃 棕色至紅棕色沉淀。18萘酚試液取萘酚 lg ,溶于 95乙醇 l0ml 即得。本液與 30WW硫酸配合應(yīng)用,可 使菊糖呈胭脂紅色并溶解。20釕紅試液取釕紅 80mg,加 l0 醋酸鉛溶液 100ml 使溶解即得。此液易失效,宜臨用 前配制。避光貯存,用量少時(shí),可于臨用前, 用針尖挑取少量釕紅溶于少量 l0 醋酸鉛溶液中,使呈酒紅色,即得。直接將釕紅溶于蒸鎦水中較好。含果膠質(zhì)的 細(xì)胞壁,酸性粘朊及糖元,遇本液染成紅色。 , 21可拉林鈉溶液有兩種配制法: (A) 取可拉林或玫紅酸 0.5g ,溶于 90乙醇 l0ml 中
29、( 甲液), 另取結(jié)晶碳酸鈉 25g,溶于蒸餾水 100ml中(乙液) 。將兩液分別裝瓶貯存,臨用 時(shí)取甲液 1ml 與乙液 20ml混合即得。 (B) 取碳酸鈉 3g溶于 7ml蒸餾水中,臨用 時(shí),取此液少量,加可拉林 l 小片,使呈粉紅色即得。混合液不耐貯存。胼胝體 及篩板遇此液呈粉紅色,木化細(xì)胞壁,淀粉粒及某些粘液質(zhì)也可染成粉紅色。 22亞甲蘭試液配成兩種溶液供用。 (1) 醇溶液:取亞甲蘭 0.1 g ,溶于 95乙醇 25ml 中; (2) 甘油溶液:取亞甲蘭 0.1 g 溶于 95乙醇及甘油 25ml 中。檢識(shí)粘液時(shí),先 加醇溶液 l-2 滴,加蓋玻片過(guò) l-2 分鐘后,再加入甘油
30、溶液粘液呈天藍(lán)色。 23硫堇試液'取硫堇 0.2ml ,溶于 25乙醇 100ml 即得。粘液質(zhì)或粘朊遇本液染成紅色至 紫色并膨脹成球形團(tuán)塊。24墨汁取商品墨汁,于臨用前加蒸餾水稀釋 l0 倍。粘液質(zhì)或粘朊不著色而呈透明 塊狀,其它細(xì)胞壁及細(xì)胞內(nèi)含物均呈黑色。25水合氯醛液取水合氯醛 50g,加水 20ml,使溶解即得。此為常用透化劑,可使皺縮的細(xì) 胞膨脹,并可溶解多種成分,如葉綠素、樹(shù)脂、揮發(fā)油、蛋白質(zhì)、淀粉等。 26乳酸氯醛取水合氯醛 50g,溶于乳酸 50ml 中即得。為透化劑,用于難透化樣品,用 法同水合氯醛。27乳酸酚取苯酚(石碳酸)2g ,乳酸 2g,甘油 2g 與蒸餾水
31、2ml,混合即得。為常用封 藏劑之一。28甘油醋酸液 (史氏溶液 )取甘油, 50醋酸,蒸餾水各等量混合即得。為常用封藏劑之一。29稀甘油取純甘油 l 0ml 加蒸餾水 20ml,混合即得;為常用封藏劑之一 30次氯酸鈉溶液 (漂白液 )取漂白粉 l0g ;分次加蒸餾水 75ml研勻,另取結(jié)晶碳酸鈉 l 5g 溶于 25ml 蒸餾水中,分次加入漂白粉液中,攪勻放置沉淀后取上清液,必要時(shí)過(guò)濾。 31硝鉻酸液取鉻酸(三氯化二鉻)l0g ,溶于l0 硝酸中' ,使全量為 100ml,即得。用于 木化組織的解離。325氫氧化鉀溶液取氫氧化鉀 5g,溶于蒸餾水 100ml 中,必要時(shí)用玻璃棉或垂
32、熔玻璃漏斗過(guò)濾 即得。用為透化劑及薄壁組織解離劑。亦可用 5氫氧化鈉代替。 33稀氨液(氨溶液、氨水 )含氨(NH4)l0 W/W,取濃氨液 40ml,加蒸餾水稀釋至全量為 100ml 即得。 34鹽酸、稀鹽酸如未指明濃度,鹽酸即指濃鹽酸,稀鹽酸指 10W W鹽酸。35. 硫酸、稀硫酸 未指明濃度,硫酸即指濃硫酸稀硫酸指 1 0WW硫酸。36醋酸、稀醋酸如未指明濃度,醋酸含 CH3COOH33 ;稀醋酸含 CH3COOH4 。 37乙醇 (酒精)最好用無(wú)水乙醇,但未特別指明時(shí),一般可用 95乙醇。38甘油明膠取明膠(粉末或剪碎 )l0g ,加蒸餾水 60ml,放置 2 小時(shí)后,加入溶有苯酚 l
33、g 的甘油 70ml,在水浴上加熱至完全溶解,用帶有綢布,玻璃棉或粗濾紙的漏斗 保溫約 60過(guò)濾。貯存在帶玻璃塞的廣口瓶中備用。用時(shí)入水浴中加熱熔化。 亦可于熔化后倒人培養(yǎng)皿中,使厚度約 5mm的層,冷卻凝固后,切成長(zhǎng)約 5mm 的小方塊。用時(shí)用解剖針取 l 小塊,放在載玻片上,加熱熔化。39樹(shù)膠甘油取白色阿拉伯膠 40g,加水 30ml,在水浴上加溫至溶解,加入甘油 40g,麝 香草酚 0.lg 為防腐劑,混勻即得。40加拿大香脂取加拿大香脂在水浴上蒸發(fā)至揮發(fā)性物質(zhì)全部除去,且放冷后能形成硬塊 時(shí),加適量二甲苯或苯,使形成糖漿狀液體。41曙紅溶液:取曙紅 lg ,溶于 90乙醇 l00ml 即得。42番紅溶液取番紅 lg ,溶于 50乙醇 100ml 即得。必要時(shí)可加入 50乙醇稀釋。 43Johason 番紅溶液取番紅 lg ,溶于甲基溶纖維素 50ml 加 95乙醇 25ml,蒸餾水 25m1再加 醋酸鈉 l g 與甲
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