HPV分型試劑盒及市場各產(chǎn)品比較

1、hpv分型試劑盒1、 hpv目前市場上主要產(chǎn)品：雜交法（達安19、凱普21、亞能23、透景26）；實時熒光pcr（之江13種高危分型、港龍凱普亞能13種高危不分型、達安8個型定量）；第二代雜交捕獲法（hc2）等2、操作方法：200ul標本hpv所有廠家標本處理操作流程（包括之江生物，都大同小異）：12000rpm離心5min沉淀加1ml生理鹽水混勻12000rpm離心5min沉淀加100ul核酸提取液混勻100溫浴10分鐘12000rpm離心5minpcr試劑配制點樣上pcr儀擴增hpv實驗：a、雜交法：首先加樣上pcr儀做擴增，上機時間大約一個半小時左右。pcr完成后做雜交，目前市場上有手工

2、雜交和使用雜交儀雜交。操作時間2-4個小時。b、第二代雜交捕獲法（hc2）: 原理是利用對抗體捕獲信號的放大和化學發(fā)光信號的檢測, c、熒光定量pcr：直接上機通過熒光信號累積實時監(jiān)測整個pcr進程，之江生物是用多重pcr對標本進行準確的13個高危型的具體分型，其他不能具體分型。舉例之江產(chǎn)品：之江八管雙通道儀器(雙色熒光pcr儀器都可以用)：123456789101112amix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1bmix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2cmix3mix3mix3mi

3、x3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3dmix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4emix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5mix5fmix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6mix6gmix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7mix7hmix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8mix8一排八管做一個標本即可具體分型！結果判斷：

4、hpv核酸熒光pcr檢測混合液若fam通道ct值35，結果判斷為若vic通道ct值35，結果判斷為mix116+56hpv16hpv56mix218+45hpv18hpv45mix335+59hpv35hpv59mix439+51hpv39hpv51mix558+52hpv58hpv52mix631hpv31mix733hpv33mix868hpv68四管四通道儀器（abi7500、羅氏480、伯樂cfx96、slan96孔等四色熒光pcr儀器）：123456789101112amix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1bmix2mix2m

5、ix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2cmix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3dmix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4emix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1mix1fmix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2mix2gmix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3mix3hmix4mix4mix4mix

6、4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4mix4四管做一個標本即可具體分型！結果判斷：hpv核酸熒光pcr檢測混合液若fam通道ct值35，結果判斷為若vic通道ct值35，結果判斷為若610通道ct值35，結果判斷為若670通道ct值35，結果判斷為mix116+56hpv16hpv56mix218+52+58+31hpv18hpv52hpv58hpv31mix335+45+33+68hpv35hpv45hpv33hpv68mix439+51+59hpv39hpv51hpv593、 產(chǎn)品分析比較： 之江h(huán)pv試劑hc-ii試劑檢測方法熒光pcr法二代雜交捕獲核酸檢

7、測技術檢測hpv分型13種高危型具體分型不能分型檢測時間1.5-2小時4小時以上操作簡單繁瑣（涉及10多種試劑配制等）檢測過程pcr擴增，儀器自動完成多步加液安全性閉管反應，安全性高多種試劑，操作過程接觸有毒物質(zhì)檢測儀器pcr儀器分子雜交儀等專用儀器靈敏度高靈敏較靈敏檢測方式閉管檢測，有效防止污染不進行pcr擴增，無污染檢測通量基本已適合目前醫(yī)院標本量通量高結果分析儀器自動分析人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件樣本類型生殖道分泌物、宮頸細胞等生殖道分泌物、宮頸細胞等實驗室要求pcr實驗室驗收不需 之江h(huán)pv試劑凱普hpv試劑檢測方法熒光pcr法核酸擴增及導流雜交技術檢測時間1.5-2小時4

8、-8小時pcr反應體積40ul25ulpcr擴增模板4ul1ul檢測儀器pcr儀器pcr儀器及分子雜交儀檢測hpv型別高危13型21型靈敏度高靈敏較靈敏樣本類型生殖道分泌物、宮頸細胞等生殖道分泌物、宮頸細胞等檢測方式閉管檢測，有效防止污染雜交為開放式反應，易產(chǎn)生交叉污染檢測通量基本適合目前醫(yī)院標本量通量高結果分析儀器自動分析人工閱讀或需專用閱讀儀及軟件生物安全閉管反應，安全性高雜交過程會接觸有危險物質(zhì)如：nbt/bcpi有毒溶液等多種混合型抗干擾能力強干擾，不宜檢測4、上海之江h(huán)pv優(yōu)劣勢: 優(yōu)點：閉管pcr操作，避免擴增污染能夠?qū)?3個高危型精確分型靈敏度高，操作簡單，減少了雜交的操作程序，一個實驗大約2個小時內(nèi)完成針對開放熒光pcr檢測系統(tǒng)，無需額外增加設備，有人員培訓基礎?？梢韵鄬Χ浚篶t值30（+）；30 ct值24（+）；