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1、微專題突破 基因工程一、與核酸有關(guān)的各種酶的比較名稱作用參與生理過(guò)程應(yīng)用作用位點(diǎn)(如下圖)dna連接酶連接兩個(gè)dna片段基因工程a限制酶切割某種特定的脫氧核苷酸序列adna聚合酶在脫氧核苷酸鏈上添加單個(gè)脫氧核苷酸dna復(fù)制arna聚合酶在核糖核苷酸鏈上添加單個(gè)核糖核苷酸轉(zhuǎn)錄解旋酶使堿基間氫鍵斷裂形成脫氧核苷酸單鏈dna復(fù)制及轉(zhuǎn)錄b逆轉(zhuǎn)錄酶以rna為模板合成dna逆轉(zhuǎn)錄、基因工程a作用位點(diǎn)示意圖二、易混概念辨析1基因文庫(kù)、基因組文庫(kù)、部分基因文庫(kù)(1)從定義上區(qū)分基因文庫(kù):將含有某種生物不同基因的許多dna片段,導(dǎo)入受體菌的群體中儲(chǔ)存,各個(gè)受體菌分別含有這種生物的不同的基因,稱為基因文庫(kù)?;蛭?/p>
2、庫(kù)是指儲(chǔ)存有某種生物基因的菌群的總稱?;蚪M文庫(kù):如果基因文庫(kù)中含有一種生物的所有基因,這種基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)。部分基因文庫(kù):指含有一種生物的一部分基因的基因文庫(kù),如cdna文庫(kù)。(2)從范圍上區(qū)別:基因文庫(kù)包含基因組文庫(kù)和部分基因文庫(kù)?;蚪M文庫(kù)有某一種生物的全部基因,它的范圍要大于部分基因文庫(kù)。2啟動(dòng)子、終止子、起始密碼子、終止密碼子(1)從定義上區(qū)分啟動(dòng)子:位于編碼區(qū)上游緊靠轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)的位置。它的主要功能是引導(dǎo)rna聚合酶與基因的正確部位結(jié)合。只有在啟動(dòng)子存在時(shí),rna聚合酶才能準(zhǔn)確地從轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)開(kāi)始,沿著編碼區(qū)正常地進(jìn)行轉(zhuǎn)錄。終止子:位于編碼區(qū)下游緊靠轉(zhuǎn)錄終點(diǎn)的位置。它的特殊的堿基排列
3、順序能夠阻礙rna聚合酶的移動(dòng),并使其從dna模板鏈上脫離下來(lái)。密碼子:指信使rna上決定一個(gè)氨基酸的三個(gè)相鄰的堿基。信使rna上四種堿基的組合方式有64種,其中,決定氨基酸的密碼子有61種,3種是終止密碼子。終止密碼子:是信使rna上能夠終止蛋白質(zhì)合成的密碼子。起始密碼子:位于信使rna上,是蛋白質(zhì)合成開(kāi)始的信號(hào),有兩種:aug、gug。(2)從本質(zhì)上區(qū)別 啟動(dòng)子和終止子都是dna分子中具有調(diào)控作用的脫氧核苷酸序列,而起始密碼子和終止密碼子都位于信使rna上,分別是翻譯的起始位置和終止位置,終止密碼子不能決定任何一種氨基酸。1下列關(guān)于各種酶作用的敘述,不正確的是()adna連接酶能使不同脫氧
4、核苷酸的磷酸與脫氧核糖連接brna聚合酶能與基因的特定位點(diǎn)結(jié)合,催化遺傳信息的轉(zhuǎn)錄c一種限制酶能識(shí)別多種核苷酸序列,切割出多種目的基因d限制酶將一個(gè)dna分子片段切割成兩個(gè)片段需消耗兩個(gè)水分子【解析】dna連接酶能在磷酸與脫氧核糖之間形成磷酸二酯鍵;rna聚合酶可以識(shí)別基因上的特定位點(diǎn);一種限制酶只能識(shí)別一種特定的核苷酸序列;限制酶切割一個(gè)dna分子時(shí)需水解兩個(gè)磷酸二酯鍵?!敬鸢浮縞2甲、乙兩圖表示從細(xì)菌細(xì)胞中獲取目的基因的兩種方法,以下說(shuō)法中錯(cuò)誤的是 ()a甲方法可建立該細(xì)菌的基因組文庫(kù)b乙方法可建立該細(xì)菌的cdna文庫(kù)c甲方法要以脫氧核苷酸為原料d乙方法需要反轉(zhuǎn)錄酶參與【解析】甲方法是以細(xì)
5、菌中的dna為基礎(chǔ),用限制酶進(jìn)行切割,它包括了細(xì)菌所有的基因,可以建立基因組文庫(kù),并且可以從中選出所需的目的基因,不需要模板,不需要原料。而乙方法是用反轉(zhuǎn)錄的方法人工合成目的基因,它只能得到生物的部分基因,基因中只有外顯子,所以組成的是該細(xì)菌的cdna文庫(kù)?!敬鸢浮縞3下圖為基因表達(dá)載體的模式圖。下列有關(guān)基因工程中載體的說(shuō)法,錯(cuò)誤的是()a基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體構(gòu)建b任何基因表達(dá)載體的構(gòu)建都是一樣的,沒(méi)有差別c圖中啟動(dòng)子位于基因的首端,是rna聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位d抗生素抗性基因的作用是作為標(biāo)記基因,用于鑒別受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因【解析】由于受體細(xì)胞有植物、動(dòng)物和微生物之分,
6、以及目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方式不同,因此,基因表達(dá)載體的構(gòu)建也會(huì)有所差別,不可能是千篇一律的?!敬鸢浮縝4據(jù)下圖分析,下列有關(guān)基因工程的說(shuō)法不正確的是()a為防止目的基因與質(zhì)粒任意結(jié)合而影響基因的表達(dá),應(yīng)用限制酶、同時(shí)切割二者b限制酶、dna連接酶的作用部位都是磷酸二酯鍵c與啟動(dòng)子結(jié)合的應(yīng)該是rna聚合酶d能夠檢測(cè)到標(biāo)記基因表達(dá)產(chǎn)物的受體細(xì)胞中,也一定會(huì)有目的基因的表達(dá)產(chǎn)物 【解析】將質(zhì)粒與目的基因進(jìn)行切割、連接時(shí),不能保證二者全部成功連接,因此,導(dǎo)入了原質(zhì)粒的受體細(xì)胞中能檢測(cè)到標(biāo)記基因的表達(dá)產(chǎn)物,但是不一定會(huì)檢測(cè)到目的基因的表達(dá)產(chǎn)物。 【答案】d5生物分子間特異性結(jié)合的性質(zhì)廣泛用于生命科學(xué)研
7、究。以下實(shí)例為體外處理“蛋白質(zhì)dna復(fù)合體”獲得dna片段信息的過(guò)程圖。據(jù)圖回答:(1)過(guò)程酶作用的部位是_鍵,此過(guò)程只發(fā)生在非結(jié)合區(qū)dna,過(guò)程酶作用的部位是_鍵。(2)、兩過(guò)程利用了酶的_特性。(3)若將得到的dna片段用于構(gòu)建重組質(zhì)粒,需要將過(guò)程的測(cè)序結(jié)果與_酶的識(shí)別序列進(jìn)行比對(duì),以確定選用何種酶。(4)如果復(fù)合體中的蛋白質(zhì)為rna聚合酶,則其識(shí)別、結(jié)合的dna序列區(qū)為基因的_。(5)以下研究利用了生物分子間特異性結(jié)合性質(zhì)的有_(多選)。a分離得到核糖體,用蛋白酶酶解后提取rrnab用無(wú)水乙醇處理菠菜葉片,提取葉綠體基粒膜上的光合色素c通過(guò)分子雜交手段,用熒光物質(zhì)標(biāo)記的目的基因進(jìn)行染色體
8、基因定位d將抑制成熟基因?qū)敕?,其mrna與催化成熟酶基因的mrna互補(bǔ)結(jié)合,終止后者翻譯,延遲果實(shí)成熟【解析】解答本題,需要首先通讀題干,確認(rèn)流程圖中每一步分子發(fā)生的變化,再根據(jù)各小題題干進(jìn)行解答。在過(guò)程中,用dna酶將dna的雙鏈剪斷,與限制性核酸內(nèi)切酶的作用相同,限制性核酸內(nèi)切酶作用的部位是磷酸二酯鍵;過(guò)程中蛋白質(zhì)被水解,與脫水縮合正好相反,蛋白質(zhì)分解的實(shí)質(zhì)是肽鍵的水解,這兩步中酶均只分解特定的物質(zhì),而不分解其他分子,利用了酶的專一性。構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí),需要限制酶和dna連接酶,因此需將過(guò)程的測(cè)序結(jié)果與限制性核酸內(nèi)切酶的識(shí)別序列進(jìn)行對(duì)比,以確定選用何種限制性核酸內(nèi)切酶。rna聚合酶的功能是啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,因此其識(shí)別并結(jié)合的部位是基因的轉(zhuǎn)錄起始區(qū)或啟動(dòng)子區(qū)域。第(5)題中a項(xiàng)用蛋白酶酶解核糖體中的蛋白質(zhì)后,只剩下rrna,利用了酶的專一性,a項(xiàng)正確;b項(xiàng)中用無(wú)水乙醇處理葉片,進(jìn)行色素的提取和分離,是因?yàn)闊o(wú)水乙醇是有機(jī)物,可溶解各種色素,不屬于特異性結(jié)合,b項(xiàng)錯(cuò)誤;c項(xiàng)是用基因探針?lè)?,利用已知基因的堿基序列可與另一基因上的堿基進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)的性質(zhì)來(lái)進(jìn)行基因定位,
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