檢測(cè)生物組織中的還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)

1、L/O/G/O 檢測(cè)生物組織中的檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)糖類、脂肪和蛋白質(zhì)2011-10-8實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定 脂質(zhì)的鑒定脂質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 Click to add title in here 4123檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)4淀粉的鑒定淀粉的鑒定 （一）還原糖的鑒定（一）還原糖的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)原理 NaOH + CuSO4 Cu(OH)2 藍(lán)色沉淀藍(lán)色沉淀 + Cu(OH) 2 + 還原糖還原糖Cu 2 O 磚紅色沉淀磚紅色沉淀 + （水浴條件（水浴條件：50-6550-65）葡萄糖葡萄糖等

2、還原糖等還原糖分子中存在醛基等分子中存在醛基等還原性還原性基團(tuán)基團(tuán)能與能與斐林試劑斐林試劑作用生成磚紅色沉淀。作用生成磚紅色沉淀。斐林試劑斐林試劑 ：甲液：質(zhì)量濃度為：甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 乙液：質(zhì)量濃度為乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/ml0.05g/ml的的CuSOCuSO4 4溶液溶液材料材料Text in hereText in hereText in here材料要含有豐富還原糖材料要含有豐富還原糖材料顏色材料顏色為白色或近于白色為白色或近于白色以免造成干擾以免造成干擾選材選材原則原則富含還原糖富含還原糖富含蔗糖富含蔗糖含淀粉但還含淀粉

3、但還原糖很少原糖很少顏色干擾顏色干擾富含蔗糖富含蔗糖富含還原糖富含還原糖2、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)步驟反應(yīng)初始反應(yīng)初始反應(yīng)結(jié)束磚紅色反應(yīng)結(jié)束磚紅色對(duì)照對(duì)照藍(lán)藍(lán)色色棕棕色色磚磚紅紅色色3、注意事項(xiàng)、注意事項(xiàng)要選擇要選擇含還原糖豐富含還原糖豐富，顏色為，顏色為白色或白色或近于白色近于白色的植物組織的植物組織斐林試劑不穩(wěn)定，一般配成甲液、乙斐林試劑不穩(wěn)定，一般配成甲液、乙液來分別配制、儲(chǔ)存。液來分別配制、儲(chǔ)存。使用時(shí)將甲液、使用時(shí)將甲液、乙液等量混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用乙液等量混合均勻，現(xiàn)配現(xiàn)用1、材料選取、材料選取2、斐林試劑、斐林試劑對(duì)試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí)，試管底對(duì)試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí)，試管底部不要觸及燒

4、杯底部；試管口不要朝部不要觸及燒杯底部；試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者向?qū)嶒?yàn)者 3、水浴加熱、水浴加熱實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定 脂肪的鑒定脂肪的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 Click to add title in here 4123檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)4淀粉的鑒定淀粉的鑒定 （二）淀粉鑒定（二）淀粉鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理、實(shí)驗(yàn)原理2、選材、選材選擇淀粉含量選擇淀粉含量高，顏色近于高，顏色近于白色的生物組白色的生物組織，如馬鈴薯織，如馬鈴薯塊莖研磨液塊莖研磨液淀粉遇碘淀粉遇碘會(huì)變成藍(lán)會(huì)變成藍(lán)色色3 3、過程及結(jié)果、過程及結(jié)果向向2ml2ml組織樣組

5、織樣液中加兩滴液中加兩滴碘液，搖勻碘液，搖勻后變成藍(lán)色后變成藍(lán)色（三）脂肪的鑒定（三）脂肪的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理脂肪可被脂肪可被 蘇丹蘇丹染成染成橘黃色橘黃色 蘇丹蘇丹染成染成紅色紅色蘇丹蘇丹材料材料 選擇富含脂肪且比較大的選擇富含脂肪且比較大的種子，成熟花生種子是最種子，成熟花生種子是最好的選擇，實(shí)驗(yàn)前好的選擇，實(shí)驗(yàn)前浸泡浸泡3 34 4小時(shí)小時(shí)時(shí)間過長(zhǎng)時(shí)間過長(zhǎng)：組織太軟，切下的：組織太軟，切下的薄片，薄片，不易成形不易成形時(shí)間過短時(shí)間過短：不容易切片不容易切片2、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)步驟注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)切片要盡可能切片要盡可能薄，觀察時(shí)要薄，觀察時(shí)要找最薄處，最找最薄處，最好只有好只有1 12 2層

6、細(xì)胞層細(xì)胞 染色后一定染色后一定要用體積分要用體積分?jǐn)?shù)為數(shù)為5050的的酒精溶液酒精溶液洗洗去浮色去浮色用蘇丹用蘇丹染色染色時(shí)間不宜過長(zhǎng)，時(shí)間不宜過長(zhǎng)，否則否則脂肪會(huì)溶脂肪會(huì)溶解在蘇丹解在蘇丹溶溶液中的酒精里液中的酒精里3、注意事項(xiàng)、注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)還原性糖的鑒定還原性糖的鑒定 脂肪的鑒定脂肪的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定蛋白質(zhì)的鑒定 Click to add title in here 4123檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)4淀粉的鑒定淀粉的鑒定 （四）蛋白質(zhì)的鑒定（四）蛋白質(zhì)的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)與雙縮脲具有相同的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)與雙縮脲具有相同的結(jié)構(gòu)-肽鍵肽鍵，能在

7、，能在堿性環(huán)境堿性環(huán)境下與雙縮脲試下與雙縮脲試劑中的劑中的CuCu2+2+產(chǎn)生產(chǎn)生紫色紫色絡(luò)合物絡(luò)合物雙縮脲試劑雙縮脲試劑A A液：質(zhì)量濃度為液：質(zhì)量濃度為0.1g/ml0.1g/ml的的NaOHNaOH溶液溶液 B B液：質(zhì)量濃度為液：質(zhì)量濃度為0.01g/ml0.01g/ml的的CuSOCuSO4 4溶液溶液注：雙縮脲與雙縮脲試劑不同。材料：材料：浸泡浸泡1 12 2天的大豆種子（或豆天的大豆種子（或豆?jié){）或雞蛋蛋白，也可用鮮肝漿）或雞蛋蛋白，也可用鮮肝提取液提取液2、實(shí)驗(yàn)步驟、實(shí)驗(yàn)步驟3、注意事項(xiàng)、注意事項(xiàng)實(shí)驗(yàn)樣液要留出一份作為實(shí)驗(yàn)樣液要留出一份作為對(duì)照對(duì)照（還原糖、淀粉的鑒定也要留出（

8、還原糖、淀粉的鑒定也要留出樣液進(jìn)行對(duì)照）樣液進(jìn)行對(duì)照）使用雙縮脲試劑時(shí)，應(yīng)使用雙縮脲試劑時(shí)，應(yīng)先先加加A A液造成堿性環(huán)境，再加液造成堿性環(huán)境，再加B B液液若使用蛋清，必須按要求若使用蛋清，必須按要求稀稀釋釋，如果稀釋不夠會(huì)粘附于，如果稀釋不夠會(huì)粘附于試管壁上，不易洗刷試管壁上，不易洗刷拓展：斐林試劑與雙縮脲試劑的對(duì)比拓展：斐林試劑與雙縮脲試劑的對(duì)比 斐林試劑斐林試劑雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定成分鑒定成分還原糖還原糖蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)鑒定原理鑒定原理還原糖中的醛基還原糖中的醛基在在加熱條件加熱條件下能將下能將Cu(OH)Cu(OH)2 2中的中的CuCu2+2+還原成還原成CuCu+ +，從而生成，

9、從而生成磚紅色磚紅色CuCu2 2O O沉淀沉淀雙縮脲在堿性溶液中能與雙縮脲在堿性溶液中能與CuCu2+2+結(jié)合生成紫色絡(luò)合物，蛋白質(zhì)結(jié)合生成紫色絡(luò)合物，蛋白質(zhì)分子中含有與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似分子中含有與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵，因而也能與的肽鍵，因而也能與CuCu2+2+作用作用試劑濃度試劑濃度甲液：質(zhì)量濃度為甲液：質(zhì)量濃度為0.1g/mol0.1g/mol的的NaOHNaOH溶液，溶液， 乙液：質(zhì)量濃度為乙液：質(zhì)量濃度為0.05g/mol0.05g/mol的的CuSO4 CuSO4 溶液溶液A A液：質(zhì)量濃度為液：質(zhì)量濃度為0.1g/ml0.1g/ml的的 NaOHNaOH溶液溶液B B液：質(zhì)量濃度

10、為液：質(zhì)量濃度為0.01g/ml0.01g/ml的的CuSO4CuSO4溶液溶液使用方法使用方法甲液、乙液甲液、乙液等量混合均勻等量混合均勻后再加入樣液后再加入樣液先加先加A A液造成堿性環(huán)境后，液造成堿性環(huán)境后，再加再加B B液液使用條件使用條件水浴加熱（水浴加熱（50-6550-65）不加熱不加熱實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象淺藍(lán)色淺藍(lán)色 棕色棕色 磚紅色磚紅色紫色紫色 唯一用到顯微鏡的實(shí)驗(yàn)唯一用到顯微鏡的實(shí)驗(yàn)脂質(zhì)的鑒定脂質(zhì)的鑒定 唯一需要加熱的實(shí)驗(yàn)唯一需要加熱的實(shí)驗(yàn)還原糖的鑒定還原糖的鑒定 非還原糖中加入斐林試劑現(xiàn)象：不是無色非還原糖中加入斐林試劑現(xiàn)象：不是無色而是藍(lán)色而是藍(lán)色典型例題分析：典型例題分

11、析：1 1、在、在“檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)檢測(cè)生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)”的實(shí)驗(yàn)中提供了的實(shí)驗(yàn)中提供了如下備選實(shí)驗(yàn)材料：如下備選實(shí)驗(yàn)材料： 蘋果、白蘿卜、大米、韭菜的葉、核桃、油菜籽、黃豆。蘋果、白蘿卜、大米、韭菜的葉、核桃、油菜籽、黃豆。 【分析分析】實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵之一是科學(xué)選擇實(shí)驗(yàn)材料，具體分析如下：實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵之一是科學(xué)選擇實(shí)驗(yàn)材料，具體分析如下： (1)(1)檢測(cè)還原糖時(shí)，為什么不選取白蘿卜或韭菜的葉？檢測(cè)還原糖時(shí)，為什么不選取白蘿卜或韭菜的葉？提示：提示：白蘿卜含還原糖很少，不符合選材的要求；白蘿卜含還原糖很少，不符合選材的要求；韭菜的葉中含有葉綠素，不利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象

12、的觀察。韭菜的葉中含有葉綠素，不利于實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察。(2)(2)檢測(cè)脂肪時(shí)，為什么不選取核桃？檢測(cè)脂肪時(shí)，為什么不選取核桃？提示：提示：核桃的種子雖然含有豐富的脂肪，但核桃的核桃的種子雖然含有豐富的脂肪，但核桃的果皮堅(jiān)硬，種皮又有顏色，不容易去除。果皮堅(jiān)硬，種皮又有顏色，不容易去除。(3)(3)如果把黃豆浸泡萌發(fā)成黃豆芽，能利用黃豆芽檢如果把黃豆浸泡萌發(fā)成黃豆芽，能利用黃豆芽檢測(cè)蛋白質(zhì)嗎？測(cè)蛋白質(zhì)嗎？提示：提示：不能，因?yàn)辄S豆萌發(fā)成黃豆芽，消耗了蛋白不能，因?yàn)辄S豆萌發(fā)成黃豆芽，消耗了蛋白質(zhì)。質(zhì)。2.2.鑒定某脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品，不需用的鑒定某脫脂淡奶粉是否為偽劣產(chǎn)品，不需用的化學(xué)試劑是化

13、學(xué)試劑是 ( )( )A.A.斐林試劑斐林試劑 B.B.蘇丹蘇丹染液染液C.C.雙縮脲雙縮脲 D.D.甲基綠甲基綠【解析解析】選選D D。甲基綠是對(duì)。甲基綠是對(duì)DNADNA染色，染成綠色。染色，染成綠色。拓展：拓展：健康人體中，能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)健康人體中，能與雙縮脲試劑發(fā)生紫色反應(yīng)的是（的是（ ） 尿素尿素 胃液胃液 汗液汗液 唾液唾液3.3.以花生子葉為材料進(jìn)行脂肪的檢測(cè)時(shí)，制作以花生子葉為材料進(jìn)行脂肪的檢測(cè)時(shí)，制作臨時(shí)裝片的正確步驟是臨時(shí)裝片的正確步驟是( )( )蓋蓋玻片蓋蓋玻片 切子葉切子葉 蘇丹蘇丹染液染色染液染色滴加蒸餾水滴加蒸餾水 酒精洗去浮色酒精洗去浮色A.A. B.

14、 B.C.C. D. D.【解析解析】選選D D。制作臨時(shí)裝片的步驟包括切片、。制作臨時(shí)裝片的步驟包括切片、制片，其中制片過程又包括染色、洗去浮色、制片，其中制片過程又包括染色、洗去浮色、滴加蒸餾水和蓋蓋玻片。滴加蒸餾水和蓋蓋玻片。4.4.生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)化生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)三種有機(jī)化合物的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是合物的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中，以下操作錯(cuò)誤的是( )( )A.A.只有脂肪的檢測(cè)需要使用顯微鏡只有脂肪的檢測(cè)需要使用顯微鏡B.B.用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱用雙縮脲試劑檢測(cè)蛋白質(zhì)不需要加熱C.C.斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)用現(xiàn)配斐林試劑和雙縮脲試劑最好是現(xiàn)用現(xiàn)配D.D.可溶性還原糖的檢測(cè)，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)可溶性還原糖的檢測(cè)，可用酒精燈直接加熱產(chǎn)生磚紅色沉淀生磚紅色沉淀【解析解析】選選D D。斐林試劑包括甲液和乙