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文檔簡(jiǎn)介
1、復(fù)習(xí)思考題(供生物技術(shù)班)一、名詞解釋1單基因病:指由單個(gè)基因突變所引起的疾病,而所謂的單個(gè)基因在這里是指位于一對(duì)同源染色體上的單個(gè)或一對(duì)等位基因。2線粒體遺傳病:廣義的線粒體病指以線粒體功能異常為病因?qū)W核心的一大類疾病,包括線粒體基因組、核基因組缺陷以及二者之間的通訊缺陷。狹義的線粒體病僅指線粒體DNA突變所致的線粒體功能異常,為通常所指的線粒體病。線粒體DNA為呼吸鏈的部分肽鏈及線粒體蛋白質(zhì)合成系統(tǒng)rRNA和tRNA編碼,這些線粒體基因突變所導(dǎo)致的疾病也稱為線粒體遺傳病。3基因組:是一個(gè)細(xì)胞或一種生物體的整套遺傳物質(zhì)。每個(gè)染色體組的DNA構(gòu)成一個(gè)基因組。廣義的基因組包括細(xì)胞核染色體基因組和
2、細(xì)胞質(zhì)中的線粒體基因組。4基因:基因是決定一定功能產(chǎn)物的DNA序列(片斷),是遺傳的結(jié)構(gòu)和功能單位。5結(jié)構(gòu)基因:指基因中編碼RNA和蛋白質(zhì)的核苷酸序列。它們?cè)谠松镏羞B續(xù)排列,在真核生物中則間斷排列。6質(zhì)粒:(plasmid)指細(xì)菌細(xì)胞染色體以外,能獨(dú)立復(fù)制并穩(wěn)定遺傳的共價(jià)閉合環(huán)狀DNA分子 7轉(zhuǎn)座因子:或轉(zhuǎn)座元件。是一類在細(xì)菌染色體、質(zhì)粒或噬菌體之間自行移動(dòng)并具有轉(zhuǎn)位特性的獨(dú)立DNA序列。是基因重組的一種方式。8假基因:在多基因家族中,某些與正常功能基因在核苷酸序列上相似,但不能轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄后生成不具功能基因產(chǎn)物的DNA序列稱為假基因。用表示。9RFLP:在同種生物的不同個(gè)體中會(huì)出現(xiàn)不同長(zhǎng)度
3、的限制性片段類型,即限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性。10基因重疊:是指兩個(gè)或兩個(gè)以上的基因共有一段DNA序列,或是指一段DNA序列成為兩個(gè)或兩個(gè)以上基因的組成部分。11衛(wèi)星DNA:指固定的重復(fù)單位頭尾相連形成重復(fù)順序片段重復(fù)長(zhǎng)度105 106BP與主體DNA的堿基組成不同(G+C含量少),用CsCl2密度梯度離心,可在主帶的兩側(cè)出現(xiàn)小帶,稱為衛(wèi)星DNA12基因多態(tài)性:基因組中某個(gè)基因在同種生物的不同個(gè)體中,同時(shí)存在兩種或以上的變異型或基因型的現(xiàn)象,稱為基因多態(tài)性。13反義RNA:堿基序列正好與有意義的mRNA互補(bǔ)的RNA稱為反義RNA??梢宰鳛橐环N調(diào)控特定基因表達(dá)的手段。14核酶:催化性RNA (rib
4、ozyme)作為序列特異性的核酸內(nèi)切酶降解mRNA。 15RNA干擾:是指一種分子生物學(xué)上由雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA)誘發(fā)的基因沉默現(xiàn)象。(或RNA干擾能觸發(fā)與短dsRNA中任何一鏈互補(bǔ)的mRNA的降解。誘發(fā)宿主基因沉默的現(xiàn)象。)16微RNA:是在動(dòng)物和植物基因組中普遍存在,是一類重要的行使基因功能但不編碼蛋白質(zhì)的基因。17原癌基因:正常宿主細(xì)胞中與病毒癌基因同源的基因,往往編碼生長(zhǎng)因子或其他信號(hào)轉(zhuǎn) 導(dǎo)分子,為細(xì)胞生長(zhǎng)所必需;只有特定條件下被活化后才有致癌性,又稱為原癌基因。 18抑癌基因:正常細(xì)胞中存在的抑制腫瘤發(fā)生的基因。19細(xì)胞癌基因:存在于正常的細(xì)
5、胞基因組中,與病毒癌基因有同源序列,具有促進(jìn)正常細(xì)胞生長(zhǎng)、增殖、分化和發(fā)育等生理功能。在正常細(xì)胞內(nèi)未激活的細(xì)胞癌基因叫原癌基因,當(dāng)其受到某些條件激活時(shí),結(jié)構(gòu)和表達(dá)發(fā)生異常,能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。 20病毒癌基因:存在于病毒(大多是逆轉(zhuǎn)錄病毒)基因組中能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。它不編碼病毒結(jié)構(gòu)成分,對(duì)病毒無(wú)復(fù)制作用,但是當(dāng)受到外界的條件激活時(shí)可產(chǎn)生誘導(dǎo)腫瘤發(fā)生的作用。21原位雜交:將標(biāo)記的核酸探針與固定在細(xì)胞或組織中的核酸進(jìn)行雜交,稱原位雜交22探針: 一段帶有檢測(cè)標(biāo)記的與特定核酸序列特異互補(bǔ)的已知核苷酸序列。 23融解溫度:即Tm。變性是在一個(gè)相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成,在這一范圍內(nèi),紫外光吸
6、收值達(dá)到最大值的50%時(shí)的溫度稱為DNA的解鏈溫度,又稱融解溫度(melting temperature, Tm)。24逆轉(zhuǎn)錄PCR:利用逆轉(zhuǎn)錄酶將細(xì)胞mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA,再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增 25SSCP: 即單鏈構(gòu)象多態(tài)性分析,它是一種基于DNA構(gòu)象差別來(lái)檢測(cè)點(diǎn)突變的方法。相同長(zhǎng)度的單鏈DNA,如果堿基序列不同,形成的構(gòu)象就不同,這樣就形成了單鏈構(gòu)象多態(tài)性。26變性梯度凝膠電泳:設(shè)計(jì)兩條引物使擴(kuò)增片段兩端的Tm值不同,當(dāng)DNA片段泳動(dòng)至變性劑相應(yīng)濃度位置時(shí),片段中Tm較低的一端部分變性解鏈,構(gòu)想改變而致遷移率大大降低27熒光定量PCR:實(shí)時(shí)PCR指在 PCR 指數(shù)擴(kuò)增
7、期間通過(guò)連續(xù)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)出現(xiàn)的先后順序以及信號(hào)強(qiáng)弱的變化來(lái)即時(shí)分析目的基因的拷貝數(shù)目,通過(guò)與加入已知量的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行比較 ,可實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)定量。28Ct值:每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的閾值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。二、填空題1DNA攜帶的兩類編碼信息是 編碼蛋白質(zhì)和RNA的信息、 編碼基因選擇性表達(dá)的信息 ,前者可作為蛋白質(zhì)合成的模板,后者則可參與蛋白質(zhì)合成過(guò)程。2真核基因的編碼序列常被 非編碼的間隔序列 斷開(kāi),故又稱為斷裂基因。3熒光定量PCR為產(chǎn)物的 初始(起始)模板 定量,普通PCR為產(chǎn)物的 終點(diǎn)產(chǎn)物 定量;前者通過(guò)與加入 已知量的標(biāo)準(zhǔn)品 進(jìn)行比較實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)定量。4DNA復(fù)制的起始點(diǎn)處呈現(xiàn)一叉形稱為
8、 復(fù)制叉 。5真核生物mRNA 加工過(guò)程可能包括 mRNA5-加帽 、 mRNA3-加尾 、 編輯 、 化學(xué)修飾 。6DNA復(fù)制的條件包括 DNA模板 ,引物 , 酶 , dNTP 。7病原生物基因診斷策略包括 病毒感染的一般性檢出策略,病毒感染的完整性檢出策略 ;前者主要針對(duì)病毒的 特異性核酸序列 進(jìn)行檢測(cè),后者檢測(cè)包括 病毒感染拷貝數(shù)測(cè)定 , 基因分型及亞型測(cè)定 , 耐藥性檢測(cè) 。8 DNA聚合酶具有三種功能,分別為 聚合酶切除引物修復(fù)功能 、 聚合酶修復(fù)功能 、 聚合酶復(fù)制功能 。9原核生物基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控涉及 啟動(dòng)子 、 因子 和 轉(zhuǎn)錄因子 三大要素間的相互作用。10DNA多態(tài)性類型:限制
9、性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP) 、短重復(fù)序列多態(tài)性(STR) 、單核苷酸多態(tài)性(SNP)。11PCR反應(yīng)的特異性是由 引物 確定的,其反應(yīng)過(guò)程包括 變性 、 退火 、 延伸 三個(gè)步驟。 12DNA的Tm值與 GC含量 、 離子強(qiáng)度 和 DNA的均一性 有關(guān)。13DNA聚合酶具有三種酶活性,他們是5->3聚合酶活性與延伸能、 3->5外切酶活性與校對(duì)功能(保真性)、 5->3外切酶活性與切口平移 。 14DNA復(fù)制應(yīng)具備的條件包括 模板、 RNA引物 、酶、 dNTP 。 15原核生物RNA聚合酶在轉(zhuǎn)錄中的作用有 識(shí)別并結(jié)合啟動(dòng)子 、 轉(zhuǎn)錄起始 、 鏈的延伸 。16瓊脂糖凝膠電泳
10、能大致鑒定DNA的: DNA分子量大小 、 DNA分子的構(gòu)象 、 DNA的純度 。17切口平移標(biāo)記DNA探針的基本原理在于利用DNA聚合酶的 3->5外切酶活性 和 5->3外切酶 的活性。18斑點(diǎn)(狹縫)雜交的特點(diǎn)是: 能鑒別DNA和RNA 、 簡(jiǎn)單快速 、特異性不高、不能鑒別核酸分子量。19可用于DNA序列分析的方法有 雙脫氧終止法、邊合成邊測(cè)序、焦磷酸測(cè)序、連接測(cè)序三、單項(xiàng)選擇題1下列哪項(xiàng)屬于單基因遺傳病( )A 冠心病 B 精神與神經(jīng)疾病 C 糖尿病 D -地中海貧血 E 原發(fā)性高血壓2下列哪項(xiàng)屬于多基因遺傳?。?E )A 脆性X綜合征 B Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良 C
11、血友病 D -地中海貧血 E 原發(fā)性高血壓3下列哪項(xiàng)屬于核苷酸三聯(lián)體重復(fù)序列發(fā)生高度擴(kuò)展所致的( )A 脆性X綜合征 B Duchenne肌營(yíng)養(yǎng)不良 C 血友病 D -地中海貧血 E 原發(fā)性高血壓4下列哪種酶缺乏校正功能而易使病毒發(fā)生變異( )A DNA聚合酶 B DNA連接酶 C RNA聚合酶 D 蛋白酶 E 限制性內(nèi)切酶5DNA探針( )雜交A只與來(lái)源相同的片段 B可與任何來(lái)源不同的DNA片段C可與含有任何互補(bǔ)的DNA片段 D只與用某些限制酶切割的DNA片段6下列關(guān)于核酸分子結(jié)構(gòu)的描述不正確的是:( )A單核苷酸通過(guò)3,5磷酸二酯鍵相連接 B核酸鏈具有方向性C組成RNA的基本單位是核糖核苷
12、D任何來(lái)源的兩條核苷酸單鏈可通過(guò)氫鍵形成順向平行的雙鏈7氨酰tRNA通過(guò)( )識(shí)別mRNA上密碼子AtRNA的反密碼子 B.tRNA的保守序列 CtRNA的雙氫尿嘧啶環(huán) DtRNA的氨基酸臂8關(guān)于體內(nèi)DNA復(fù)制正確的是:( )A不涉及RNA引物的形成 B為全保留復(fù)制模式Cori控制著復(fù)制起始 D不需要DNA連接酶9原核生物mRNA含有幾個(gè)功能必須的特征區(qū)段,他們是:( )A帽結(jié)構(gòu),編碼序列,多聚腺苷酸尾 B啟動(dòng)子,轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),轉(zhuǎn)錄子C轉(zhuǎn)錄單位,編碼序列,帽結(jié)構(gòu) D起始密碼子,終止密碼子,編碼序列10關(guān)于遺傳密碼子正確的是( )A不同生物的密碼子代表的意義各異 B每一個(gè)密碼子均代表不同的氨基酸
13、C密碼子第一個(gè)堿基替換其意義可不變 D密碼子第三個(gè)堿基替換其意義可不變11RNA聚合酶不具備的功能是:( )A識(shí)別啟動(dòng)子序列 B決定轉(zhuǎn)錄的范圍 C催化DNA鏈的合成 D與DNA鏈結(jié)合12基因組是:( )A一個(gè)生物體內(nèi)DNA分子總量 B一個(gè)二倍體細(xì)胞中的染色體數(shù)C一個(gè)遺傳單位 D一個(gè)單倍體細(xì)胞中的基因總和13當(dāng)細(xì)胞喪失端粒酶活性后,不會(huì)出現(xiàn)以下( )情形A隨著細(xì)胞每次分裂,端粒逐漸縮短 B細(xì)胞分裂數(shù)十次后,出現(xiàn)衰老跡象并死亡C免疫系統(tǒng)逐步喪失某些防御機(jī)制 D大量細(xì)胞出現(xiàn)了無(wú)限的分裂能力14PCR技術(shù)的特異性是由( )決定的A檢測(cè)樣本的種類 B引物 CTaqDNA聚合酶 DDNA單鏈模板 15下列
14、敘述哪項(xiàng)是錯(cuò)誤的( )A 原核生物基因組具有操縱子結(jié)構(gòu) B 原核生物結(jié)構(gòu)基因是斷裂基因C 原核生物基因組中含有插入序列 D 原核生物基因組中含有重復(fù)順序E 原核生物結(jié)構(gòu)基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順?lè)醋有蚼RNA16下列哪項(xiàng)不符合轉(zhuǎn)位因子的含義( )A 轉(zhuǎn)位因子是DNA重組的一種形式 B 可在質(zhì)粒與染色體之間移動(dòng)的DNA片段C 轉(zhuǎn)座子是轉(zhuǎn)位因子的一個(gè)類型 D 可移動(dòng)的基因成分E 能在一個(gè)DNA分子內(nèi)部或兩個(gè)DNA分子之間移動(dòng)的DNA片段17大腸桿菌類核結(jié)構(gòu)的組成是( E )A 雙鏈DNA B RNA C 蛋白質(zhì)+DNA D 支架蛋白 E RNA+支架蛋白+雙鏈DNA18操縱子結(jié)構(gòu)不存在( )A 細(xì)菌基因
15、組 B 病毒基因組中 C 真核生物基因組中 D 大腸桿菌基因組中 E 原核生物基因組中19病毒的遺傳物質(zhì)是( ) A DNA B RNA和蛋白質(zhì) C DNA或RNA D RNA和DNA E DNA和蛋白質(zhì)20原核生物基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)不應(yīng)包括( ) A 具有操縱子結(jié)構(gòu) B 斷裂基因C 含插入序列 D 含有重復(fù)順序 E 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為多順?lè)醋?1乙型肝炎病毒的核酸類型是( )A 雙股DNA B 負(fù)股DNA C 正股DNA D 單股DNA E DNA-RNA二聚體22下列哪種病毒是DNA病毒 ( ) A 冠狀病毒 B 逆轉(zhuǎn)錄病毒 C HCV D HIV E 腺病毒23在HIV-1中最易發(fā)生變異的基因是(
16、)A tat B env C pol D nef E gag24HBV X蛋白的功能是( ) A 表面抗原 B 核心抗原 C DNA多聚酶作用 D 反式激活作用 E 逆轉(zhuǎn)錄酶作用25有關(guān)微衛(wèi)星重復(fù)序列的描述正確的是( )A 在群體的個(gè)體間重復(fù)簇的大小不發(fā)生變化 B 每一簇含的重復(fù)序列的數(shù)目比衛(wèi)星重復(fù)的多C 有一個(gè)1015個(gè)核苷酸的核心重復(fù)序列 D 在DNA重組時(shí),是不具有活性的26基因組是( )A 一個(gè)二倍體細(xì)胞中的染色體數(shù) B 生物體的一個(gè)特定細(xì)胞內(nèi)所有基因的分子的總量C 一個(gè)生物體內(nèi)所有基因的分子總量 D 遺傳單位27指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因大多數(shù)為( A )A 單拷貝順序 B 中度重復(fù)順
17、序 C 高度重復(fù)順序 D 回文順序28遺傳圖譜的標(biāo)記不包括( )A 單核苷酸多態(tài)性標(biāo)記 B 表達(dá)序列標(biāo)簽 C 簡(jiǎn)短串聯(lián)重復(fù) D 限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性29第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的癌基因是( )A myb B abl C myc D src E ras30能編碼具有酪氨酸蛋白激酶活性的癌基因是( )A ras B myb C src D sis E erb31表達(dá)產(chǎn)物屬GTP結(jié)合蛋白的癌基因是( )A src B ras C myc D myb E sis32第一個(gè)發(fā)現(xiàn)的細(xì)胞癌基因是( )A c-src B c-ras C c-myc D c-abl E c-sis33編碼蛋白為P21的癌基因是( )A my
18、c B myb C sis D ras E src 34第一個(gè)分離到的抑癌基因是( )A Rb基因 B p53基因 C p16基因 D BRCA基因 E APC基因35哪種形式的Rb蛋白具有防止細(xì)胞增殖的作用( )A 磷酸化 B 非磷酸化 C 乙?;?D 甲基化 E 糖基化36關(guān)于p53基因的敘述,正確的是( C )A 是癌基因 B 是腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因 C 野生型p53是抑癌基因 D 是腫瘤轉(zhuǎn)移基因 E 突變型p53是抑癌基因37ras癌基因被激活的機(jī)制一般為( )A 染色體易位和基因重排 B 基因擴(kuò)增 C 點(diǎn)突變 D 獲得外源啟動(dòng)子 E 甲基化水平降低38以下不屬于細(xì)胞癌基因激活的機(jī)制有(
19、E )A 點(diǎn)突變 B 基因重排 C 基因擴(kuò)增 D 染色體易位 E 原癌基因甲基化程度升高39. 以下哪種方法不能抑制或滅活RNase活性( ) A 實(shí)驗(yàn)玻璃器皿及溶液用DEPC處理 B 加入強(qiáng)烈的胍類變性劑C 加入-巰基乙醇 D 加入EDTA金屬離子螯合劑 E 加入DTT40用于提取DNA的血液樣品在采集時(shí)應(yīng)使用哪種抗凝劑( E ) A 肝素 B EDTA C 檸檬酸葡萄糖溶液 D 香豆素 E 枸櫞酸鈉41波長(zhǎng)260nm的紫外線下,A值等于l時(shí)的光密度大約相當(dāng)于多少的雙鏈DNA( C)A 38gml B 33gml C 50gml D 20gml E 40gml42下面哪個(gè)方法不能用于mRNA
20、的分離( E )A oligo(dT)-纖維素柱層析法 B (異)硫氰酸胍-酚氯仿法 C Poly(U)-凝膠層析法利用 D 磁珠分離法 E 堿裂解法43下列選項(xiàng)中不是保證RNA制備成功的條件的是(D )A 在RNA的制備過(guò)程中,排除RNase的污染及強(qiáng)有力地抑制其活性B 選擇性地使用針對(duì)RNase的蛋白質(zhì)變性劑并聯(lián)合使用RNase的特異性抑制劑,極大地防止內(nèi)源性RNase對(duì)RNA的水解C 應(yīng)使用pH4.55.5的水飽和酸性酚,這既有利于DNA的變性又有利于RNA的分離D 在抽提過(guò)程中加入少量氯仿,目的在于消除抽提過(guò)程中因蛋白質(zhì)變性而產(chǎn)生的泡沫E 低溫操作44純DNA的A260/A280比值為
21、1.8,可使比值升高的是( C ) A 蛋白質(zhì) B 酚 C RNA D 氯仿 E Mg+45完整的無(wú)降解或降解很少的總RNA電泳圖中,三個(gè)條帶的熒光強(qiáng)度積分應(yīng)呈特定的比值,下列表述錯(cuò)誤的是(E )A 沉降系數(shù)大的核酸條帶分子量大,電泳遷移率低B 分子量小,電泳遷移率高,熒光強(qiáng)度積分低C 28SRNA的熒光強(qiáng)度比18SRNA 的熒光強(qiáng)度高 D 原核生物總RNA電泳結(jié)果,熒光強(qiáng)度由高到低為:23SRNA, 16SRNA, 5SRNAE RNA中以mRNA最多46SDS的作用是( C )A 螯合劑,可以抑制DNA酶的活性,同時(shí)降低細(xì)胞膜的穩(wěn)定性B 高效水解RNAC 引起細(xì)胞膜的降解并能乳化脂質(zhì)和蛋白
22、質(zhì)。并使它們沉淀D 增加溶液黏度,維持滲透壓,防止受機(jī)械力作用而降解E 沉淀DNA47在RNA純化時(shí),應(yīng)使用(D )A pH4.55.5的水飽和酚 B pH7.58.5的水飽和酚 C pH4.55.5的Tris飽和酚 D pH7.58.5的Tris飽和酚 E pH1.52.5的酚48抽提過(guò)程中加入少量異戊醇可以( B)A 去除植物色素和蔗糖 B 消除抽提過(guò)程中產(chǎn)生的泡沫 C 去除核酸樣品中的痕量酚 D 使酚脫水防止mRNA的丟失 E 提高RNA的回收率49DNA鏈的Tm值主要取決于核酸分子的(A )A GC含量 B AT含量 C AG含量 D AC含量 E TG含量50Southern雜交通常
23、是指(B )A DNA和RNA雜交 B DNA和DNA雜交 C RNA和RNA雜交D 蛋白質(zhì)和蛋白質(zhì)雜交 E DNA和蛋白質(zhì)雜交51基因芯片技術(shù)的本質(zhì)就是( A )A 核酸分子雜交技術(shù) B 蛋白質(zhì)分子雜交技術(shù) C 聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)D 基因重組技術(shù) E 酶切技術(shù)52檢測(cè)目標(biāo)是RNA的技術(shù)是( )A Southern雜交 B Western雜交 C Northern雜交 D Eastern雜交 E 雜交淋巴瘤53DNA雙螺旋之間氫鍵斷裂,雙螺旋解開(kāi),DNA分子成為單鏈,這一過(guò)程稱( )A 變性 B 復(fù)性 C 復(fù)雜性 D 雜交 E 探針54一種標(biāo)記核酸與另一種核酸單鏈進(jìn)行配對(duì)形成異源核酸分子的雙鏈,
24、這一過(guò)程稱( )A 變性 B 復(fù)性 C 復(fù)雜性 D 雜交 E 探針55標(biāo)記的參與雜交反應(yīng)的核酸分子,稱( )A 變性 B 復(fù)性 C 復(fù)雜性 D 雜交 E 探針56點(diǎn)/狹縫雜交可以用于( )A 快速確定是否存在目的基因B 不僅可以檢測(cè)DNA樣品中是否存在某一特定的基因,而且還可以獲得基因片段的大小及酶切位點(diǎn)分布的信息C 用于基因定位分析 D 陽(yáng)性菌落的篩選 E 蛋白水平的檢測(cè)57菌落雜交可以用于( E )A 快速確定是否存在目的基因B 不僅可以檢測(cè)DNA樣品中是否存在某一特定的基因,而且還可以獲得基因片段的大小及酶切位點(diǎn)分布的信息C 檢測(cè)的目標(biāo)是RNA D 用于基因定位分析 E 陽(yáng)性菌落的篩選5
25、8Southern印跡雜交可以用于( A )A 不僅可以檢測(cè)DNA樣品中是否存在某一特定的基因,而且還可以獲得基因片段的大小及酶切位點(diǎn)分布的信息B 檢測(cè)的目標(biāo)是RNA C 用于基因定位分析D 陽(yáng)性菌落的篩選 E 蛋白水平的檢測(cè)59熒光原位雜交可以用于( )A 快速確定是否存在目的基因 B 檢測(cè)的目標(biāo)是RNA C 用于基因定位分析D 陽(yáng)性菌落的篩選 E 蛋白水平的檢測(cè)60以等位基因特異的寡核苷酸探針雜交法診斷某常染色體隱性遺傳病時(shí),若能與突變探針及正常探針接合,則該樣本為( ) A 正常人 B 雜合體患者 C 純合體患者 D 攜帶者 E 不能確定61用“Nick translation”的方法標(biāo)
26、記DNA探針時(shí)需要(E ) “缺口平移法”A DNA酶 B DNA聚合酶的53聚合活性 C DNA聚合酶的53外切活性D B+C E A+B+C62下列有關(guān)cDNA探針的描述不正確的為(D ) A 利用mRNA通過(guò)RT-PCR在體外反轉(zhuǎn)錄可制備大量的cDNA探針B cDNA探針不包含內(nèi)含子C cDNA探針不包含大量的高度重復(fù)序列D 由于cDNA探針自身所攜帶的poly(dT),有可能產(chǎn)生非特異性雜交的問(wèn)題E cDNA探針合成方便,成為探針的重要來(lái)源63聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種( D )A 體外特異轉(zhuǎn)錄RNA的過(guò)程 B 體外翻譯蛋白質(zhì)的過(guò)程 C 體外特異轉(zhuǎn)錄DNA的過(guò)程D 體外特異復(fù)制DNA的過(guò)程
27、E 體內(nèi)特異復(fù)制DNA的過(guò)程64雙脫氧終止法測(cè)定核酸序列時(shí),使用ddNTP的作用是(B )A 作為DNA合成的正常底物 B 形成特異性終止鏈 C 標(biāo)記合成的DNA鏈 D 使電泳時(shí)DNA易于檢測(cè) E 使新合成的DNA鏈不易形成二級(jí)結(jié)構(gòu)65有關(guān)PCR的描述下列哪項(xiàng)不正確( D )A 是一種酶促反應(yīng) B 引物決定了擴(kuò)增的特異性C 擴(kuò)增的產(chǎn)量按Y=A(1+X)n(A是模板量,X是擴(kuò)增效率,n是循環(huán)次數(shù)) D 循環(huán)次數(shù)越多產(chǎn)物量就越大,可增加循環(huán)次數(shù)提高產(chǎn)物量 E 擴(kuò)增的對(duì)象是DNA序列66決定PCR反應(yīng)特異性和PCR長(zhǎng)度的物質(zhì)是( C )A 模板 B dNTP C 引物 D 緩沖液 E Taq DNA
28、聚合酶67關(guān)于PCR反應(yīng)引物的描述,不正確的是( D )A 引物的長(zhǎng)度在18bp25bpB 引物內(nèi)部不能存在連續(xù)的互補(bǔ)序列,防止產(chǎn)生二聚體和發(fā)夾結(jié)構(gòu)C 引物中G+C的含量占45%55%D 引物的3端可以帶有生物素、熒光或酶切位點(diǎn)等作為標(biāo)記E 兩條引物的Tm值應(yīng)該盡量相近68下列關(guān)于Taq DNA聚合酶的描述,正確的是( E )A 催化一條雙鏈DNA3端羥基與另一條雙鏈DNA5端磷酸根形成3,5-磷酸二酯鍵B Taq DNA聚合酶具有3 5外切酶活性,PCR擴(kuò)增過(guò)程中有校正功能C 增加酶量可以提高反應(yīng)速度,減少堿基錯(cuò)配D 擴(kuò)增的DNA片段越長(zhǎng),錯(cuò)配機(jī)率越大,每次循環(huán)移碼突變率為1/8000左右
29、(1/30000)E 在引物的3-OH末端加入脫氧單核苷酸,形成3,5-磷酸二酯鍵69關(guān)于定量PCR的描述,不正確的是( C )A 可以定量或半定量檢測(cè)PCR產(chǎn)物的方法B 定量PCR主要進(jìn)行基因表達(dá)的分析和病原體的核酸檢測(cè)C 水解探針技術(shù)中TaqMan探針的位置位于兩條引物之間D 分子信標(biāo)在自由狀態(tài)下為發(fā)夾結(jié)構(gòu),熒光信號(hào)極低E 定量PCR在封閉狀態(tài)下進(jìn)行,有效避免了產(chǎn)物的實(shí)驗(yàn)室污染70未知突變的檢測(cè),下列哪種是最好的方法( D )A PCR B RFLP C 核酸雜交 D PCR-SSCP-Sequencing PCR-單鏈構(gòu)象多態(tài)性 E ASO71. 實(shí)時(shí)PCR通過(guò)對(duì)熒光信號(hào)的檢測(cè)實(shí)現(xiàn)了對(duì)P
30、CR過(guò)程中實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè),熒光信號(hào)的檢測(cè)的主要方法有(A )A 水解探針技術(shù) B 多重PCR C 雜交探針技術(shù) D 分子信標(biāo) E 原位PCR72以下能夠保護(hù)和提高DNA聚合酶活性的是( A )A MgCl2 B 小牛血清白蛋白 C Tween20 D EDTA E 高鹽溶液73以下措施可以預(yù)防PCR的實(shí)驗(yàn)室污染,除外( D)A 嚴(yán)格區(qū)分標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)和產(chǎn)物分析區(qū) B 設(shè)置陰性、陽(yáng)性和內(nèi)對(duì)照C 在反應(yīng)體系中使用dUTP代替dCTP D 減少模板核酸用量E 254nm波長(zhǎng)紫外線光近距離充分照射74與蛋白質(zhì)合成體系組裝無(wú)關(guān)的RNA是( B )AmRNA B. 核酶RNA CrRNA DtRNA75
31、下列( D )酶使用時(shí)不需要引物( )A限制性內(nèi)切核酸酶BDNA聚合酶CTaq DNA酶D逆轉(zhuǎn)錄酶76控制基因產(chǎn)物數(shù)量的最關(guān)鍵步驟是( C )A. 復(fù)制的終止 BmRNA向細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn) C. 轉(zhuǎn)錄的起始 DDNA的復(fù)制77下列( C )是對(duì)DNA的解鏈溫度的最佳描述A解鏈溫度越高,說(shuō)明DNA中的A,T含量越多B是雙鏈DNA中兩條單鏈分開(kāi)過(guò)程中溫度變化范圍的中間值C是單鏈發(fā)生斷裂時(shí)的溫度D可通過(guò)堿基在280nm的特征吸收峰的改變來(lái)確定78真核細(xì)胞mRNA含有幾個(gè)功能必須的特征區(qū)段,他們是:( D )A編碼序列,復(fù)制起始點(diǎn),多聚腺苷酸尾 B啟動(dòng)子,轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn),轉(zhuǎn)錄子C轉(zhuǎn)錄單位,編碼序列,帽結(jié)構(gòu)
32、D帽結(jié)構(gòu),起始密碼子,終止密碼子,多聚腺苷酸尾79密碼子中的(C )堿基參與了密碼子的簡(jiǎn)并性A第一個(gè) B第二個(gè) C第三個(gè) D第一個(gè)和第三個(gè)80與DNA變性無(wú)關(guān)的是( D )A改變DNA溶液的離子強(qiáng)度 B改變DNA溶液的pH C加入甲酰胺溶液 D加入BSA81標(biāo)出下列正確的答案( C )A轉(zhuǎn)錄是以半保留的方式獲得兩條相同的DNA鏈的過(guò)程BDNA依賴的RNA聚合酶是負(fù)責(zé)DNA復(fù)制的酶C細(xì)菌轉(zhuǎn)錄單位常是多基因串聯(lián)在一起的D轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是蛋白質(zhì)和各種RNA分子82下列( C )不是核蛋白體的作用A提供兩分子氨酰tRNA結(jié)合位點(diǎn) B提供轉(zhuǎn)肽酶C提供轉(zhuǎn)錄終止因子 D提供mRNA結(jié)合位點(diǎn)83在PCR反應(yīng)體系中不
33、應(yīng)含有( B )AMg2 BDnmp C兩條引物 D待擴(kuò)增的核酸片段四、多項(xiàng)選擇題1.病毒感染宿主的方式主要表現(xiàn)為( )A 病毒感染宿主細(xì)胞后,病毒DNA直接在細(xì)胞內(nèi)復(fù)制B 病毒基因與宿主細(xì)胞染色體發(fā)生整合而使宿主染色體基因結(jié)構(gòu)發(fā)生改變C 病毒基因與宿主細(xì)胞染色體結(jié)合,形成一復(fù)合物D 病毒感染宿主細(xì)胞后,病毒吞噬細(xì)胞核E 病毒感染宿主細(xì)胞后,病毒顆粒被宿主細(xì)胞吞噬2.核酸含量及完整性鑒定可采用( )ASouthern雜交技術(shù) B熒光分光光度法 CDNA測(cè)序技術(shù)D紫外分光光度法 EPCR技術(shù)3.導(dǎo)致PCR反應(yīng)中出現(xiàn)平臺(tái)效應(yīng)的因素是( )A擴(kuò)增產(chǎn)物增加 BdNTP消耗 CMg2+消耗 DDNA聚合
34、酶活性降低 EPPi增加4.癌基因激活的機(jī)制包括( )A基因突變 B插入外源啟動(dòng)子 C基因重排 DDNA甲基化 E基因擴(kuò)增5.原核生物翻譯水平的基因表達(dá)調(diào)控涉及( )ASD序列 BAUG與SD序列的間距 CmRNA、氨酰-tRNA與核蛋白體的有效組裝D反義RNA E蛋白多肽鏈的有效折疊6.基因芯片技術(shù)可用于( )A核酸序列分析 B基因突變分析C指導(dǎo)個(gè)性化給藥D基因表達(dá)差異分析E個(gè)體識(shí)別7癌基因的表達(dá)產(chǎn)物包括( )A ATP結(jié)合蛋白 B 生長(zhǎng)因子 C 反式作用因子 D 單克隆抗體 E 生長(zhǎng)因子受體8核酸提取時(shí)應(yīng)去除的污染物主要包括哪些部分( )A 非核酸的大分子污染物 B 非需要的核酸分子 C
35、有機(jī)溶劑和某些金屬離子 D DNA E 蛋白質(zhì)、多糖和脂類物質(zhì)9核酸沉淀常用的有機(jī)溶劑有( )A 酚抽提法 B 甲酰胺 C 氯仿 D 異丙醇 E 乙醇10核酸分離與純化總的原則包括( )A 保證核酸一級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性 B 保證核酸二級(jí)結(jié)構(gòu)的完整性C 盡量排除其它分子的污染 D 盡量簡(jiǎn)化分離純化步驟 E 盡量縮短提取時(shí)間11通過(guò)哪些措施可以提高雜交反應(yīng)的速度( )A 采用大片段探針 B少量的反應(yīng)體積 C高反應(yīng)溫度 D不斷的振搖 E大量的反應(yīng)體積12整個(gè)雜交反應(yīng)主要以下哪些步驟組成( )A 預(yù)雜交 B雜交 C洗脫 D固定 E轉(zhuǎn)移13預(yù)雜交的主要目的是( )A 平衡濾膜 B 封閉非特異性雜交的位置 C
36、 提高雜交信號(hào)的檢測(cè)效率D 便于從濾膜上除去探針 E 清除用于雜交反應(yīng)檢測(cè)的顯色物質(zhì)14真核生物轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)調(diào)控涉及( )A啟動(dòng)子 B. 增強(qiáng)子 C. 復(fù)制子 D. 反式作用因子 E. RNA聚合酶15. 腫瘤形成的分子機(jī)制涉及( )A原癌基因激活 B抑癌基因激活 C腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)基因激活D端粒酶激活 E凋亡基因激活16可檢測(cè)點(diǎn)突變的方法包括( )A雙脫氧鏈末端終止法測(cè)序技術(shù) B基因芯片技術(shù) CSSCP技術(shù)DPCR-ASO技術(shù) E點(diǎn)雜交技術(shù)17PCR質(zhì)量控制涉及( )APCR實(shí)驗(yàn)室規(guī)范化設(shè)置 B控制污染 C充分暴露待測(cè)標(biāo)本中的DNAD保護(hù)DNA聚合酶活性 E盡力減少酚的殘留18. 參與基因
37、表達(dá)調(diào)控的RNA分子有(A )AmRNA B. 反義RNA C. 核酶RNA D. siRNA E. miRNA五、改錯(cuò)題1酚抽提DNA時(shí)加入氯仿是為了防止蛋白質(zhì)氧化。錯(cuò)。氯仿的加入是加強(qiáng)苯酚對(duì)蛋白質(zhì)的變性作用,有助于水相與有機(jī)相分層。2EDTA通過(guò)抑制核酸酶的活性來(lái)保護(hù)DNA的純度和濃度。3DNA復(fù)性后不能恢復(fù)DNA的生物學(xué)活性。錯(cuò),DNA復(fù)性后還可以恢復(fù)生物學(xué)活性。參考PCR技術(shù),若不能恢復(fù)活性PCR就不能進(jìn)行。4創(chuàng)建無(wú)RNase酶環(huán)境是提取真核生物基因組的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。錯(cuò)。創(chuàng)建無(wú)RNase酶環(huán)境視提取RNA的關(guān)鍵環(huán)節(jié),而創(chuàng)建無(wú)DNase酶環(huán)境是提取真核生物基因組的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。5RNA聚合酶結(jié)合
38、的起始點(diǎn)和終止點(diǎn)之間的DNA片段稱為復(fù)制子。錯(cuò)。復(fù)制子是從起始點(diǎn)開(kāi)始到終止點(diǎn)的區(qū)域,不僅僅是起始點(diǎn)和終止點(diǎn)之間的片段。6人體內(nèi)所有細(xì)胞具有相同的一套基因,因此表達(dá)的產(chǎn)物是相同的。錯(cuò)。雖然所有細(xì)胞具有相同的基因,但是在不同的組織細(xì)胞內(nèi)基因的表達(dá)情況不同,所以表達(dá)產(chǎn)物不同。7識(shí)別起始密碼子的tRNA的反密碼子是5-UAC-3。錯(cuò)。應(yīng)該為5-CAU-38PCR反應(yīng)中的引物應(yīng)與待擴(kuò)增片段5端序列相同。錯(cuò)。應(yīng)該是互補(bǔ)配對(duì)。9在DNA轉(zhuǎn)錄中,新合成的RNA鏈中的核苷酸序列同DNA模板鏈序列一樣。錯(cuò)。新合成的RNA鏈中核苷酸序列與DNA模板鏈序列互補(bǔ)配對(duì)。10通常PCR反應(yīng)中的復(fù)性溫度設(shè)為T(mén)m+5。錯(cuò)。應(yīng)該
39、為T(mén)m-511RNA聚合酶可參與DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄過(guò)程。錯(cuò)。RNA聚合酶可以參與轉(zhuǎn)錄過(guò)程,但是不能參與復(fù)制過(guò)程。注意:復(fù)制過(guò)程中合成RNA引物的是引物酶,而不是RNA聚合酶。12細(xì)菌的基因表達(dá)調(diào)控常為正性調(diào)控。錯(cuò)。主要為負(fù)性調(diào)控。13核酶是一種存在于細(xì)胞核中的能水解核酸的蛋白酶。錯(cuò)。核酶(ribozyme)是具有催化功能的RNA。而不是降解核酸的酶,降解核酸的酶是核酸酶(nuclease)。14PCR-ASO可用于鑒定基因點(diǎn)突變,但無(wú)法了解點(diǎn)突變的性質(zhì)。15轉(zhuǎn)錄是以半保留方式獲得序列相同的兩條DNA鏈的過(guò)程。錯(cuò)。轉(zhuǎn)錄是以DNA兩條路中的一條鏈為模板獲得一條RNA鏈的過(guò)程。16基因是DNA分子中
40、攜帶蛋白質(zhì)編碼信息的一段特定序列。錯(cuò)。DNA是DNA 分子中決定一定功能的序列。17RNA分子是遺傳信息傳遞的載體,與遺傳信息表達(dá)調(diào)控?zé)o關(guān)。錯(cuò)。RNA與遺傳信息表達(dá)調(diào)控有關(guān)。18DNA變性可導(dǎo)致DNA鏈斷裂等不可逆轉(zhuǎn)的損害。錯(cuò)。DNA變性并不是不可逆轉(zhuǎn)的。19對(duì)于一個(gè)基因組,轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分基因,而且每個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄都受到共同的調(diào)控機(jī)制控制。20所有生物mRNA前體都要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄后加工,才能變成成熟的、有活性的mRNA分子。錯(cuò),絕大多數(shù)原核生物mRNA前體都要經(jīng)過(guò)轉(zhuǎn)錄后加工。21在體細(xì)胞DNA復(fù)制中,末端復(fù)制問(wèn)題通常可通過(guò)激活端粒酶活性得以解決,從而維持DNA的穩(wěn)定性。錯(cuò)。體細(xì)胞中并不具有端粒酶
41、活性。在生殖細(xì)胞、胚胎細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞中才有端粒酶活性。22 PCR反應(yīng)的特異性是由一對(duì)與模板DNA鏈5端互補(bǔ)的引物決定的。錯(cuò)。是由3端互補(bǔ)引物決定。(因?yàn)镈NA合成為53,所以引物為5端為起點(diǎn)向3擴(kuò)增,而與引物5端互補(bǔ)的是模板鏈的3端。23乳糖操縱子表達(dá)是一種負(fù)性調(diào)控,而色氨酸操縱子表達(dá)既有負(fù)性調(diào)控也存在正性調(diào)控。錯(cuò)。乳糖操縱子中既有負(fù)性調(diào)控又有正性調(diào)控。而色氨酸操縱子中有阻遏調(diào)控和衰減子調(diào)控。24PCR擴(kuò)增產(chǎn)物量可通過(guò)公式Y(jié)=X0+(1+E)n計(jì)算,因此在PCR反應(yīng)中設(shè)定的循環(huán)次數(shù)(n)越大,擴(kuò)增的產(chǎn)率就越高。錯(cuò)。當(dāng)循環(huán)達(dá)到一定次數(shù)時(shí),會(huì)形成一個(gè)平臺(tái),使產(chǎn)率不變。25腫瘤細(xì)胞的形成是由于原癌
42、基因被激活導(dǎo)致細(xì)胞過(guò)度增殖。錯(cuò)誤。腫瘤細(xì)胞的形成是癌基因與抑癌基因間平衡被打破的結(jié)果。26PCR延伸溫度常用的范圍是30-45。錯(cuò)。延伸溫度為72。27Northern blot常用于檢測(cè)RNA,Western blot常用于檢測(cè)cDNA。Western blot是檢測(cè)蛋白質(zhì)。(southern:用DNA作為探針雜交DNA.檢測(cè)目標(biāo)DNA的存在與否;northern:用DNA或RNA探針雜交RNA.檢測(cè)目標(biāo)RNA的存在與否;western:用抗體和目的蛋白結(jié)合進(jìn)行雜交.檢測(cè)目標(biāo)蛋白的存在與否.)沒(méi)有eastern雜交.少數(shù)人提議將IEF膠(即等電聚焦電泳)中的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)印到膜上的技術(shù)稱為East
43、ern-blotting,但這一建議并未被廣泛接受.)南D北R西蛋28點(diǎn)雜交是一種特異性很高并可一次性檢測(cè)多個(gè)樣本的技術(shù)。錯(cuò)。點(diǎn)雜交一次可檢測(cè)多個(gè)樣本,但是特異性不高。29ORF以外的突變不會(huì)導(dǎo)致基因表達(dá)調(diào)控異常。錯(cuò)。ORF以外還有許多調(diào)控序列,突變會(huì)導(dǎo)致基因表達(dá)異常。30mRNA分離純化的關(guān)鍵是要有效破壞細(xì)胞膜,以充分釋放核酸分子。錯(cuò),提取mRNA的關(guān)鍵是要?jiǎng)?chuàng)建一個(gè)無(wú)RNase環(huán)境。六、簡(jiǎn)述題1 操縱子結(jié)構(gòu)及其生理意義操縱子結(jié)構(gòu)是指數(shù)個(gè)功能上相關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,連同上游的調(diào)控區(qū)(包括調(diào)節(jié)基因、啟動(dòng)子、操縱基因)以及下游的轉(zhuǎn)錄終止信號(hào),共同組成的一個(gè)基因表達(dá)單位。生理意義:原核生物大多
44、數(shù)基因表達(dá)調(diào)控是通過(guò)操縱子機(jī)制實(shí)現(xiàn)的。操縱子結(jié)構(gòu)對(duì)細(xì)胞代謝、基因表達(dá)有重要的作用。阿拉伯糖操縱子是指令合成糖分解代謝所需酶系的操縱子,它具有正、負(fù)調(diào)節(jié)的功能。色氨酸操縱子的調(diào)控作用主要有三種方式:阻遏作用、弱化作用以及終產(chǎn)物Trp 對(duì)合成酶的反饋抑制作用。2. DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)與遺傳信息傳遞的忠實(shí)性DNA二級(jí)結(jié)構(gòu)是指兩條多核苷酸鏈反向平行盤(pán)繞所生成的雙螺旋結(jié)構(gòu)。具有大溝和小溝,具有多態(tài)性,可分為三種類型:B型DNA,A型DNA,Z型DNA。三種構(gòu)型中,大溝的信息在遺傳信息表達(dá)過(guò)程中起關(guān)鍵作用?;虮磉_(dá)調(diào)控蛋白通過(guò)其分子上特定的氨基酸側(cè)鏈與溝中堿基對(duì)兩側(cè)潛在的氫原子供體或受體形成氫鍵而識(shí)別DNA遺
45、傳信息。由于大溝和小溝中的氫原子供體和受體各異及排列不同,大溝和小溝的寬窄和深淺直接影響堿基對(duì)的暴露程度,從而影響調(diào)控蛋白對(duì)DNA信息的識(shí)別,從而影響遺傳信息的傳遞。復(fù)制的忠實(shí)性:DNA復(fù)制過(guò)程是一個(gè)高度精確的過(guò)程,據(jù)估計(jì),大腸桿菌DNA復(fù)制5´109堿基對(duì)僅出現(xiàn)一個(gè)誤差,保證復(fù)制忠實(shí)性的原因主要有以下三點(diǎn):DNA聚合酶的高度專一性(嚴(yán)格遵循堿基配對(duì)原則,但錯(cuò)配率為7x10-6 ) DNA聚合酶的校對(duì)功能(錯(cuò)配堿基被3-5外切酶切除)起始時(shí)以RNA為引物3核酸探針與核酸雜交技術(shù)1 核酸探針指一段帶有檢測(cè)標(biāo)記的與特定核酸序列特異互補(bǔ)的已知核苷酸序列。核酸探針包括:基因組DNA探針; c
46、DNA探針; RNA探針;寡核苷酸探針(DNA/RNA)-DNA(cDNA)探針:不易降解(DNA酶活性可抑制);可通過(guò)基因克隆大量制備;標(biāo)記方法成熟。RNA探針:雜交效率高;雜交體穩(wěn)定性高;非特異性雜交低;通過(guò)RNase降解未雜交探針可減少本底干擾。但易降解,標(biāo)記方法復(fù)雜。寡核苷酸探針:可人工大批量合成和標(biāo)記;可以檢測(cè)一個(gè)堿基的差異。但雜交體不穩(wěn)定;需優(yōu)化雜交條件以保證特異性。2單鏈的核酸分子在合適的條件下,與具有堿基互補(bǔ)序列的異源核酸形成雙鏈雜交體的過(guò)程稱核酸分子雜交。利用核酸分子雜交原理,用已知序列標(biāo)記作為探針,檢測(cè)核酸靶序列的一類技術(shù)稱作核酸分子雜交技術(shù)核酸分子雜交技術(shù)類型:(一)液相
47、雜交、(二)固相雜交(包括Southern雜交 Northern 雜交 點(diǎn)雜交/狹縫雜交 反向點(diǎn)雜交 菌落雜交)、(三)原位雜交、(四)基因芯片技術(shù)4DNA芯片技術(shù) DNA芯片技術(shù),實(shí)際上就是一種大規(guī)模集成的固相雜交,是指在固相支持物上原位合成(insitusynthesis)寡核苷酸或者直接將大量預(yù)先制備的DNA探針以顯微打印的方式有序地固化于支持物表面,然后與標(biāo)記的樣品雜交。通過(guò)對(duì)雜交信號(hào)的檢測(cè)分析,得出樣品的遺傳信息(基因序列及表達(dá)的信息)。由于常用計(jì)算機(jī)硅芯片作為固相支持物,所以稱為DNA芯片。根據(jù)芯片的制備方式可以將其分為兩大類:原位合成芯片和DNA微集陣列(DNAmicroarra
48、y)。5遺傳密碼子遺傳密碼子又稱密碼子、遺傳密碼、三聯(lián)體密碼。指信使RNA(mRNA)分子上從5'端到3'端方向,由起始密碼子AUG開(kāi)始,每三個(gè)核苷酸組成的三聯(lián)體。它決定肽鏈上每一個(gè)氨基酸和各氨基酸的合成順序,以及蛋白質(zhì)合成的起始、延伸和終止。遺傳密碼子具有方向性,連續(xù)性,簡(jiǎn)并性,擺動(dòng)性和通用性。6、原核生物基因組的特征。 結(jié)構(gòu)基因是連續(xù)的,無(wú)內(nèi)含子成分; 多順?lè)醋咏Y(jié)構(gòu); 多數(shù)為單拷貝基因,編碼rRNA、tRNA的基因?yàn)槎嗫截悾?結(jié)構(gòu)基因的編碼順序一般不重疊?;蛑丿B是指基因組DNA中某些順序被兩個(gè)及以上基因所共用7、病毒基因組的特征。 分子較小,一般為1.5×103
49、3.6×106,基因數(shù)少; 每種病毒只含一種核酸(RNA或DNA),可為雙鏈或單鏈、環(huán)狀或線性; 核酸分正鏈和負(fù)鏈,與mRNA序列一致的為正鏈,與mRNA序列互補(bǔ)的為負(fù)鏈; 反轉(zhuǎn)錄病毒(逆轉(zhuǎn)錄病毒)是一類特殊類型的單鏈正鏈RNA病毒,含有RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶,能使RNA反轉(zhuǎn)錄生成DNA。 基因組中有基因重疊現(xiàn)象,能攜帶較多的遺傳信息; 有操縱子結(jié)構(gòu)和相關(guān)基因叢集; 感染真核細(xì)胞的病毒基因內(nèi)部含有內(nèi)含子; 少或無(wú)重復(fù)序列; 基因組中編碼序列占90%以上; 基因組多為單倍體; 含有不規(guī)則結(jié)構(gòu)基因8、真核生物基因組有何特點(diǎn)? 分細(xì)胞核基因組和細(xì)胞核外基因組 細(xì)胞核基因組含有兩份同源基因
50、組(二倍體) 核外基因組可有多個(gè)拷貝 基因組龐大,但非編碼序列占90%以上 轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順?lè)醋?細(xì)胞核基因組存在重復(fù)序列 基因是不連續(xù)的斷裂基因 線性雙鏈DNA分子,眼型復(fù)制模式9、基因病有哪些類型?請(qǐng)舉例說(shuō)明常見(jiàn)的基因病型。 人類疾病可大致分為3類: 單基因?。ㄓ梢粋€(gè)基因位點(diǎn)突變引起),例如地中海貧血、苯丙酮尿癥、杜氏肌營(yíng)養(yǎng)不良、 血友病、紅綠色盲癥、多指癥、早老癥、白化病等; 多基因?。ㄈ绺哐獕?、糖尿病和腫瘤等),此類疾病的發(fā)生涉及兩個(gè)以上基因的結(jié)構(gòu)或表達(dá)調(diào)控的改變; 獲得性基因?。ǜ腥拘约膊。喝绺窝?、 艾滋病等傳染性疾病,此類疾病由病原微生物通過(guò)感染將其基因入侵到宿主基因造成 10請(qǐng)簡(jiǎn)述人類基因組計(jì)劃的內(nèi)容。遺傳圖譜遺傳圖(genetic map),又稱連鎖圖(linkage map),是以具有遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記作為“位標(biāo)”,遺傳學(xué)距離作為“圖距”的基因組圖。連鎖的遺傳標(biāo)志之間的遺傳學(xué)距離是通過(guò)計(jì)算它們的重組頻率來(lái)確定的,一般用厘摩(CM)表示 物理圖(physical map):是用于確定
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