發(fā)酵工程復習

1、1. 發(fā)酵工程概念：發(fā)酵工程 是生物技術的重要組成和基礎，是生物技術產(chǎn)業(yè)化的重要環(huán)節(jié)。它將微生物學、生物化學和化學工程的基本原理有機結合起來，廣泛而深入地揭示了發(fā)酵過程的本質(zhì)。狹義的發(fā)酵概念：微生物培養(yǎng)和代謝過程。廣義的概念：生物學( ( 微生物學、生物化學) ) 和工程學( ( 化學工程) ) 結合。2. 發(fā)酵工程的應用： 在食品工業(yè)中的應用：食品加工、發(fā)酵乳制品、調(diào)味品 、食品添加劑、檢驗 在醫(yī)藥衛(wèi)生中的應用 ：抗生素、 氨基酸、維生素、甾體激素、生物制品、治療用酶 在輕工業(yè)中的應用：各類酶（糖酶、蛋白酶、果膠酶、脂肪酶等、酶抑制劑）在化工能源中的應用：醇及溶劑，有機酸，多糖，清潔能源在農(nóng)

2、業(yè)中的應用：生物農(nóng)藥，生物除草劑、增產(chǎn)劑，食用菌在環(huán)境保護中的作用 在細菌冶金中的應用 在高技術研究中的應用 3. 微生物代謝產(chǎn)物類型：包括初級代謝產(chǎn)物、中間代謝產(chǎn)物和次級代謝產(chǎn)物。4. 發(fā)酵方法的類別：根據(jù)對氧的需要區(qū)分：厭氧和有氧發(fā)酵 根據(jù)培養(yǎng)基物理性狀區(qū)分：液體和固體發(fā)酵 根據(jù)從微生物生長特性區(qū)分：分批發(fā)酵和連續(xù)發(fā)酵、補料分批發(fā)酵 按發(fā)酵原料來區(qū)分：糖類物質(zhì)發(fā)酵、石油發(fā)酵、廢水發(fā)酵5. 發(fā)酵生產(chǎn)的條件： 某種適宜的微生物 保證或控制微生物進行代謝的各種條件 進行微生物發(fā)酵的設備 提取菌體或代謝產(chǎn)物并精制成產(chǎn)品的方法和設備6. 組成典型的發(fā)酵過程可以劃分成六個基本組成部分： （1

3、）繁殖種子和發(fā)酵生產(chǎn)所用的培養(yǎng)基組份設定； （2 ）培養(yǎng)基、發(fā)酵罐及其附屬設備的滅菌；  （3）培養(yǎng)出有活性、適量的純種，接種入生產(chǎn)的容器中； （4 ）微生物在最適合于產(chǎn)物生長的條件下，在發(fā)酵罐中生長； （5）產(chǎn)物萃取和精制；  （6）過程中排出的廢棄物的處理。7. 決定微生物工程工業(yè)生產(chǎn)水平的三個要素：生產(chǎn)菌種的性能、發(fā)酵及提純工藝條件、生產(chǎn)設備。8. 工業(yè)微生物菌種的基本要求： 1. 菌種生長繁殖能力強，能夠在較短的發(fā)酵周期內(nèi)產(chǎn)生大量有價值的發(fā)酵產(chǎn)物，因為高產(chǎn)菌株的運用可以在不增加投資的情況下大幅度提高生產(chǎn)能力。 2. 菌種的發(fā)酵培養(yǎng)基應該

4、價格低廉、來源充足、被轉(zhuǎn)化為產(chǎn)品的效率高。3. 菌種發(fā)酵后，非目標代謝產(chǎn)物少，而且產(chǎn)品應相對容易分離。4. 菌種的培養(yǎng)條件易于控制，并具有抗噬菌體感染的能力。 5. 菌種的遺傳特性穩(wěn)定，不易變異和退化，這樣才能保證發(fā)酵過程長期、穩(wěn)定地進行，同時有利于實施最佳的工藝控制，保證發(fā)酵生產(chǎn)和產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性。 6. 菌種對人、動物、植物和環(huán)境不應該造成危害，還應注意潛在的、慢性的、長期的危害，要充分評估，嚴格防范。9. 一般菌種分離純化和篩選步驟：標本采集 標本材料預處理 富集培養(yǎng) 性能鑒定 菌種復篩 菌種初篩 菌種保藏10. 富集方法 定向培養(yǎng):底物 pH條件、培養(yǎng)時間 、培養(yǎng)溫度、C源、N源 .抗

5、生素等一切能提高目的微生物相對生長速度的手段，培養(yǎng)（固體、液體；分批連續(xù)）后使目的微生物在種群中占優(yōu)勢。11. 高產(chǎn)菌株的篩選：這一步是采用與生產(chǎn)相近的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，通過三角瓶的容量進行小型發(fā)酵試驗，獲得適合于工業(yè)生產(chǎn)用菌種。還要對菌種進行發(fā)酵性能測定，12. 施加選擇性壓力分離法：主要是利用不同種類的微生物其生長繁殖對環(huán)境和營養(yǎng)的要求不同，如溫度、pH、滲透壓、氧氣、碳源、氮源等，人為控制這些條件，使之利于某類或某種微生物生長，而不利于其他種類微生物的生存，以達到使目的菌種占優(yōu)勢而得以快速分離純化的目的。如可以控制培養(yǎng)時的氧，可將好氧微生物和厭氧微生物分開；通過控制溫度，可將嗜熱微生物和

6、非嗜熱微生物分開；控制pH，可將嗜酸、嗜堿微生物分離等。在分離培養(yǎng)基中也可以加入不同的抗生素或試劑來增加選擇性。如在分離放線菌和細菌時，可加入抗真菌抗生素；分離真菌時，可加入抗細菌藥物。13. 生長因子產(chǎn)生菌的分離：篩選模型：營養(yǎng)缺陷型試驗菌 篩選方法：利用被分離的微生物產(chǎn)物能否促進營養(yǎng)缺陷型試驗菌生長。13. 放線菌產(chǎn)生多種抗生素（ 多種抗生素（12 000余種， 余種，60%左右來自放線菌），經(jīng)濟 左右來自放線菌），經(jīng)濟價值大。14. 育種方法 基因突變： 自然選育、誘變育種 基因重組：雜交、原生質(zhì)體融合、基因工程 基因的直接進化：定點突變、易錯PCR、同序法、 DNA Shuffling

7、等 15. 回復突變： 高產(chǎn)菌株在傳代的過程中 ， 由于自然突變導致高產(chǎn)性狀的丟失，生產(chǎn)性能下降 ， 這種情況我們稱為回復突變.16. 自然選育操作步驟：單細胞( 孢子) )懸液的制備 平板分離 挑選單菌落( 注意形態(tài)的觀察) 發(fā)酵試驗17. 用各種物理、化學的因素人工誘發(fā)基因突變進行的篩選 ， 稱為誘變育種。18. 誘變育種步驟：出發(fā)菌株的選擇處理菌懸液的制備誘變處理中間培養(yǎng)分離和篩選 中間培養(yǎng)：讓變異處理后細胞在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)幾小時，以讓細胞的遺傳物質(zhì)復制，讓細胞繁殖幾代，以得到純的變異細胞。19. 篩選營養(yǎng)缺陷型的步驟：誘變 淘汰野生型檢出缺陷型 確定生長譜 淘汰野生型方法 抗生素法：

8、野生型能在MM中生長，而缺陷型不能，于是將誘變處理液在MM中培養(yǎng)短時讓野生型生長，處于活化階段，而缺陷型無法生長，仍處于休眠狀態(tài)。由于細菌或酵母對一些抗生素敏感，于是就相應加入一定量的抗生素，結果活化狀態(tài)的野生型就被殺死，保存了缺陷型。一般細菌可以采用青霉素，酵母可采用制霉菌素。檢出缺陷型方法：影印法、點種法、夾層法20. 微生物雜交育種一般程序：選擇原始親本直接親本之間親和力鑒定雜交分離到基本培養(yǎng)基或選擇培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選重組體重組體分析鑒定21. 常規(guī)雜交育種：原核微生物 ：接合 轉(zhuǎn)化 轉(zhuǎn)導 真核微生物：有性生殖 準性生殖22. 原生質(zhì)體的制備主要是在高滲壓溶液中加入細胞壁分解酶，將細胞壁分離

9、剝離，結果剩下由原生質(zhì)膜包住的類似球狀的細胞，它保持原細胞的一切活性。 原生質(zhì)體融合育種步驟：1. 標記菌株的篩選和穩(wěn)定性驗證。 2原生質(zhì)體制備。3等量原生質(zhì)體加聚乙二醇促進融合。 4涂布于再生培養(yǎng)基，再生出菌落。5選擇性培養(yǎng)基上劃線生長，分離驗證，挑取融合子進一步試驗、保藏。6 生產(chǎn)性能篩選。23 . 基因定點突變是指按照設計的要求，使基因的特定序列發(fā)生插入、刪除、置換和重排等變異。24. 酶分子定向進化是模擬自然進化過程(隨機變異和自然選擇)，在體外進行酶基因的人工隨機突變，建立突變基因文庫，在人工控制條件的特殊環(huán)境下，定向選擇得到具有優(yōu)良催化特性的酶的突變體的技術過程。25. 易錯PCR

10、技術(error-prone PCR)是從酶的單一基因出發(fā)，在改變反應條件下進行聚合酶鏈反應，使擴增得到的基因出現(xiàn)堿基配對錯誤，從而引起基因突變的技術過程。第四章1. 菌種保藏原理：主要是根據(jù)菌種的生理生化特點，人工創(chuàng)造條件，使孢子或菌體的生長代謝活動盡量降低，以減少其變異。一般可通過保持培養(yǎng)基營養(yǎng)成分在最低水平缺氧狀態(tài)，干燥和低溫，使菌種處于 “休眠”狀態(tài) ，抑制其繁殖能力。2. 菌種保藏方法：斜面保藏法、穿刺保藏法、沙土管干燥保藏法、 真空冷凍干燥保藏法、 液氮保藏法、 懸液保藏法、低溫保藏法(普通冷凍)、超低溫冷凍保藏技術(-60-80)3. 懸液保藏法（寡營養(yǎng)保藏）：將微生物懸浮在不含

11、養(yǎng)分的溶液中，如蒸餾水、生理鹽水中保藏。適用于絲狀真菌、酵母狀真菌及腸道科細菌。第五章1. 微生物的代謝類型：分解代謝和合成代謝。2. 酶活性的調(diào)節(jié)機制：共價修飾、別構效應、締合與解離、競爭性抑制。 共價修飾：指蛋白質(zhì)分子中的一個或多個氨基酸殘基與一化學基團共價連接或解開，使其活性改變的作用。共價修飾分可逆和不可逆兩種 別構效應：是指一種小分子物質(zhì)與一種蛋白質(zhì)分子發(fā)生可逆的相互作用，導致這種蛋白質(zhì)的構象發(fā)生改變，從而改變這種蛋白質(zhì)與第三種分子的相互作用。3. 酶合成的調(diào)節(jié)是一種通過調(diào)節(jié)酶的合成量進而調(diào)節(jié)代謝速率的調(diào)節(jié)機制，這是一種在基因水平上（在原核生物中主要在轉(zhuǎn)錄水平上）的代謝調(diào)節(jié)。4. 凡

12、是能促進酶合成的調(diào)節(jié)稱為誘導；而能阻礙酶合成的調(diào)節(jié)稱為阻遏。5. 誘導劑可以是誘導酶的底物，也可是底物的結構類似物. ü誘導劑也可以不是該酶的作用底物 ü酶的作用底物不一定有誘導作用6. 末端產(chǎn)物阻遏:指由某代謝途徑末端產(chǎn)物過量積累而引起的阻遏。末端產(chǎn)物阻遏在代謝調(diào)節(jié)中有重要作用，保證細胞內(nèi)各種物質(zhì)維持適當?shù)臐舛? 分解代謝物阻遏:當培養(yǎng)基中同時存在有多種可供利用的底物時，某些酶的合成往往被容易利用的底物所阻遏，這就是分解代謝阻遏。 阻遏作用并非快速利用的碳源（或氮源）本身作用的結果；而是其分解代謝過程中所產(chǎn)生的中間代謝物引起；7. 效應物（誘導物、輔阻遏物）：指一類低分子

13、質(zhì)量的信號物質(zhì)（如糖類及其衍生物、氨基酸、核苷酸等）。8. 分支生物合成途徑的調(diào)節(jié)：同工酶調(diào)節(jié)、協(xié)同反饋調(diào)節(jié)、累加反饋調(diào)節(jié)、增效反饋調(diào)節(jié)、順序反饋調(diào)節(jié)、 聯(lián)合激活或抑制調(diào)節(jié)、 酶的共價修飾9. 能荷調(diào)節(jié)： 指細胞通過改變ATP、ADP、AMP三者比例來調(diào)節(jié)其代謝活動，也稱腺苷酸調(diào)節(jié)。10. 代謝調(diào)控 發(fā)酵條件的控制：發(fā)酵條件、使用誘導物、 添加生物合成的前體、培養(yǎng)基成份和濃度的控制 改變細胞透性 菌種遺傳特性的改變：營養(yǎng)缺陷型的利用（利用營養(yǎng)缺陷型積累分支代謝途徑中的中間產(chǎn)物或末端產(chǎn)物、從營養(yǎng)缺陷型的回復突變株也能獲得抗反饋的突變菌株） 抗反饋調(diào)節(jié)突變株的利用（在工業(yè)上，生產(chǎn)氨基酸、嘌呤、嘧啶

14、和維生素的生產(chǎn)菌種大都是抗反饋突變株。）11.次級代謝調(diào)節(jié)方式：誘導調(diào)節(jié)、碳分解產(chǎn)物調(diào)節(jié)、氮分解產(chǎn)物調(diào)節(jié)、磷酸鹽調(diào)節(jié)12.代謝工程的目：在于構建具有新的代謝途徑，能生產(chǎn)特定目的產(chǎn)物或具有過量生產(chǎn)能力的工程菌應用于工業(yè)生產(chǎn)。代謝工程的應用：改變代謝途徑、擴展代謝途徑、轉(zhuǎn)移或構建新的代謝途徑14. 微生物代謝調(diào)節(jié)的方式方式：反饋抑制、反饋阻遏、酶的誘導調(diào)節(jié)、 酶的共價修飾。第六章1. 培養(yǎng)基主要成分：能源，碳源，氮源，無機鹽和微量元素，前體，促進劑和抑制劑，水2. 常見的碳源：糖類、脂類、有機酸、低碳醇等3. 有機酸積累，會引起pH的下降，并影響微生物酶系統(tǒng)的作用。有機酸的利用會使pH上

15、升，尤其是有機酸鹽氧化時，常伴隨著堿性物質(zhì)的產(chǎn)生，使pH進一步上升。4. 無機氮源被菌體作為氮源利用后，培養(yǎng)液中就留下了酸性或堿性物質(zhì)，這種經(jīng)微生物生理作用（代謝）后能形成酸性物質(zhì)的無機氮源叫 生理酸性物質(zhì) ，如 硫酸銨， 若菌體代謝后能產(chǎn)生堿性物質(zhì)的則此種無機氮源稱為 生理堿性物質(zhì) ，如硝酸鈉。正確使用生理酸堿性物質(zhì)，對穩(wěn)定和調(diào)節(jié)發(fā)酵過程的pH有積極作用。 5. 前體：指某些化合物加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，能直接被微生物在生物合成過程中結合到產(chǎn)物分子中去，而其自身的結構并沒有多大變化，但是產(chǎn)物的產(chǎn)量卻因加入前體而有較大的提高。6. 促進劑：促進劑不是前體或營養(yǎng)物，可影響正常代謝，或促進中間代謝產(chǎn)物

16、的積累，或提高次級代謝產(chǎn)物的產(chǎn)量。7. 抑制劑：抑制某些代謝途徑的進行，同時刺激另一代謝途徑，以致可以改變微生物的代謝途徑。8. 培養(yǎng)基的類型按培養(yǎng)基成分：天然培養(yǎng)基，合成培養(yǎng)基，無血清培養(yǎng)基按用途分：孢子培養(yǎng)基（供菌種繁殖孢子）、 種子培養(yǎng)基（供孢子發(fā)芽、生長和菌體繁殖）、發(fā)酵培養(yǎng)基（供菌體生長、繁殖和合成大量代謝產(chǎn)物）9. 預處理原因：是因為原料在收獲貯藏和運輸中會混入各種夾雜物，使原料出品率降低，影響后面工序的進行，如粉碎時會磨損機械等。10. 固體物料的篩選除雜設備：大麥粗選機，磁力除鐵器，永磁滾筒11. 粉碎機的幾種類型：錘式粉碎機、輥式粉碎機、微細超微細粉碎，12. 蒸煮目的 ：破

17、壞淀粉顆粒的外皮，使其內(nèi)容物流出，呈溶解狀態(tài)變成可溶性淀粉，便于糖化劑作用。滅菌。13. 糊化:指淀粉與水共熱后，在一定條件下變成半透明狀膠體的現(xiàn)象。 糖化：指淀粉加水分解成甜品的過程。14. 汽液分離器作用：維持蒸煮溫度達到要求時間，使糊化 維持蒸煮溫度達到要求時間，使糊化醪煮透。第七章1. 培養(yǎng)基滅菌：是指從培養(yǎng)基中殺滅有生活能力的細菌營養(yǎng)體及其孢子，或從中將其除去。2. 滅菌：用物理或化學方法殺死或除去環(huán)境中所有微生物，包括營養(yǎng)細胞、細菌芽孢和孢子。 消毒：用物理或化學方法殺死物料、容器、器皿內(nèi)外的病源微生物。3. 培養(yǎng)基滅菌的要求：達到要求的無菌程度 盡量減少營養(yǎng)成分的破壞，在滅菌過程

18、中，培養(yǎng)基組分的破壞，是由兩個基本類型的反應引起的：培養(yǎng)基中不同營養(yǎng)成分間的相互作用；對熱不穩(wěn)定的組分如氨基酸和維生素等的分解。4.濕熱滅菌原理：用高溫蒸汽將物料溫度升高使微生物體內(nèi)蛋白質(zhì)變性而進行滅菌。4. 微生物的熱阻：是指微生物在某一特定條件(主要是溫度和加熱方式)下的致死時間。 相對熱阻：是指某一微生物在某條件下的致死時間與另一微生物在相同條件下的致死時間的比值。5. 致死溫度(Deathtemperature)：殺死微生物的極限溫度6. 致死時間：在致死溫度下，殺死全部微生物所需的時間。 致死時間(Death Time)；在致死溫度以上，溫度愈高，致死時間愈短。微生物類型7. 某些微

19、生物對濕熱的相對熱阻（與大腸桿菌比較相對熱阻 細菌和酵母的營養(yǎng)細胞 1 細菌孢子 3×10 6 霉菌孢子 2-10 病毒及噬菌體 1-5 衡量滅菌是否徹底，一般以能否殺死細菌孢子為標準，因為它的相對熱阻最大。（相對熱阻越高，越難殺死）8. 對數(shù)殘留定律：對微生物進行濕熱滅菌時，培養(yǎng)基中的微生物受熱死亡的速率與殘存的微生物活菌數(shù)量成正比。- dN/dt= KN t= 2.303/K·lgN 0 /N可見滅菌時間取決于污染程度(N 0 )、滅菌程度（殘留菌數(shù)N）和K值滅菌程度，即殘留菌數(shù)，如果要求完全徹底滅菌，即N = 0，則t 為，上式無意義，事實上也不可能。一般取N = 0

20、.001，即1000次滅菌中有1次失敗。9 培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇 培養(yǎng)基滅菌過程中，除微生物被殺死外，還伴隨著培養(yǎng)基成分被破壞，在加熱下氨基酸、維生素等受破壞。ü培養(yǎng)基滅菌時，必須選擇既能達到滅菌目的，又能使培養(yǎng)基成分破壞減至最少的條件。 滅菌過程微生物死亡屬于一級反應動力學類型（從對數(shù)殘留定律表達式可知）。 在其它條件不變時，比死亡速率 K 與溫度的關系可用阿侖尼烏斯方程式表示。9. 影響培養(yǎng)基滅菌的因素：（1）微生物種類：不同的微生物k值不同。 （2）初始菌量：在保持N值不變的前提下，t 與初始菌量N0的對數(shù)成正比。 （3）培養(yǎng)基成份：油脂、蛋白質(zhì)增加微生物的耐熱性。 (4)傳熱

21、與混合狀況：影響受熱均勻度。 (5)培養(yǎng)基物理狀態(tài) (6)空氣排除情況 (7)pH：酸性pH下可加快微生物熱死速率10. 分批培養(yǎng)：是指將細胞和培養(yǎng)基一次性裝入反應器內(nèi)，進行培炎，細胞不斷生長，產(chǎn)物也不斷形成，經(jīng)過一定時間反應后，將整個反應系取出。 流加培養(yǎng)：是指先將一定量的培養(yǎng)液裝入反應器，在適宜條件下接種細胞，進行培養(yǎng)，細胞不斷生長，產(chǎn)物也不斷形成。隨著細胞對營養(yǎng)物質(zhì)的不斷消耗，新的營養(yǎng)成分不斷補充至反應器內(nèi)，使細胞進一步生長代謝。到反應終止時，取出整個反應系 連續(xù)培養(yǎng)：是指將細胞種子和培養(yǎng)液一起加入反應器內(nèi)進行培養(yǎng)，一方面新鮮培養(yǎng)液不斷加入反應器內(nèi)，另一方面又將反應液連續(xù)不斷地取出，反應

22、條件處于一種恒定狀態(tài)。與分批培養(yǎng)和半連續(xù)培養(yǎng)不同，連續(xù)培養(yǎng)可以控制細胞所處的環(huán)境條件長時間的穩(wěn)定。因此，可以使細胞維持在優(yōu)化狀態(tài)下，促進細胞生長和產(chǎn)物形成。10. 在發(fā)酵罐中進行實罐滅菌，是典型的分批滅菌。全過程包括升溫、保溫、降溫三個過程。分批滅菌：將配置好的培養(yǎng)基放在發(fā)酵罐或其他裝置中，通入蒸汽將培養(yǎng)基和所用的設備一起進行加熱滅菌的過程，通常也稱為實罐滅菌。連續(xù)滅菌：將配制好的培養(yǎng)基在向發(fā)酵罐輸送的同時加熱、保溫和冷卻，進行滅菌。11. 保證分批滅菌成功的要素 內(nèi)部結構合理(主要是無死角)，焊縫及軸封裝置可靠，蛇管無穿孔現(xiàn)象 壓力穩(wěn)定的蒸汽 合理的操作方法。12. 在發(fā)酵過程中夾雜其它雜菌

23、造成的后果： 生產(chǎn)菌和雜菌同時生長，生產(chǎn)菌喪失生產(chǎn)能力； 在連續(xù)發(fā)酵過程中，雜菌的生長速度有時會比生產(chǎn)菌生長得更快，結果使發(fā)酵罐中以雜菌為主； 雜菌及其產(chǎn)生的物質(zhì)，使提取精制發(fā)生困難； 雜菌會降解目的產(chǎn)物； 雜菌會污染最終產(chǎn)品； 發(fā)酵時如污染噬菌體，可使生產(chǎn)菌發(fā)生溶菌現(xiàn)象。12. 連續(xù)滅菌設備：配料罐、連消泵、連消塔、維持罐、蛇管冷卻器等。13. 無菌空氣：是指通過除菌處理使空氣中含菌量降低在一個極低的百分數(shù)，從而能控制發(fā)酵污染至極小機會。此種空氣稱為“ 無菌空氣”。14. 空氣除菌的方法：輻射滅菌、加熱滅菌、靜電除菌、介質(zhì)過濾15. 過濾除菌：利用有孔介質(zhì)從氣體中除去微生物。16. 過濾機理

24、：直接攔截ü慣性沖擊ü布朗擴散ü重力沉降ü靜電吸引 氣流速度小 布朗運動 氣流速度中等 攔截作用 氣流速度大 慣性沖擊作用 表面過濾是攔截作用機理其作用17. 無菌空氣的制備流程：空氣 空壓機 儲氣罐 冷卻 除油水 加熱(空氣熱處理) 總過濾器 分過濾器 無菌空氣(空氣過濾)18. 空氣的預處理目的: 提高壓縮前空氣的潔凈度 去除壓縮后空氣中的油和水19. 粗過濾器(安裝在壓縮機前）作用：是捕集較大的灰塵顆粒，防止壓縮機受磨損，同時也可減輕總過濾器負荷。 常用的粗過濾器有：布袋過濾、 填料過濾 、油浴洗滌 、水霧除塵20. 空氣貯罐作用：消除空壓機排出空

25、氣量的脈動 、維持穩(wěn)定的壓力 、分離部分油水、貯氣21. 氣液分離器作用：分離空氣中被冷凝成霧狀的水霧和油霧。22. 常用的過濾介質(zhì)：棉花、活性炭、玻璃纖維、超細玻璃纖維 棉花 宜選用纖維細長、疏松的新棉花，未脫脂棉。因為舊的棉花容易斷絲，脫脂棉容易吸水，會影響過濾。23. 種子擴大培養(yǎng)：是指將保存在砂土管、冷凍干燥管、斜面試管中處于休眠狀態(tài)的生產(chǎn)菌種接入斜面試管活化后，再經(jīng)過扁瓶或搖瓶及種子罐逐級放大培養(yǎng)而獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種的過程。這些純種培養(yǎng)物稱為種子。24. 種子制備的過程大致可分為：實驗室種子制備階段、生產(chǎn)車間種子制備階段25. 作為種子的準則(優(yōu)質(zhì)種子的標準)： 1. 菌種細胞

26、的生長活力強，移種至發(fā)酵罐后能迅速生長，遲緩期短； 2. 菌種能保持穩(wěn)定的生產(chǎn)性能，生理性狀穩(wěn)定； 3. 菌體總量及濃度能滿足大容量發(fā)酵罐的要求； 4. 無雜菌和噬菌體污染； 5. 保持穩(wěn)定的生產(chǎn)能力。 種子質(zhì)量標準：細胞或菌體、生化指標、產(chǎn)物生成量、酶活力 種子異常分析： 菌種生長速度，過快或過慢 菌絲結 菌絲粘壁27 .影響種子質(zhì)量的因素及控制： 孢子的質(zhì)量 培養(yǎng)基 培養(yǎng)條件：溫度、pH、通風和攪拌、泡沫、染菌的控制 種齡和接種量 種子罐的級數(shù) 影響孢子質(zhì)量的因素及控制： 培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件、培養(yǎng)時間和冷藏時間、接種量。28. 發(fā)酵菌種質(zhì)量的保障措施：合理的育種 選用合適的培養(yǎng)基 創(chuàng)造良好的

27、培養(yǎng)條件 控制傳代次數(shù) 利用不同類型的細胞進行傳代 選擇合適的菌種保藏方法發(fā)酵過程參數(shù)的控制：物理參數(shù)控制、化學參數(shù)控制、間接參數(shù)控制、28. 接種量：是指移入的種子液體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。29. 溫度對發(fā)酵的影響：溫度對微生物生長的影響、溫度對產(chǎn)物形成的影響 溫度對產(chǎn)物形成的影響： 影響發(fā)酵過程中各種反應速率，從而影響微生物的生長代謝與產(chǎn)物生成。 改變發(fā)酵液的物理性質(zhì)，間接影響菌的生物合成 。 影響生物合成方向 。e.g. 四環(huán)素發(fā)酵中金色鏈霉菌：T<30 ，產(chǎn)生金霉素； 產(chǎn)生金霉素；T 達35 ， 產(chǎn)生四環(huán)素 。30. 發(fā)酵熱：發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的凈熱量。 凈熱量。 J / m

28、 3 · h Q 發(fā)酵 = Q 生物 + Q 攪拌 - Q 蒸發(fā) - Q顯 Q輻射31. 產(chǎn)生菌在生長繁殖過程中本身會產(chǎn)生大量的熱，此為生物熱。 影響生物熱的因素：菌株特性、培養(yǎng)基成分和濃度、發(fā)酵時期生物熱的大小還與菌體的呼吸強度有對應關系。生物熱的大小與菌體呼吸強度有對應關系（）32. 發(fā)酵工藝的三類主要控制參數(shù)：溫度、PH、氧32. pH對發(fā)酵的影響：（1）pH影響酶的活性。當pH值抑制菌體某些酶的活性時使菌的新陳代謝受阻  （2）pH值影響微生物細胞膜所帶電荷的改變，從而改變細胞膜的透性，影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收及代謝物的排泄，因此影響新陳代謝的進行   （3）pH值影響培養(yǎng)基某些成分和中間代謝物的解離，從而影響微生物對這些物質(zhì)的利用  （4）p