【的綜述】酶學(xué)的知識(shí)在臨床疾病診斷及治療上的應(yīng)用地要求

1、實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案【綜述】酶學(xué)知識(shí)在臨床疾病診斷及治療上的應(yīng)用要求目前臨床主要以檢測(cè)指標(biāo)作為依據(jù)對(duì)疾病的診斷作出較為準(zhǔn)確的判斷。 其中，酶學(xué)上的應(yīng)用 占了相當(dāng)一部分。 所以， 從臨床疾病診斷以及治療的角度去對(duì)酶學(xué)知識(shí)的具體化了解和應(yīng)用 深化是十分有必要的。 本文獻(xiàn)綜述旨在對(duì)現(xiàn)有的臨床應(yīng)用的常見(jiàn)幾種酶學(xué)指標(biāo)檢測(cè)作出一個(gè) 較為直觀的知識(shí)匯總和部分拓展，作為基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)的一次應(yīng)用上的聯(lián)系。閱讀文獻(xiàn)：?jiǎn)岱纫蕾囅嚓P(guān)的酶學(xué)研究進(jìn)展生理學(xué)與生化學(xué)的緊密聯(lián)系， 酶學(xué)體系上對(duì)某種疾病機(jī)制的解釋和指 標(biāo)上對(duì)該疾病的指導(dǎo)。新生兒 -長(zhǎng)期以來(lái)，膽紅素對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)毒性作用的研究較為深入。近年隨著對(duì)膽紅素生理功能毒性作用的

2、進(jìn)一步研究。發(fā)現(xiàn)膽紅素對(duì)心臟腎臟有一定的毒性影響 u J 。心肌酶分布在全身組織中，特別 是心、肝、肺、骨骼肌、腎、腦中含量 高，以上組織損傷均可使細(xì)胞膜的完整 性喪失。使 ASr（ 谷草轉(zhuǎn)氨酶 ）、 CPK （肌酸激酶 ）、LDH （ 乳酸脫氫酶 ）逸 出，致血清中含量增高，特別是肌酸激 酶同工酶 （CK MB） 絕大部分存在于 心肌細(xì)胞漿內(nèi)，心肌以外細(xì)胞含量甚 微，是一種心肌特異性酶。通過(guò)測(cè)定血 清心肌酶的變化，可以反映心肌受損程 度 J。新生兒高膽紅素血癥引起心肌損 害的病因及發(fā)病機(jī)制尚不清楚。有人認(rèn) 為，可能因?yàn)槲唇Y(jié)合膽紅素為脂溶性， 可以透過(guò)細(xì)胞膜。進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)干擾細(xì)胞 的代謝功能，使

3、細(xì)胞受損 bJ。本組高膽 患兒心肌酶及同工酶活性均有不同程度 增高，黃疸愈重。心肌酶活性升高愈明 顯。且經(jīng)退黃綜合治療后，黃疽減退。 心肌酶活性亦隨之下降，治療前后比較 有顯著差異 （P<0 01） ，提示新生兒高 膽紅素血癥時(shí)存在心肌損害。本組中， 有 25 例高膽患兒做心電圖檢查，大多 數(shù)心電圖正常，故僅憑心電圖檢查不能 發(fā)現(xiàn)早期心肌損害。高膽患兒應(yīng)同時(shí)作 心肌酶譜檢查，早期應(yīng)注意保護(hù)心臟功 能，以避免嚴(yán)重心肌損害。第七章 診斷酶學(xué)本世紀(jì)初臨床就開(kāi)始測(cè)定體液中的酶來(lái)診斷疾病，如 Wohlgemuth 早在1908 年就測(cè) 定尿液中淀粉酶（ AMY ）以診斷急性胰腺炎； 30 年代臨床

4、測(cè)定堿性磷酸酶（ ALP ）用于診 斷骨骼疾病， 隨后發(fā)現(xiàn)不少肝膽疾病特別在出現(xiàn)梗阻性黃疸時(shí)此酶常明顯升高。 這些酶成為 當(dāng)時(shí)臨床實(shí)驗(yàn)室的常規(guī)測(cè)定項(xiàng)目，直到60 年代 ALP 仍是世界上測(cè)定次數(shù)最多的酶。但在 50年代以前，酶測(cè)定在檢驗(yàn)科常規(guī)工作中只占很少一部分。診斷酶學(xué)的真正發(fā)展還是從 50 年 代用分光光度法建立了連續(xù)監(jiān)測(cè)酶活性濃度方法開(kāi)始，它可以測(cè)定不少用舊的“固定時(shí)間 法”不能測(cè)定的酶， 并用于診斷疾病。 結(jié)果發(fā)現(xiàn)乳酸脫氫酶 （LD ）、天冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶 （AST） 和 - 羥丁酸脫氫酶（ HBDH ）在診斷急性心肌梗死（ AMI ）上的靈敏度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其他診斷 方法。在 60 年代初又

5、肯定了肌酸激酶（ CK）在診斷 AMI 比上面幾個(gè)酶更早出現(xiàn)增高，特異 性也高，目前此酶已取代 ALP 成為世界范圍內(nèi)測(cè)定次數(shù)最多的酶。同時(shí)發(fā)現(xiàn)丙氨酸氨基轉(zhuǎn) 移酶（ ALT）、 AST 對(duì)肝炎診斷不僅敏感度高，而且早在肝炎黃疸前期就明顯升高。這些成 就引起了當(dāng)時(shí)臨床和實(shí)驗(yàn)室工作者廣泛的興趣和注意， 先后進(jìn)行了大量臨床和實(shí)驗(yàn)工作， 嘗 試和評(píng)價(jià)過(guò)成百種酶測(cè)定的臨床意義， 其中十種左右酶已成為目前檢驗(yàn)科常用的重要測(cè)定項(xiàng) 目。酶測(cè)定約占目前臨床化學(xué)總工作量的1/4 到 1/2 。隨著廣泛地應(yīng)用和研究， 也發(fā)現(xiàn)總酶活性濃度測(cè)定對(duì)疾病診斷的特異性遠(yuǎn)不如人們所開(kāi)始預(yù)期的那樣高。從 70 年代開(kāi)始，學(xué)者逐漸

6、將注意力集中到同工酶測(cè)定上來(lái)，發(fā)現(xiàn) CK-MB 和 LD1 診斷 AMI 比上述總酶特異性更高， CK-MB 已成為公認(rèn)的診斷 AMI 的“金指標(biāo)”， 此二項(xiàng)同工酶測(cè)定也成為各大醫(yī)院檢驗(yàn)科必測(cè)項(xiàng)目。80 年代以來(lái)，發(fā)現(xiàn)組織中同工酶進(jìn)入體液后，有可能出現(xiàn)變化。如 Ck-MM 可進(jìn)一步 分為 Ck-MM1 、 MM2 和 MM3 ， Ck-MB 可分為 MB1 和 MB2 。在診斷 AMI 上優(yōu)于 CK 總 酶和同工酶，成為目前臨床酶學(xué)上的一個(gè)研究熱點(diǎn)。從70年代起，隨著免疫學(xué)和技術(shù)方法的發(fā)展，用抗原抗體反應(yīng)有可能直接測(cè)定微量的 酶蛋白，為酶學(xué)在臨床醫(yī)學(xué)上的發(fā)展開(kāi)拓了一個(gè)新的領(lǐng)域。本章將以血液中酶

7、變化為重點(diǎn)， 首先研究其變化的總規(guī)律， 其次將從臨床角度來(lái)探討這 些酶測(cè)定在臨床診斷疾病、判斷療效和疾病預(yù)后中的價(jià)值。第一節(jié) 概述長(zhǎng)期以來(lái)臨床將血清酶變化的機(jī)制理解得很簡(jiǎn)單： 即病變細(xì)胞將其細(xì)胞中高濃度的酶釋 放到血液中， 二者間酶濃度梯度越大， 則血清中酶升高程度越大。 這種理解遠(yuǎn)不能解釋各種 各樣的臨床現(xiàn)象，例如肝中 AST 絕對(duì)量約是 ALT 的4 倍，但在急性肝炎時(shí) ALT 增高程度遠(yuǎn) 大于 AST ，而在慢性肝病特別是肝硬化時(shí)血中 AST 又比 ALT 高，單從上述濃度梯度理論顯 然很難說(shuō)清。 必須全面了解各種影響血清酶變化的因素。 首先要了解血清酶的分類， 因?yàn)椴?同類型酶變化模式

8、將是不一樣的。一、血清酶的分類雖然絕大多數(shù)血清酶含量極低， 在血液中沒(méi)有任何功能， 但也確有一小部分酶在細(xì)胞內(nèi)合成后分泌到血液中， 并行使一定功能。 其典型例子就是一些與凝血過(guò)程有關(guān)的酶， 如凝血 酶原、因子、因子等，還有與纖溶有關(guān)的酶如纖溶酶原、纖溶酶原活化因子等。它們一 般以失活或酶原狀態(tài)分泌入血， 在一定情況下被活化， 引起一系列病理或生理變化。 它們?cè)?血中濃度往往很高， 甚至超過(guò)大多數(shù)器官細(xì)胞內(nèi)濃度， 因此在血中的變化常不是升高而是下 降。它們大都在肝臟合成，并以恒定速度釋放入血，肝實(shí)質(zhì)病變時(shí)，血中濃度明顯下降，常 作為肝功能試驗(yàn)的一部分。這類對(duì)臨床有價(jià)值的酶還有膽堿酯酶（CHE）、

9、銅氧化酶、脂蛋白脂酶等，在血中含量都以 mg 計(jì)，人們將此類酶命名為血漿特異酶。表 7-1 臨床常用的酶*EC 編號(hào)推薦名簡(jiǎn)寫1.1.1.27乳酸脫氫酶LD 、 LDH1.1.1.37蘋果酸脫氫酶MD 、 MDH1.1.1.41異檸檬酸脫氫酶ICD、ICDH1.4.1.3谷氨酸脫氫酶GDH 、 GLDH2.3.2.2-谷氨?；D(zhuǎn)移酶GGT、-GT （GGTP）2.6.1.1天門冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST、GOT2.7.3.2肌酸激酶CK（CPK）3.1.1.3脂肪酶LPS3.1.1.8膽堿酯酶CHE3.1.3.1堿性磷酸酶ALP（AKP ）3.1.3.2酸性磷酸酶ACP3.2.1.1-淀粉酶AMY

10、（ AMS ）3.4.11.2氨基酸芳香酰胺酶LAP4.1.2.13果糖二磷酸醛縮酶ALD2.1.3.3鳥(niǎo)氨酸氨甲?；D(zhuǎn)移酶OCT3.1.3.55-核苷酸酶5 -NA （ 5-NT ）*EC：國(guó)際酶學(xué)委員會(huì)其它酶可歸為非血漿特異酶，它們?cè)谘袧舛群艿停Ｒ晕⒖擞?jì)算，并且無(wú)何功能?？蛇M(jìn)一步分為分泌酶和代謝酶，一些外分泌器官分泌的酶可有小部分入血，如- 淀粉酶（AMY ）、脂肪酶（ LPS）、胃蛋白酶原等等，它們?cè)谘幸话阋惨允Щ顮顟B(tài)存在，疾病時(shí)可 以升高，但是如分泌細(xì)胞破壞，血中濃度也可下降，往往將ALP 、酸性磷酸酶（ ACP）也歸到此類，認(rèn)為 ALP 由骨細(xì)胞分泌， ACP 由前列腺分泌。其

11、余絕大多數(shù)酶都參與細(xì)胞內(nèi)代謝， 隨正常細(xì)胞的新陳代謝， 極少數(shù)進(jìn)入血液， 細(xì)胞內(nèi) 外濃度差異懸殊，病理情況下極易升高，一般很少考慮其濃度下降的臨床意義。有些書(shū)還講一步將代謝酶分為一般酶和組織專一酶， 看來(lái)無(wú)此必要， 從臨床觀點(diǎn)看， 單測(cè)總酶變化就要得出病變存在組織或器官的結(jié)論，顯然是很困難的。二、血清酶變化的病理生理機(jī)制前面已提到不同類型的酶， 其變化機(jī)制會(huì)有所不同， 如把所有可能影響因素都考慮進(jìn)去，可以得到一個(gè)總的酶由細(xì)胞內(nèi)進(jìn)入血液以及在血中變化的總的模式圖（圖 7-1 ）：圖 7-1 血清酶變化機(jī)制式中 k1，k2分別代表細(xì)胞內(nèi)酶進(jìn)入細(xì)胞間隙或（和）直接進(jìn)入血液的速率，如某些種 類細(xì)胞直接

12、與血液接觸， 不需經(jīng)過(guò)組織間隙就直接進(jìn)入血液， 則血中酶變化不僅出現(xiàn)早而且 明顯。 K3和 k4 分別代表酶從兩個(gè)不同方向通過(guò)毛細(xì)血管壁的速率，某些組織或器官中毛細(xì) 血管壁很致密， 這些值較低， 則可能有相當(dāng)一部分酶經(jīng)由淋巴管才進(jìn)入血液， 此速率常數(shù)為 k5。而 k6、k7 則代表了酶在細(xì)胞間隙和血液的清除速率。K8代表酶被血中細(xì)胞或網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)細(xì)胞攝入的速率常數(shù)。 少數(shù)酶屬于血漿特異酶和分泌酶， 如細(xì)胞出現(xiàn)增生性病變， 則酶 可以產(chǎn)生增多，并進(jìn)入血液，反之也可能產(chǎn)生減少，從而引起血中酶濃度下降。不同組織或器管中酶進(jìn)入血中途徑不一， 清除方法也有差異， 這就構(gòu)成不同疾病酶變化 的多樣性， 也只

13、有在總的規(guī)律基礎(chǔ)上， 掌握各種器官疾病的特殊性， 才能解釋和掌握酶變化 規(guī)律，正確用于臨床。從臨床角度，可以將上述各種因素歸納為以下四個(gè)方面加以敘述。（一）細(xì)胞酶的釋放細(xì)胞靠細(xì)胞膜來(lái)維持其完整性，細(xì)胞膜代謝十分活躍，依靠膜上一系列 ATP 依賴的離 子泵來(lái)維持細(xì)胞內(nèi)外 Na+、K+和 Ca2+濃度的差異，這過(guò)程需要耗費(fèi)大量能源，當(dāng)缺氧或能 量代謝障礙、 ATP 供應(yīng)減少、離子泵功能障礙時(shí)，無(wú)法維持正常離子的梯度差，改變了細(xì) 胞的內(nèi)滲透壓，從而引起細(xì)胞腫脹，特別是 Ca2+ 進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，引起細(xì)胞膜的泡狀突出，膜 孔隙增大，酶開(kāi)始從細(xì)胞內(nèi)向外溢出，其速度和數(shù)量受多種因素影響。主要的有：細(xì)胞內(nèi)外酶濃

14、度的差異 對(duì)于非血漿特異酶，細(xì)胞內(nèi)外濃度差可在千倍以上，因此只 要有少量細(xì)胞壞死或者細(xì)胞有輕度病變，血中酶濃度就可能明顯升高。有人計(jì)算過(guò)只要有 1/1000 肝細(xì)胞壞死，所釋放的酶可使血中酶增加一倍。鳥(niǎo)氨酸氨甲酰基轉(zhuǎn)移酶（OCT ）在 細(xì)胞內(nèi)外濃度差異可達(dá)到 105 ：1 ，此酶在肝臟病變時(shí)變化極為明顯，可惜的是，由于測(cè)定 方法不方便，臨床應(yīng)用不多。但對(duì)于血漿特異酶而言，由于細(xì)胞內(nèi)外濃度差異小， 細(xì)胞病變 很少引起血中酶濃度明顯升高。酶在細(xì)胞內(nèi)定位與存在形式 從上述酶釋放的機(jī)制不難理解最容易釋放入血的是胞質(zhì) 中游離的酶，如 ALT， LD 等。而在細(xì)胞亞顯微結(jié)構(gòu)中的酶則較難溢出，除非細(xì)胞病變進(jìn)

15、一 步加重，不局限于細(xì)胞膜。特別是線粒體酶， 由于有兩層致密的線粒體膜， 往往當(dāng)細(xì)胞出現(xiàn) 壞死病變時(shí)，才開(kāi)始釋放入血。在一個(gè)典型的 AMI 病程中，線粒體 AST 是最后一個(gè)出現(xiàn)升 高的酶，而且到達(dá)峰值時(shí)間也最遲。臨床通過(guò)線體酶的測(cè)定，有助于判斷疾病的不良預(yù)后。 又如肝細(xì)胞中 AST 大部分存在于線粒體，雖然其絕對(duì)量超過(guò)ALT ，但在急性肝炎時(shí)，由于細(xì)胞病變較輕，胞質(zhì)中含有大量 ALT，故血中 ALT 往往超過(guò) AST 。而在肝硬化時(shí)，主要病 變?yōu)楦渭?xì)胞壞死，線粒體中 AST 大量溢出，血中往往 AST 大于 ALT 。細(xì)胞膜上也含有多種酶，如 - 谷氨?；D(zhuǎn)移酶（ GGT）大量存在于肝中毛細(xì)

16、膽管上皮 膜上，當(dāng)膽道梗阻、膽汁潴留在肝中時(shí)，膽汁酸鹽有表面活性劑作用，可將 GGT 從細(xì)胞膜 上洗脫下來(lái)， 而此時(shí)不一定伴有細(xì)胞膜病變。 正因?yàn)檠胁煌缸兓瘷C(jī)制有差異， 這樣 GGT 和 ALT 在各種肝膽疾病時(shí)的變化常不一致。酶蛋白分子量的大小 不少實(shí)驗(yàn)都證實(shí)酶的釋放速度大致與酶的分子量成反比。由于 臨床上測(cè)定的十余種酶之間分子量差異不太大， 此因素對(duì)血中酶濃度高低影響恐不如上述因 素，但對(duì)酶在血中出現(xiàn)升高時(shí)間先后有相當(dāng)大影響。例如在 AMI 時(shí)，血中最先升高的 CK 分子量為 85000 ，而分子量為 125000 的 LD 出現(xiàn)升高明顯推遲。（二）酶在細(xì)胞外間隙的分布和運(yùn)送細(xì)胞中的酶

17、經(jīng)過(guò)三種途徑進(jìn)入血液： 一種如血細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞中的酶， 不經(jīng)過(guò)稀釋 就直接進(jìn)入血液。第二種途徑， 細(xì)胞酶既和組織間隙也和血液直接相接觸。 如肝脾，它們釋 放的酶很快直接入血，另有小部分進(jìn)入組織間隙。 第三種途徑，大多數(shù)組織或器官中， 由于 存在著結(jié)構(gòu)致密的毛細(xì)血管， 所釋放的酶大部分進(jìn)入組織液。 除一小部分通過(guò)毛細(xì)血管壁進(jìn) 入血液外，主要經(jīng)由淋巴系統(tǒng)進(jìn)入血液。由于血液只占細(xì)胞外液的20 ，淋巴液和血液一天交換量可達(dá) 50 -100 ，其結(jié)果通過(guò)此途徑進(jìn)入血液的酶量不僅增高程度較低，在血中 出現(xiàn)增高時(shí)間也較遲。 臨床醫(yī)師不能忽視淋巴系統(tǒng)對(duì)血清酶濃度的影響。 在一組動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中， 單純肌肉損傷加

18、以固定，血中酶濃度變化不大；如加上被動(dòng)運(yùn)動(dòng)，則 AST 明顯升高；如移 去實(shí)驗(yàn)動(dòng)物胸導(dǎo)管，即使有被動(dòng)運(yùn)動(dòng)， AST 也不升高。有作者認(rèn)為在壞死病變時(shí)血中線粒體酶很少達(dá)到像胞質(zhì)酶這樣高的程度， 也是因?yàn)閴乃?病灶無(wú)淋巴液或很少淋巴液流動(dòng)， 這樣大量線粒體酶堆積在壞死區(qū)， 只有少部分壞死邊緣區(qū) 酶通過(guò)淋巴進(jìn)入血液。 劇烈運(yùn)動(dòng)后血中酶升高與其說(shuō)是由于細(xì)胞損傷引起， 還不如說(shuō)與酶在 不同體液中重新分布有關(guān)。首先運(yùn)動(dòng)引起血壓升高，血漿容量減少，血液濃縮；更重要的是 運(yùn)動(dòng)加速了淋巴液回流入血， 大量組織液中酶進(jìn)入血液。 因此即使細(xì)胞中酶無(wú)明顯釋放入血， 血液酶濃度也可增高。不同入血途徑還可引起別一種差異，

19、 通過(guò)第三途徑入血的往往是一些分子量小的單純酶 蛋白， 通過(guò)前兩種途徑入血的不僅有單純酶蛋白、 大分子量的酶多聚體和抗體的復(fù)合物， 乃 至一些和細(xì)胞碎片結(jié)合的酶都易進(jìn)入血液， 臨床上所觀察的巨酶血癥常與肝病有關(guān)， 可能原 因在此。（三）血中酶的清除為了很好解釋臨床上復(fù)雜情況，還必須了解不同酶從血中清除率的差異以及清除機(jī)制。弄清酶的清除率有助于理解， 為什么同一疾病不同酶升高持續(xù)時(shí)間有差異。 一般以血中酶的半壽期來(lái)代表酶從血中清除快慢，表 7-2 是一些常用酶的半壽期數(shù)據(jù)。表7-2 血漿中酶的半壽期酶半壽期AST17 ± 5hALT47 ± 10hGLD18 ± 1

20、hLD1113 ± 60hLD510 ± 2hCK約15hCK-MM17 ± 4hCk-MB12 ± 4hCK-BB約5hALP3-7天GGT3-4 天CHE約10天AMY3-6hLPS3-6h從表7-2中不難理解為什么在急性肝炎恢復(fù)期時(shí)AST先于ALT 恢復(fù)正常，也很好解釋在 AMI 時(shí) CK-MB 持續(xù)時(shí)間最短，因其半壽期只有 6小時(shí)，而 LD 1因其半壽期長(zhǎng)達(dá) 100 余小 時(shí)，持續(xù)時(shí)間最長(zhǎng)。有關(guān)酶從血中清除的機(jī)制， 可說(shuō)是目前最不清楚的問(wèn)題， 酶雖然也是蛋白質(zhì)， 但它們的 半壽期明顯比一般血清蛋白質(zhì)為短， 說(shuō)明酶蛋白除遵守一般蛋白質(zhì)代謝規(guī)律外，

21、還有其特殊 的清除機(jī)制。目前發(fā)現(xiàn)對(duì)于一小部分分子量小于 60000 的酶，如 AMY 可以從腎小球?yàn)V過(guò)一 部分，從尿中排出，腎臟嚴(yán)重疾病時(shí) AMY 升高也證實(shí)此一推論。但對(duì)于大多數(shù)酶而言，這精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案種清除機(jī)制顯然是不存在的。過(guò)去曾強(qiáng)調(diào)，通過(guò)膽汁可能排泄一部分酶，并認(rèn)為這是梗阻性黃疸時(shí)，血中 ALP 、亮 氨酸氨基肽酶（ LAP ）的升高機(jī)制。而目前更多傾向認(rèn)為此時(shí)升高機(jī)制是肝細(xì)胞受刺激合成 更多的酶，因?yàn)槿缃o以抑制蛋白合成的藥物，雖有黃疸，這些酶也不升高。目前有人強(qiáng)調(diào)單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)在清除酶中的作用， 它們可將酶迅速吞噬入細(xì)胞中， 并 進(jìn)一步分解破壞。 有學(xué)者用 Riley 病毒選

22、擇性地感染小鼠單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)， 引起血中 LD 、 AST、 AMY 和 CK 等酶升高，用其它化合物封閉單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)也得類似結(jié)果。使用乙 芪酚刺激單核吞噬細(xì)胞系統(tǒng)可加速這些酶的清除， 但是也不能過(guò)高評(píng)價(jià)這種結(jié)果， 就在同一 試驗(yàn)中，一些酶如 LD 1和 ALT 就不受影響。此外，從臨床角度來(lái)看，目前，尚無(wú)任何證據(jù) 顯示任何人的病毒感染疾病引起酶清除機(jī)制的障礙。（四）酶合成異常對(duì)于血漿特異酶， 細(xì)胞內(nèi)酶合成下降是引起血中酶變化的重要因素， 這些酶大多在肝臟 合成， 因此當(dāng)肝功能障礙時(shí)， 膽堿酯酶常與白蛋白同時(shí)下降。 酶合成減少和變異還見(jiàn)于不少 遺傳疾病， 由于酶基因變異， 可引起特定的酶

23、合成減少乃至消失， 如肝 -豆?fàn)詈司C合征患者， 血中銅氧化酶活性可明顯下降乃至于零。在增生性疾病如骨骼疾病時(shí)，可因?yàn)楣羌?xì)胞增生， 合成分泌更多的 ALP ，引起血中此酶升高。惡性腫瘤患者血中酶升高有一部分可能與腫瘤 細(xì)胞中酶合成增加有關(guān)，如前列腺癌細(xì)胞可產(chǎn)生大量酸性磷酸酶。酶的誘導(dǎo)作用也可引起血中一些酶濃度增高， 最明顯例子是服用苯巴比妥后常可引起肝 中 GGT 合成增加，血中濃度升高并不意味著肝細(xì)胞有什么病理變化，停藥后GGT 就會(huì)下降至正常。 乙醇、巴比妥類、杜冷丁類以及雙苯內(nèi)酰脲類藥物都有此種誘導(dǎo)作用， 誘導(dǎo)的酶 精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案除 GGT 外還可以是 ALP 。（五）其它實(shí)驗(yàn)室所測(cè)

24、到的酶活性濃度值主要和酶量多少相關(guān)， 但還受到其它物質(zhì)特別是抑制劑和 活化劑的影響。 在病理情況下， 應(yīng)考慮有無(wú)抑制作用， 因?yàn)槟承┧幬锖投疚镉幸种泼傅淖饔谩?當(dāng)使用某些藥物治療肝炎后，還應(yīng)考慮此藥物有無(wú)可能抑制 ALT 活性，此時(shí)血中 ALT 量不 一定下降， 只是活性受到抑制， 使所測(cè)活性下降而已。 有機(jī)磷中毒時(shí)所測(cè)的血清膽堿脂酶和 紅細(xì)胞中真性膽堿酯酶活性濃度可以很低， 此時(shí)并不是酶含量降低， 只是和有機(jī)磷結(jié)合， 而 有機(jī)磷是這些酶的不可逆抑制劑，使酶活性無(wú)法發(fā)揮。三、血清酶的生理變異臨床醫(yī)師常通過(guò)兩個(gè)途徑來(lái)判斷血清酶的測(cè)定結(jié)果是否異常， 有無(wú)臨床價(jià)值。 一是將所 測(cè)值與同一被測(cè)對(duì)象在正

25、常條件下所測(cè)值進(jìn)行比較， 二是將所測(cè)值與實(shí)驗(yàn)室提供的參考值進(jìn) 行比較。 但不論用什么方法都需知道， 不僅是病理因素， 還有不少生理因素也能引起所測(cè)值 變化，這些變異并無(wú)臨床或病理意義。（一）性別大多數(shù)酶在男女之間無(wú)大差異，但少數(shù)酶如CK、GGT 在男女之間有明顯差異，因此不能以一個(gè)參考值作為判斷標(biāo)準(zhǔn)。建議以 130U/L 為男性正常參考上限， 100U/L 為女性參考 值上限。這是因?yàn)?CK 在肌肉收縮中起重要作用，大量存在于肌肉組織中，從總體說(shuō)男性肌 肉比女性發(fā)達(dá)，所以血清 CK 在男女之間差異較大，在衡量個(gè)體 CK 變化時(shí)，恐怕肌肉發(fā)達(dá) 程度是一個(gè)很重要的因素。 GGT 是另一個(gè)男女差別明

26、顯的酶，常以 GGT30U/L （ 30 ）為 女性上界值， 50U/L （ 30 ）為男性上界值，這可能與雌激素抑制 GGT 合成有關(guān)。嗜酒者 可誘導(dǎo) GGT 合成，而嗜酒者男性多于女性。（二）年齡不少酶在兒童時(shí)期與成人有所不同，例如新生兒的CK、 LD、蘋果酸脫氫酶（ MD ）、ACP 和谷氨酸脫氫酶（ GLD ）等常為成人 2-3 倍，尤其前兩項(xiàng) CK 、LD 是臨床常用的酶。 CK 出生24小時(shí)內(nèi)可為成年人的 3倍，到嬰兒時(shí)降為兩倍，到青春期降到成年人值。 LD 在出 生時(shí)也為成人兩倍，逐漸下降到 14 歲和成年人值一致。同時(shí) LD1 值兒童期也比成年人高， 正常兒童也可出現(xiàn) LD1

27、>LD2 ，如不注意此點(diǎn)， 簡(jiǎn)單以正常成年人參考值為診斷標(biāo)準(zhǔn)， 易導(dǎo) 致兒童心肌炎的誤診。年齡引起酶變化最明顯的酶是 ALP ，新生兒值略高于成年人。至周歲增至成年人的 2-3 倍。然后逐漸下降，到 10 歲左右，發(fā)育長(zhǎng)高期 ALP 又明顯升高，可達(dá)到成人的 3-5 倍。這 可能與該時(shí)期軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞代謝活躍密切相關(guān)，切勿認(rèn)為有肝臟病變，必要時(shí)應(yīng)測(cè) ALP 同工酶以資鑒別。也有少數(shù)酶如 AMY ，新生兒比成年人低。 當(dāng)進(jìn)入老年期， 有些酶也可出現(xiàn)變化， 如 ALP 、GGT 等都有輕度升高三）進(jìn)食大多數(shù)血清酶不受飲食影響， 故測(cè)酶活性不一定空腹采血。 但應(yīng)注意酗酒者常引起 GGT 明

28、顯升高，日本學(xué)者認(rèn)為可根據(jù)血中 GGT 升高判斷酗酒程度，如未累及肝臟，戒酒后一周 GGT 可降至正常。此外如禁食數(shù)天可導(dǎo)致血清 AMY 下降。精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案四）運(yùn)動(dòng)劇烈運(yùn)動(dòng)可引起血清中多種酶升高， 升高程度和運(yùn)動(dòng)量及持續(xù)時(shí)間有關(guān)， 也與運(yùn)動(dòng)者是 否經(jīng)常鍛煉相關(guān)。 訓(xùn)練有素的運(yùn)動(dòng)員， 其血清酶升高幅度小。 升高的酶多為肌肉中含量豐富 的CK、LD、AST、醛縮酶（ ALD ）和ALT 等，這些酶變化機(jī)制和意義是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)的一個(gè)重 要研究項(xiàng)目，從臨床角度，抽血化驗(yàn)前不宜過(guò)度運(yùn)動(dòng)，以免引起解釋困難。（五）妊娠與分娩妊娠期出現(xiàn)一系列生理變化， 也可引起一些酶升高， 如不注意有可能引起誤診。 例如

29、由 于胎盤產(chǎn)生耐熱的 ALP 可引起血中 ALP 值超過(guò)正常， LAP 也會(huì)明顯升高，但都無(wú)臨床診斷 價(jià)值。 銅氧化酶在妊娠期升高， 若胎兒死亡， 此酶很快降至正常， 有學(xué)者在妊娠期監(jiān)測(cè)此酶 以觀察胎兒情況。分娩時(shí)，由于子宮收縮，肌肉劇烈活動(dòng)，可導(dǎo)致CK、 CK-BB 、AST、LD等升高，這些變化與心肌損傷無(wú)關(guān)。四、測(cè)定方法、標(biāo)本處理等對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響除了生理?xiàng)l件可引起酶測(cè)定值的變化外， 還有其它一些非病理因素也會(huì)引起實(shí)驗(yàn)室測(cè)定 結(jié)果的變化。（一）酶測(cè)定方法酶測(cè)定方法大致經(jīng)過(guò)三個(gè)歷史發(fā)展階段， 50 年代以前大都使用“固定時(shí)間法”，即讓 酶與底物作用一段固定時(shí)間， 一般為半小時(shí)左右， 然后停

30、止酶反應(yīng)， 用光電比色測(cè)產(chǎn)物生成 量或底物消耗量， 從而計(jì)算出酶催化反應(yīng)的平均速度。 再據(jù)此按各作者自己定義的“單位” 向臨床報(bào)告測(cè)定結(jié)果。這些所報(bào)的單位往往在前面冠以作者的姓名命名，例如 ALP 根據(jù)不 精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案同測(cè)定方法就有金氏單位、 鮑氏單位、 國(guó)際單位等等。 同一標(biāo)本不同單位結(jié)果從表面數(shù)值看 可以差異很大。如 ALP 上列三種單位參考值分別為 3-13 金氏單位， 0-3 鮑氏單位， 20-80 國(guó)際單位。50年代中期，國(guó)際臨床實(shí)驗(yàn)室開(kāi)始采用“連續(xù)監(jiān)測(cè)法”，就是習(xí)慣上所稱的“動(dòng)態(tài)法”。 需要使用生化分析儀， 可以測(cè)酶反應(yīng)的初速度， 其結(jié)果遠(yuǎn)比“固定時(shí)間法”所測(cè)平均 速度準(zhǔn)確

31、， 在高濃度標(biāo)本時(shí)尤為明顯。 這樣同一疾病患者用兩種方法所測(cè)酶的結(jié)果并不一定 平行一致。 在疾病急性期， 用新法測(cè)定結(jié)果增加倍數(shù)常明顯超過(guò)老法。 例如在肝炎用賴氏法 測(cè) ALT 很少超過(guò)參考值上限的十倍。改用新法，在肝炎急性期可得到超過(guò)參考值上限數(shù)十 倍乃至百倍以上的結(jié)果， 由于后者結(jié)果和臨床病理變化相一致， 結(jié)果準(zhǔn)確。 目前在發(fā)達(dá)國(guó)家 中，新法已幾乎取代了老法， 我國(guó)也已開(kāi)始廣泛應(yīng)用新法。 本書(shū)各論在討論各種疾病酶變化 時(shí)，將主要根據(jù)新法加以敘述。 用新法也就是“連續(xù)監(jiān)測(cè)法”所得結(jié)果， 目前已基本統(tǒng)一使 用1964 年國(guó)際生化協(xié)會(huì)所規(guī)定的國(guó)際單位（ IU ）：即以每分鐘能催化 1微摩爾底物的

32、酶量為 1 個(gè)國(guó)際單位。如表示血清中酶濃度多以 U/L 表示之，即 IL 標(biāo)本（血清）中含的酶量，我 國(guó)醫(yī)學(xué)界對(duì)此表示方法已經(jīng)熟悉習(xí)慣。我國(guó)現(xiàn)在規(guī)定 SI 制為計(jì)量的法定單位， SI 制的酶單 位為 Katal ，即每秒能催化 1 總分子底物的酶量為 1 個(gè) Katal ，此單位不僅我國(guó)醫(yī)學(xué)家不熟悉， 國(guó)際上應(yīng)用不多，如有可能可同時(shí)用兩種單位報(bào)告結(jié)果，或者注明轉(zhuǎn)換系數(shù)，即1U 16.67 Katal 。37 所但即使同使用連續(xù)監(jiān)測(cè)法，同用 IU/L 報(bào)告結(jié)果，不同實(shí)驗(yàn)室測(cè)定結(jié)果仍可出現(xiàn)較大差 異。這是因?yàn)樯鲜龆ㄊ峭ㄟ^(guò)測(cè)酶催化速度來(lái)間接表示酶量高低， 而酶催化的速度還受很多 其它因素影響。 首

33、先是溫度， 在國(guó)際單位定義中并未規(guī)定測(cè)定溫度， 而反應(yīng)速度隨溫度升高 而加速，一般說(shuō)每增加 10 ，反應(yīng)速度將增加一倍。因此同一標(biāo)本、同一方法，在精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案37得結(jié)果將顯著高于30 。雖然國(guó)際臨床化學(xué)協(xié)會(huì)（IFCC）推薦 30 為酶測(cè)定溫度，但臨床實(shí)驗(yàn)室由于實(shí)驗(yàn)工作方便等因素，愈來(lái)愈多使用 37 。因此本書(shū)各酶測(cè)定參考值將以 所測(cè)結(jié)果為準(zhǔn)，某些數(shù)據(jù)如在 30 測(cè)定將在結(jié)果后面用（ 30 ）表示。除溫度外，測(cè)定時(shí)條件的不同也可能引起結(jié)果明顯差異。最突出例子是 ALP 測(cè)定，用 二乙醇胺為緩沖液測(cè)出 ALP 結(jié)果比用氨基甲基丙烷為緩沖液的高 2-3 倍。又如在 ALT 測(cè)定 時(shí)，如在底物

34、中加入磷酸吡哆醛比不加者結(jié)果可增高20 -100 。正因?yàn)槿绱?，為防止臨床醫(yī)生產(chǎn)生錯(cuò)覺(jué)， 認(rèn)為 IU/L 結(jié)果在國(guó)際上應(yīng)一致。 目前實(shí)驗(yàn)室常以 U/L ，而不以 IU/L 向臨 床報(bào)告。總之，臨床醫(yī)師在分析酶測(cè)定結(jié)果（ U/L ）時(shí)應(yīng)以給報(bào)告實(shí)驗(yàn)室的參考值為準(zhǔn)，盲目套 用文獻(xiàn)結(jié)果或與其它實(shí)驗(yàn)室結(jié)果相比較，有可能得到不恰當(dāng)?shù)慕Y(jié)論。前面已提到從 70 年代以來(lái)，隨免疫技術(shù)發(fā)展，出現(xiàn)利用酶的抗原性，通過(guò)抗原抗體反 應(yīng)直接測(cè)定酶的質(zhì)量。測(cè)定結(jié)果不是以 U/L 報(bào)告而是直接用 ng/ml ， g/L等報(bào)告酶蛋白含 量高低。 如臨床醫(yī)師看到這樣的報(bào)告， 就可知道此時(shí)使用了最新的免疫學(xué)方法測(cè)酶， 其臨床 意

35、義有可能與前兩種方法結(jié)果有差異。例如國(guó)外公認(rèn)，同樣測(cè) CK-MB ，用免疫學(xué)方法所測(cè) 結(jié)果診斷價(jià)值最高，此問(wèn)題將在后專門敘述。（二）標(biāo)本的采集、處理與貯存在實(shí)驗(yàn)室測(cè)定酶之前， 標(biāo)本還要經(jīng)過(guò)采集、 分離血清和貯存等一系列處理過(guò)程。 而酶在 血中是處于一個(gè)動(dòng)態(tài)變化過(guò)程， 血液離開(kāi)體內(nèi)后， 還會(huì)有一定變化。 因此在其中任何一個(gè)階 段處理不當(dāng)，都有可能引起測(cè)定值變化。精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案采取血液標(biāo)本時(shí)最容易引起實(shí)驗(yàn)室誤差的是抽血不當(dāng)， 或者實(shí)驗(yàn)室急于分離血清， 因此 體外溶血。 由于大部分酶在細(xì)胞內(nèi)外濃度差異明顯， 少量血細(xì)胞的破壞就有可能引起血清中 酶明顯升高。最明顯例子是 LD ，紅細(xì)胞中 LD

36、約為血清的 100 倍，這樣，只要有輕度溶血， 如1/100 紅細(xì)胞破壞，就足以使血清中 LD 升高一倍，常使原為正常的血清 LD 值超過(guò)參考 值上限。其它如 CK，雖然紅細(xì)胞中無(wú) CK，但含有豐富腺苷酸激酶（ AK ），進(jìn)入血清能使某 些用“連續(xù)監(jiān)測(cè)法”測(cè)定 CK 的值假性升高，紅細(xì)胞中酶的干擾，不僅表現(xiàn)在溶血影響上， 采血后如不及時(shí)將血清和血凝塊分離， 血細(xì)胞中酶同樣可以透過(guò)細(xì)胞膜進(jìn)入血清， 所以采血 后1-2 小時(shí)實(shí)驗(yàn)室必須及時(shí)離心，分離血清。除非測(cè)定與凝血或纖溶有關(guān)的酶， 一般都不采用血漿而采用血清作為測(cè)定標(biāo)本。 大多數(shù) 抗凝劑都在一定程度上影響酶活性，例如 EDTA 為金屬離子螯合劑

37、，在去除 Ca2+ 同時(shí)也去 除其中 Mg 2+、Mn 2+等離子， Mg 2+是 ALP 、 CK 和 5-核苷酸酶（ -N5A）作用的激活劑， 其它如草酸鹽、 枸櫞酸鹽乃至肝素都對(duì)一些酶有一定程度抑制。 有必要時(shí)， 可考慮使用肝素 為抗凝劑，在常用抗凝劑中它對(duì)酶影響最小的。酶蛋白不穩(wěn)定，易失活， ACP 是最明顯的一個(gè)例子。此酶在中性或堿性環(huán)境中極不穩(wěn) 定，血液在 37 放1置小時(shí)， ACP 活性可下降 50 。大部分酶在低溫中比較穩(wěn)定，分離血 清如不能及時(shí)測(cè)定，應(yīng)放冰箱保存，表（ 7-3 ）是常用酶在不同溫度情況下的穩(wěn)定性。從表7-3 可看出 25 將血清凍結(jié)并沒(méi)有太大優(yōu)點(diǎn)， 相反有些酶

38、如 ALD 、ALT 在融凍時(shí) 被破壞。有文獻(xiàn)報(bào)道用液氧在195 貯存血清，常用AL酶T如、AST 、ALP、CK、LD 、GGT 和 AMY ，在10個(gè)月活性變化不大。個(gè)別酶如 LD 在低溫反而不如室溫穩(wěn)定，即所謂的 “冷變性”。表7-3 酶在不同溫度儲(chǔ)存的穩(wěn)定性（活性變化小于10 ）酶室溫（ 25 ）冰箱（ 0- 4）冰凍（ 25 ）ALD2天2天不穩(wěn)定 ALT2天5天不穩(wěn)定 AST3天1周1月ALP2-3天2-3天1月GGT2天1周1月CHE1周1周1周LAP1周1周1周CK1周1周1周LD1周1-3天1-3 天ICD1天2天1天AMY1月7月2月LPS1周3周3周ACP4小時(shí)￥3天&#

39、167;3天§亞鐵氧化酶 I1天2周2周（銅氧化酶）酶不耐融化；￥ 標(biāo)本未酸化；§標(biāo)本加枸櫞酸到 pH5五、免疫方法測(cè)酶質(zhì)量的臨床應(yīng)用用免疫學(xué)方法測(cè)酶質(zhì)量和經(jīng)典的測(cè)酶活性方法相比， 不僅靈敏度高， 并可能測(cè)定一些以 前不易測(cè)定的酶。 但更為有意義的是： 有可能為臨床上的應(yīng)用提供新的資料和信息。 從疾病 論斷的角度來(lái)看，至少提供下列三個(gè)新的可能性：一）酶活性和酶質(zhì)量變化的不平行精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案這二者的變化在不少情況下是互相平行的， 但在一些情況下可以出現(xiàn)不一致。 早在 1987 年 Robert 就提出可以用免疫學(xué)方法直接測(cè)量 CK 的質(zhì)量，并聲稱：“由于 RIA 法是如

40、此的 敏感，并可測(cè)定血循環(huán)中無(wú)活性的 CK-MB ，毫不奇怪此法可比其它方法更早查出心肌梗死， 一般在疼痛 3 小時(shí)就可升高?！贝撕笥行W(xué)者在急性心肌梗死時(shí)比較測(cè)CK-MB 活性和 RIA法 CK-B 亞單位的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)二者之間存在著不平行關(guān)系。 CK-MB 活性升高持續(xù)較短， 3 天左右；而CK-B 亞單位酶蛋白升高卻在 7天左右。近幾年來(lái)發(fā)展了用免疫學(xué)方法測(cè) CK-MB 酶質(zhì)量（ mass ）方法與測(cè)酶活性（ activity ）方法的結(jié)果相比較，在檢測(cè)心肌壞死上，測(cè)質(zhì) 量方法明顯優(yōu)于測(cè)活性方法。國(guó)內(nèi)有人報(bào)告了用單擴(kuò)法測(cè)酶活性的方法，測(cè)定了在各種患者血中超氧歧化酶（SOD ）含量，證實(shí)有些

41、患者血中存在著無(wú)活性的 SOD 。在一些疾病情況下， 甚至出現(xiàn)二者變化完全相反的情況。 例如在狗實(shí)驗(yàn)性胰腺炎， 用免 疫學(xué)方法測(cè)彈性蛋白酶濃度， 出現(xiàn)迅速而急劇地上升， 但同時(shí)酶活性卻出現(xiàn)平行地下降。 作 者解釋在釋放酶蛋白入血同時(shí)， 有大量酶抑制劑也釋放入血， 以致出現(xiàn)相互矛盾結(jié)果。 前面 提到的用兩種方法測(cè)前列腺酸性磷酸酶（PACP ）來(lái)診斷前列腺癌的陽(yáng)性率不一致，有作者也認(rèn)為可能是腫瘤組織合成一些無(wú)活性或活性較低的酸性磷酸酶。如果說(shuō)在這方面尚有爭(zhēng)論， 那么在遺傳學(xué)方面的意義則是比較明確的， 將此兩大類方法 結(jié)合起來(lái)可以研究酶缺陷遺傳疾病的發(fā)生機(jī)制， 用免疫學(xué)方法可以測(cè)出滅活的酶蛋白量。

42、由 于基因缺陷引起的酶缺陷如果僅僅影響酶蛋白合成下降， 酶活性與酶蛋白量的比率即所謂的 “免疫比活性”無(wú)變化； 如果由于基因缺陷合成了變異的酶蛋白， 則不僅總酶活性下降， 免 疫比活性也將變化； 如果合成了一種活性正常但結(jié)構(gòu)不穩(wěn)定的酶， 則幼稚細(xì)胞中酶活性及質(zhì) 量都無(wú)變化， 而在衰老細(xì)胞中將出現(xiàn)酶缺陷。 酶穩(wěn)定性的變異常見(jiàn)于紅細(xì)胞內(nèi)酶缺陷癥。 這 精彩文檔實(shí)用標(biāo)準(zhǔn)文案是由于紅細(xì)胞壽命較長(zhǎng)， 成熟紅細(xì)胞無(wú)細(xì)胞核不能制造新蛋白質(zhì)， 所以酶穩(wěn)定性的缺陷容易 在衰老紅細(xì)胞中表現(xiàn)出來(lái)。在最嚴(yán)重的情況， 變異的基因甚至能合成無(wú)活性的酶蛋白， 如膽堿酯酶遺傳變異中， 有 一類型所謂“不活動(dòng)等位基因”(“ s

43、ilent ” allele )就是典型Le例sc子h-。Ny又ha如u在 綜合征中存在這免疫活性但無(wú)催化活性的次黃嘌呤轉(zhuǎn)磷酸核糖基酶。(二)以免疫方法取代測(cè)酶活性方法免疫學(xué)方法和經(jīng)典測(cè)酶活性方法相比最突出的優(yōu)點(diǎn)是： 免疫學(xué)方法能測(cè)定一些不表現(xiàn)酶 活性的酶蛋白質(zhì)，這在以前是不能想象的。首先是各種酶原，還有去輔基酶蛋白 (apoenzyme )以及一些滅活的酶蛋白裂解產(chǎn)物等等。例如已有用 RIA 法測(cè)胰蛋白酶原。 也有用免疫學(xué)方法測(cè)定線粒體和胞質(zhì)谷草轉(zhuǎn)氨酶，這其中包括無(wú)酶活性的去輔基谷草轉(zhuǎn)氨 酶。免疫學(xué)方法另一特點(diǎn)是特異性高， 且不受體液中其它物質(zhì)， 特別是抑制劑、 激活劑的干 擾。不少蛋白水解

44、酶或者對(duì)基質(zhì)特異性不高，或者易受血中一些蛋白質(zhì)如1- 抗胰蛋白酶、巨球蛋白的抑制作用。用測(cè)酶活性方法不易準(zhǔn)確定量甚至無(wú)法測(cè)定。在近年來(lái)用免疫 學(xué)方法陸續(xù)建立了 RIA 測(cè)胰蛋白酶、彈性蛋白酶的方法。一般說(shuō)來(lái)和測(cè)酶活性相比， 免疫學(xué)方法靈敏度更高一些。 一些既往由于方法學(xué)靈敏度差， 不易測(cè)定的酶可以嘗試改用免疫學(xué)方法， 脂肪酶是其中例子之一。 經(jīng)典測(cè)酶活性方法由于靈 敏度差，酶溫育時(shí)間長(zhǎng)達(dá) 24 小時(shí)，幾經(jīng)修改仍需 4小時(shí)，現(xiàn)已有 RIA 法脂肪酶試劑盒。近年 來(lái)隨著優(yōu)生學(xué)發(fā)展，羊水中各種成分包括酶的測(cè)定日益受到重視。例如在 Tay-Sachs 綜合 征時(shí)，胚胎組織細(xì)胞中氨基已糖苷同工酶 A 或

45、(和) B 合成障礙，免疫學(xué)方法由于靈敏度高，可以比測(cè)酶活性方法早幾周在胎兒的羊水中查出此酶的缺陷。（三）同工酶測(cè)定免疫學(xué)方法用于測(cè)定同工酶比經(jīng)典的理化方法簡(jiǎn)單方便， 所以愈來(lái)愈多同工酶測(cè)定改用 免疫學(xué)方法，國(guó)外已逐步取代電泳或?qū)游龇?。除上文已提到的CK-MB 、LD 1、LD 5測(cè)定外，還可用免疫學(xué)方法測(cè)半乳糖?；D(zhuǎn)移酶同工酶A 和 B，堿性磷酸酶的 Regan 同工酶。同工酶有可能作為腫瘤的標(biāo)記物 （ tumor marker ），已證實(shí) - 烯醇化酶或神經(jīng)元特異烯醇化酶 （NSE ）可作為 APUD 系統(tǒng)腫瘤的一個(gè)很好標(biāo)記物。 用 RIA 測(cè)血中 NSE 在肺小細(xì)胞性腫瘤 患者中陽(yáng)性率超

46、過(guò) 80 ，-烯醇化酶在大細(xì)胞肺癌陽(yáng)性率也超過(guò) 70 ?？梢灶A(yù)期隨科學(xué)技 術(shù)發(fā)展，免疫學(xué)方法將成為臨床上測(cè)定同工酶的主要方法。六、檢測(cè)同工酶及其亞型的臨床意義從50年代中期開(kāi)始，臨床酶學(xué)有了迅速的發(fā)展，幾乎把當(dāng)時(shí)能測(cè)的酶都在臨床上試用 過(guò)，企圖通過(guò)測(cè)定某一種或某幾種酶來(lái)診斷一些特定疾病或特定組織器官的病變。通過(guò) 10 余年廣泛的研究， 發(fā)現(xiàn)酶測(cè)定診斷疾病的特異性并不高， 因?yàn)闄C(jī)體中各種細(xì)胞的代謝有很大 的相似性，從臨床角度很難說(shuō)存在著所謂器官特異酶。 當(dāng)時(shí)曾有學(xué)者想找出一些腫瘤特異酶， 但很快發(fā)現(xiàn)找不到一種只存在于腫瘤組織并能進(jìn)入血液而正常組織又不存在的酶。在此同時(shí)， Market 等通過(guò)對(duì) LD 在電泳時(shí)可分為 5 個(gè)區(qū)帶的深入研究，在 1959 年首先 提出“ isozyme ”的術(shù)語(yǔ)來(lái)描述一類酶，它們催化同一生化反應(yīng)， 但在結(jié)構(gòu)和理化性質(zhì)上有 所不同，目前廣泛使用國(guó)際生化協(xié)會(huì)推薦術(shù)語(yǔ)“ isoenzyme ”。我國(guó)目前多翻譯為同工酶， 臨床很快將此新概念、 新發(fā)現(xiàn)用于臨床， 發(fā)現(xiàn)同工酶測(cè)定可以彌補(bǔ)上述測(cè)酶總活性的不足之 處，因?yàn)椴煌っ冈诮M織分布、細(xì)胞內(nèi)定位、發(fā)生發(fā)育方面都可能有所差異