級(jí)基因表達(dá)載體構(gòu)建PPT課件

1、課前復(fù)習(xí)課前復(fù)習(xí)四個(gè)步驟四個(gè)步驟 指指？3.3.獲取目的基因方法：獲取目的基因方法：3 3個(gè)個(gè)酶有酶有? ?PCRPCR技術(shù)技術(shù)的的名稱、原理、過程名稱、原理、過程第1頁(yè)/共42頁(yè) 基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序第2頁(yè)/共42頁(yè)學(xué)習(xí)目標(biāo)學(xué)習(xí)目標(biāo)1 1知道、識(shí)圖基因知道、識(shí)圖基因表達(dá)載體構(gòu)成表達(dá)載體構(gòu)成2. 2. 概述概述基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程學(xué)法指導(dǎo)學(xué)法指導(dǎo)獨(dú)立思考獨(dú)立思考積極討論積極討論規(guī)范展示規(guī)范展示精彩點(diǎn)評(píng)精彩點(diǎn)評(píng)鼓勵(lì)質(zhì)疑鼓勵(lì)質(zhì)疑第3頁(yè)/共42頁(yè)課前預(yù)習(xí)核對(duì)答案課前預(yù)習(xí)核對(duì)答案 一、一、1.1.構(gòu)建基因表達(dá)載體構(gòu)建基因表達(dá)載體2.2.穩(wěn)定存在穩(wěn)定存在

2、下一代，使目的基因表達(dá)發(fā)揮作用下一代，使目的基因表達(dá)發(fā)揮作用3.3.標(biāo)記基因標(biāo)記基因 啟動(dòng)子啟動(dòng)子 目的基因目的基因 終止子終止子 復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn)首端首端 RNARNA聚合酶聚合酶 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)DNADNA短片段短片段 尾端尾端 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄 脫氧核苷酸脫氧核苷酸 含目的基因的受體細(xì)胞含目的基因的受體細(xì)胞 抗生素抗性基因抗生素抗性基因4.4.啟動(dòng)子啟動(dòng)子 終止子終止子 標(biāo)記基因標(biāo)記基因二、（一）二、（一）維持穩(wěn)定維持穩(wěn)定 表達(dá)表達(dá) （二）（二）1.1. 雙子葉植物雙子葉植物 單子葉植物單子葉植物 T-DNAT-DNA 染色體的染色體的DNADNA TiTi質(zhì)粒的質(zhì)粒的T-DNAT-DNA上上 整

3、合整合 染色體染色體DNADNA(2)(2)金屬顆粒金屬顆粒 （3 3）抗蟲棉）抗蟲棉2.2.顯微注射顯微注射 受精卵受精卵 雌雌 輸卵管輸卵管 子宮子宮 3.3.快快 單單 少少 鈣離子鈣離子 感受態(tài)感受態(tài) 感受態(tài)感受態(tài) 過程過程第4頁(yè)/共42頁(yè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建1.是基因工程的核心步驟2.目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)輝作用。3.基因表達(dá)載體的組成 啟動(dòng)子 插入的目的基因 終止子 標(biāo)記基因 復(fù)制遠(yuǎn)點(diǎn)第5頁(yè)/共42頁(yè) 標(biāo)記基因標(biāo)記基因各部分的功能是什么？各部分的功能是什么？第6頁(yè)/共42頁(yè)思考：在基因表達(dá)載體中思考：在基因表達(dá)載體中,

4、 ,啟動(dòng)子和終止子的位置是否可以互換啟動(dòng)子和終止子的位置是否可以互換? ?試分析原因。試分析原因。不可以。啟動(dòng)子是不可以。啟動(dòng)子是RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位,使轉(zhuǎn)錄開始使轉(zhuǎn)錄開始;終止子位于基因的尾端終止子位于基因的尾端,使轉(zhuǎn)錄終止使轉(zhuǎn)錄終止;只有順序正確只有順序正確,目的基因才能正常轉(zhuǎn)錄。目的基因才能正常轉(zhuǎn)錄。第7頁(yè)/共42頁(yè)合作探究合作探究1 1 1.啟動(dòng)子位于基因啟動(dòng)子位于基因首端，首端，終止子位于基終止子位于基因因尾端，分別決定轉(zhuǎn)錄的開始和結(jié)束。尾端，分別決定轉(zhuǎn)錄的開始和結(jié)束。它們由脫氧核苷酸組成。起始密碼子和它們由脫氧核苷酸組成。起始密碼子和終止密碼子位于終止

5、密碼子位于mRNA上，分別決定翻上，分別決定翻譯的開始和結(jié)束。它們由核糖核苷酸組譯的開始和結(jié)束。它們由核糖核苷酸組成。成。第8頁(yè)/共42頁(yè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建核心核心（1 1）用一定的）用一定的_切切割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，割質(zhì)粒，使其出現(xiàn)一個(gè)切口，露出露出_。（2 2）用）用_切斷目切斷目 的基因，使其產(chǎn)生的基因，使其產(chǎn)生_ _ _。（3 3）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的）將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的_處，再加入適量處，再加入適量_，形成了一個(gè)重組，形成了一個(gè)重組 DNADNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端同一種限制酶同一種限制酶的黏性末端

6、的黏性末端切口切口DNADNA連接酶連接酶相同相同4.4.過程過程: :第9頁(yè)/共42頁(yè) GAATTCGAATTC目的基因目的基因1CTTAAG載體載體1酶酶1酶酶1酶酶1第10頁(yè)/共42頁(yè)1.1.自身環(huán)化（包括自身環(huán)化（包括目的基因環(huán)化目的基因環(huán)化，質(zhì)粒再環(huán)化質(zhì)粒再環(huán)化）2.2.兩個(gè)兩個(gè)DNADNA片段連接時(shí)有：片段連接時(shí)有：載體載體-載體連接物；目的基因載體連接物；目的基因-載體連接物；目的基因載體連接物；目的基因-目的基因連接目的基因連接物物 3.3.反向連接反向連接一種限制酶切割構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)可能出現(xiàn)：一種限制酶切割構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)可能出現(xiàn)：如何防止自身環(huán)化與反向連接？如何防止自

7、身環(huán)化與反向連接？可選用兩種不同的酶同時(shí)切割可選用兩種不同的酶同時(shí)切割第11頁(yè)/共42頁(yè)GAATTCAAAGCTTT目的基因目的基因3TTTCGAAA黏性末端黏性末端-TCGA-CTTAAG黏性末端黏性末端-TTAA-酶酶3酶酶1酶酶1酶酶3第12頁(yè)/共42頁(yè)同種限制同種限制同（一或兩）種限制同（一或兩）種限制DNADNA連接連接第13頁(yè)/共42頁(yè)質(zhì)粒質(zhì)粒DNADNA分子分子一個(gè)一個(gè)切口切口兩個(gè)兩個(gè)黏性末端黏性末端兩個(gè)兩個(gè)切口切口獲得目的基因獲得目的基因DNA DNA 連接酶連接酶重組重組DNADNA分子（重組質(zhì)粒）分子（重組質(zhì)粒）同一種同一種 限制酶限制酶第14頁(yè)/共42頁(yè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建

8、1.是基因工程的核心步驟2.目的是使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在，并且可以遺傳給下一代，同時(shí)，使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)輝作用。3.基因表達(dá)載體的組成 啟動(dòng)子 插入的目的基因 終止子 標(biāo)記基因 復(fù)制遠(yuǎn)點(diǎn)第15頁(yè)/共42頁(yè)檢測(cè)檢測(cè) 1. C 2. C 3.（1）Ti質(zhì)粒質(zhì)粒 T-DNA 攜帶外源基因攜帶外源基因的的DNA 表達(dá)載體（含有目的基因的重組表達(dá)載體（含有目的基因的重組Ti質(zhì)粒）質(zhì)粒） 含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌 （2）構(gòu)建表達(dá)載體）構(gòu)建表達(dá)載體 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) （3）75 50 減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染，減輕農(nóng)藥對(duì)環(huán)境的污染，防止農(nóng)藥危害人體健康。防止農(nóng)藥危害人

9、體健康。第16頁(yè)/共42頁(yè)練習(xí)案3答案1.1.（1 1）目的基因）目的基因載體連接物載體連接物 載體載體-載體連載體連接物接物 目的基因目的基因-目的基因連接物目的基因連接物 分離純化分離純化 （2 2）載體）載體-載體連接物載體連接物 目的基因目的基因-載體連載體連接物、載體接物、載體-載體連接物載體連接物 （3 3）啟動(dòng)子）啟動(dòng)子 mRNA mRNA（4 4）EcoRIEcoRI和和BamHIBamHI2.2.（1 1）.NgoMIV .NgoMIV （2 2）.ABD .ABD （3 3）.ABC .ABC （4 4）.B.B第17頁(yè)/共42頁(yè)1、（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括、（

10、多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括A目的基因目的基因 B啟動(dòng)子啟動(dòng)子 C終止子終止子 D標(biāo)記基因標(biāo)記基因ABCD2、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是A啟動(dòng)子是與啟動(dòng)子是與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼B啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，對(duì)短片段，對(duì)mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選D基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)

11、胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別A3、目前轉(zhuǎn)基因工程可以、目前轉(zhuǎn)基因工程可以A. 打破地理隔離但不能突破生殖隔離打破地理隔離但不能突破生殖隔離B. 打破生殖隔離但不能突破地理隔離打破生殖隔離但不能突破地理隔離C. 完全突破地理隔離和生殖隔離完全突破地理隔離和生殖隔離D. 部分突破地理隔離和生殖隔離部分突破地理隔離和生殖隔離 C第18頁(yè)/共42頁(yè)類別類別項(xiàng)目項(xiàng)目 復(fù)制復(fù)制 轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄場(chǎng)所場(chǎng)所特點(diǎn)特點(diǎn)模板模板原料原料酶酶能量能量堿基堿基配對(duì)配對(duì)產(chǎn)物產(chǎn)物細(xì)胞核細(xì)胞核只有只有DNA的一條鏈的一條鏈四種核糖核苷酸四種核糖核苷酸RNA聚合酶聚合酶ATPA-U C-G T-A G-C細(xì)胞核細(xì)胞核DNA的兩條鏈的兩條

12、鏈四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸解旋酶、解旋酶、DNADNA聚合酶聚合酶ATPA-T C-G T-A G-C兩個(gè)雙鏈兩個(gè)雙鏈DNADNA分子分子一條單鏈一條單鏈mRNAmRNA邊解旋邊復(fù)制，邊解旋邊復(fù)制，半保留復(fù)制半保留復(fù)制邊解旋邊轉(zhuǎn)錄邊解旋邊轉(zhuǎn)錄第19頁(yè)/共42頁(yè) 目的基因插入目的基因插入TiTi質(zhì)粒的質(zhì)粒的T-DNAT-DNA上上 農(nóng)桿菌農(nóng)桿菌 導(dǎo)入植物細(xì)胞導(dǎo)入植物細(xì)胞 整合到受體細(xì)胞的染色體上整合到受體細(xì)胞的染色體上 目的基因的遺傳特性得以維持穩(wěn)定和表達(dá)目的基因的遺傳特性得以維持穩(wěn)定和表達(dá) 1. 1.農(nóng)桿菌特點(diǎn)：農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物。易感染雙子葉植物和裸子植物。TiTi質(zhì)

13、粒的質(zhì)粒的T-T-DNADNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體上可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞的染色體上2.轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化化第20頁(yè)/共42頁(yè)第21頁(yè)/共42頁(yè)基因組文庫(kù)的建立方法基因組文庫(kù)的建立方法提取某種生物的全部提取某種生物的全部DNADNA用適當(dāng)?shù)南拗泼该盖杏眠m當(dāng)?shù)南拗泼该盖幸欢ù笮〉囊欢ù笮〉腄NADNA片段片段將將DNADNA片段與運(yùn)載體連接片段與運(yùn)載體連接導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存（導(dǎo)入受體菌中儲(chǔ)存（基因組文庫(kù)）基因組文庫(kù)）目的基因目的基因分離分離第22頁(yè)/共42頁(yè)部分基因文庫(kù)的建立方法部分基因文庫(kù)的建立方法 mRNA mRNA反轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄酶單鏈單鏈DNADNA合成合成 雙鏈雙鏈DNADNA（cDNAcDNA） 載體

14、載體插入插入導(dǎo)入導(dǎo)入受體菌群（受體菌群（ cDNA文庫(kù)）文庫(kù)）分離分離目的基因目的基因第23頁(yè)/共42頁(yè)cDNA合成過程合成過程 第一步：反轉(zhuǎn)錄酶以RNA為模板合成一條與RNA互補(bǔ)的 DNA單鏈，形成RNA-DNA雜交分子。第二步：核酸酶H使RNA-DNA雜交分子中的RNA鏈降 解，使之變成單鏈的DNA。第三步：以單鏈DNA為模板，在DNA聚合酶的作用下合 成另一條互補(bǔ)的DNA鏈，形成雙鏈DNA分子。 第24頁(yè)/共42頁(yè)1.下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作下表關(guān)于基因工程中有關(guān)基因操作的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是的名詞及對(duì)應(yīng)的內(nèi)容，正確的組合是2 2、下列屬于獲取目的基因的方法的是、下列屬于

15、獲取目的基因的方法的是( )( )利用利用mRNAmRNA反轉(zhuǎn)錄形成從基因組文庫(kù)中提取反轉(zhuǎn)錄形成從基因組文庫(kù)中提取從受體細(xì)胞中提取從受體細(xì)胞中提取 利用利用PCRPCR技術(shù)技術(shù) 利用利用DNADNA轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄 人工合成人工合成A.A. B. B. C. C. D. D.第25頁(yè)/共42頁(yè)3.細(xì)菌的質(zhì)粒分子帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗性基因在基因工程中的主要作細(xì)菌的質(zhì)粒分子帶有一個(gè)抗菌素抗性基因，該抗性基因在基因工程中的主要作用是用是 A提高受體細(xì)胞在自然環(huán)境中的耐藥性 B有利于對(duì)目的基因是否導(dǎo)入進(jìn)行檢測(cè)C增加質(zhì)粒分子的分子量D便于與外源基因連接4.4. 有關(guān)基因工程的敘述正確的是有關(guān)基因工程的敘

16、述正確的是A限制酶只在獲得目的基因時(shí)才用B重組質(zhì)粒的形成是在細(xì)胞內(nèi)完成的C質(zhì)粒都可作為運(yùn)載體 D蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)可為合成目的基因提供資料第26頁(yè)/共42頁(yè)第27頁(yè)/共42頁(yè)7、構(gòu)建基因組、構(gòu)建基因組DNA文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞的文庫(kù)時(shí)，首先應(yīng)分離細(xì)胞的A、染色體、染色體DNA B、線粒體、線粒體DNAC、總、總mRNA D、tRNA 8、目的基因可從基因文庫(kù)中獲得，下列有關(guān)基因文庫(kù)的描述正確的是、目的基因可從基因文庫(kù)中獲得，下列有關(guān)基因文庫(kù)的描述正確的是A、某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫(kù)、某生物的全套基因就是一個(gè)基因文庫(kù)B、將含有某種生物不同的許多、將含有某種生物不同的許多DNA片段，導(dǎo)入某個(gè)生

17、物片段，導(dǎo)入某個(gè)生物 體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一體內(nèi)，則這個(gè)生物就是一個(gè)基因文庫(kù)個(gè)基因文庫(kù)C、含有一種生物所有基因的基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)、含有一種生物所有基因的基因文庫(kù)叫做基因組文庫(kù)D、含有一種生物的一部分基因的基因文庫(kù)叫、含有一種生物的一部分基因的基因文庫(kù)叫cDNA文庫(kù)文庫(kù)AC第28頁(yè)/共42頁(yè)9、在遺傳工程中，若有一個(gè)控制有利性狀的、在遺傳工程中，若有一個(gè)控制有利性狀的DNA分子片段為分子片段為ATGTGTACAC，要使其數(shù)量增多，可用，要使其數(shù)量增多，可用PCR技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制，復(fù)制時(shí)應(yīng)給予的條件是技術(shù)進(jìn)行人工復(fù)制，復(fù)制時(shí)應(yīng)給予的條件是 雙鏈雙鏈DNA分子為模板分子為模板 ATGTG或或T

18、ACAC模板鏈模板鏈 四種脫氧核苷酸四種脫氧核苷酸 四種核四種核苷酸苷酸 DNA聚合酶聚合酶 熱穩(wěn)定熱穩(wěn)定DNA聚合酶引物聚合酶引物 溫度變化溫度變化 恒溫恒溫A BC DD10、在基因工程中，把選出的目的基因（共、在基因工程中，把選出的目的基因（共1000個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌呤脫氧個(gè)脫氧核苷酸對(duì)，其中腺嘌呤脫氧核苷酸是核苷酸是460個(gè)）放入個(gè)）放入DNA擴(kuò)增儀中擴(kuò)增擴(kuò)增儀中擴(kuò)增4代，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核代，那么，在擴(kuò)增儀中應(yīng)放入胞嘧啶脫氧核苷酸的個(gè)數(shù)是苷酸的個(gè)數(shù)是B第29頁(yè)/共42頁(yè)11、在已知序列信息的情況下，獲取目的基因的最方便方法是、在已知序列信息的情況下，獲取目的基

19、因的最方便方法是A、化學(xué)合成法、化學(xué)合成法 B、基因組文庫(kù)法、基因組文庫(kù)法C、cDNA文庫(kù)法文庫(kù)法 D、聚合酶鏈反應(yīng)、聚合酶鏈反應(yīng)12、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是、下列獲取目的基因的方法中需要模板鏈的是從基因文庫(kù)中獲取目的基因從基因文庫(kù)中獲取目的基因 利用利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因技術(shù)擴(kuò)增目的基因 反轉(zhuǎn)錄法反轉(zhuǎn)錄法 通過通過DNA合成儀利用化學(xué)方法人工合成合成儀利用化學(xué)方法人工合成A B C DAD第30頁(yè)/共42頁(yè)13、目的基因主要是指、目的基因主要是指_的結(jié)構(gòu)基因。獲得目的基因的常見方法有的結(jié)構(gòu)基因。獲得目的基因的常見方法有三種：（三種：（1）從基因文庫(kù)中獲取目的基因，根據(jù)基因

20、的）從基因文庫(kù)中獲取目的基因，根據(jù)基因的_序列，基因在序列，基因在_上的位置，基因的上的位置，基因的_產(chǎn)物產(chǎn)物mRNA，基因的，基因的_產(chǎn)物蛋白質(zhì)等獲產(chǎn)物蛋白質(zhì)等獲取目的基因。（取目的基因。（2）利用）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)是一項(xiàng)在技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)是一項(xiàng)在_完成的核完成的核酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目的基因的酸合成技術(shù)，前提條件是有一段已知目的基因的_序列，以便于合成序列，以便于合成_。（。（3）如果基因較小且核苷酸序列已知，可以通過）如果基因較小且核苷酸序列已知，可以通過_方法。方法。 編碼蛋白質(zhì)編碼蛋白質(zhì)核苷酸核苷酸染色體染色體轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)錄表達(dá)表達(dá)體外體外核苷酸核苷酸

21、引物引物人工合成人工合成第31頁(yè)/共42頁(yè)14、（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括、（多選）一個(gè)基因表達(dá)載體的構(gòu)建應(yīng)包括A目的基因目的基因 B啟動(dòng)子啟動(dòng)子 C終止子終止子 D標(biāo)記基因標(biāo)記基因ABCD15、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是、下列關(guān)于基因表達(dá)載體的敘述不正確的是A啟動(dòng)子是與啟動(dòng)子是與RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位，是起始密碼B啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的啟動(dòng)子和終止子都是特殊結(jié)構(gòu)的DNA短片段，對(duì)短片段，對(duì)mRNA的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用的轉(zhuǎn)錄起調(diào)控作用C標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從而便于篩選標(biāo)記基因是為了鑒別受體細(xì)胞中是否有目的基因從

22、而便于篩選D基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別基因表達(dá)載體的構(gòu)建視受體細(xì)胞及導(dǎo)入方式不同而有所差別A16、目前轉(zhuǎn)基因工程可以、目前轉(zhuǎn)基因工程可以A. 打破地理隔離但不能突破生殖隔離打破地理隔離但不能突破生殖隔離B. 打破生殖隔離但不能突破地理隔離打破生殖隔離但不能突破地理隔離C. 完全突破地理隔離和生殖隔離完全突破地理隔離和生殖隔離D. 部分突破地理隔離和生殖隔離部分突破地理隔離和生殖隔離 C第32頁(yè)/共42頁(yè)17、基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞，原因是、基因工程中科學(xué)家常用細(xì)菌、酵母菌等微生物作為受體細(xì)胞，原因是 A結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、操作方便

23、 B繁殖速度快繁殖速度快 C遺傳物質(zhì)含量少、簡(jiǎn)單遺傳物質(zhì)含量少、簡(jiǎn)單 D性狀穩(wěn)定、變異少性狀穩(wěn)定、變異少18、基因工程常用的受體細(xì)胞有、基因工程常用的受體細(xì)胞有 大腸桿菌大腸桿菌 枯草桿菌枯草桿菌 支原體支原體 動(dòng)植物細(xì)胞動(dòng)植物細(xì)胞A B C DBD19、基因工程是在、基因工程是在DNA分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的，在基因操作的基本步驟中，不分子水平上進(jìn)行設(shè)計(jì)施工的，在基因操作的基本步驟中，不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)的步驟是C第33頁(yè)/共42頁(yè)20. 采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是采用基因工程的方法培育抗蟲棉，下列導(dǎo)入目的基因的做法正確的是將毒素蛋白質(zhì)

24、注射到棉受精卵中將毒素蛋白質(zhì)注射到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白的將編碼毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中序列注射到棉受精卵中 將編碼毒素蛋白的將編碼毒素蛋白的DNA序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵中序列與細(xì)菌質(zhì)粒重組，注射到棉的子房并進(jìn)入受精卵中 將將編碼毒素蛋白的編碼毒素蛋白的DNA序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)序列與質(zhì)粒重組，導(dǎo)入細(xì)菌感染棉的體細(xì)胞，再進(jìn)行組織培養(yǎng)A B C DC21. 下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是下列屬于基因工程中導(dǎo)入目的基因方法的是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 基因槍法基因槍法 花粉管道法花粉管道法 顯微注射法顯微注射法 胚胎

25、移植胚胎移植 DNA分子分子雜交法雜交法A BC DC第34頁(yè)/共42頁(yè)第35頁(yè)/共42頁(yè)2525、（、（多選）人們利用基因工程的方法，用大腸桿菌生產(chǎn)人類胰島素，這一過程涉及到（多選）人們利用基因工程的方法，用大腸桿菌生產(chǎn)人類胰島素，這一過程涉及到（ ）D.篩選出能產(chǎn)生胰島素的篩選出能產(chǎn)生胰島素的“工程菌工程菌” 2626、下列哪項(xiàng)不屬于基因工程技術(shù)的步驟下列哪項(xiàng)不屬于基因工程技術(shù)的步驟 （ ） A基因轉(zhuǎn)移基因轉(zhuǎn)移 B基因擴(kuò)增基因擴(kuò)增C基因檢測(cè)基因檢測(cè) D基因表達(dá)基因表達(dá) 第36頁(yè)/共42頁(yè) 嘗試設(shè)計(jì)嘗試設(shè)計(jì) 第37頁(yè)/共42頁(yè)思考探究思考探究思考：思考：作為基因工程表達(dá)載體，只作為基因工程表

26、達(dá)載體，只需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎需含有目的基因就可以完成任務(wù)嗎？為什么？為什么？第38頁(yè)/共42頁(yè)不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，不可以。因?yàn)槟康幕蛟诒磉_(dá)載體中得到表達(dá)并發(fā)揮作用，還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。還需要有其他控制元件，如啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。必須構(gòu)建上述元件的主要理由是：必須構(gòu)建上述元件的主要理由是：（1） 生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用生物之間進(jìn)行基因交流，只有使用受體生物自身基因受體生物自身基因的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)；的啟動(dòng)子才能比較有利于基因的表達(dá)；（2） 通過通過cDNA文庫(kù)獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將

27、編碼文庫(kù)獲得的目的基因沒有啟動(dòng)子，只將編碼序列導(dǎo)入受體生物中無(wú)法轉(zhuǎn)錄；序列導(dǎo)入受體生物中無(wú)法轉(zhuǎn)錄；（3） 目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記；目的基因是否導(dǎo)入受體生物中需要有篩選標(biāo)記；（4） 為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其為了增強(qiáng)目的基因的表達(dá)水平，往往還要增加一些其他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；他調(diào)控元件，如增強(qiáng)子等；（5） 有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么有時(shí)需要確定目的基因表達(dá)的產(chǎn)物存在于細(xì)胞的什么部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基部位，往往要加上可以標(biāo)識(shí)存在部位的基因（或做成目的基因與標(biāo)識(shí)基因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。因與標(biāo)識(shí)基

28、因的融合基因），如綠色熒光蛋白基因等。第39頁(yè)/共42頁(yè)思考與探究：思考與探究：2.根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理根據(jù)農(nóng)桿菌可將目的基因?qū)腚p子葉植物的機(jī)理,你能分你能分析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎析出不能導(dǎo)入單子葉植物的原因嗎?若將一個(gè)抗病基因?qū)魧⒁粋€(gè)抗病基因?qū)胄←溨腥胄←溨?理論上講你應(yīng)該怎樣做理論上講你應(yīng)該怎樣做?要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都要選擇合適的農(nóng)桿菌菌株，因?yàn)椴皇撬械霓r(nóng)桿菌菌株都可以侵染單子葉植物；可以侵染單子葉植物；要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一般為乙要加趨化和誘導(dǎo)的物質(zhì)，一般為乙酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（酰丁香酮等，目的是使農(nóng)桿菌向植物組織的受傷部位靠攏（趨化性）和激活農(nóng)桿菌的趨化性）和激活農(nóng)桿菌的Vir區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使區(qū)（誘導(dǎo)）的基因，使T-DNA轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移并插入到染色體移并插入到染色體DNA上。上。3.3.利用大腸桿菌可以生產(chǎn)出人的胰島素，聯(lián)系前面有關(guān)細(xì)胞器功利用