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1、實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?掌握制備具有正常收縮功能的蛙類坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本的基本操作技術(shù),掌握蛙類手術(shù)器械的使用方法。 通過增加和減少對(duì)蟾蜍坐骨神經(jīng)的刺激強(qiáng)度和頻率,觀察記錄腓腸肌收縮張力,分析探討刺激強(qiáng)度和頻率對(duì)骨骼肌收縮張力的關(guān)系。 學(xué)習(xí)微機(jī)生物信號(hào)采集處理系統(tǒng)的使用。第1頁/共13頁實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理-1 蛙類的某些基本生命活動(dòng)和生理功能與哺乳類動(dòng)物有相似之處,而且其離體組織的生活條件比較簡(jiǎn)單,易于控制和掌握。因此,蛙或蟾蜍的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本常被用來觀察神經(jīng)肌肉的興奮性刺激與反應(yīng)的規(guī)律及肌肉收縮特點(diǎn)等實(shí)驗(yàn)第2頁/共13頁實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理-2 肌肉、神經(jīng)和腺體組織稱為可興奮組織,它們有較大的興奮性
2、。不同組織、細(xì)胞的興奮表現(xiàn)各不相同,神經(jīng)組織的興奮性表現(xiàn)為動(dòng)作電位,肌肉組織的興奮表現(xiàn)為收縮活動(dòng)。因此觀察肌肉是否收縮可以判斷它是否產(chǎn)生了興奮。一個(gè)刺激是否能使組織發(fā)生興奮,不僅與刺激形式有關(guān),還與刺激時(shí)間、刺激強(qiáng)度、強(qiáng)度時(shí)間變化率三要素有關(guān)。第3頁/共13頁 刺激神經(jīng)使神經(jīng)細(xì)胞產(chǎn)生興奮,興奮延神經(jīng)纖維傳到,通過神經(jīng)肌接頭的化學(xué)傳遞,使肌肉終板膜上產(chǎn)生終板電位,終板電位可引起肌肉產(chǎn)生興奮,即動(dòng)作電位,傳遍整個(gè)肌纖維,再通過興奮-收縮偶聯(lián)使肌纖維中粗、細(xì)肌絲產(chǎn)生相對(duì)滑動(dòng),宏觀上表現(xiàn)為肌肉收縮第4頁/共13頁材料和方法 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(laboratory animal) 蟾蜍(中華蟾蜍
3、指名亞種,蟾蜍(中華蟾蜍指名亞種,Zhuoshan Toad) 雄性蟾蜍皮膚光滑,前肢趾上有黑色婚墊,會(huì)鳴叫。雌性蟾蜍皮膚粗糙,無婚墊,不會(huì)鳴叫?;閴|雄蟾雄蟾雌蟾第5頁/共13頁1.材料和方法 (Materials and methods )2 2、藥品、藥品(drug) : 任氏液任氏液 任氏液由無機(jī)鹽和蒸餾水配置而成,每升溶液含NaCl、KCl、CaCl2 0.12g,、NaHCO3 、NaH2PO4。任氏液的理化特性與蛙的組織液近似??捎糜谕艿慕M織、器官潤濕和營養(yǎng)。第6頁/共13頁3、器材、器材( Experimental apparatus) RM6240生物信號(hào)處理系生物信號(hào)處理系統(tǒng)
4、(成都儀器廠)、神經(jīng)標(biāo)本盒、蛙板、剪刀、探針、玻璃分統(tǒng)(成都儀器廠)、神經(jīng)標(biāo)本盒、蛙板、剪刀、探針、玻璃分針、鑷子、張力換能器。針、鑷子、張力換能器。RM6240C微機(jī)生物信號(hào)處理系統(tǒng) S+ S- E R1 - R1+ R2- R2+第7頁/共13頁材料和方法材料和方法方法(方法(N-MN-M標(biāo)本的制標(biāo)本的制備)備)1 1毀腦脊髓毀腦脊髓 2 2去下肢皮膚去下肢皮膚 3 3去上肢、內(nèi)臟、頭去上肢、內(nèi)臟、頭 4 4分離兩腿分離兩腿 5. 5. 大腿坐骨神經(jīng)大腿坐骨神經(jīng) 6. 6. 游離坐骨神經(jīng)游離坐骨神經(jīng) 7 7游離腓腸肌游離腓腸肌 8 8去掉小腿骨、肌肉、腳去掉小腿骨、肌肉、腳 第8頁/共13
5、頁材料和方法材料和方法方法(儀器連接)方法(儀器連接)腓腸肌坐骨神經(jīng)換能器保護(hù)電極刺激強(qiáng)度和頻率對(duì)肌肉收縮的影響實(shí)驗(yàn)裝置示意圖第9頁/共13頁結(jié)果觀察結(jié)果觀察單收縮:?jiǎn)问湛s:肌肉受到一次刺激,引起一次收縮和舒張的過程。肌肉受到一次刺激,引起一次收縮和舒張的過程。復(fù)合收縮復(fù)合收縮: :肌肉受到連續(xù)刺激,前一次收縮和舒張尚未結(jié)束,新肌肉受到連續(xù)刺激,前一次收縮和舒張尚未結(jié)束,新的收縮在此基礎(chǔ)上出現(xiàn)的過程。的收縮在此基礎(chǔ)上出現(xiàn)的過程。 不完全強(qiáng)直收縮不完全強(qiáng)直收縮 完全強(qiáng)直收縮完全強(qiáng)直收縮第10頁/共13頁討論討論 刺激強(qiáng)度對(duì)肌肉收縮的影響 刺激強(qiáng)度小于興奮性最高的運(yùn)動(dòng)單位的閾值時(shí) 中等刺激強(qiáng)度時(shí) 刺激強(qiáng)度大于興奮性最低的運(yùn)動(dòng)單位的閾值時(shí) 刺激頻率對(duì)肌肉收縮的影響 刺激落在前一次刺激引起的收縮的舒張期之后 刺激落在前一次刺激引起的收縮的舒張期上 刺激落在前一次刺激引起的收縮的收縮期上第11頁/共13頁注意事項(xiàng)注意事項(xiàng) 標(biāo)本制備時(shí)要注意保持標(biāo)本的標(biāo)本制備時(shí)要注意保持標(biāo)本的濕潤。濕潤。 標(biāo)本制備時(shí)盡量標(biāo)本制備時(shí)盡量避免使用尖銳的、鐵制器械避免使用尖銳的、鐵制器械,以免損傷神經(jīng)、肌肉。以免損傷神經(jīng)、肌肉。 標(biāo)本的標(biāo)本的股骨股骨要保留一部分(后要保留一部分(后2/3),以利),以利于下一步實(shí)驗(yàn)。于下一步實(shí)驗(yàn)。 實(shí)驗(yàn)中保持換能器與標(biāo)本連線的實(shí)驗(yàn)中保持換能器與
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