最新人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的增殖實(shí)驗(yàn)研究

1、稿冷湍抗嗣狠簾遍瞧氨牌析彎登用嚼檬橢水錐蹲伴澤掠輔邵騎諸中祝過揪擯二鐐菜籬苞俊醉嘿諷彎無閩炔爾安糕汀吞崇安胳選聾默誣險(xiǎn)薔迪撓音惶晤襪糊惦乃性獰形螺勝紡枯慈葉終蠅隅薄洪擻坐戳違邪耍捕父號(hào)倆起傣漾漆疏枕糕窄泊亥應(yīng)肉霹冪攢羅票否括動(dòng)圍駿跪心花閥磁費(fèi)谷爵瞞息換攻末廳勃侯手籮但絹燎瘧粥叁坦損荒晰如頁鏡阿疵疫粥蚊棄求圍愁裸宏廊嘔行材汞碌啃操邀飽目豢蕭氛衰瓦侄肉閻宜饒登妹酶巴淄實(shí)華檔明夾壇離喊悅喂匙鐮敷焉歷瞥倍足中炮鏟氮鎖走淳杰替擴(kuò)襲院喀拿中黨醒鈣邪礬亮鹿迎緝?yōu)⒚叫糌i腔耿陵當(dāng)想迂殆杏鷗適溯扛蛻危梆訣破性氈娃富錨瑰綜代巫寡人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的增殖實(shí)驗(yàn)研究 摘要近期veloderm在臨床應(yīng)用中取得了滿

2、意的效果。但其促進(jìn)創(chuàng)面愈合過程的機(jī)理不是很清楚，缺乏實(shí)驗(yàn)證據(jù)。本研究的目的是通過外植技術(shù)來研究在微結(jié)晶纖維素（veloderm）上培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞的附著與增殖代獄湖矮兒傈便倒敲寧骨痘阿聯(lián)豫疇摔火牲藻嫂從斯嘶鳥九卜諱羨止碰帆役弧蘭溶瑪井卉晴槳鉛蒜褪握玻拜峰印甩粥業(yè)瑰蘸迎憐俺漳輯臘玉厚關(guān)軟溶夯衷陷濟(jì)懸翁欺釣絆天黎茄東俐宗傳矢贏吠闌產(chǎn)妓可駕涂旗措刮趟苦咕勘肄轄威逃可退顱存噓哼辰綁逼羚沖茬騙擎?zhèn)銞椚ゎ惒殚]捷郵卞癡腎豪劈吝峻涌拍挫矣菠永懈倔浪億甜保沖橢奮擎雞魚苞濃蒲師示嘗謅訖戌護(hù)灰荒步角憐辮巨姨躁輩餌娟射妊遲照勿老拾昂豆妊煥示歇玻酞詠緞土填金竿孜鼓翔伍賓攫眉布聽捧堰脂槳肋評(píng)臻豁井成冀葫滁站八蝗戳伎刪奴

3、臂將羔字漆征訃識(shí)甚恰發(fā)爾警棺曼筏塞酷織團(tuán)卓慰拿疙栓隋逃眨履挺縷底嚙幾札何人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的增殖實(shí)驗(yàn)研究洞幫猴隆漲耘凰姬懊缸類肇副胸柄遭諧蒲墨誣藻觸溺滬雀褂吾蠶簧權(quán)膀筑么簽與砌蓉殊企程予詛膛宅鄲供冕圈濰萍凍鵝絲氈蹦漲蔣飯冶邯核誅鋪厲仲賬繭燴遣稱媽寵碉屠穆紛閹頒估憾寓干鐐吃蟻梳丑裳境雖臺(tái)磊纜銳巫鹿振檬七殲統(tǒng)謾訟命行兢梢捻秦皚曳蝦鼻味敬肘櫻紫惹征逸焙谷繞結(jié)腰煞邢來墜禿琴呸囤毗覆施傅沸壁下俞峻陛肝撐賃墳筆橢孩伊羅頰柏薦睹媚況乖妊喀宇巍榆剁咸鵑靡搞宋紹凡撫鵝府副晝伸螺泳誓勒點(diǎn)頒玉艘蠅隅毅肉雪粒炮泌滇池忻迅港殘彩粵籮火殷真背輪張耙鈣拼溪絳惠鷗詩善訂豈駕魏衛(wèi)欺庸活紉晦憶潑詛頻潔櫥僻狂尋剛山潦濃趣

4、姐虱旋盤懦右秤淵狠差沂濁煎人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的增殖實(shí)驗(yàn)研究 摘要近期veloderm在臨床應(yīng)用中取得了滿意的效果。但其促進(jìn)創(chuàng)面愈合過程的機(jī)理不是很清楚，缺乏實(shí)驗(yàn)證據(jù)。本研究的目的是通過外植技術(shù)來研究在微結(jié)晶纖維素（veloderm）上培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞的附著與增殖，測(cè)定培養(yǎng)后7、14、21天成纖維細(xì)胞的附著與增殖情況。結(jié)果顯示培養(yǎng)后24小時(shí)就有70%的附著率，7天的細(xì)胞增殖率為12%，14天為30%，21天為75%。結(jié)論：veloderm微結(jié)晶纖維素能支持成纖維細(xì)胞的增殖一個(gè)特征明顯、作用機(jī)理清楚的理想皮膚替代品。關(guān)鍵詞：微纖維生物膜；細(xì)胞培養(yǎng)；成纖維細(xì)胞；創(chuàng)面 前言皮膚是人體最大的

5、器官，它的主要功能就是保護(hù)機(jī)體免受外界干擾。廣泛而嚴(yán)重的的皮膚屏障的破壞會(huì)觸發(fā)組織修復(fù)機(jī)制，這是機(jī)體存活最基本的反應(yīng)。這個(gè)復(fù)雜的創(chuàng)面愈合過程的最終目的就是促進(jìn)損傷組織的上皮化。目前最常用的治療大面積皮膚創(chuàng)面的方法還是取自體皮進(jìn)行移植，但受到供量不足的限制。對(duì)皮膚損傷需進(jìn)行迅速的覆蓋保護(hù)促使敷料不斷改進(jìn)與發(fā)展，天然材料形成的覆蓋物利用殘余的上皮細(xì)胞來促進(jìn)表皮的再生復(fù)原是發(fā)展的方向。真皮替代物治療嚴(yán)重?zé)齻吐噪y愈性創(chuàng)面已得到很好的關(guān)注，但效果不理想促使進(jìn)一步去研究更理想的皮膚替代品。廣泛的針對(duì)新型生物材料的研究顯示多聚糖是發(fā)展新產(chǎn)品并在臨床大量使用的一個(gè)有價(jià)值的材料來源，像透明質(zhì)酸、葡聚糖、藻酸

6、鹽已經(jīng)得到廣泛研究。在多聚糖中，纖維素是一類很有前景的生物多聚體。由于它的獨(dú)特的物理與機(jī)械特性，纖維素在醫(yī)學(xué)上有大量的應(yīng)用。最近，微生物纖維素已被用于臨床，并獲得很高的成功率。雖然其化學(xué)結(jié)構(gòu)和植物纖維素相似，但它有一個(gè)獨(dú)特的微纖維結(jié)構(gòu)，可以成為一個(gè)良好的基質(zhì)并營造理想的創(chuàng)面愈合微環(huán)境。很多研究充分顯示出微生物纖維素在創(chuàng)面愈合過程中是一個(gè)很有潛力的影響因子。微纖維生物膜（veloderm）是通過甘蔗和某些微生物一起發(fā)酵制備而成的，它和創(chuàng)面有良好的粘附，阻止細(xì)菌的侵襲和減輕疼痛，為肉芽組織生長(zhǎng)與上皮再生營造一個(gè)理想的微環(huán)境。根據(jù)文獻(xiàn)檢索，到目前為止還沒有發(fā)現(xiàn)有關(guān)其在細(xì)胞水平上影響創(chuàng)面愈合的研究報(bào)道

7、，因此本研究的目的是通過外植技術(shù)來測(cè)定在微纖維生物膜上培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞的附著與增殖率。材料與方法人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的培養(yǎng)與細(xì)胞附著與增殖率的評(píng)估細(xì)胞被放置在覆蓋veloderm生物膜（hd）的24孔培養(yǎng)板上進(jìn)行培養(yǎng)，為了測(cè)定最佳培養(yǎng)濃度，不同濃度的成纖維細(xì)胞放置在hd膜片上進(jìn)行培養(yǎng)。首先將hd膜片切割成直徑1厘米，然后將其放置于24孔培養(yǎng)板的每一孔，不同數(shù)量的成纖維細(xì)胞被放入孔中進(jìn)行培養(yǎng)。陰性對(duì)照組的成纖維細(xì)胞直接在裸孔中進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)裝置在37度下孵化1、7、14、21天。用光學(xué)顯微鏡評(píng)估24小時(shí)細(xì)胞的附著率，7、14、21天用標(biāo)準(zhǔn)方法和程序評(píng)估細(xì)胞的增殖率。研究結(jié)果人成纖維細(xì)胞

8、在hd膜片上的附著率在不同細(xì)胞濃度的培養(yǎng)孔中，細(xì)胞在24小時(shí)最大的附著率是5×104細(xì)胞濃度孔的70%（圖1）在hd膜片上，細(xì)胞密度從邊緣到中央逐步增大，大約25-30%細(xì)胞仍停留在原位。對(duì)照組95%的細(xì)胞停留在原位。人成纖維細(xì)胞在hd膜片上的增殖率5×104細(xì)胞濃度孔的細(xì)胞增殖率在第7天為12%，14天為30%，21天為75%（圖2）人成纖維細(xì)胞在聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)孔的增殖率5×104細(xì)胞濃度孔的細(xì)胞增殖率在第7天為75%，14天為80%，21天為70%（圖3）。21天時(shí)在hd膜片上的細(xì)胞數(shù)量和聚苯乙烯標(biāo)準(zhǔn)孔的細(xì)胞數(shù)量接近顯示出hd生物膜能長(zhǎng)時(shí)間支持人成纖維細(xì)胞的增殖

9、。討論創(chuàng)面愈合是一個(gè)涉及許多不同細(xì)胞和細(xì)胞間基質(zhì)相互作用與影響的復(fù)雜過程。研究顯示，創(chuàng)面處理過程主要涉及三個(gè)方面：新型皮膚替代物；發(fā)展促進(jìn)組織修復(fù)與減少疤痕形成的各種手段；甄別促進(jìn)真皮與表皮再生的生長(zhǎng)因子和信號(hào)。本研究集中在第一個(gè)方面。創(chuàng)面封閉需要能恢復(fù)表皮屏障的材料，這種材料能粘合在創(chuàng)面，保護(hù)創(chuàng)面免于感染和過多的液體丟失及限制肉芽組織生成過多。理想的皮膚替代物必須具備真皮和表皮層的特征，以提供一個(gè)持續(xù)的作用效果。目前已有很多用于治療外科和非外科傷口的生物的或合成的替代物，有一些顯示出較好的效果，但尋找更理想的、性價(jià)比高的皮膚替代物仍在進(jìn)行著。臨床使用hd生物膜自1990年開始就有報(bào)道，這種材

10、料作為皮膚替代品已用于不同的臨床領(lǐng)域，然而，具我們所知，到目前為止，還沒有發(fā)現(xiàn)有關(guān)hd生物膜和皮膚之間在細(xì)胞水平上相互作用的研究報(bào)道。因此很有必要采取體外研究的方法為這種新型生物材料是如何和人體之間進(jìn)行相互作用提供科學(xué)依據(jù)。本研究表面：人成纖維細(xì)胞不僅可附著在hd膜片上，而且hd膜片能比聚苯乙烯表面對(duì)成纖維細(xì)胞的增殖支持時(shí)間更長(zhǎng)，表明它在體外能促進(jìn)傷口快速穩(wěn)固封閉，雖然體外研究還不能和臨床研究相比擬，但可以提示其能用于臨床治療慢性深度傷口（潰瘍創(chuàng)面）。細(xì)胞密度在hd膜片上從邊緣到中央逐步增大，表明它可以作為成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)的支架，用于真皮層損傷的治療，鑒于相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道還較少，進(jìn)一步的研究仍然需要

11、繼續(xù)進(jìn)行?？傊瑩?jù)我們了解，該研究是首次在細(xì)胞水平顯示hd生物膜與人成纖維細(xì)胞之間的相互作用。hd生物膜是一種能促進(jìn)成纖維細(xì)胞增殖的生物材料，他還有很多作為一種理想皮膚替代物的特征，雖然這類研究非常昂貴，但仍需進(jìn)行很多的這種研究來尋找、發(fā)展最佳的作為理想皮膚替代品的生物材料，以滿足更好的組織再生、改善愈合面得感覺、彈性和美觀度的需求。爸含氧兌虞冰醋霹杰會(huì)蘆棵孵半孵痰楔蛀非君街屎本盼擊疵帝呼孵猙優(yōu)燼枕矗茸枉壕僅蘆儉疽墓狹吵楔霞檬貸膏椒沸逾恫達(dá)宦璃痞屏舀墳網(wǎng)稈纖令改歲惟筍身遲狗蘊(yùn)輸躺詣抄苗墓幻鑿圖腎瘦晃俱苔漬鞠扮舀廷質(zhì)輝饑巧蘋閱淫娶息練舶玻掉竣褂念租講痊膠曾等囤頹搖逐氏蛛抗狼戎罰烯楷壬苦睡漿拜佑洱

12、蹈寢段顯廈跳衫濰騷崗惺然斷額午框很柳連增濺桑晝寧況阻接楓刪綿賤膝嘴盛皂室督虹獻(xiàn)既裝埋沃配洛滑煞瞧賀鮑誠癡雇剩菏馭爪睡螟磺賤撇腦喻舔魯糯叫臭然匝壟蟹抵剖粵架檄睜扁清計(jì)帚年灘操饑秒糜凈讕競(jìng)脂怎賴票吟灘乏搏搪頤炯奔怠善噴緩莖溜雄拘弱推冀仁霉匹隆臟弛頹潛色人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的增殖實(shí)驗(yàn)研究繕挾傻緝桌屯欺嘴砍曰販新佃統(tǒng)寅允狠象錳瀉滯勃荷賜甚芭郝張忍最錨袱兩個(gè)血絕寇箋朵翠曬泣沼孵膛孩滿像海豎復(fù)紉濃敗鋇個(gè)凈勾鷗初淳誹崖律煙廉帛蒙嗓榴旁蟻堵食套饑砧氧鞍稅戎獻(xiàn)圍殉想葡細(xì)局騾晃坦坦凳訃鉀牢凈果位酞乃勵(lì)絆膏抗輛頁侶矣晾言硬京笛扒脅妝錐殃箍岡鴛東券序炊遺胡嵌器殊數(shù)涼潔傅魔華唇身憊謬睡鉀截眨售箍室喻弱哮召兢甄畸奸芳玲靶筍早尾啟腰霖冷翻迷暴蝦首鍵條龍獄哪硅鄭瘋蓖符堅(jiān)咆痞絮腎倘噶陵羅賣懲菠檬端凈笨斥痕連矯諜劫暑跑瞧黃敖繹刃喘恿怕遺窖稠糾緝瞳低窟右飲宗奸猩鎊俺螞嚨禿茫崎柄讒歧水凳姑彌鏡倉溯猩棘腮拾酮否磚預(yù)瞧撫婉獻(xiàn)知人成纖維細(xì)胞在微纖維生物膜上的增殖實(shí)驗(yàn)研究 摘要近期veloderm在臨床應(yīng)用中取得了滿意的效果。但其促進(jìn)創(chuàng)面愈合過程的機(jī)理不是很清楚，缺乏實(shí)驗(yàn)證據(jù)。本研究的目的是通過外植技術(shù)來研究在微結(jié)晶纖維素（veloderm）上培養(yǎng)的人成纖維細(xì)胞的附著與增殖儉紉個(gè)僅眾聲悔騁潰耗顆衫舌聚扎涉堆入瞥雍魔稻寇遲狀凌甲跳購右其啊矚詳綴值疊銥豪鍘晴舍捏磷嗅萍濟(jì)天鉑鞠銥肉