Chaptr 20 Chlamydia衣 原 體

1、衣衣 原原 體體 chlamydiae *0.5 teaching hr第第2020章章 第一節(jié)第一節(jié) 概述概述 衣原體：一類能通過細(xì)菌濾器，嚴(yán)格在真核細(xì)胞內(nèi)寄生，并有獨(dú)特發(fā)育周期獨(dú)特發(fā)育周期的原核細(xì)胞型微生物。 廣泛寄生于人、鳥、哺乳動(dòng)物。致人疾病的有沙眼衣原體沙眼衣原體，肺炎衣原體肺炎衣原體和由動(dòng)物傳播的鸚鵡熱衣原體鸚鵡熱衣原體。由衣原體感染所致的性傳播性疾病(std)已成為最常見的性傳播性疾病之一。共同特性細(xì)胞壁組成與g-相似，呈圓形或橢圓形, ,具有獨(dú)特的發(fā)育周期, ,類似細(xì)菌的二分裂方式繁殖。有dna和rna兩種核酸，含核糖體,具有嚴(yán)格的細(xì)胞內(nèi)寄生細(xì)胞內(nèi)寄生性，對(duì)多種抗生素敏感抗生素

2、敏感。衣原體分類衣原體分類（一）（一）發(fā)育周期發(fā)育周期與形態(tài)染色與形態(tài)染色 原體（elementary body, eb）:呈球形,或橢圓形,小而致密小而致密. .直徑0.2-0.4m, giemsa染色呈紫色,macchiavello染色呈紅色. 是衣原體在細(xì)胞外的強(qiáng)感染形式，無繁殖能力。當(dāng)原體進(jìn)入宿主易感細(xì)胞后,宿主細(xì)胞膜圍于原體外形成空泡,原體在空泡中逐漸發(fā)育,增殖成為始體始體. 始體（始體（initial body）: :大而疏松大而疏松, ,直徑0.51.0m,圓形或橢圓形,致密度較低,無胞壁,代謝活躍,以二分裂方式繁殖。 macchivello染色呈藍(lán)色。 始體始體是衣原體在細(xì)胞內(nèi)

3、內(nèi)的繁殖型,不具感染性。在空泡內(nèi)增殖成許多子代原體.成熟的子代原體從被破壞的感染細(xì)胞中釋放,再感染新的易感細(xì)胞,開始新的發(fā)育周期,每個(gè)發(fā)育周期約48h. 衣原體的發(fā)育周期衣原體的發(fā)育周期原體吸附于細(xì)胞，原體吸附于細(xì)胞，8小時(shí)后發(fā)育成始體并增殖；小時(shí)后發(fā)育成始體并增殖；30小時(shí)后始體開始分化為原體，小時(shí)后始體開始分化為原體，并在細(xì)胞形成包涵體；并在細(xì)胞形成包涵體；48小時(shí)后細(xì)胞破裂，釋放的原體繼續(xù)感染鄰近細(xì)胞小時(shí)后細(xì)胞破裂，釋放的原體繼續(xù)感染鄰近細(xì)胞始體始體原體原體性狀性狀原體原體始體始體大?。ù笮。╩） 0.20.20.4 0.4 0.50.51.0 1.0 細(xì)胞壁細(xì)胞壁- -代謝活性代謝活性

4、- -胞外穩(wěn)定性胞外穩(wěn)定性強(qiáng)強(qiáng)弱弱感染性感染性強(qiáng)強(qiáng)無無繁殖能力繁殖能力無無強(qiáng)強(qiáng)rna:dna比比 1:11:13:13:1 （二）培養(yǎng)特性（二）培養(yǎng)特性: 活細(xì)胞內(nèi)寄生 雞胚接種：68日齡雞胚卵黃囊中繁殖，感染后36天致雞胚死亡，并可在卵黃囊膜中找到包涵包涵體體( (含始體和含始體和子代原體的空泡子代原體的空泡)、原體和始體顆粒。 組織細(xì)胞培養(yǎng)：可在hela、mccoy或hl等細(xì)胞中生長(zhǎng)良好，可將接種有標(biāo)本的細(xì)胞培養(yǎng)管離心沉淀以促使衣原體穿入細(xì)胞，在細(xì)胞培養(yǎng)管中加入代謝抑制物。 （三）抗原結(jié)構(gòu)（三）抗原結(jié)構(gòu) 屬特異性抗原：屬特異性抗原：位于胞壁的共同抗原為脂多糖脂多糖，類似于g菌的脂蛋白-脂多

5、糖復(fù)合物，可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)檢測(cè)。 種特異性抗原種特異性抗原:多數(shù)衣原體種特異性抗原位于主要外主要外膜蛋白膜蛋白（major outer membrane protein, momp）上,可用補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)和中和試驗(yàn)檢測(cè)鑒別不同種衣原體。 型特異性抗原型特異性抗原:據(jù)momp可變區(qū)氨基酸序列可變區(qū)氨基酸序列的不同，可將衣原體分為不同的血清型或生物型（biovar）。 （四）抵抗力 衣原體耐冷不耐熱，60僅能存活510min；在-60感染性可保持5年,液氮內(nèi)可保存10年以上,冷凍干燥保存30年以上仍可復(fù)蘇。 對(duì)常用消毒劑敏感，紫外線照射可迅速滅活。 四環(huán)素、氯霉素、強(qiáng)力霉素和紅霉素等抗生素有抑制衣原

6、體繁殖的作用。 （一）致病性（一）致病性 能產(chǎn)生能產(chǎn)生類似類似g g菌內(nèi)毒素的毒性物質(zhì)菌內(nèi)毒素的毒性物質(zhì)，能抑制宿主，能抑制宿主細(xì)胞代謝，直接破壞宿主細(xì)胞。細(xì)胞代謝，直接破壞宿主細(xì)胞。 mompmomp能阻止吞噬能阻止吞噬體與溶酶體融合，表位易變異，體與溶酶體融合，表位易變異，在體內(nèi)可逃避特異性抗體的中和作用而繼續(xù)感染在體內(nèi)可逃避特異性抗體的中和作用而繼續(xù)感染細(xì)胞。細(xì)胞。 熱休克蛋白（熱休克蛋白（hsphsp）能刺激機(jī)體巨噬細(xì)胞產(chǎn)生）能刺激機(jī)體巨噬細(xì)胞產(chǎn)生tnf-tnf-、il-1il-1、il-6il-6等炎癥性細(xì)胞因子。等炎癥性細(xì)胞因子。 （二）免疫性（二）免疫性 產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液

7、免疫，以產(chǎn)生特異性細(xì)胞免疫和體液免疫，以細(xì)胞免疫細(xì)胞免疫為為主。主。 衣原體發(fā)現(xiàn)衣原體發(fā)現(xiàn) 1956年湯飛凡等首次分離培養(yǎng)出沙眼衣原體，年湯飛凡等首次分離培養(yǎng)出沙眼衣原體，結(jié)束了半個(gè)多世紀(jì)關(guān)于沙眼病原的爭(zhēng)論。是世結(jié)束了半個(gè)多世紀(jì)關(guān)于沙眼病原的爭(zhēng)論。是世界上發(fā)現(xiàn)重要病原體的第一個(gè)中國(guó)人。界上發(fā)現(xiàn)重要病原體的第一個(gè)中國(guó)人。 生物分型生物分型 沙眼生物型沙眼生物型（biovar trachoma） 性病淋巴肉芽腫生物型性病淋巴肉芽腫生物型（ lgv， biovar lymphogramuloma venereum, ）第二節(jié)第二節(jié) 沙眼衣原體沙眼衣原體 （一）形態(tài)染色（一）形態(tài)染色: 原體為圓形原體

8、為圓形, ,giemsa染色呈紫紅色染色呈紫紅色. .原體能原體能合成糖原合成糖原, ,故被碘溶液染成棕褐色故被碘溶液染成棕褐色. .網(wǎng)狀體核質(zhì)分散網(wǎng)狀體核質(zhì)分散, ,giemsa染色為深藍(lán)或暗紫色。染色為深藍(lán)或暗紫色。碘染色碘染色沙眼衣原體始體的鏡下沙眼衣原體始體的鏡下形態(tài)（形態(tài)（giemsa染色）染色） （二）血清學(xué)分型（二）血清學(xué)分型 根據(jù)根據(jù)momp表位氨基酸序列的差異，將沙眼衣原體分為表位氨基酸序列的差異，將沙眼衣原體分為19個(gè)個(gè)血清型，其中沙眼生物型包括血清型，其中沙眼生物型包括15個(gè)血清型；個(gè)血清型；lgv生物型包括生物型包括l1、l2、l2a和和l3共共4個(gè)血清型。個(gè)血清型。

9、所致疾病所致疾病 1.1.沙眼沙眼: :通過眼-手-眼途徑直接或間接密切接觸傳播。由a、b、ba和c血清型引起。早期流淚，后期結(jié)膜瘢痕、瞼內(nèi)翻、倒睫及角膜血管翳引起角膜損害，影響視力或致盲。 2 2. .包涵體結(jié)膜炎包涵體結(jié)膜炎 嬰兒結(jié)膜炎嬰兒結(jié)膜炎，引起急性化膿性結(jié)膜炎（包涵體膿，引起急性化膿性結(jié)膜炎（包涵體膿漏眼），不侵犯角膜，能自愈；漏眼），不侵犯角膜，能自愈；成人結(jié)膜炎成人結(jié)膜炎可經(jīng)兩可經(jīng)兩性性接觸、經(jīng)手至眼或污染的游泳池水感染接觸、經(jīng)手至眼或污染的游泳池水感染，引起濾，引起濾泡性結(jié)膜炎，又稱游泳池結(jié)膜炎，一般經(jīng)數(shù)周或數(shù)泡性結(jié)膜炎，又稱游泳池結(jié)膜炎，一般經(jīng)數(shù)周或數(shù)月痊愈，無后遺癥。月痊

10、愈，無后遺癥。3.3.泌尿生殖道感染泌尿生殖道感染: :沙眼生物型dk血清型引起,男性多表現(xiàn)為非淋菌性尿道炎，并可合并附睪炎、前列腺炎、直腸炎等；女性表現(xiàn)為尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎與盆腔炎等。泌尿生殖道感染 4.4.嬰幼兒肺炎嬰幼兒肺炎 5.5.性病淋巴肉芽腫性病淋巴肉芽腫: :侵犯男性腹股溝淋巴結(jié)，引起化膿性淋巴結(jié)炎和慢性淋巴肉芽腫，常形成瘺管；亦可侵犯女性會(huì)陰、肛門、直腸，引起會(huì)陰-肛門-直腸組織狹窄。瘺管（一）直接涂片鏡檢（一）直接涂片鏡檢: : 取結(jié)膜刮片，取結(jié)膜刮片，giemsa或碘液及或碘液及熒光抗體染色鏡檢，觀察上皮細(xì)熒光抗體染色鏡檢，觀察上皮細(xì)胞漿內(nèi)胞漿內(nèi)有無有無包涵體。包涵體

11、。（二）分離培養(yǎng)（二）分離培養(yǎng) 取感染組織的滲出液或刮取物，接種于雞胚取感染組織的滲出液或刮取物，接種于雞胚卵黃囊或傳代細(xì)胞，再用卵黃囊或傳代細(xì)胞，再用ifa或或elisa檢測(cè)檢測(cè)培養(yǎng)物中的衣原體。培養(yǎng)物中的衣原體。（三）衣原體抗原與核酸組分檢測(cè)（三）衣原體抗原與核酸組分檢測(cè) elisa：檢測(cè)沙眼衣原體：檢測(cè)沙眼衣原體lps和和momp pcr和和lcr（鏈接酶鏈反應(yīng)）等擴(kuò)增技術(shù)（鏈接酶鏈反應(yīng)）等擴(kuò)增技術(shù)檢測(cè)沙眼衣原體檢測(cè)沙眼衣原體dna預(yù)防重點(diǎn)是注意個(gè)人衛(wèi)生，避免直接或間接的預(yù)防重點(diǎn)是注意個(gè)人衛(wèi)生，避免直接或間接的接觸傳染。接觸傳染。治療藥物選用強(qiáng)力霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、治療藥物選用強(qiáng)力

12、霉素、羅紅霉素、阿奇霉素、加替沙星等。加替沙星等。目前目前尚無有效的沙眼衣原體疫苗尚無有效的沙眼衣原體疫苗，momp是其是其主要候選抗原。由于主要候選抗原。由于momp的多型性，其疫苗的多型性，其疫苗不易對(duì)所有型別沙眼衣原體都產(chǎn)生保護(hù)性，故不易對(duì)所有型別沙眼衣原體都產(chǎn)生保護(hù)性，故增加了增加了momp作為疫苗的難度。作為疫苗的難度。第三節(jié)第三節(jié) 肺炎嗜衣原體肺炎嗜衣原體 肺炎嗜衣原體是衣原體屬的一個(gè)新種。肺炎嗜衣原體是衣原體屬的一個(gè)新種。最初分離的兩株病原體：1965年自一名臺(tái)灣小學(xué)生眼結(jié)膜中分離得到的一株tw-183（taiwan -183）。1983年自美國(guó)西雅圖一位急性呼吸道感染病人的咽部

13、分離出另一株ar-39（acute respiratory-39)，后發(fā)現(xiàn)這兩株衣原體為同一菌株，命名為twar。（一）形態(tài)染色（一）形態(tài)染色 原體直徑為原體直徑為0.38 m，電鏡下呈典型的梨形，并，電鏡下呈典型的梨形，并有清晰的周漿間隙，有清晰的周漿間隙，giemsa染色呈紫紅色，該染色呈紫紅色，該法對(duì)細(xì)胞內(nèi)包涵體的定位比碘染法敏感。法對(duì)細(xì)胞內(nèi)包涵體的定位比碘染法敏感。 （二）細(xì)胞培養(yǎng)（二）細(xì)胞培養(yǎng)mccoy和和hela細(xì)胞，但都很難用于連續(xù)傳代。細(xì)胞，但都很難用于連續(xù)傳代。目前常用目前常用hep-2和和hl細(xì)胞系，其在培養(yǎng)肺炎嗜細(xì)胞系，其在培養(yǎng)肺炎嗜衣原體的敏感性方面要高于前兩者。衣原體

14、的敏感性方面要高于前兩者。肺炎衣原體肺炎衣原體 所致疾病所致疾病: 易引起易引起肺炎肺炎、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩、支氣管炎、咽炎和鼻竇炎等。起病緩慢，臨床癥狀與肺炎支原體相似，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、慢，臨床癥狀與肺炎支原體相似，表現(xiàn)為咽痛、咳嗽、咳痰、發(fā)熱等，一般癥狀較輕。肺炎嗜衣原體與發(fā)熱等，一般癥狀較輕。肺炎嗜衣原體與冠心病、動(dòng)脈粥樣冠心病、動(dòng)脈粥樣硬化等慢性病的發(fā)生密切相關(guān)硬化等慢性病的發(fā)生密切相關(guān)，但其具體機(jī)制尚待深入研究。，但其具體機(jī)制尚待深入研究。 病原學(xué)檢查病原學(xué)檢查: : 先直接涂片，觀察包涵體；以熒光或酶標(biāo)記的種先直接涂片，觀察包涵體；以熒光或酶標(biāo)記的種特異性單克

15、隆抗體直接檢測(cè)標(biāo)本中肺炎嗜衣原體抗原。特異性單克隆抗體直接檢測(cè)標(biāo)本中肺炎嗜衣原體抗原。 血清學(xué)方法血清學(xué)方法: : 微量免疫熒光試驗(yàn)（微量免疫熒光試驗(yàn)（mif: microimmuno-mif: microimmuno-fluorescence test fluorescence test ）. .凡雙份血清抗體滴度增高凡雙份血清抗體滴度增高4 4倍或以上，倍或以上，或單份血清或單份血清igmigm抗體滴度抗體滴度1:161:16，或，或iggigg抗體滴度抗體滴度1:5121:512，可，可確定為急性感染，確定為急性感染，igg1:16igg1:16表示為既往感染表示為既往感染。 生物學(xué)性狀生物學(xué)性狀: 原體呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體呈球形原體呈球形或卵圓形。網(wǎng)狀體呈球形或不規(guī)則形態(tài)或不規(guī)則形態(tài); ;原體在細(xì)胞空泡中增殖，形成結(jié)構(gòu)原體在細(xì)胞空泡中增殖，形成結(jié)構(gòu)疏松、疏松、不含糖原、碘染色呈陰性的包涵體不含糖原、碘染色呈陰性的包涵體。至少。至少可以分為可以分為6 6個(gè)血清型個(gè)血清型 致病性致病性: 經(jīng)呼吸道經(jīng)呼吸道, ,破損皮膚破損皮膚, ,粘膜或結(jié)膜感染粘膜或結(jié)膜感染; ;臨臨床表現(xiàn)多為床表現(xiàn)多為非典型性肺炎非典型性肺炎 微生物檢查微生物檢查: 取患者血,痰標(biāo)本或咽拭子直接涂片染色觀察包涵體。ifa或elisa檢測(cè)特異igm抗體作