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文檔簡介
1、輸血科工作制度一查對希陰(一)三查就診卡號(標本接收時) 上 1OH| (一點加 一翰ii溜二需齧讀楚,如姓名、性別、年齡、住院號、帶書鞏觸號,是否寫明姓名、病區(qū)、床號;2、3、是否-致; 每本是否有祁 ife?5 燧病人身份污染;6、核對輸血日緲呈歪一致;的普謠,加網(wǎng)巒冊-致' 二領血型蠟薪爲刼;'翩烈山換區(qū)派一名能夠 j嘍踰辟工似貨昭価曲馭歸期液;核對無誤后斗來領血,采4、全血及血液成分制品發(fā)出血庫后應立即輸注給病人,原則上不能退:需瀚和蕭觀w照血液的保存日期先后進行發(fā)血臨床醫(yī)務人輸血科質量控制工作制度科獄畫勰辭求所采取的作業(yè)技術和活動,以提高醫(yī)學檢驗質量,特制定本 度化剌
2、彳§2 (IQC),參加室間質評(EQA),作為科室常規(guī)化、制 品丄操4、鑑堀過程、質控結果、上報結果、 云嘆,磨E右A成績、實驗差距或不足、改 號團店桃弓、結會議。學習質控有關文獻、掌握質控學術 E電累赦行質控工作,對于存在的問題,科室統(tǒng)一匯總并轎ifete制蘆,履行職責,負責門急診供血的各項工作,ill2卩時,應報告科主任,并番:努力完成職責以內的運轉情況,辛己錄,并應an/. S甜貝T W 5爲燿懈變鯛觸據(jù)不同季節(jié)各班次上襄賽覽薫®®艷攥幫K收器隔實到專孑使用者,必須事先接受培訓和帶教,實習、進 玉處部、工作: 并作跖下班均'人負責和希 修人負 蓋上
3、關年" 畤自拆 翩憾 以保樂為懐器檢定率達到wo%,匚:、站 跚攵器、設備、計量器具只限本單位使用,未經(jīng)領導批準一律不 得外心為【Et-t+afcr黠;Iffl圧41桔善蘿I®讎書籲靱罄所規(guī)定的相應資質。 ,=1聲戀理籲揉緒愿鷲*業(yè)盒稔培養(yǎng)具備指:;希眺卿銘魏讎°床科室的申請和患者的病情,提供合適的 尙:站焚向臨床開展科學用血、合理用血的宣傳,推廣普及新的 :血咚$罐礙麹篠為讎魁豔擁皐住觀T究危重特殊患者的 二般關捫附鈕 證不對、輸血方法欠妥、輸血4、C性等i3、保存、領發(fā)管理制度核耳血爲 co填、號 對:入題 入核 i #, .n 應密陋 不 口al血 合 成、
4、目熱 坯題, SS 汚 入右僅 ft f M 括 <Engiix 喙幫拒 H sis1:2、血液驗收合格并核對無誤后,雙方簽名確認。血液的貯存卜易甸嘯幼謂兩涼 血型、規(guī)格和有效日期分別豎立放置于金屬架細胞;4±2 C; CAPD 35天;CPD28天;單D 21 天;,B百紅細胞:4±2 °C, 的3歪天;CPD28天;ACD22天;細胞:4±2 °C 24小時丙輸注;冰凍紅纟竊赫眇廠祗以環(huán); 鎰定毎咒以下1年;報警毀iJ®闘 存伽翻:4±2 °C解凍后24:22±2 °C 5-7A U2
5、2±2 _°C. 24小時內m動控制記錄或 館、無燥,嚴禁:AF>D 35: CPD28天:ACD21 天:、I他導確請k床號;、完整:),用血來 血標術;),寺6、按失空熾歸艸刪蹩分制品存放整齊,冶T五對性2、b.c.d.時m.%血日期、尢損;0要求做到:6、(必須7、血液 報單8'為1、嗣薛端礙陽9®需瞬的血液 睡鷺勰癬融嘔霧縣霰應回樺謎金蠶議幌減眶種形式考核。7、侏獎轡診病次輜話關規(guī)齢管理,保證病人用血安全,規(guī)范和方便門、急診輸血病人診輸液室交輸液室護士實施輸血。嚮Jf鋼»餓踴療鑑般辭,、雛 毎腿戲L:緇1照輸血規(guī)范要求執(zhí)行。血標本
6、切卿鄒聽“舷臺峽.砒病人爭踰嗣輸血科工作職責科主任職責,1?在醫(yī)院黨委和院長領導下,全面負責輸血科的醫(yī)療、教學、科研和行 呀工科室長遠發(fā) 督促和 開豳霽承儡fe準操作施疔荃面質量管理,定期衿単|甯床輸血業(yè)務的開展和研究工作,積極引進新技術,硏究、分析各項工作開展情況及存在問題,制定 耐殳,經(jīng)常進行醫(yī)療安全教育,嚴防事故和差錯,改進霜確保輸rflf麥全:核。學H.S訓、員<1員業(yè)4HWAn人人宀科崗 拠 sgs2>wr>s££3xHS£SES貴差、爺全-L,技己O'TV 和 1床 臨 弊、量 質。II O®XH- si 成塡 fu
7、 術耀 蘇檢 應閒 廣保定 推,的 iw. 方淵 m 立暮 W0 ,作 動丄 學的 的班能力,6、碩士以lilt沁豹本職工作,遵守醫(yī)院和科室各項規(guī)章制度,具有良好同徽2羋人才(卜力,冇較好的教學組織和甘理崗1>乙3、K CET4 2慫愛,本卿-曲八那冰組織安排,遵守醫(yī)院和科室各項規(guī)章lil卿骸技師、進修人員簡能力廠能承制度,、i»fc4、科研工作 領導.卡纟極申結郵.的醫(yī)德必鳳副主任技師職責負責派定的醫(yī)療、教學、科研工作。 鏈蠶加保證輸血安全。,八南籠和臨床檢驗的質量。!藉1試劑和消耗品的使用° 財女配合醫(yī)療和科研,根據(jù)需要開展新的檢驗項LI,滿足研究與臨床 勿技師一
8、切崗位職責。續(xù)醫(yī)學教育的教與學工作。指導下級技術人員的實 IB幫WW,囁極監(jiān)督并指導下級醫(yī) ht囪孳專業(yè)或臨床檢驗專業(yè)基礎課新進展,作好讀書舎)農(nóng)冒翻&驗室發(fā)展規(guī)劃,操作規(guī)范。(2)參加實驗的日??蒲泄芾恚撠熍R床檢驗儀器的請領、維修和保養(yǎng)(3)掌握科研選題、課題設訃及研究方法,能結合臨床實踐提出課題,開'” 一 麴飜目。胃歪錨騙卿并發(fā)適合臨床需要的新技術、新方法與新項目,每2年 一項。主管技師職責:、參 工作曲爵芒任和上級技師指導下,負責派定的醫(yī)療、教學、科研工作。用。3理、驟儀器設備的使用和維修,檢查和督促本部門試劑和消耗品的使“ ,6)考察先進儀器設備在研究與臨床工作中的
9、價值與性能,并負責其維護與 土甲1 (7)iyjj?(級技師一切崗位職責。3'飛續(xù)醫(yī)學教育的教與學工作。指導下級技術人員的實術建課和交流至少1次。盤施戢臨床檢驗專業(yè)基礎課新進展,作好讀 于誓密綴見瞬治嬴盔學分不少于15分。發(fā)展規(guī)劃,操作規(guī)范。irF L作發(fā)歸參;2、三輸血保證臨床F醫(yī)療、科研,在上級醫(yī)技人員指導下開展新項口,滿足研究W 展科負.履職要?制度'貨役計及研究方法等工作,結合臨床實踐、開 詼需較朱、新方法和新項目。組織安排,遵守醫(yī)院和科室各項規(guī)章4、大殳 際學癥 的組維墓祐畜蠢或國要時主動加班。攵實習生,并能正確引導下級技師處理常見問題,有一定 和上級技師指導下,負責
10、派定的醫(yī)療、教學、科研工作。保障嗨舌)扌縛#1 蔘和實習人員的技術操作工作并給予研究生技術和設備使用等幫每: 解誡年對制度。認真核對檢驗結助。冊年爲 琴云黯魅邈業(yè)或臨床檢驗專業(yè)基礎課12門,了 誓須劉進墓靈噬'教書賽裡,按規(guī)定完成繼續(xù)教育學分。乍暮恿麹保專地鈔勺課題瞌疆豪勸聖°節(jié)約各項研究使用的耗林買、登記、使譬,r3>專具 跚度孫垂子工 燔制摯IK456urr安織,遵守醫(yī)院和科室各項規(guī)章獻識本從 文型咼 盤論 下,贄 導爲人 段。醫(yī)。 蟄踐 貫礎丄慟一 另O 于能,基,學曲 pmt疋技術規(guī)范與操作規(guī)程ABO和Rh血型鑒定(試管法)【原理】正定型:用已知血清測定紅細胞上
11、未知抗原。反定型:用已知抗原測定血清中的未知抗體?!静僮鳌空ㄐ停簩⑹軝z者的紅細胞配成5%的鹽水懸液備用,取小試管3支,并 標明A、B和D并各加入1滴抗A和抗B、抗D試劑,再加入受檢者紅細胞懸液 1滴,混勻,lOOOrpm,離心1分鐘。反定型:取小試管2支,并標明a和b,分別加入5%標準A 型和B型紅細胞1滴,再加入受檢者血清1滴,混勻,lOOOrpm,離心1分鐘。將試管輕輕搖動,使沉于管底的紅細胞浮起,先以肉眼觀察有無 凝集(或溶血)現(xiàn)象,如肉眼不凝集,應將反應物倒在玻片上,再以 顯微鏡檢查?!窘Y果判定】1、ABO血型結果判定正定型反定型A型紅細胞 B型紅細胞OAB1、Rh (D) fit型
12、結果判定:紅細胞與抗D凝集為Rh (D)陽性,無凝集 為 Rh (D)陰性,陰性必須作抗人球試驗確證?!咀⒁馐马棥?、單克隆抗體試劑和試劑細胞每天使用前必須與相應的紅細胞和 血清作陽性、陰性對照,以檢測其活性。2、對含有較多自身冷凝集素的受檢者,正定型易誤定為AB,需用 37°C生理鹽水洗滌受檢者紅細胞23次,去除吸附在紅細胞上的冷凝集 素。3、Rh (D)血型只做正定型。ABO和Rh血型鑒定(抗人球法)【工作準備】1、Al, B標準反定型細胞的制備(1%):取5ulA型和B型標準壓積紅細 胞分別懸浮于05ml低離子稀釋液中,制成1%標準反定型細胞。(若是成品試 劑細胞,紅細胞濃度為
13、5%,需稀釋5倍)2、5%樣本紅細胞制備:樣本壓積紅細胞25ul或50ul全血懸浮于0.5ml 低離子液中?!静僮鞑襟E】1> Al, B管中分別加入50ull%Al, B標準紅細胞,再加入50ul標本血清 或血漿(反定型)。2、取5%樣本紅細胞lOul加入A, B, D和Ctrl管中3、離心10分鐘,判斷結果,記錄?!咀⒁馐马棥?、每日實驗前,先取出低離子稀釋液及標準紅細胞,平衡至室溫,以防 冷凝集。2、必須標記卡。3、DiaMed卡封口已破損時,管中干涸,或有氣泡時,不可使用。4、應用低離子稀釋液保證反應結果可鼎,正定型細胞濃度要在5%左右, 不可太濃或太稀。5. 纖維蛋白可吸附部分紅
14、細胞,應將血樣離心。6、反定型先加樣,以便標準細胞與血清血漿反應,先加細胞再加血漿或血 清。7、正反定型對照,確定結果及亞型。正定型結果若為弱陽性,應懷疑為 ABO亞型??芍刈鐾耆珳y試。正反定型不符時,請設計實驗分析。8、質控管為陽性時,請先用生理鹽水洗細胞,再做血型。9. 嚴格按照標準程序操作可檢出弱抗原,血型亞型。10. 某些藥物、疾病可導致弱陽性及正反定型不符。11. 細菌及異常血清蛋口可影響結果。ABO標準紅細胞的制備【操作步驟】1、取10ml試管3支,分別標記A、B、Oo2、分別取35人份健康新鮮A型、B型、O型紅細胞于上述三支試管 內,混勻。3、用大量生理鹽水充分洗滌至少3次,每次
15、用滴管充分混勻,洗滌至上 清液澄清為止,棄上清,留壓積紅細胞備用。4、將壓積紅細胞根據(jù)實驗方法的要求配制成不同濃度的標準紅細胞懸液 備用?!咀⒁馐马棥?、配制過程中各型之間應謹防交義污染,滴管、剪刀等要嚴格分開;2、配制好的壓積紅細胞4弋保存可用3-5天,一旦有洛血現(xiàn)象,都應 立即重新配制。3、每日使用前都應與對應的血清作陰性、陽性對照,以檢測其活性和特異性。ABO血型正反定型不符原因及處理【原因】1. 操作或實驗本身的錯誤2.紅細胞的問題3血清的問題【處理】1、排除實驗操作失誤,如血清未加,使用錯誤的抗體或紅細胞試劑(如 紅細胞在洗滌的過程中受到污染),血清或試劑與紅細胞比例不當,沒能認識
16、到溶血也是陽性反應等。2、排除操作失誤后,按下列基本程序處理:1)重取標本。2)多次洗滌標本紅細胞或試劑紅細胞,除去可能引起意外陽性反應 的血漿中的或試劑紅細胞中的化學成分。3)應用抗AB,抗或抗H檢測紅細胞。4)如果懷疑血清中有抗-Al,則用數(shù)份抗A2紅細胞標本進行檢測。5)用0型篩選細胞檢測,確定是否是非特異性的冷抗體的干擾。6)室溫孵育30分種后,離心觀察凝集結果,能檢測弱的抗原抗體 反應,但要用O型和自身紅細胞做對照,以排除抗"或抗H等抗體對正 反定型結果的干擾,抗1和抗-H是對所有成人紅細胞都反應的凝集素。7)抗原弱表達或血清意外反應應結合臨床具體分析,分別對待。8)樣本紅
17、細胞可能由于病理情況被一些未知的抗體致敬,此時要對 紅細胞做相應的處理后再定血型,例如多次洗滌樣本紅細胞再次實驗。9)對于血型抗原表達弱的情況下,可采用吸收放散的方法進行血型 的鑒定。10)有些是曲于紅細胞自身冷凝的原因,發(fā)生自身的凝集所致,應將細 胞做預溫處理或恒溫下進行血型的鑒定。11)有些進行了血型不合的骨髄移植的病人在一定時間內也可以岀現(xiàn)正 反定型不一的情況,應緊密結合臨床作出正確的判斷??傊偷恼炊ㄐ筒灰恢?,要從紅細胞自身和血清兩個方面尋找原 因,要結合臨床,聯(lián)系病情等相關因素作相應的處理。鹽水法交叉配血【實驗原理】紅細胞加入血清中,當血清中存在針對紅細胞膜上的ABO血型或其它
18、血 型抗原的抗體時,離心力加速抗體抗原的結合速度,山于人類ABO血型抗體 是以IgM型為主(包括MN. P等血型抗體),這種抗體可以結合多個鹽水介質中 懸浮的紅細胞,最終導致紅細胞凝集;也可以激活補體,導致紅細胞膜的損傷, 出現(xiàn)溶血。在進行交義配血試驗時,加入受血者血清和用生理鹽水制備的獻血 者紅細胞懸液的試管,稱為交義配血主側管,加入獻血者血清和用生理鹽水制 備的受血者紅細胞懸液的試管,稱為次側管。分別離心后,肉眼觀察試管中紅 細胞有無凝集或溶血。為了防止紅細胞弱凝集的漏檢,必須用顯微鏡觀察鏡下 有無紅細胞凝集,兩者合稱為鹽水介質交義配血試驗。此試驗主要檢查受血者 或獻血者血清中是否存在破壞
19、對方紅細胞的不規(guī)則完全性(IgM型)或補體依 賴性紅細胞抗體;并可以驗證ABO血型鑒定是否正確,確保受血者和獻血者血 液相容,防止發(fā)生急性輸血性溶血反應?!静僮鞑襟E】1、抽取受血者靜脈血34ml,待凝固后分離血清;以生理鹽水洗滌受血者 紅細胞3次,配成3%紅細胞懸液。同樣的方法處理獻血者標本;2、取潔凈小試管2支,1支加入受血者血清(PS) +獻血者紅細胞(DC), 標為主側管,另1支加入獻血者血清(DS) +受血者細胞(PC),標為次側管;3、標為主側管內加受血者血清2滴,獻血者紅細胞懸液1滴。次側管加獻 血者血清2滴,受血者紅細胞懸液1滴;4、混勻后,立即將兩只試管放入離心機,以120g離
20、心lmin或1300 g離 心 15s;5、小心取出試管后,肉眼觀察上清液有無溶血現(xiàn)象,再輕輕搖動試管,直 至紅細胞成為均勻的混懸液,并觀察有無紅細胞的凝集;6、取載玻片一張,用兩滴管分別從主側管和次側管內吸取紅細胞懸液各1 滴,分別滴在載玻片兩側,用顯微鏡觀察結果,最后得出試驗結果。注:3%紅細胞懸液配制方法:取洗滌后壓積紅細胞30ul,加入lml生理鹽水中懸浮,即成為3% 的紅細胞懸液?!窘Y果判斷】ABO同型配血,主側和(或)次側管紅細胞無凝集,無溶血,表示受血者 和獻血者鹽水介質配血相容,獻血者血液可以輸注。出現(xiàn)主側和次側試管或單 獨一側試管內紅細胞凝集和(或)溶血則表明兩血不相容,獻血
21、者血液不可輸 注?!咀⒁馐马棥葵}水介質交義配血試驗是臨床輸血前最基本的相容試驗,此試驗靈敬 度不高,特異性不強,僅能檢測完全性(IgM型)紅細胞血型抗體,不能檢測 不完全性(IgG型)抗體。在臨床實際工作中,鹽水交義配血完成后,必須增 加另外一種可以檢測不完全性抗體介質的配血方法,防止此類抗體漏檢,保證 輸血安全;2、應用鹽水介質交叉配血試驗時,出現(xiàn)兩血不相容,應當首先重新進行 獻血者和受血者ABO血型鑒定,排除ABO血型鑒定錯誤導致的兩血不相容;3、溶血標本不得用于交義配血試驗;4、冬季實驗室溫度較低出現(xiàn)紅細胞凝集時,應肖排除受血者或獻血者血 清中存在自身冷凝集素。分別取受血者和獻血者紅細胞
22、懸液各1滴,滴加在載 玻片上,顯微鏡下觀察有無紅細胞自身凝集現(xiàn)象,借以確定是否存在自身冷凝 集素。確定是冷凝集素導致的紅細胞凝集,可以把主側或次側試管放置在37 度水浴箱內,輕輕搖動試管,取岀試管后立即吸取試管內紅細胞懸液放在顯微 鏡下觀察結果。抗人球卡交叉配血【實驗原理】微柱凝膠測試法基于生物化學凝膠過濾技術和離心技術及免 疫化學抗原抗體特異性反應。當紅細胞上的抗原與相應抗體反應時,通過抗 人球蛋口的橋聯(lián),紅細胞發(fā)生凝集。離心時凝集塊不能通過凝膠間隙而留在 凝膠上層,呈陽性反應。未凝集紅細胞離心時可通過凝膠間隙而沉積在凝膠 底部,呈陰性反應。【工作準備】1、將低離子稀釋液室溫平衡。準備樣本。
23、2、1%樣本紅細胞的制備:分別取病人和獻血者壓積紅細胞5ul懸浮于0.5ml 的低離子稀釋液中。【抗人球卡的準備】選擇配血抗人球卡(Liss/coombs卡),揭去封口錫紙(需要兒孔打開兒 孑L,可用剪刀剪),編上病人(主側)和獻血員(次測)姓名(或號碼)?!炯訕印?. 主側加入50ul獻血者細胞(1%), 25ul受血者血漿或血清。2. 次側加入50ul受血者細胞(1%), 25ul獻血者血漿或血清?!痉跤半x心】37°C孵育15分鐘。然后離心10分鐘(轉速1030rpm,機器已自動設定)【讀取結果】按達亞美卡圖示:主側(一),次側(一+),認為交義配血結果良好。【注意事項】1、加
24、樣時,每個病人都要更換加樣頭,避免病人間交叉污染;先病人后 獻血員,避免獻血員標本污染病人標本(或每次都更換加樣頭);加紅細胞和 血漿要在反應孔兩側壁上,避免主次側相互污染,影響結果判斷。2、加樣時,先加紅細胞,后加血清,否則會致假陰性。3、LISS溶液從冰箱取出后,室溫平衡10分鐘,否則會致冷凝集。4、若對次側弱凝集可疑,可補做病人自身紅細胞對照,即只加病人1% 紅細胞懸液50 uh其他操作同上。5、10分鐘離心過程不能人為中斷,否則本次實驗結果無效。孵育、離心 時間不能隨意縮短或延長。6、結果判斷時,溶血也應視為配血不合或由于其他原因造成,不能忽視。凝聚胺交叉配血【原理】紅細胞表面帶有大量
25、的負電荷,以避免其產(chǎn)生自發(fā)性聚集,當紅細胞懸浮在 電解質時,陽離子會被紅細胞的負電荷所吸引,此時紅細胞則被擴散的雙層離子 云所圍繞,而形成Zeta電位,Zeta電位決定紅細胞之間的排斥作用。凝聚胺技 術首先利用低離子溶液(LIM),降低介質的離子強度,減少紅細胞周圉的陽離子 云,以促進紅細胞和血清(血漿)中的抗體結合。其后,加入凝聚胺溶液,它是 一種高價陽離子多聚物,肝素中和劑,溶解后能產(chǎn)生很多正電荷,可以中和紅細 胞表面帶有的負電荷,使紅細胞Zeta電位降低,縮短紅細胞表面的距離,使紅 細胞產(chǎn)生非特異性的凝聚。最后,加入懸浮液(Resuspending) , (Resuspending) 具
26、有中和凝聚胺的作用,使正常的紅細胞非特異性凝聚散開,試驗結果為陰性, 但如果紅細胞被相應的抗體致敬,則會被凝聚胺凝結,凝集就不會散開,試驗結 果為陽性。【試驗步驟】1取二支試管,標主次側,主側管加病人的血清(血漿)2滴,加供血 者35%紅細胞懸液(洗滌不洗滌均可)1滴,次管反之。2、各加LIM0.7ml,混合均勻后,再各加Polybrene溶液2滴,并混合均勻。3、用BASO血庫專用離心機lOOOg離心力,離心10秒(若為普通離心機, 離心條件為:3400rpm,離心10秒),然后把上清液倒掉,不要瀝干,讓管底 殘留約0.1ml液體。4、輕輕搖動試管,目測紅細胞有無凝集,如無凝集,則必須重做。5、最后加入Resuspending 2滴,輕輕搖動試管混合并同時觀察結果。如 果在30秒1分鐘內凝集散開,代表是由Polybrene引起的非特異性聚集, 配血結果相合,如凝集不散開,則為紅細胞抗原抗體結合的特異性反應,配 血結果不相合。如反應可疑,可進一步倒在玻片上用顯微鏡觀察?!咀⒁馐马棥?、可以用含EDTA之血漿代替血清。2、若病人血清(血漿)含肝素,如洗腎患者
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