埃博拉出血熱標(biāo)本采集、包裝、運(yùn)輸與檢測(cè)

1、CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION中國(guó)疾病預(yù)防控制中心 2014年12月CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 埃博拉出血熱(Ebola hemorrhagic fever)是由埃博拉病毒(Ebola virus)引起的一種急性傳染病。l 人主要通過(guò)接觸病人或感染動(dòng)物的體液、分泌物和排泄物等而感染。l 臨床表現(xiàn)主要為突起發(fā)熱、出血和多臟器損害，病死率可高達(dá)50%-90%。l 本病潛伏期為221天，通常為810天。l 2014年，在幾內(nèi)亞、利比里亞和塞拉利昂等西非國(guó)家發(fā)生

2、歷史上最嚴(yán)重的埃博拉出血熱暴發(fā)疫情。CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 為指導(dǎo)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)工作人員對(duì)埃博拉出血熱相關(guān)標(biāo)本的采集、包裝、運(yùn)輸和檢測(cè)工作，保證生物安全。CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 埃博拉出血熱留觀、疑似或確診病例：l標(biāo)本采集的個(gè)人防護(hù)生物安全要求l包裝的要求l運(yùn)輸?shù)姆绞絣實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 中華人民共和國(guó)傳染病防治法l 病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物

3、安全管理?xiàng)l例l 可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運(yùn)輸管理規(guī)定l 衛(wèi)生部人間傳染的病原微生物名錄l 國(guó)際民航組織危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則l 中國(guó)疾病預(yù)防控制中心關(guān)于規(guī)范埃博拉出血熱病例標(biāo)本接收和檢測(cè)結(jié)果反饋等工作的通知中疾控應(yīng)急發(fā)2014322號(hào)CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 應(yīng)遵守醫(yī)院感染管理規(guī)范和病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例等相關(guān)生物安全規(guī)定。l 在標(biāo)準(zhǔn)預(yù)防的基礎(chǔ)上，應(yīng)采取避免飛沫和接觸感染的預(yù)防措施。CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl

4、采樣人員應(yīng)該接受埃博拉病人采血規(guī)程的培訓(xùn)l培訓(xùn)內(nèi)容lPPE的規(guī)范使用l采血要求及注意事項(xiàng)l采血時(shí)，需 2名采血人員同時(shí)在場(chǎng)CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 工作服l 一次性工作帽l 雙層醫(yī)用手套l 防滲透防護(hù)服(連帽，猴服)l 醫(yī)用防護(hù)口罩(N95及以上)+護(hù)目鏡或防護(hù)面屏 或普通外科口罩+正壓頭盔l 工作鞋+一次性防水靴套 或長(zhǎng)筒膠靴l 防滲漏防護(hù)服(反穿式)CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl應(yīng)提前將所有采血物品準(zhǔn)備齊全，并配備：n洗手的設(shè)施n備用手套n消毒液

5、n銳器盒CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl一般發(fā)病后2周內(nèi)，可在患者血標(biāo)本中檢測(cè)到病毒核酸和抗原，發(fā)病后310天的標(biāo)本核酸和抗原的檢出率高。l留觀病例、疑似病例診斷埃博拉病毒感染應(yīng)采集發(fā)病3天以后的血標(biāo)本。CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl用分離膠無(wú)菌真空促凝管采集靜脈血，每管3mll留觀病例、疑似病例采集4管n2管送指定的具有埃博拉出血熱檢測(cè)資質(zhì)的實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行檢測(cè)n2管保存于樣本采集單位或所在省級(jí)疾控中心CHINESE CENTER FOR DISEASE CON

6、TROL AND PREVENTION采集采集后的處理方式后的處理方式l 應(yīng)用封口膜封閉管口，消毒后由協(xié)助者將病人信息填寫(xiě)在采血管上，放入試管架中l(wèi) 退入潛在污染區(qū)，將采血管放入50ml離心管內(nèi)l 離心管消毒后，放入第二層包裝盡快送檢l 如不能立即送檢，則置于4下保存，填寫(xiě)標(biāo)本采集登記表保存方式保存方式l 全血采用冷藏運(yùn)輸，血清采用冷凍運(yùn)輸CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION恢復(fù)期標(biāo)本采集l 確診病例采集恢復(fù)期血標(biāo)本2份，每份2管l 采集時(shí)間應(yīng)間隔不少于48小時(shí)，送國(guó)家疾控中心病毒病所進(jìn)行埃博拉病毒相關(guān)檢測(cè)，用于指導(dǎo)病例管理l 恢復(fù)

7、期血標(biāo)本，并不限定必須于出院前采集l 可采集發(fā)病2周后或出院(死亡)前標(biāo)本CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 采取A類包裝，符合UN2814要求l 容器或包裝材料應(yīng)達(dá)到國(guó)際民航組織危險(xiǎn)物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則（Doc9284包裝說(shuō)明PI602）規(guī)定的A類包裝標(biāo)準(zhǔn)CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION三層包裝三層包裝l 第一層為自封袋或50ml離心管l 第二層為防水、防漏的安全殼容器l 第三層為運(yùn)輸包裝包裝要求包裝要求l 樣本應(yīng)用吸水紙等包裹，固定在自封袋或離心管內(nèi)l 在

8、堅(jiān)固、防水、防漏的第二層安全殼容器中，用吸水紙等填充物將內(nèi)有標(biāo)本的自封袋或離心管固定好，裝入第三層包裝l 第二層和第三次包裝之間應(yīng)放置冰排等制冷材料l 安全殼容器和外包裝須與IATA危險(xiǎn)物品條例包裝制度650相符合CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION包裝中的注意事項(xiàng)包裝中的注意事項(xiàng)l 用0.5%有效氯消毒50ml離心管表面，并在潛在污染區(qū)放入第二層包裝l 第二層包裝用0.5%有效氯浸泡消毒15min后，擦拭干凈帶入清潔區(qū)，放入外層包裝CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION樣

9、品清單樣品清單l 填寫(xiě)標(biāo)本說(shuō)明兩份，寫(xiě)明標(biāo)本的基本信息、運(yùn)送者及接收者地址等l 將標(biāo)本說(shuō)明密封在塑料袋里，用膠布分別粘貼于最外層包裝的內(nèi)側(cè)和外側(cè)l 標(biāo)本相關(guān)信息需留檔以便查驗(yàn)，方便實(shí)驗(yàn)室操作人員查對(duì)標(biāo)本數(shù)量CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION收取標(biāo)本收取標(biāo)本l 由醫(yī)院所在地的疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)到醫(yī)院收取標(biāo)本。標(biāo)本運(yùn)輸之前，應(yīng)按相關(guān)生物安全規(guī)定，與樣本接收單位生物安全管理部門(mén)聯(lián)系，辦理相關(guān)手續(xù)。l 運(yùn)送日期確定后，立即將運(yùn)送時(shí)間和運(yùn)輸方式通知接收單位，做好接收準(zhǔn)備。中國(guó)中國(guó)疾控中疾控中心檢測(cè)的標(biāo)心檢測(cè)的標(biāo)本本運(yùn)輸流程運(yùn)輸流程CHINES

10、E CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONCHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION生物安全要求生物安全要求l 由專人專車運(yùn)送，運(yùn)送人員須有相關(guān)資質(zhì)，且不得少于兩人l 申請(qǐng)單位對(duì)與運(yùn)送人員進(jìn)行埃博拉病毒相關(guān)的生物安全培訓(xùn)l 在運(yùn)送過(guò)程中采取相應(yīng)的防護(hù)措施l 運(yùn)輸前仔細(xì)檢查容器，要符合安全要求l 按照規(guī)定進(jìn)行標(biāo)本運(yùn)輸前的包裝和送達(dá)后的開(kāi)啟標(biāo)本運(yùn)輸標(biāo)本運(yùn)輸?shù)纳锇踩蟮纳锇踩驝HINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION省市間標(biāo)本運(yùn)輸省市間

11、標(biāo)本運(yùn)輸l 跨省、自治區(qū)、直轄市運(yùn)輸疑似病例或留觀病例樣本時(shí)，應(yīng)當(dāng)將申請(qǐng)材料提交至運(yùn)輸出發(fā)地省級(jí)衛(wèi)生計(jì)生行政部門(mén)進(jìn)行初審l 對(duì)符合要求的，省級(jí)衛(wèi)生計(jì)生行政部門(mén)應(yīng)當(dāng)在3個(gè)工作日內(nèi)出具初審意見(jiàn)，并將初審意見(jiàn)和申報(bào)材料上報(bào)衛(wèi)計(jì)委審批l 衛(wèi)計(jì)委應(yīng)當(dāng)自收到申報(bào)材料后3個(gè)工作日內(nèi)做出是否批準(zhǔn)的決定l 符合法定條件的，頒發(fā)準(zhǔn)運(yùn)證書(shū)省市省市間間BSL-3BSL-3實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本運(yùn)輸流程實(shí)驗(yàn)室標(biāo)本運(yùn)輸流程CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONWHOWHO、美國(guó)、美國(guó)CDCCDC等其他國(guó)家及地區(qū)關(guān)于等其他國(guó)家及地區(qū)關(guān)于標(biāo)本的采集、包裝和標(biāo)本的采集、包裝和運(yùn)輸

12、的文件運(yùn)輸?shù)奈募 WHO的Laboratory Guidance for the Diagnosis of Ebola Virus Disease Interim Recommendations2014.9.19l 英國(guó)衛(wèi)生署的PHE Microbiology Services VHF Sample Testing Queries2014.9l 美國(guó)CDC的Interim Guidance for Specimen Collection, Transport, Testing, and Submission for Persons Under Investigation for Ebola

13、Virus Disease in the United States2014.10.20CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 推薦用EDTA塑料采血管采集全血，最低量4mll 保存聚茴香腦硫酸鈉(SPS)或檸檬酸采血管中,或促凝采血管也可以l 尿液標(biāo)本也是可以的，但需要盡快檢測(cè)。l 死亡者或無(wú)法采血的兒童采集咽拭子CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl WHO和美國(guó)CDC包裝形式均與我國(guó)一致，運(yùn)輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的容器或包裝材料應(yīng)當(dāng)達(dá)到國(guó)際民航組織危險(xiǎn)

14、物品航空安全運(yùn)輸技術(shù)細(xì)則（Doc9284包裝說(shuō)明PI602）規(guī)定的A類包裝標(biāo)準(zhǔn)CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl WHO關(guān)于運(yùn)輸主要依據(jù)Guidance on regulations for the Transport of Infectious Substances2013.1.1，如果本國(guó)沒(méi)有實(shí)驗(yàn)室可以做檢測(cè)可將標(biāo)本寄到Laboratory Guidance for the Diagnosis of Ebola Virus Disease Interim Recommendations2014.9.19所寫(xiě)的實(shí)驗(yàn)室。l 美國(guó)

15、則按照各州的規(guī)定運(yùn)輸標(biāo)本CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONWHO發(fā)布的安全采集埃博拉出血熱疑似患者血液標(biāo)本W(wǎng)HO發(fā)布的如何安全運(yùn)輸埃博拉出血熱疑似患者血液標(biāo)本的流程 （國(guó)內(nèi)運(yùn)輸）CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION檢測(cè)方法1. 病毒核酸檢測(cè)方法 （1）實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法 （2）一步法常規(guī)RT-PCR方法2. 埃博拉病毒抗原抗體檢測(cè)方法 （1）埃博拉病毒抗原檢測(cè)方法（雙抗體夾心法ELISA、膠體金快診） （2）埃博拉病毒IgM抗體檢測(cè)（抗體捕捉法ELISA） （3

16、）埃博拉病毒IgG抗體檢測(cè)方法（間接法ELISA）CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTIONl 埃博拉病毒的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)相關(guān)活動(dòng)嚴(yán)格按照人間傳染的病原微生物名錄的要求，在相應(yīng)的生物安全級(jí)別實(shí)驗(yàn)室開(kāi)展。n 病毒培養(yǎng)在BSL-4實(shí)驗(yàn)室n 動(dòng)物感染實(shí)驗(yàn)在ABSL-4實(shí)驗(yàn)室n 未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在BSL-3實(shí)驗(yàn)室n 滅活材料的操作在BSL-2實(shí)驗(yàn)室l 按照病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例等相關(guān)規(guī)定要求，做好生物安全工作。CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 埃博拉病毒檢測(cè)機(jī)構(gòu)應(yīng)將所有陽(yáng)性和部分陰性血清標(biāo)本送中國(guó)疾病預(yù)防控制中心病毒病所進(jìn)行復(fù)核檢測(cè)。 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果應(yīng)及時(shí)反饋標(biāo)本送檢單位，并盡快上報(bào)上級(jí)主管部門(mén)。CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION 埃博拉病毒相關(guān)感染性標(biāo)本的滅活，應(yīng)在BSL-3實(shí)驗(yàn)室級(jí)生物安全柜內(nèi)進(jìn)行。 CHINESE CENTER FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION（1 1） TRI