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文檔簡介
1、第1頁/共26頁Solid Phase Extraction SPE And Solid phase Micro-Extraction SPME 準系列中,有很多項目,尤其是農藥項目的前處理普遍使用了固相萃取技術經典的真空固相萃取裝置 第2頁/共26頁SPESPE的分類及一般操作程序的分類及一般操作程序第3頁/共26頁課后思考題課后思考題第4頁/共26頁SPE的操作第5頁/共26頁SPE的操作第6頁/共26頁試樣20g加入內標,劇烈搖均后放置10min萃取丙酮15ml液-液萃?。弘姶艛嚢?min+15min;靜置分層(時間視情況而定)水300ml NaCl3g 正己烷3.5ml小心吸取獲得有機
2、相40攝氏度,氮氣吹干乙酸乙酯溶解GC/MS微量液-液萃取操作步驟第7頁/共26頁SPMESPME的發(fā)展歷史的發(fā)展歷史第8頁/共26頁SPMESPME裝置裝置 裝置外型如一只微量進樣器,由手柄(holderholder)和萃取頭或纖維頭(fiberfiber)兩部分構成,萃取頭是一根1 1長,涂有吸附劑(萃取相)的熔融纖維,接在不銹鋼絲上,外套細不銹鋼管(保護纖維不被折斷),纖維頭在鋼管內可伸縮或進出,細不銹鋼管可穿透橡膠或塑料墊片進行取樣或進樣。手柄用于安裝或固定萃取頭,可永遠使用第9頁/共26頁SPEMSPEM原理原理Fiber SPME第10頁/共26頁Fiber-SPME-HPLC第1
3、1頁/共26頁課后思考題課后思考題 SPE、SPME與液-液萃取相比,有何優(yōu)點? 在應用上,有何局限第12頁/共26頁優(yōu)缺點第13頁/共26頁第14頁/共26頁第15頁/共26頁第16頁/共26頁第17頁/共26頁第18頁/共26頁圖示圖示【大腸菌群大腸菌群】123456平面凹面第19頁/共26頁大腸菌群測試片是一種預先制備好的培養(yǎng)基系統(tǒng),含有VRB 培養(yǎng)基,冷水可溶性凝膠和TTC指示劑,可增強菌落計數效果。表面覆蓋的膠膜,可截留發(fā)酵乳糖的大腸菌群產生的氣體。培養(yǎng)結束后計數紅點周圍有氣泡的菌落為大腸菌群數。培養(yǎng)24h 2h后應立即計數,可目測、用標準菌落計數器、顯微鏡、或自動判讀儀來計數。紅色
4、有氣泡的菌落確認為大腸菌群數。培養(yǎng)圓形面積邊緣上及邊緣以外的菌落不作計數。當培養(yǎng)區(qū)域出現(xiàn)大量氣泡,大量不明顯小菌落或培養(yǎng)區(qū)呈暗紅色三種情況,表明大腸菌群的濃度較高,需要進一步稀釋樣品來獲得準確的讀數。第20頁/共26頁 3MTM快速涂抹棒(Quick Swab)干式取樣干式取樣 當待測表面潮濕時當待測表面潮濕時1. 標記每個涂抹棒2. 擰扭管子使球莖末端和涂抹棒管相連處分開3. 30度角緩慢并全面涂抹待測表面,每涂抹一次注意翻轉涂抹棒頭的方向4. 取樣后, 完整地把涂抹棒放回管中5. 用大拇指掰斷球莖中的紅色閥門, 聽到啪的一聲, 閥門打開, Leetheen 肉湯流入管中和浸濕涂抹棒6. 用
5、力擠壓球莖末端, 使Leetheen 肉湯流入管中7. 在實驗室里, 充分振蕩涂抹棒至少10分鐘, 使菌與涂抹棒分離8. 在管壁上擠擰出涂抹棒頭上的內容物, 按通常工業(yè)用標準方法處置棄去涂抹棒9. 小心地傾注管中的全部內容物到3M PetrifilmTM測試片上10. 按包裝內說明培養(yǎng)測試片第21頁/共26頁 3MTM快速涂抹棒(Quick Swab)濕式取樣濕式取樣 當待測表面干燥時當待測表面干燥時1. 標記每個涂抹棒4. 擰扭管子使球莖末端和涂抹棒管相連處分開5. 30度角緩慢并全面涂抹待測表面,每涂抹一次注意翻轉涂抹棒頭的方向6. 取樣后, 完整地把涂抹棒放回管中2. 用大拇指掰斷球莖中
6、的紅色閥門, 聽到啪的一聲, 閥門打開, Leetheen 肉湯流入管中和浸濕涂抹棒3. 用力擠壓球莖末端, 使Leetheen 肉湯流入管中7. 在實驗室里, 充分振蕩涂抹棒至少10分鐘, 使菌與涂抹棒分離8. 在管壁上擠擰出涂抹棒頭上的內容物, 按通常工業(yè)用標準方法處置棄去涂抹棒9. 小心地傾注管中的全部內容物到3M PetrifilmTM測試片上10. 按包裝內說明培養(yǎng)測試片第22頁/共26頁 Hygicult 瓊脂載片是一塊兩面覆有為特定細菌生長的瓊脂培養(yǎng)基的塑料載片并根據歐盟(EU)相關法規(guī)而設計,用來檢測各類表面、原材料、食品原料中的微生物(菌落總數、大腸菌群、霉菌和酵母菌)存在狀況(其使用不會影響被采樣本的質量)。該培養(yǎng)基上另含有吐溫和卵磷脂以中和殘留的消毒劑對微生物生長的影響。 Hygicult瓊脂載片檢測微生物介紹TPC:菌落總數 CF:大腸菌群 E:大腸桿菌 Y&F:霉菌和酵母第23頁/共26頁 操作步驟接種培養(yǎng)判讀第一步第二步第三步第
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