中藥常規(guī)檢驗(yàn)

1、編輯編輯pptppt1 1中藥的檢驗(yàn)化化 驗(yàn)驗(yàn) 室室20182018年年6 6月月編輯編輯pptppt2 2中藥材及其炮制品的常用檢查一般檢查限量檢查雜質(zhì)雜質(zhì)水分水分總灰分總灰分酸不溶灰分酸不溶灰分 浸出物浸出物 二氧化硫二氧化硫 含量測(cè)定含量測(cè)定 黃曲霉素黃曲霉素編輯編輯pptppt3 3雜質(zhì)的來源一是由中藥材原料中帶入； 二是在生產(chǎn)制備過程中引入； 三是貯存過程中受外界條件的影響，制劑的理化性質(zhì)改變而產(chǎn)生。 編輯編輯pptppt4 4雜質(zhì)藥材中混存的雜質(zhì)系指下列各類物質(zhì)： 一、來源與規(guī)定相同，但其性狀或部位與規(guī)定不符； 二、來源與規(guī)定不同的物質(zhì)； 三、無機(jī)雜質(zhì)，如砂石、泥塊、塵土等。 編輯

2、編輯pptppt5 5雜質(zhì)檢查法(通則2301)檢查方法1. 取規(guī)定量的供試品，攤開，用肉眼或放大鏡（510倍）觀察，將雜質(zhì)揀出；如其中有可以篩分的雜質(zhì)，則通過適當(dāng)?shù)暮Y，將雜質(zhì)分出。 2. 將各類雜質(zhì)分別稱重，計(jì)算其在供試品中的含量（%）。 編輯編輯pptppt6 6【注意】1.藥材中混存的雜質(zhì)如與正品相似，難以從外觀鑒別時(shí)，可稱取適量，進(jìn)行顯微、化學(xué)或物理鑒別試驗(yàn)，證明其為雜質(zhì)后，計(jì)入雜質(zhì)重量中。 2.個(gè)體大的藥材，必要時(shí)可破開，檢查有無蟲蛀、霉?fàn)€或變質(zhì)情況。 3.雜質(zhì)檢查所用的供試品量，除另有規(guī)定外，按藥材取樣法稱取。雜質(zhì)檢查法(通則2301)編輯編輯pptppt7 7水分測(cè)定法（通則08

3、32）第一法（費(fèi)休氏法）適用于多種有機(jī)和無機(jī)物中含水的測(cè)定。第二法(烘干法) 適用于不含或少含揮發(fā)性成分的藥品。第三法(減壓干燥法) 適用于含有揮發(fā)性成分的貴重藥品。第四法(甲苯法) 適用于含揮發(fā)性成分的藥品。第五法（氣相色譜法） 適用于中藥制劑中微量水分的測(cè)定。編輯編輯pptppt8 8甲苯法測(cè)定水分 A 為500mL的短頸圓底燒瓶， B 為水分測(cè)定管； C 為直形冷凝管，外管長40cm。 使用前，全部儀器應(yīng)清潔，并置烘箱中烘干。編輯編輯pptppt9 9甲苯法測(cè)定水分 取供試品適量（約相當(dāng)于含水量14ml），精密稱定，置A瓶中,加甲苯約200ml，必要時(shí)加入干燥、潔凈的沸石或玻璃珠數(shù)粒，將

4、儀器各部分連接，自冷凝管頂端加入甲苯，至充滿B管的狹細(xì)部分。將A瓶置電熱套中或用其他適宜方法緩緩加熱,待甲苯開始沸騰時(shí)，調(diào)節(jié)溫度，使每秒鐘餾出2滴。待水分完全餾出，即測(cè)定管刻度部分的水量不再增加時(shí),將冷凝管內(nèi)部先用甲苯?jīng)_洗, 再用飽蘸甲苯的長刷或其他適宜的方法，將管壁上附著的甲苯推下，繼續(xù)蒸餾5分鐘，放冷至室溫，拆卸裝置，如有水黏附在B管的管壁上，可用蘸甲苯的銅絲推下，放置，使水分與甲苯完全分離（可加亞甲藍(lán)粉末少量，使水染成藍(lán)色，以便分離觀察）。檢讀水量，并計(jì)算供試品中的含水量（%）。 編輯編輯pptppt1010灰分測(cè)定法（通則02302）總灰分：中藥經(jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱一?，稱定重量計(jì)

5、算結(jié)果。酸不溶性灰分：中藥經(jīng)高溫?zé)胱频玫降目偦曳旨酉←}酸處理，得到不溶于稀鹽酸的灰分，稱為酸不溶性灰分。 編輯編輯pptppt1111總灰分測(cè)定法 稱取供試品23g（如需測(cè)定酸不溶性灰分，可取供試品35g），置熾灼至恒重的坩堝中，稱定重量（準(zhǔn)確至0.01 g），緩緩熾熱，注意避免燃燒，至完全炭化時(shí)，逐漸升高溫度至500600，使完全炭化并至恒重，根據(jù)殘?jiān)亓浚?jì)算供試品中總灰分的含量（%）。編輯編輯pptppt1212酸不溶性灰分測(cè)定法 供試品先按總灰分測(cè)定的方法測(cè)定其總灰分，然后取所得的灰分，在坩堝中注意加入稀鹽酸約10ml，用表面皿覆蓋坩堝，置水浴上加熱10分鐘，表面皿用熱水5ml沖洗，洗

6、液并入坩堝中，用無灰濾紙濾過，坩堝內(nèi)的殘?jiān)盟从跒V紙上，并洗滌至洗液不顯氯化物反應(yīng)為止。濾渣連同濾紙移至同一坩堝中，干燥，熾灼至恒重。根據(jù)殘?jiān)亓?，?jì)算供試品中含酸不溶性灰分的含量（%）。編輯編輯pptppt1313灰分測(cè)定的注意事項(xiàng)1. 測(cè)定前先將供試品稱取適量粉碎，使其能通過2號(hào)篩，將粉末混合均勻后再取樣。2. 如供試品不易灰化，可將坩堝放冷，加熱水或10%硝酸銨溶液2ml；使殘?jiān)鼭駶?，然后置水浴上蒸干，得到的殘?jiān)侔瓷厦嫠f的方法熾灼至坩堝內(nèi)容物完全灰化。編輯編輯pptppt1414浸出物測(cè)定法（通則2201） 浸出物分為水溶性、醇溶性、揮發(fā)性醚三種方法；同時(shí)水溶性和醇溶性又分為冷浸法

7、和熱浸法兩種。其方法相同，不同的是使用的溶劑；水溶性使用的是水；醇溶性除另有規(guī)定外，以各品種項(xiàng)下規(guī)定濃度的乙醇代替水溶劑。 1. 冷浸法 樣品加水100ml，靜置24小時(shí)后，取續(xù)濾液20ml，水浴蒸干，干燥3小時(shí)，放冷，稱定重量。 2. 熱浸法 樣品加溶劑50ml，稱定重量，靜置1小時(shí)后，連接冷凝管，加熱回流1小時(shí)。放冷，補(bǔ)足重量，取續(xù)濾液25ml，水浴蒸干，干燥3小時(shí)，放冷，稱定重量。編輯編輯pptppt1515二氧化硫殘留量測(cè)定法（通則2331）T為什么要測(cè)定？T方法T硫磺具有漂白、增艷、防蟲等作用，某些中藥材在加工過程中有用硫磺熏蒸的習(xí)慣，殘留的S02可能影響人體健康。T從2005版藥典

8、開始規(guī)定，中藥材不再允許使用硫磺熏蒸，并要求對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)。編輯編輯pptppt1616二氧化硫殘留量測(cè)定法（2015）A 為1000ml兩頸圓底燒瓶；B 為豎式回流冷凝管；C 為（帶刻度）分液漏斗；D 為連接氮?dú)饬魅肟?；E 為二氧化硫氣體導(dǎo)出口。另準(zhǔn)備電熱套及高濃度氮。 編輯編輯pptppt1717 取藥材或飲片細(xì)粉約10g，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300-400ml，連接回流冷凝管以及刻度分液漏斗，并給水。在冷凝管的上端E口處連接導(dǎo)氣管，將導(dǎo)氣管插入100ml錐形瓶底部。錐形瓶內(nèi)加3%過氧化氫溶液50ml作為吸收液，使用前，加3滴甲基紅乙醇溶液指示劑，并用0.01mol/L氫氧化鈉滴

9、定液滴定至黃色 。開通氮?dú)?，打開分液漏斗活塞，加入6mol/L鹽酸溶液10ml，立即加熱兩頸圓底燒瓶內(nèi)的溶液至沸，并保持微沸；1.5小時(shí)后，停止加熱。放冷后，用氫氧化鈉滴定液滴定，至黃色持續(xù)20秒鐘不褪，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。 編輯編輯pptppt1818A為供試品消耗氫氧化鈉滴定液的體積，ml；B為空白消耗氫氧化鈉滴定液的體積，ml；C為氫氧化鈉滴定液濃度，mol/L； 0.032為每1ml氫氧化鈉滴定液（1mol/L）相當(dāng)?shù)亩趸虻馁|(zhì)量，g。 W為供試品的重量，g；供試品中二氧化硫殘留量（mg/g）=WCBA10032. 0)(6編輯編輯pptppt1919含量（高效液相）測(cè)定法

10、（通則0512）T為什么要測(cè)定？為什么要測(cè)定？T方法簡述方法簡述T注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)編輯編輯pptppt2020中藥組成復(fù)雜，產(chǎn)生療效的不是某單一成分，檢測(cè)任何一種活性成分均不能反映中藥的整體療效。但是借鑒化藥質(zhì)量控制模式，測(cè)定某一味藥味的有效成分、活性成分、指標(biāo)性成分的含量的方法，對(duì)于控制中藥質(zhì)量起著不可替代的重要作用。通過測(cè)定中藥中有效成分、毒性成分或某些指標(biāo)性成分的含量來衡量其生產(chǎn)工藝的穩(wěn)定性和中藥材的質(zhì)量優(yōu)劣，以保證中藥的質(zhì)量，達(dá)到臨床用藥安全、有效的目的。 檢查含量的必要性編輯編輯pptppt2121 本法是將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、 緩沖劑等作為流動(dòng)相, 用泵將流

11、動(dòng)相壓入裝有填充劑的色譜柱, 注入供試品, 經(jīng)流動(dòng)相帶入柱內(nèi), 用記錄儀記錄色譜圖, 從而達(dá)到定性及定量的目的。本法應(yīng)用范圍比氣相色譜廣, 只要樣品能制成溶液, 就可進(jìn)行分析, 尤其是中藥的含量測(cè)定, 更為適用。 高效液相測(cè)定法的原理編輯編輯pptppt22221、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 根據(jù)中國藥典項(xiàng)下對(duì)各品種的規(guī)定，選擇色譜柱、流動(dòng)相、檢測(cè)波長；并核對(duì)檢測(cè)后的理論板數(shù)。2、對(duì)照品溶液的制備 根據(jù)中國藥典項(xiàng)下對(duì)各品種的規(guī)定，按其要求完成對(duì)照品的稱重、配制。3、供試品溶液的制備 根據(jù)中國藥典項(xiàng)下對(duì)各品種的規(guī)定， 按其要求完成樣品的粉碎、稱重、提取、制備。4 測(cè)定法 分別將對(duì)照品與供試品溶液按

12、中國藥典要求注入色譜儀，通過所得數(shù)據(jù)用外標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算，得出結(jié)果并打印保存圖譜。高效液相測(cè)定法方法簡介編輯編輯pptppt2323高效液相測(cè)定法注意事項(xiàng)1、貯液器：盡可能使用HPLC的溶劑和試劑。含有緩沖鹽和非HPLC的流動(dòng)相一定要通過0.5um的過濾器。改變流動(dòng)相時(shí)應(yīng)防止交叉污染，陳舊的流動(dòng)相和用久了的試劑瓶應(yīng)定期廢棄，防止生長微生物和組分改變。貯器內(nèi)壁定期清洗，里面的附件要經(jīng)常更換。2、泵： 密封墊圈是最易磨損的部件。密封墊圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。最好3個(gè)月?lián)Q一次墊圈。要注意防止因泵堵塞造成的壓力過高而損壞柱塞桿或燒壞電機(jī)。延長墊圈壽命的措施（1）每次把泵的緩沖液洗干凈，防止鹽沉積，泵

13、要浸在無緩沖液的溶液或有機(jī)溶劑中（2）用HPLC級(jí)試劑編輯編輯pptppt24243、進(jìn)樣器：停機(jī)后要用溶劑沖洗干凈進(jìn)樣器內(nèi)的殘留的樣品和緩沖鹽，防止無機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥轉(zhuǎn)子面磨損或阻塞。嚴(yán)禁用尖針頭進(jìn)樣。4、柱：防止柱性能下降的措施：（1）溶劑的化學(xué)腐蝕性不能太強(qiáng)；（2）避免微粒在柱頭沉降；（3）泵上要裝壓力限制器，防止壓力過高沖擊過大；（4）流動(dòng)相ph7時(shí)用大粒度同種填料作預(yù)柱（5）柱頭加燒結(jié)不銹鋼濾片，需要時(shí)加保護(hù)柱。采用正確的制備樣品方法和經(jīng)常清洗柱也能延長壽命。 柱在不用時(shí)要保存好，要洗去緩沖液防止生長微生物。應(yīng)加入大于10的有機(jī)溶劑，將柱兩端用蓋擰緊，保持柱填料濕潤不造成裂縫

14、。5、檢測(cè)器：保持清潔，用后連同柱一起沖洗。提倡不定期用強(qiáng)溶劑反向沖洗檢測(cè)池（拆開柱）用脫氣流動(dòng)相，以防空氣泡卡在池內(nèi)。不用時(shí)不開燈。高效液相注意事項(xiàng)編輯編輯pptppt2525由色譜柱引起的故障及解決辦法故故 障障現(xiàn)現(xiàn) 象象解決辦法解決辦法過濾片阻塞壓力增高 N下降 峰形差倒柱沖洗或換過濾片柱頭塌陷峰分叉 N下降修補(bǔ)柱頭可恢復(fù)80%以上樣品阻塞高壓用能溶解樣品的溶劑沖洗柱強(qiáng)吸附的樣品N下降 保留減小強(qiáng)溶劑反沖編輯編輯pptppt2626黃曲霉毒素測(cè)定法（通則2351）為什么要測(cè)定？方法注意事項(xiàng)編輯編輯pptppt2727檢查黃曲霉素的必要性 中藥材采集后干燥或貯存不當(dāng)，或在制備和加工過程中處

15、理不善，可能污染在自然界普遍存在的黃曲霉而產(chǎn)生黃曲霉毒素，黃曲霉毒素具有極強(qiáng)的毒性和致癌性，故需對(duì)中藥材及中藥制劑中黃曲霉毒素含量進(jìn)行控制。編輯編輯pptppt2828黃曲霉的基本結(jié)構(gòu) 黃曲霉毒素是一類結(jié)構(gòu)相似的化合物，其基本結(jié)構(gòu)都有二呋喃和香豆素。黃曲霉毒素在紫外線照射下，都能了出熒光，根據(jù)熒光顏色、Rf值及結(jié)構(gòu)等不同，分別命名為B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q等。 B B1 1 B B2 2 G G1 1編輯編輯pptppt2929黃曲霉毒素測(cè)定法（2015） 本法系用高效液相色譜法（通則0512）測(cè)定藥材、飲片及制劑中的黃曲霉毒素（以黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2總量計(jì)），

16、除另有規(guī)定外，按下列方法測(cè)定。規(guī)定：B15g/kg，G2+G1+B2+B1的總量 10g/kg。黃曲霉毒素品種決明子柏子仁地龍胖大海肉豆蔻蓮子遠(yuǎn)志蜈蚣陳皮檳榔桃仁酸棗仁麥芽僵蠶大棗薏苡仁編輯編輯pptppt3030黃曲霉毒素測(cè)定法（2015）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-水（40：18：42）為流動(dòng)相，流速每分鐘0.8ml；采用柱后衍生法檢測(cè)，衍生溶液為0.05%的碘溶液（取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀釋至1000ml制成），衍生化泵流速每分鐘0.3ml，衍生化溫度70；以熒光檢測(cè)器檢測(cè)，激發(fā)波長ex=360nm（或365nm），發(fā)射波

17、長em=450nm。兩個(gè)相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。編輯編輯pptppt3131黃曲霉毒素測(cè)定法（2015）混合對(duì)照品溶液的制備 精密量取黃曲霉毒素混合標(biāo)準(zhǔn)品（黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2標(biāo)示濃度分別為1.0g/ml、0.3g/ml、1.0g/ml、0.3g/ml）0.5ml，置10ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，作為儲(chǔ)備液。精密量取儲(chǔ)備液1ml，置25ml量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，即得。編輯編輯pptppt3232黃曲霉毒素測(cè)定法（2015）供試品溶液的制備 取供試品粉末約15g（過二號(hào)篩），精密稱定，加入氯化鈉3g，置于均質(zhì)瓶中，精密加入70%甲醇溶液75ml，高速攪拌2分鐘（攪拌速度大于11000轉(zhuǎn)/分鐘），離心5分鐘（離心速度2500轉(zhuǎn)/分鐘），精密量取上清液15ml，置50ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，用微孔濾膜（0.45m）濾過，量取續(xù)濾液20.0ml，通過免疫親合柱（AflaT-estP）,流速每分鐘3ml，用水20ml洗脫，洗脫液棄去，使空氣進(jìn)入柱子，將水?dāng)D出柱子，再用適量甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，并用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。編輯編輯pptppt3333黃曲霉毒素測(cè)定法（2015）測(cè)定法 分別精密吸取上述混合對(duì)照品溶液5l、10l、15l、