《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》教學(xué)大綱（06版）

1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱（06版）一、課程基本信息1. 課程中文名稱：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)2. 課程類別：必修3. 適用專業(yè)：生物科學(xué)/園林4. 課程地位：專業(yè)基礎(chǔ)課5. 總學(xué)時(shí)：36學(xué)時(shí)6. 總學(xué)分： 7. 先修課程：無機(jī)及分析化學(xué)和有機(jī)化學(xué)二、課程目標(biāo)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物學(xué)科本科生的一門專業(yè)基礎(chǔ)課。在當(dāng)今有了驚人發(fā)展的生物學(xué)科中，生物化學(xué)是最活躍的分支學(xué)科之一。促使生物化學(xué)迅速發(fā)展的重要因素之一是新技術(shù)的開發(fā)。隨著生物化學(xué)的實(shí)驗(yàn)方法日趨專門化和復(fù)雜化，牽涉到生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)工作的領(lǐng)域也越來越多。生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)已經(jīng)成為生物技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)最基本的實(shí)驗(yàn)操作技能。通過本課程的學(xué)習(xí)使學(xué)生了解“生物大分子的分離和純化方法，糖

2、、蛋白質(zhì)、核酸及主要次生代謝產(chǎn)物的定性、定量和有關(guān)生物化學(xué)性質(zhì)的分析技術(shù)，酶活性測(cè)定、動(dòng)力學(xué)分析等”知識(shí)和技能，為專業(yè)課的學(xué)習(xí)和專業(yè)技能的培訓(xùn)奠定良好的基礎(chǔ)，并通過嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)要求和管理，誘導(dǎo)和培養(yǎng)學(xué)生將所學(xué)的知識(shí)和技能用于今后的社會(huì)實(shí)踐及創(chuàng)新的思維方法和動(dòng)手能力，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)?、?shí)事求是作風(fēng)和與人合作精神，使他們成為團(tuán)結(jié)合作，務(wù)實(shí)、創(chuàng)新的專門人才。三、課程內(nèi)容序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名稱學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)性質(zhì)實(shí)驗(yàn)類型主要設(shè)備配置1血糖的斐林法測(cè)定3必開設(shè)計(jì)分光光度計(jì)2種子粗脂肪的提取3選開設(shè)計(jì)索氏提取器3氨基酸分離雙向?qū)游龇?必開驗(yàn)證層析缸4樣品中總氮量的測(cè)定微量凱氏定氮法3必開設(shè)計(jì)凱氏定氮蒸餾器5蛋白質(zhì)的性質(zhì)蛋白質(zhì)及

3、氨基酸的呈色反應(yīng)3選開驗(yàn)證試管6蛋白質(zhì)的性質(zhì)蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)3選開驗(yàn)證試管7血清蛋白質(zhì)醋酸纖維薄膜電泳3必開驗(yàn)證醋酸纖維薄膜、層析缸8酶的特性3必開驗(yàn)證水浴、試管9植物組織中過氧化氫酶活力測(cè)定3選開設(shè)計(jì)酸式滴定管10底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響米氏常數(shù)的測(cè)定3必開驗(yàn)證堿式滴定管11酶的提取、分離、純化及其活力測(cè)定3選開綜合分光光度計(jì)12核酸濃度測(cè)定-紫外線（UV）吸收法3必開設(shè)計(jì)紫外分光光度計(jì)13核酸的增色效應(yīng)3選開設(shè)計(jì)水浴、紫外分光光度計(jì)14氨基移換反應(yīng)血液中轉(zhuǎn)氨酶活力的測(cè)定3必開設(shè)計(jì)分光光度計(jì)15維生素C含量的測(cè)定3必開設(shè)計(jì)紫外分光光度計(jì)16實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)及操作考試3必開綜合實(shí)驗(yàn)性質(zhì)：必開/選開

4、；實(shí)驗(yàn)類型：驗(yàn)證、設(shè)計(jì)、綜合、研究。四、教學(xué)方法進(jìn)入本課程的學(xué)生必需嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則和紀(jì)律，認(rèn)真對(duì)待每一次實(shí)驗(yàn)，做好實(shí)驗(yàn)課前的預(yù)習(xí)，完成預(yù)習(xí)報(bào)告；仔細(xì)推敲、認(rèn)真操作、細(xì)心觀察，真實(shí)記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果并完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。鼓勵(lì)學(xué)生對(duì)已有實(shí)驗(yàn)提出質(zhì)疑，按照自己的思路設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)或參與實(shí)驗(yàn)教改，以活躍氣氛，啟迪思維。將利用黑板和多媒體教學(xué)手段講解實(shí)驗(yàn)的基本原理、方法及有關(guān)儀器的使用方法。五、課程考核（黑體小四號(hào)）考查六、教材與參考書（黑體小四號(hào)）1、教材：王秀奇、秦淑媛等編 基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)高等教育出版社，2003.62、主要參考書：（1）戴玉錦主編 生物化學(xué)（實(shí)驗(yàn)部分）高等教育出版社，1992.10（2）趙永芳

5、主編 生物化學(xué)技術(shù)原理及應(yīng)用科學(xué)出版社，2002.7七、其它序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、?shí)驗(yàn)要求和實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目血糖的斐林法測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆誇olin-Wu法測(cè)定血糖含量的原理和方法。實(shí)驗(yàn)要求測(cè)定血糖含量實(shí)驗(yàn)內(nèi)容無蛋白血濾液的制備；血糖的測(cè)定2實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目種子粗脂肪的提取實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私忤b別種子品質(zhì)的指標(biāo)及方法實(shí)驗(yàn)要求掌握測(cè)定脂肪的含量的方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容用索氏提取瓶提取種子中的脂肪；計(jì)算含量3實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目氨基酸分離雙向?qū)游龇▽?shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆辗峙鋵游龇蛛x技術(shù)的原理。實(shí)驗(yàn)要求用雙向?qū)游龇ǚ治龌旌习被針悠返某煞?。?shí)驗(yàn)內(nèi)容以濾紙及其結(jié)合水作為固定相，以有機(jī)溶劑作為流動(dòng)相，分離混合氨基酸樣品，并鑒定其成分。4實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目樣品

6、中總氮量的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆談P氏定氮儀的使用方法及凱氏定氮法測(cè)定樣品總氮量的原理。實(shí)驗(yàn)要求以魚粉為樣品，用凱氏定氮法測(cè)定總氮量。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容用魚粉作實(shí)驗(yàn)樣品，濃H2SO4消化魚粉，將有機(jī)氮轉(zhuǎn)化成無機(jī)氮；用凱氏定氮儀測(cè)出該樣品中的總氮量。5實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目蛋白質(zhì)的性質(zhì)蛋白質(zhì)及氨基酸的呈色反應(yīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獾鞍踪|(zhì)和某些氨基酸的呈色反應(yīng)原理實(shí)驗(yàn)要求掌握幾種鑒定蛋白質(zhì)和氨基酸的方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容雙縮脲反應(yīng)；茚三酮反應(yīng)；黃色反應(yīng)；考馬斯亮藍(lán)反應(yīng)6實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目蛋白質(zhì)的性質(zhì)蛋白質(zhì)的沉淀反應(yīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獾鞍踪|(zhì)變性與沉淀的關(guān)系實(shí)驗(yàn)要求掌握沉淀蛋白質(zhì)的幾種方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容蛋白質(zhì)的鹽析；重金屬離子沉淀蛋白質(zhì)；某些有機(jī)酸沉淀蛋白質(zhì)；有機(jī)溶劑沉淀

7、蛋白質(zhì)；乙醇引起的變性與沉淀7實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目血清蛋白質(zhì)醋酸纖維薄膜電泳實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶W(xué)習(xí)醋酸纖維薄膜電泳的操作技術(shù)，了解電泳技術(shù)的基本原理實(shí)驗(yàn)要求掌握測(cè)定人血清中各種蛋白質(zhì)的相對(duì)含量的方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容儀器與薄膜的準(zhǔn)備；電泳；定量8實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目酶的特性實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饷傅奶匦詫?shí)驗(yàn)要求了解影響酶活力的因素實(shí)驗(yàn)內(nèi)容酶的專一性；溫度對(duì)酶活力的影響；PH對(duì)酶活力的影響；酶的活化及抑制9實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目植物組織中過氧化氫酶活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私膺^氧化氫酶在生物體中的作用原理實(shí)驗(yàn)要求掌握酶活力測(cè)定的方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容過氧化氫酶活力測(cè)定10實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響米氏常數(shù)的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私獾孜餄舛葘?duì)酶促反應(yīng)的影響。實(shí)驗(yàn)要求掌握測(cè)定米氏

8、常數(shù)Km的原理和方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容酪蛋白在不同情況下反應(yīng)速度11實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目酶的提取、分離、純化及其活力測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私饷傅闹苽溥^程以及如何保證酶活力實(shí)驗(yàn)要求掌握酶制備每一步所需基本實(shí)驗(yàn)技術(shù)，了解其原理。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容酶的提取；硫酸銨分級(jí)沉淀；蛋白質(zhì)含量的測(cè)定；酶活性的測(cè)定12實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目核酸濃度測(cè)定-紫外線（UV）吸收法實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庾贤饩€（UV）測(cè)定核酸濃度的原理；進(jìn)一步熟悉紫外分光光度計(jì)的使用方法。實(shí)驗(yàn)要求以RNA或DNA干粉為材料，測(cè)定核酸濃度實(shí)驗(yàn)內(nèi)容檢測(cè)樣品在260nm波長(zhǎng)處的A值。13實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目核酸的增色效應(yīng)實(shí)驗(yàn)?zāi)康尿?yàn)證核酸的紫外吸收特性及增色效應(yīng)實(shí)驗(yàn)要求測(cè)出天然核酸及變性核酸的吸光值實(shí)驗(yàn)內(nèi)容使DNA變性，分別測(cè)天然DNA和變性DNA的吸光值14實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目氨基移換反應(yīng)血液中轉(zhuǎn)氨酶活力的測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康尿?yàn)證氨基轉(zhuǎn)移反應(yīng)谷丙轉(zhuǎn)氨酶作用原理實(shí)驗(yàn)要求掌握酶活力測(cè)定的方法。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制；酶活力的測(cè)定；計(jì)算酶活力15實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目維生素C的定量測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆諛悠分蠽C的測(cè)定原理及方法。實(shí)驗(yàn)要求用分光光度法測(cè)定樣品中VC的含量。實(shí)驗(yàn)內(nèi)容以桔皮作實(shí)驗(yàn)樣品或以柑桔作實(shí)驗(yàn)樣品，