母豬繁殖障礙疾病的血清學(xué)調(diào)查報告

1、母豬繁殖障礙疾病的血清學(xué)調(diào)查報告母豬繁殖障礙疾病的血清學(xué)調(diào)查報告摘要：隨著豬場規(guī)模化、集約化程度的不斷提高，豬病 的種類也在不斷增加，特別是近年來的母豬繁殖障礙性疾病 嚴重制約生豬產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。xx年我們引進了帶有外種血緣 的外種豬洋二元母豬，進行了優(yōu)良品種推廣，結(jié)果80%的豬 場母豬普遍出現(xiàn)第一胎發(fā)生流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎，新生仔豬 和斷奶仔豬發(fā)病率和死亡率增高，高達20%,而母豬一般無 臨慶癥狀，對這情況我們凝似是母豬繁殖障礙性疾病，故 進行了血清調(diào)查。共采血抽樣237份，分離血清212份， 并對分得的212份血清全部進行藍耳病檢測，其中陽性80 份，陽性率；對其中的160份血清進行了偽狂犬檢測，

2、1 60份進行了豬瘟檢測，160份血清進行了細小病毒檢測。 結(jié)果表明：一十三個豬場均有以上母豬繁殖障礙病存在。由此可見：母豬繁殖障礙病在我縣外種豬場已普遍存在。關(guān)鍵詞:母豬;繁殖與呼吸綜合征;調(diào)查;血清學(xué);檢測asho gfarmshav e increase di nbothsi zea ndeffi cien cy, so haveh ogdi seaset ype s, inren ce ntyesrs,t heproblem hasbeenesp eciallyser iousamong b reedings ow s, where dis easeha sine rease dinf

3、e rtic ityand neg atively af fee tedth e developme ntofthehog breed ingin dustrylnx x , bloodwa. sc ollecte dfr om237s ousf romth ese, 2 12sa mpleso fse rumwere su ccessful 1 yproduced andtestedf orblucearp isease.th e positive te stratew asp ercent also tests forth reet ypesof dis easepor ci nepseu

4、ud o rabies, sw inefever, a ndwicrosco picvirali n feetionw er eperfor med , eacht esto nl60o fthes ampl es.s ow ;porcine r eproducti veandrespi ratory母豬繁殖障礙疾病是近年來危害母豬的一種主要的疫 病，現(xiàn)已被廣范受到人們的重視，它以妊娠母豬發(fā)生流產(chǎn)、 死胎、木乃伊胎、產(chǎn)弱仔、畸形胎和母豬不育、配不上種 為主要特征的一類疾病。此病主要包括豬瘟、豬偽狂犬病、 豬細小病毒病、繁殖障礙與呼吸綜合征和豬乙型腦炎等幾 種病。xx年我們對存在有明顯繁殖障礙病

5、的1 3個豬場的 237母豬頭進行采血，分離血清212份，并對分得的212份 血清全部進行了檢測，對其中的160份血清進行了豬偽狂 犬、豬細小病毒檢測，并根據(jù)檢測結(jié)果對母豬繁殖障礙原 因進行了分析總結(jié)，現(xiàn)將詳細情況分述如下。1材料和方法材料被檢血清被檢血清來13個母豬場，耳靜脈采血，3600轉(zhuǎn)/min分離血清，待檢。主要診斷試劑藍耳病eli sa試劑盒：由美國idexx公司提供；豬瘟診斷抗原及陰、陽性血清：由蘭州獸醫(yī)研究所提 供；豬偽狂犬l at診斷液試劑盒：由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)提供；豬細小病毒l at診斷液試劑盒：由華中農(nóng)業(yè)大學(xué)提供。 方法母豬繁殖于呼吸綜合癥方法：間接elisaa采樣：常規(guī)采血，

6、分離血清，無腐敗、溶血、凝塊和 沉淀。b準備：a試驗前將所有試劑從冰箱中取出，置室溫下達到室溫, 并輕輕搖勻，用后立即放回冰箱。b將達到室溫并完全溶解的洗液深縮用滅菌水或去離子 水稀釋10倍。c將待檢血清用稀釋液進行40倍稀釋；注意匆將陽性/ 陰性對照血清稀釋。c取出抗原抱被的96孔板，在工作表上標(biāo)記好樣品的 位置。d取100ul陰性血清分別加入cl、c2、di、d2孔中。e取100ul陽性血清分別加入al、a 2、bl. b2孔中。f取10 0 ul稀釋的待檢血清分別加入相鄰的prr s抗 原孔和marc145細胞抗原孔中。h在室溫下孵育30m im。l將反應(yīng)板孔里的液體倒入廢液缸，并在吸水

7、紙上扣 干。j每孔加入300 ul洗滌液，置室溫約3mim,棄去孔中 液體，重復(fù)35次，最后一次在吸水紙水輕輕扣干。k每孔加入100ul酶標(biāo)抗體復(fù)合物，在室溫下孵育3omi m0并利用此空隙，取等量底物濃縮液和底物稀釋液混 勻。l重復(fù)i、j操作。m每孔加入100 ul稀釋好底物溶液，在室溫下孵育15mimon每孔加入100終止液0用酶聯(lián)免疫檢測儀于650nm波長下測定各孔的吸光度 值。q結(jié)果判定：ape： prrs nc： prrs2,試驗方成立。bs/p上，樣品血清prrs抗體陽性；s/p<,樣品血清 prrs抗體陰性。豬瘟檢測方法：正向血凝試驗a取一潔凈玻片，以蠟筆劃成34c nf小

8、格，如下圖血清號第1格第2格第3格第4格陽性血清對照陰性血清對照血清樣品1血清樣品2b試驗前，先將待檢血清、標(biāo)準血清和抗原置于室溫， 使其達到20°cob將待檢血清、標(biāo)準血清按上表中的量，垂直接觸玻片 分別加到各方格內(nèi)。c搖勻抗原，每一血清格內(nèi)分別垂直加入抗原。d自血清格開始，用牙簽將抗原與血清完全混合，攤開 直徑2cm左右，依次至、血清格，一個血清樣使用一牙簽。e輕輕搖動玻片后，室溫靜置58min0春冬季節(jié)室溫 較低時，可置于30°c左右的溫箱中。f記錄結(jié)果出現(xiàn)大凝集片或小粒狀物，液體完全透明，即10 0%凝 集。有明顯凝集片和粒，液體幾乎完全透明，即75%凝集。有可見凝

9、集片和顆粒，液體不甚透明，即50%凝集。 豬偽狂犬檢測方法：乳膠凝集試驗操作步驟取待檢樣品、陽性/陰性對照血清和稀釋液各一滴，分 別置于玻片上，各加一滴乳膠抗原，用牙簽或火柴棍攪 拌，并輕輕搖動1一2 min后，于35 min內(nèi)觀察結(jié)果。也可將血清作倍比連續(xù)稀釋，每個稀釋度加乳膠抗原 進行定量分析。c判定結(jié)果：a所有對照成立，即陽性血清呈“”，陰性血清和稀釋液呈“一”，試驗方有效。樣品出現(xiàn)“+”以上者為 陽性。豬細小病毒檢測方法：乳膠凝集試驗。2調(diào)查內(nèi)容流行病學(xué)調(diào)查：通過查閱記錄，調(diào)查種源、胎次，發(fā)病的季節(jié)性。飼養(yǎng)管理調(diào)查：主要包括飼料質(zhì)量，營養(yǎng)成份，有無霉變；有無環(huán)境、機械等不良因素引起的，

10、防疫、免疫、 消毒是否落實到位。臨床病例剖解：包括對繁殖母豬的臨床檢查及對發(fā)病母豬所產(chǎn)部分弱仔及新生病仔豬的病理剖檢觀察。血清學(xué)檢測：對采得的2 12份血清樣品進行藍耳病抗體檢測和部分血清的偽狂犬、豬瘟、豬細小病毒檢測。2檢測結(jié)果及討論發(fā)生繁殖障礙的母豬有長白、約克及長白x約克，發(fā) 病母豬沒有明顯的品系差別；發(fā)病的胎次主要集中在第一 胎，在第一胎過后，很多母豬不再表現(xiàn)明顯的繁殖障礙病;發(fā)病沒有季節(jié)性，一年四季均可發(fā)病；發(fā)病豬主要表現(xiàn)產(chǎn) 死胎、木乃伊胎、弱仔和新生仔豬發(fā)病死亡。豬場的飼料基本上都統(tǒng)一飼喂母豬專用料，不存在霉變和質(zhì)量問題，也無環(huán)境或機械因素引起的流產(chǎn)和死胎。在采血檢查時除兩家豬場拿

11、不出嚴格的免疫記錄檔案外, 其他豬場都按免疫程序進行了免疫，并做到定期消毒。剖檢弱仔和新生病仔豬，大體表現(xiàn)一致，體表貧血蒼白，皮下脂肪多黃染，腎呈土黃色，在表面有小出血點， 有的淋巴結(jié)水腫出血呈大理石樣狀，心包積液，小葉性肺 炎，肝褐黃色。血清學(xué)檢測結(jié)果: 母豬繁殖障礙疾病血清學(xué)檢測統(tǒng)計表豬場藍耳病偽狂犬細小病毒繁殖障 礙病史樣品數(shù)陽性數(shù)陽性率樣品數(shù)陽性數(shù)陽性率樣品數(shù)陽性 數(shù)陽性率1場35 10%148%146%11頭流產(chǎn)、死胎、木乃伊胎2場327%171 0%178%記載不詳3場145%1410%149%14頭流產(chǎn)、死胎、木乃伊4 場 20 14 %2014%2 016 %4 頭發(fā)流產(chǎn)5場2

12、6 13%1 311%13 9%記載不詳6場1 32%136%13 7%9頭流產(chǎn)、死胎、弱仔、木乃伊、7場91%96%9 5%1配不上種、1頭產(chǎn)死胎、7頭流產(chǎn)、弱仔8場1 10%118%118%11頭流產(chǎn)、死胎、木乃伊、弱仔9場127%12 6%127%12頭流產(chǎn)、死胎、弱仔、木乃伊10場72%76%74%7死胎、木乃伊11場73%42%43%7頭發(fā)生過流產(chǎn)、死胎、木乃伊12場2416%24 20%2417%24頭發(fā)生過流產(chǎn)、死胎、弱仔13場20 %22 %21%2頭后備發(fā)病豬合計 21280 %16 0109%16 01 00%110 頭繁殖障礙4小結(jié)與分析通過流行病學(xué)、飼料、飼養(yǎng)管理和對弱

13、仔、新生病仔 豬剖檢等各個方面的調(diào)查，排除了母豬繁殖障礙病因為品 種、種源、飼料和飼養(yǎng)管理因素造成的可能。因為剖檢有 一定的病理變化，說明是由病毒或病原微生物等致病因素 引起。本次監(jiān)測采樣全由專業(yè)人員把關(guān)操作，藍耳病檢測釆 用美國進口 eli sa試劑，微電腦數(shù)控機洗板，偽狂犬、細 小病毒采用華中農(nóng)業(yè)大學(xué)lat試劑盒，其靈敏度高，監(jiān)測 結(jié)果可靠。監(jiān)測豬均未接種藍耳病疫苗免疫，經(jīng)過豬偽狂犬、豬 細小病毒疫苗免疫，被監(jiān)測種豬群體中有藍耳病陽性，說 明有感染豬或曾經(jīng)感染過；偽狂犬、細小病毒的免疫合格 率分別達到%和%說明了種豬的免疫效果較好。本次監(jiān)測的樣本較大，檢測結(jié)果具有代表性，監(jiān)測結(jié) 果，藍耳病

14、樣品陽性,其中1至5場樣品陽性率,豬場藍 耳病樣品陽性率比較高；偽狂犬和細小病毒的免疫陽性率 比較高，說明種豬在經(jīng)過免疫或曾經(jīng)感染后產(chǎn)生了對該病 的較高抵抗力，免受強毒的攻擊。在本次的調(diào)查中還發(fā)現(xiàn)，同一頭豬在藍耳病呈陰性， 偽狂犬、細小病毒免疫抗體都達到免疫保護力的情況下， 仍然存在繁殖障礙病，說明該豬場發(fā)生的繁殖病不僅由藍 耳病、偽狂犬、細小病毒引起，還有其它繁殖障礙疾病參 與。5防制建議繁殖障礙性疾病，特別是藍耳病，它是我縣的首次監(jiān) 測到的一個新病，它對養(yǎng)豬業(yè)的危害較重，一是引起嚴重 的種豬繁殖障礙，導(dǎo)致其它疫病的免疫抑制，產(chǎn)生免疫失 ??；二是隱性豬瘟很難控制和消除，是母豬繁殖障礙的潛 在殺手；三是豬偽狂犬和豬細小病毒通過免疫后不能準確 的判斷是否是決定性致病因素。面對當(dāng)前繁殖障