實(shí)驗(yàn)三逆境對(duì)植物細(xì)胞膜的傷害電導(dǎo)法ppt課件

1、實(shí)驗(yàn)三 不同植物離體葉片抗逆性比較一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康? 1、認(rèn)識(shí)植物在逆境或者其他損傷的情況下，、認(rèn)識(shí)植物在逆境或者其他損傷的情況下，細(xì)胞受損傷原理以及丈量方法細(xì)胞受損傷原理以及丈量方法2 2、掌握電導(dǎo)率的測(cè)定方法、掌握電導(dǎo)率的測(cè)定方法3 3、學(xué)會(huì)運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，對(duì)不同植物在冷害、學(xué)會(huì)運(yùn)用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，對(duì)不同植物在冷害后其細(xì)胞損傷程度進(jìn)展比較和分析。后其細(xì)胞損傷程度進(jìn)展比較和分析。二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境植物細(xì)胞膜對(duì)維持細(xì)胞的微環(huán)境和正常的代謝起著重要的作用。細(xì)胞和正常的代謝起著重要的作用。細(xì)胞膜不僅是分隔細(xì)胞質(zhì)和胞外環(huán)境的屏膜不僅是分隔細(xì)胞質(zhì)和胞外環(huán)境的屏障

2、，而且也是細(xì)胞與環(huán)境發(fā)生物質(zhì)交障，而且也是細(xì)胞與環(huán)境發(fā)生物質(zhì)交換的主要通道，又是細(xì)胞感受環(huán)境變換的主要通道，又是細(xì)胞感受環(huán)境變化刺激的部位?；碳さ牟课?。 細(xì)胞膜的選擇透性是其維持細(xì)胞膜的選擇透性是其維持生理功能的最重要的條件之一。生理功能的最重要的條件之一。各種逆境損傷都會(huì)呵斥質(zhì)膜選擇透性的改動(dòng)或喪失，各種逆境損傷都會(huì)呵斥質(zhì)膜選擇透性的改動(dòng)或喪失，例如低溫、冰凍、干旱脫水等導(dǎo)致的細(xì)胞膜機(jī)械損例如低溫、冰凍、干旱脫水等導(dǎo)致的細(xì)胞膜機(jī)械損傷以及逆境和衰老過(guò)程中的膜脂過(guò)氧化作用，都可傷以及逆境和衰老過(guò)程中的膜脂過(guò)氧化作用，都可以增大細(xì)胞膜通透性。因此，細(xì)胞質(zhì)膜透性的測(cè)定以增大細(xì)胞膜通透性。因此，細(xì)

3、胞質(zhì)膜透性的測(cè)定常作為植物抗性研討中的一個(gè)重要生理目的。常作為植物抗性研討中的一個(gè)重要生理目的。 當(dāng)質(zhì)膜的選擇透性因逆境損傷而當(dāng)質(zhì)膜的選擇透性因逆境損傷而明顯改動(dòng)或喪失時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)明顯改動(dòng)或喪失時(shí)，細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)( (尤其是尤其是電解質(zhì)電解質(zhì)) )大量外滲，從而引起組織浸泡液的大量外滲，從而引起組織浸泡液的電導(dǎo)率發(fā)生變化，經(jīng)過(guò)測(cè)定外滲液電導(dǎo)率電導(dǎo)率發(fā)生變化，經(jīng)過(guò)測(cè)定外滲液電導(dǎo)率的變化，就可反映出質(zhì)膜的損傷程度和所的變化，就可反映出質(zhì)膜的損傷程度和所測(cè)資料抗逆性的大小。測(cè)資料抗逆性的大小。 膜透性增大的程度與逆境脅迫強(qiáng)膜透性增大的程度與逆境脅迫強(qiáng)度有關(guān)，也與植物抗逆性的強(qiáng)弱有關(guān)。度有關(guān)，也與植

4、物抗逆性的強(qiáng)弱有關(guān)。 因此，比較不同植物或同一植物不因此，比較不同植物或同一植物不同種類在一樣脅迫溫度下膜透性的增大程同種類在一樣脅迫溫度下膜透性的增大程度，即可比較植物間或種類間的抗逆性強(qiáng)度，即可比較植物間或種類間的抗逆性強(qiáng)弱。弱。電導(dǎo)儀電導(dǎo)儀 電導(dǎo)率是物質(zhì)傳送電流的才干，是電阻率的倒數(shù)。在液電導(dǎo)率是物質(zhì)傳送電流的才干，是電阻率的倒數(shù)。在液體中常以電阻的倒數(shù)體中常以電阻的倒數(shù)電導(dǎo)來(lái)衡量其導(dǎo)電才干的大小。電導(dǎo)來(lái)衡量其導(dǎo)電才干的大小。電導(dǎo)率電導(dǎo)率-電阻率的倒數(shù)即稱之為電導(dǎo)率電阻率的倒數(shù)即稱之為電導(dǎo)率L L。電導(dǎo)電導(dǎo)L L的計(jì)算式如下式所示：的計(jì)算式如下式所示： L=l/R=S/l L=l/R=S

5、/l電導(dǎo)的單位用姆歐又稱西門子電導(dǎo)的單位用姆歐又稱西門子(S)(S)。用用S S表示，由于表示，由于S S單位太大。常采用毫西門子，微西門子單位單位太大。常采用毫西門子，微西門子單位1S=103mS=106S1S=103mS=106S。普通用當(dāng)量電導(dǎo)來(lái)表示電導(dǎo)率。電導(dǎo)率普通用當(dāng)量電導(dǎo)來(lái)表示電導(dǎo)率。電導(dǎo)率L L的單位是的單位是 (S/cm) (S/cm)電導(dǎo)儀的用法電導(dǎo)儀的用法DDS307型電導(dǎo)率儀型電導(dǎo)率儀機(jī)箱鍵盤顯示器多功能電極架電極電導(dǎo)電極溫度電極電導(dǎo)率：0.00S/cm-100mS/cmTDS:溶解性總固體, 衡量水中一切離子的總含量ppm) 0.00mg/L-1000mg/L溫度： 0

6、99.9度運(yùn)用過(guò)程：運(yùn)用過(guò)程：1將多功能電極插入電極插座中，用蒸溜水將多功能電極插入電極插座中，用蒸溜水清洗電極，并將電極浸泡在雙蒸水中。清洗電極，并將電極浸泡在雙蒸水中。2翻開電源，儀器進(jìn)入丈量形狀，預(yù)熱翻開電源，儀器進(jìn)入丈量形狀，預(yù)熱30min3按壓按壓“電導(dǎo)率電導(dǎo)率/TDS為切換鍵。為切換鍵。4) 假設(shè)插上溫度電極，那么電導(dǎo)顯示為假設(shè)插上溫度電極，那么電導(dǎo)顯示為25度度的電導(dǎo)率值，假設(shè)不插溫度電極，那么需求丈量的電導(dǎo)率值，假設(shè)不插溫度電極，那么需求丈量當(dāng)前液體溫度，然后將溫度調(diào)至當(dāng)前溫度。當(dāng)前液體溫度，然后將溫度調(diào)至當(dāng)前溫度。5將被測(cè)液用玻棒攪均勻；用雙蒸水沖洗電將被測(cè)液用玻棒攪均勻；用

7、雙蒸水沖洗電導(dǎo)電極，將電極浸入被測(cè)液中，讀取顯示器上的導(dǎo)電極，將電極浸入被測(cè)液中，讀取顯示器上的數(shù)據(jù)，為當(dāng)前被測(cè)液的電導(dǎo)率值數(shù)據(jù)，為當(dāng)前被測(cè)液的電導(dǎo)率值us/cm).三、三、 實(shí)驗(yàn)資料實(shí)驗(yàn)資料1 1、資料處置、資料處置 采集所研討植物的莖葉采集所研討植物的莖葉4 48 8枝枝10cm10cm左右，分別左右，分別做如下處置用紙分包，并寫好標(biāo)鑒做如下處置用紙分包，并寫好標(biāo)鑒) )。1 1對(duì)照無(wú)冰冷處置對(duì)照無(wú)冰冷處置2 24 4度冰冷處置度冰冷處置30min30min3 30 0度冰冷處置度冰冷處置30min30min3 32020度冷害處置度冷害處置30min30min2 2、儀器和藥品：雙蒸水、

8、儀器和藥品：雙蒸水、 水浴鍋、電導(dǎo)儀水浴鍋、電導(dǎo)儀各組需求：電爐各組需求：電爐1 1臺(tái)、塑料杯臺(tái)、塑料杯1212個(gè)、大小燒杯各個(gè)、大小燒杯各2 2 只、試管只、試管1212支，試管夾支，試管夾2 23 3個(gè)個(gè)四、實(shí)驗(yàn)方法四、實(shí)驗(yàn)方法 浸泡法浸泡法 1 1、取材、取材 每處置取大小相當(dāng)?shù)闹参锶~片假每處置取大小相當(dāng)?shù)闹参锶~片假設(shè)干片設(shè)干片( (盡量保證葉片的完好性，少含盡量保證葉片的完好性，少含莖節(jié)莖節(jié)) )，用自來(lái)水洗凈后再用蒸餾水沖，用自來(lái)水洗凈后再用蒸餾水沖洗洗3 3次，用濾紙吸干外表水分，將葉片次，用濾紙吸干外表水分，將葉片剪成小片剪成小片 ( (避開主脈避開主脈) )； 每種處置下快速稱

9、取鮮樣每種處置下快速稱取鮮樣3 3份三份三個(gè)反復(fù)，每份個(gè)反復(fù)，每份0 01 g1 g，分別置于，分別置于10 10 m1m1去離子水的試管中，用玻棒攪動(dòng)。使去離子水的試管中，用玻棒攪動(dòng)。使樣品浸入水中。蓋上蓋子置于室溫下浸樣品浸入水中。蓋上蓋子置于室溫下浸泡處置泡處置12 h12 h。每。每1 1 植物有植物有4 4個(gè)處置，個(gè)處置，3 3 個(gè)反復(fù)，共個(gè)反復(fù)，共1212個(gè)試管。貼上標(biāo)鑒。個(gè)試管。貼上標(biāo)鑒。2 2、電導(dǎo)率的測(cè)定、電導(dǎo)率的測(cè)定 1 1先丈量空白電導(dǎo)率蒸溜水的先丈量空白電導(dǎo)率蒸溜水的電導(dǎo)電導(dǎo) 2 2用電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡后的浸提液用電導(dǎo)儀測(cè)定浸泡后的浸提液電導(dǎo)電導(dǎo)(S1)(S1)； 3 3然

10、后用沸水浴加熱然后用沸水浴加熱1Omin1Omin，冷，冷卻至室溫后搖勻，再次測(cè)定煮沸后浸提液卻至室溫后搖勻，再次測(cè)定煮沸后浸提液電導(dǎo)電導(dǎo)(S2)(S2)。電導(dǎo)率值電導(dǎo)率值1 1蒸溜水蒸溜水1 1蒸溜水蒸溜水1 1蒸溜水蒸溜水2 2浸泡浸泡2 2浸泡浸泡2 2浸泡浸泡3 3煮沸煮沸3 3煮沸煮沸3 3煮沸煮沸CK4度0度20度五計(jì)算五計(jì)算按下式計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率值：按下式計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率值：相對(duì)電導(dǎo)率相對(duì)電導(dǎo)率L L= =S1-S1-空白電導(dǎo)率空白電導(dǎo)率/ /S2-S2-空白電導(dǎo)率空白電導(dǎo)率 S1: S1:煮前的電導(dǎo)率煮前的電導(dǎo)率 S2: S2:煮后的電導(dǎo)率煮后的電導(dǎo)率 空白電導(dǎo)率空白電導(dǎo)率: :蒸

11、餾水的電導(dǎo)率蒸餾水的電導(dǎo)率 單位：?jiǎn)挝唬簎s/cmus/cm21SS相對(duì)電導(dǎo)度的大小表示細(xì)胞膜受損傷的程度相對(duì)電導(dǎo)度的大小表示細(xì)胞膜受損傷的程度 由于室溫對(duì)照也有少量電解質(zhì)外滲，故由于室溫對(duì)照也有少量電解質(zhì)外滲，故按下式計(jì)算由于低溫或高溫脅迫而產(chǎn)生的外滲，按下式計(jì)算由于低溫或高溫脅迫而產(chǎn)生的外滲，稱為損傷度或損傷性外滲。稱為損傷度或損傷性外滲。 損傷度損傷度% %= =式中式中 Lt Lt 處置葉片的相對(duì)電導(dǎo)度；處置葉片的相對(duì)電導(dǎo)度； Lck Lck對(duì)照葉片的相對(duì)電導(dǎo)度。對(duì)照葉片的相對(duì)電導(dǎo)度。 1001CKCKtLLL1.1.比較不同植物經(jīng)不同冰冷處置后葉片細(xì)比較不同植物經(jīng)不同冰冷處置后葉片細(xì)

12、胞透性的變化情況，并加解釋。胞透性的變化情況，并加解釋。2.2.計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率值，列表寫上各植物不計(jì)算相對(duì)電導(dǎo)率值，列表寫上各植物不同處置下的相對(duì)電導(dǎo)率值和損傷率。同處置下的相對(duì)電導(dǎo)率值和損傷率。3.3.比較不同植物的抗逆性。比較不同植物的抗逆性。六、分析與討論六、分析與討論 本卷須知本卷須知 1. 1. 整個(gè)過(guò)程中，葉片接觸的器具必需整個(gè)過(guò)程中，葉片接觸的器具必需絕對(duì)干凈全部器皿要洗凈，也不要絕對(duì)干凈全部器皿要洗凈，也不要用手直接接觸葉片，以免污染。用手直接接觸葉片，以免污染。 2. 2. 測(cè)定前電極要用雙蒸水清洗，用后測(cè)定前電極要用雙蒸水清洗，用后電極要用蒸溜水清洗干凈。不能用其電極要用蒸

13、溜水清洗干凈。不能用其它藥品清洗它藥品清洗 分組分組取樣時(shí)間取樣時(shí)間冷凍時(shí)間冷凍時(shí)間浸泡時(shí)間浸泡時(shí)間測(cè)樣時(shí)間測(cè)樣時(shí)間2 2班第班第1 1組組1 13 3組組4 4月月1515日下午日下午5 5點(diǎn)點(diǎn) 下午下午5:306:0015h4 4月月1616日上午日上午9 9：00004 46 6組組4 4月月1515日下午日下午7 7點(diǎn)點(diǎn) 下午下午7:308:00 15h4 4月月1616日上午日上午1111：00002 2班第班第2 2組組1 13 3組組4 4月月1515日下午日下午7 7點(diǎn)點(diǎn)晚上晚上9:009:30 15h4 4月月1616日日上午上午1212：30304 46 6組組4 4月月1515日下午日下午7 7點(diǎn)點(diǎn)晚上晚上10:0010:30 15h4 4月月1616日日中午中午1 1：3030實(shí)驗(yàn)時(shí)間安排實(shí)驗(yàn)時(shí)間安排實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)室4月月15日下午日下午5 點(diǎn)晚上點(diǎn)晚上10點(diǎn)點(diǎn)30分分4月月16日上午日上午9點(diǎn)下午點(diǎn)下午3點(diǎn)點(diǎn)分組分組取樣時(shí)間取樣時(shí)間冷凍時(shí)間冷凍時(shí)間浸泡時(shí)間浸泡時(shí)間測(cè)樣時(shí)間測(cè)樣時(shí)間1 1班第班第1 1組組1 13 3組組4 4月月1616日下午日下午5 5點(diǎn)點(diǎn) 下午下午5:306:0015h4 4月月1717日上午日上午9 9：00004 46 6組組4 4月月1616日下午日下午7 7點(diǎn)點(diǎn) 下午下午7:308:00 15h4 4月月1717日上午日上