生物化學(xué)習(xí)題蛋白質(zhì)化學(xué)

1、第二章蛋白質(zhì)化學(xué)29 / 29文檔可自由編輯打印一、知識要點（一）氨基酸的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)是重要的生物大分子，其組成單位是氨基酸。組成蛋白質(zhì)的氨基酸有 20 種，均為-氨基酸。每個氨基酸的-碳上連接一個羧基，一個氨基，一個氫原子和一個側(cè)鏈 R基團(tuán)。20 種氨基酸結(jié)構(gòu)的差別就在于它們的 R 基團(tuán)結(jié)構(gòu)的不同。根據(jù) 20 種氨基酸側(cè)鏈 R 基團(tuán)的極性，可將其分為四大類：非極性 R 基氨基酸（8 種）；不帶電荷的極性 R 基氨基酸（7 種）；帶負(fù)電荷的 R 基氨基酸（2 種）；帶正電荷的 R 基氨基酸（3 種）。（二）氨基酸的性質(zhì)氨基酸是兩性電解質(zhì)。由于氨基酸含有酸性的羧基和堿性的氨基，所以既是酸又是堿，是

2、兩性電解質(zhì)。有些氨基酸的側(cè)鏈還含有可解離的基團(tuán)，其帶電狀況取決于它們的 pK 值。由于不同氨基酸所帶的可解離基團(tuán)不同，所以等電點不同。PI 的定義。除甘氨酸外，其它都有不對稱碳原子，所以具有 D-型和 L-型 2 種構(gòu)型，具有旋光性，天然蛋白質(zhì)中存在的氨基酸都是 L-型的。酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸具有紫外吸收特性，在 280nm 處有最大吸收值，大多數(shù)蛋白質(zhì)都具有這些氨基酸，所以蛋白質(zhì)在 280nm 處也有特征吸收，這是紫外吸收法定量測定蛋白質(zhì)的基礎(chǔ)。氨基酸的-羧基和-氨基具有化學(xué)反應(yīng)性，另外，許多氨基酸的側(cè)鏈還含有羥基、氨基、羧基等可解離基團(tuán)，也具有化學(xué)反應(yīng)性。較重要的化學(xué)反應(yīng)有：（1）茚三

3、酮反應(yīng)，除脯氨酸外，所有的-氨基酸都能與茚三酮發(fā)生顏色反應(yīng)，生成藍(lán)紫色化合物，脯氨酸與茚三酮生成黃色化合物。（2）Sanger反應(yīng)，-NH2與 2,4-二硝基氟苯作用產(chǎn)生相應(yīng)的DNB-氨基酸。（3）Edman反應(yīng)，-NH2與苯異硫氰酸酯作用產(chǎn)生相應(yīng)的氨基酸的苯氨基硫甲酰衍生物（PIT-氨基酸）。Sanger反應(yīng)和Edmen反應(yīng)均可用于蛋白質(zhì)多肽鏈N端氨基酸的測定。氨基酸通過肽鍵相互連接而成的化合物稱為肽，由 2 個氨基酸組成的肽稱為二肽，由 3個氨基酸組成的肽稱為三肽，少于 10 個氨基酸肽稱為寡肽，由 10 個以上氨基酸組成的肽稱為多肽。（三）蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)是具有特定構(gòu)象的大分子，為研究

4、方便，將蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)分為四個結(jié)構(gòu)水平，包括一級結(jié)構(gòu)、二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)。一般將二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)稱為三維構(gòu)象或高級結(jié)構(gòu)。一級結(jié)構(gòu)指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序。肽鍵是蛋白質(zhì)中氨基酸之間的主要連接方式，即由一個氨基酸的-氨基和另一個氨基酸的 -之間脫去一分子水相互連接。肽鍵具有部分雙鍵的性質(zhì)，所以整個肽單位是一個剛性的平面結(jié)構(gòu)。在多肽鏈的含有游離氨基的一端稱為肽鏈的氨基端或 N 端，而另一端含有一個游離羧基的一端稱為肽鏈的羧基端或 C端。蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)是指多肽鏈骨架盤繞折疊所形成的有規(guī)律性的結(jié)構(gòu)。最基本的二級結(jié)構(gòu)類型有-螺旋結(jié)構(gòu)和 -折疊結(jié)構(gòu)，此外還有 -轉(zhuǎn)角和自由回轉(zhuǎn)。右

5、手 -螺旋結(jié)構(gòu)是在纖維蛋白和球蛋白中發(fā)現(xiàn)的最常見的二級結(jié)構(gòu),每圈螺旋含有 3.6 個氨基酸殘基，螺距為0.54nm,螺旋中的每個肽鍵均參與氫鍵的形成以維持螺旋的穩(wěn)定。-折疊結(jié)構(gòu)也是一種常見的二級結(jié)構(gòu)，在此結(jié)構(gòu)中，多肽鏈以較伸展的曲折形式存在，肽鏈（或肽段）的排列可以有平行和反平行兩種方式。氨基酸之間的軸心距為 0.35nm,相鄰肽鏈之間借助氫鍵彼此連成片層結(jié)構(gòu)。結(jié)構(gòu)域是介于二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu)之間的一種結(jié)構(gòu)層次，是指蛋白質(zhì)亞基結(jié)構(gòu)中明顯分開的緊密球狀結(jié)構(gòu)區(qū)域。超二級結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)分子 中的多肽鏈在三維折疊中形成有規(guī)則的三級結(jié)構(gòu)聚集體。蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)是整個多肽鏈的三維構(gòu)象，它是在二級結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上

6、，多肽鏈進(jìn)一步折疊卷曲形成復(fù)雜的球狀分子結(jié)構(gòu)。具有三級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)一般都是球蛋白，這類蛋白質(zhì)的多肽鏈在三維空間中沿多個方向進(jìn)行盤繞折疊，形成十分緊密的近似球形的結(jié)構(gòu)，分子內(nèi)部的空間只能容納少數(shù)水分子，幾乎所有的極性 R 基都分布在分子外表面，形成親水的分子外殼，而非極性的基團(tuán)則被埋在分子內(nèi)部，不與水接觸。蛋白質(zhì)分子中側(cè)鏈 R 基團(tuán)的相互作用對穩(wěn)定球狀蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)起著重要作用。蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)指數(shù)條具有獨(dú)立的三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈通過非共價鍵相互連接而成的聚合體結(jié)構(gòu)。在具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中，每一條具有三級結(jié)構(gòu)的皚鏈稱為亞基或亞單位，缺少一個亞基或亞基單獨(dú)存在都不具有活性。四級結(jié)構(gòu)涉及亞基在整個分

7、子中的空間排布以及亞基之間的相互關(guān)系。維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用力主要是氫鍵、離子鍵、疏水作用力和范德華力等非共價鍵，又稱次級鍵。此外，在某些蛋白質(zhì)中還有二硫鍵，二硫鍵在維持蛋白質(zhì)構(gòu)象方面也起著重要作用。蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)取決于它的一級結(jié)構(gòu)，多肽鏈主鏈上的氨基酸排列順序包含了形成復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)（即正確的空間結(jié)構(gòu)）所需要的全部信息。（四）蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系不同的蛋白質(zhì)，由于結(jié)構(gòu)不同而具有不同的生物學(xué)功能。蛋白質(zhì)的生物學(xué)功能是蛋白質(zhì)分子的天然構(gòu)象所具有的性質(zhì)，功能與結(jié)構(gòu)密切相關(guān)。1一級結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)功能有相適應(yīng)性和統(tǒng)一性，可從以下幾個方面說明：（1）一級結(jié)構(gòu)的變異與分子病

8、蛋白質(zhì)中的氨基酸序列與生物功能密切相關(guān)，一級結(jié)構(gòu)的變化往往導(dǎo)致蛋白質(zhì)生物功能的變化。如鐮刀型細(xì)胞貧血癥，其病因是血紅蛋白基因中的一個核苷酸的突變導(dǎo)致該蛋白分子中-鏈第 6 位谷氨酸被纈氨酸取代。這個一級結(jié)構(gòu)上的細(xì)微差別使患者的血紅蛋白分子容易發(fā)生凝聚，導(dǎo)致紅細(xì)胞變成鐮刀狀，容易破裂引起貧血，即血紅蛋白的功能發(fā)生了變化。（2）一級結(jié)構(gòu)與生物進(jìn)化研究發(fā)現(xiàn)，同源蛋白質(zhì)中有許多位置的氨基酸是相同的，而其它氨基酸差異較大。如比較不同生物的細(xì)胞色素 C 的一級結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)與人類親緣關(guān)系接近，其氨基酸組成的差異越小，親緣關(guān)系越遠(yuǎn)差異越大。（3）蛋白質(zhì)的激活作用在生物體內(nèi)，有些蛋白質(zhì)常以前體的形式合成，只有按一

9、 定方式裂解除去部分肽鏈之后才具有生物活性，如酶原的激活。2蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與功能之間有密切相關(guān)性，其特定的空間結(jié)構(gòu)是行使生物功能的基礎(chǔ)。以下兩方面均可說明這種相關(guān)性。（1）.核糖核酸酶的變性與復(fù)性及其功能的喪失與恢復(fù)核糖核酸酶是由 124 個氨基酸組成的一條多肽鏈，含有四對二硫鍵，空間構(gòu)象為球狀分子。將天然核糖核酸酶在 8mol/L 脲中用-巰基乙醇處理，則分子內(nèi)的四對二硫鍵斷裂，分子變成一條松散的肽鏈，此時酶活性完全喪失。但用透析法除去 -巰基乙醇和脲后，此酶經(jīng)氧化又自發(fā)地折疊成原有的天然構(gòu)象，同時酶活性又恢復(fù)。（2）血紅蛋白的變構(gòu)現(xiàn)象血紅蛋白是一個四聚體蛋白質(zhì)，

10、具有氧合功能，可在血液中運(yùn)輸氧。研究發(fā)現(xiàn)，脫氧血紅蛋白與氧的親和力很低，不易與氧結(jié)合。一旦血紅蛋白分子中的一個亞基與O2結(jié)合，就會引起該亞基構(gòu)象發(fā)生改變，并引起其它三個亞基的構(gòu)象相繼發(fā)生變化，使它們易于和氧結(jié)合，說明變化后的構(gòu)象最適合與氧結(jié)合。從以上例子可以看出，只有當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)以特定的適當(dāng)空間構(gòu)象存在時才具有生物活性。（五）蛋白質(zhì)的重要性質(zhì)蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，它的酸堿性質(zhì)取決于肽鏈上的可解離的 R 基團(tuán)。不同蛋白質(zhì)所含有的氨基酸的種類、數(shù)目不同，所以具有不同的等電點。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)所處環(huán)境的 pH 大于 pI時，蛋白質(zhì)分子帶負(fù)電荷，pH 小于 pI 時，蛋白質(zhì)帶正電荷，pH 等于 pI 時，蛋白質(zhì)所帶

11、凈電荷為零，此時溶解度最小。蛋白質(zhì)分子表面帶有許多親水基團(tuán)，使蛋白質(zhì)成為親水的膠體溶液。蛋白質(zhì)顆粒周圍的水化膜（水化層）以及非等電狀態(tài)時蛋白質(zhì)顆粒所帶的同性電荷的互相排斥是使蛋白質(zhì)膠體系統(tǒng)穩(wěn)定的主要因素。當(dāng)這些穩(wěn)定因素被破壞時，蛋白質(zhì)會產(chǎn)生沉淀。高濃度中性鹽可使蛋白質(zhì)分子脫水并中和其所帶電荷，從而降低蛋白質(zhì)的溶解度并沉淀析出，即鹽析。但這種作用并不引起蛋白質(zhì)的變性。這個性質(zhì)可用于蛋白質(zhì)的分離。蛋白質(zhì)受到某些物理或化學(xué)因素作用時，引起生物活性的喪失，溶解度的降低以及其它性質(zhì)的改變，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。變性作用的實質(zhì)是由于維持蛋白質(zhì)高級結(jié)構(gòu)的次級鍵遭到破壞而造成天然構(gòu)象的解體，但未涉及共

12、價鍵的斷裂。有些變性是可逆的，有些變性是不可逆的。當(dāng)變性條件不劇烈時，變性是可逆的，除去變性因素后，變性蛋白又可從新回復(fù)到原有的天然構(gòu)象，恢復(fù)或部分恢復(fù)其原有的生物活性，這種現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的復(fù)性。（六）測定蛋白質(zhì)分子量的方法1凝膠過濾法凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子量的大小。由于不同排阻范圍的葡聚糖凝膠有一特定的蛋白質(zhì)分子量范圍，在此范圍內(nèi)，分子量的對數(shù)和洗脫體積之間成線性關(guān)系。因此，用幾種已知分子量的蛋白質(zhì)為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行凝膠層析，以每種蛋白質(zhì)的洗脫體積對它們的分子量的對數(shù)作圖，繪制出標(biāo)準(zhǔn)洗脫曲線。未知蛋白質(zhì)在同樣的條件下進(jìn)行凝膠層析，根據(jù)其所用的洗脫體積，從標(biāo)準(zhǔn)洗脫曲線上可求出此未

13、知蛋白質(zhì)對應(yīng)的分子量。2SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法蛋白質(zhì)在普通聚丙烯酰胺凝膠中的電泳速度取決于蛋白質(zhì)分子的大小、分子形狀和所帶電荷的多少。SDS（十二烷基磺酸鈉）是一種去污劑，可使蛋白質(zhì)變性并解離成亞基。當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)樣品中加入 SDS 后，SDS 與蛋白質(zhì)分子結(jié)合，使蛋白質(zhì)分子帶上大量的強(qiáng)負(fù)電荷，并且使蛋白質(zhì)分子的形狀都變成短棒狀，從而消除了蛋白質(zhì)分子之間原有的帶電荷量和分子形狀的差異。這樣電泳的速度只取決于蛋白質(zhì)分子量的大小，蛋白質(zhì)分子在電泳中的相對遷移率和分子質(zhì)量的對數(shù)成直線關(guān)系。以標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)分子質(zhì)量的對數(shù)和其相對遷移率作圖，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)所測樣品的相對遷移率，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上便可查出其分子

14、質(zhì)量。3沉降法（超速離心法）沉降系數(shù)（S）是指單位離心場強(qiáng)度溶質(zhì)的沉降速度。S 也常用于近似地描述生物大分子的大小。蛋白質(zhì)溶液經(jīng)高速離心分離時，由于比重關(guān)系，蛋白質(zhì)分子趨于下沉，沉降速度與蛋白質(zhì)顆粒大小成正比，應(yīng)用光學(xué)方法觀察離心過程中蛋白質(zhì)顆粒的沉降行為，可判斷出蛋白質(zhì)的沉降速度。根據(jù)沉降速度可求出沉降系數(shù)，將 S 帶入公式，即可計算出蛋白質(zhì)的分子質(zhì)量。M =RTSD(1 Vñ)單位：g/mol1 S= 1 x 10-13 秒-16（沉降系數(shù)）R: 氣體常數(shù) 8.314 J/mol.度；D:擴(kuò)散系數(shù) cm2 s-1í：偏微比容 (蛋白質(zhì)為 0.74ml.g 1)ñ

15、;:溶劑密度二、習(xí)（一）名詞解釋1 兩性離子（dipolarion）2 必需氨基酸（essential amino acid）3 等電點(isoelectric point,pI)4 稀有氨基酸(rare amino acid)5 非蛋白質(zhì)氨基酸(nonprotein amino acid)6 構(gòu)型(configuration)7 蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)(protein primary structure)8 構(gòu)象(conformation)9 蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)(protein secondary structure)10結(jié)構(gòu)域(domain)11蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)(protein tertiary

16、structure)12氫鍵(hydrogen bond)13蛋白質(zhì)的四級結(jié)構(gòu)(protein quaternary structure)14離子鍵(ionic bond)15超二級結(jié)構(gòu)(super-secondary structure)16疏水鍵(hydrophobic bond)17范德華力( van der Waals force)題18鹽析(salting out)19鹽溶(salting in)20蛋白質(zhì)的變性(denaturation)21蛋白質(zhì)的復(fù)性(renaturation)22蛋白質(zhì)的沉淀作用(precipitation)23凝膠電泳（gel electrophoresis

17、）24層析（chromatography）(二)填空題（二）填空題1 氨；羧基；2 16 ；6.253 谷氨酸；天冬氨酸；絲氨酸；蘇氨酸 半胱氨酸4 苯丙氨酸；酪氨酸；色氨酸；紫外吸收5 負(fù)極6 組氨酸；半胱氨酸；蛋氨酸7 -螺旋結(jié)構(gòu)；-折疊結(jié)構(gòu)8 C=O；N=H；氫；0.54nm； 3.6；0.15nm；右9 脯氨酸；羥脯氨酸10極性；疏水性11藍(lán)紫色；脯氨酸12肽鍵；二硫鍵；氫鍵；次級鍵；氫鍵；離子鍵；疏水鍵；范德華力13表面的水化膜；同性電荷14谷胱甘肽；巰基；還原劑15增加；鹽溶；減??；沉淀析出；鹽析；蛋白質(zhì)分離16帶電荷量；分子大小；分子形狀；方向；速率17兩性離子；最小18FDNB

18、 法（2,4-二硝基氟苯法）；Edman 降解法（苯異硫氫酸酯法）19沉降法；凝膠過濾法；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE 法）20不動；向正極移動；向負(fù)極移動；21兩性離子；負(fù)；223.2223氫鍵；24C；a；b2516 672； 66 687；2650 圈；27nm1蛋白質(zhì)多肽鏈中的肽鍵是通過一個氨基酸的_羧基_基和另一氨基酸的_氨基_基連接而形成的。2大多數(shù)蛋白質(zhì)中氮的含量較恒定，平均為_16_%，如測得 1 克樣品含氮量為 10mg,則蛋白質(zhì)含量為_%。3在 20 種氨基酸中，酸性氨基酸有_天冬氨酸_和_谷氨酸_2 種，具有羥基的氨基酸是_絲氨酸_和_蘇氨酸_，能形成二

19、硫鍵的氨基酸是_半胱氨酸_.4蛋白質(zhì)中的_酪氨酸_、_色氨酸_和_苯丙氨酸_3 種氨基酸具有紫外吸收特性，因而色氨酸 使蛋白質(zhì)在 280nm 處有最大吸收值。5精氨酸的 pI 值為 10.76,將其溶于 pH7 的緩沖液中，并置于電場中，則精氨酸應(yīng)向電場的_陰極_方向移動。6組成蛋白質(zhì)的 20 種氨基酸中，含有咪唑環(huán)的氨基酸是_組氨酸_，含硫的氨基酸有_半胱氨酸_和_甲硫氨酸_。7蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)最基本的有兩種類型，它們是_螺旋_和_折疊_。8-螺旋結(jié)構(gòu)是由同一肽鏈的_羰基氧_和_亞氨基_間的_氫鍵_鍵維持的，螺距為_0.54nm_,每圈螺旋含_3.6_個氨基酸殘基，每個氨基酸殘基沿軸上升高度

20、為_0.15nm_。天然蛋白質(zhì)分子中的-螺旋大都屬于_右手_手螺旋。9在蛋白質(zhì)的-螺旋結(jié)構(gòu)中，在環(huán)狀氨基酸_脯氨酸_羥脯氨酸_存在處局部螺旋結(jié)構(gòu)中斷。10球狀蛋白質(zhì)中有_親水_側(cè)鏈的氨基酸殘基常位于分子表面而與水結(jié)合，而有_疏水_側(cè)鏈的氨基酸位于分子的內(nèi)部。11氨基酸與茚三酮發(fā)生氧化脫羧脫氨反應(yīng)生成_紫色_色化合物，而_脯氨酸_與茚三酮反應(yīng)生成黃色化合物。12維持蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)的化學(xué)鍵有_肽鍵_和_二硫鍵_；維持二級結(jié)構(gòu)靠_氫鍵_鍵；維持三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)靠_次級鍵_鍵，其中包括_疏水作用_、_范德華力_、_離子鍵_和_.13穩(wěn)定蛋白質(zhì)膠體的因素是_水化層_和_電荷層_。14 GSH 的中文

21、名稱是 _谷胱甘肽_，它的活性基團(tuán)是 _，它的生化功能是_。15加入低濃度的中性鹽可使蛋白質(zhì)溶解度_增大_，這種現(xiàn)象稱為_鹽溶_，而加入高濃度的中性鹽，當(dāng)達(dá)到一定的鹽飽和度時，可使蛋白質(zhì)的溶解度_減小_并_沉淀_,這種現(xiàn)象稱為_鹽溶_,蛋白質(zhì)的這種性質(zhì)常用于_蛋白質(zhì)的提純_。16用電泳方法分離蛋白質(zhì)的原理，是在一定的 pH 條件下，不同蛋白質(zhì)的_帶電荷量_、_相對分子質(zhì)量_和_極性_不同，因而在電場中移動的_方向_和_快慢_不同，從而使蛋白質(zhì)得到分離。17氨基酸處于等電狀態(tài)時，主要是以_兼性離子_形式存在，此時它的溶解度最小。18鑒定蛋白質(zhì)多肽鏈氨基末端常用的方法有_和_。FDNB 法（2,4

22、-二硝基氟苯法）；Edman 降解法（苯異硫氫酸酯法）19測定蛋白質(zhì)分子量的方法有_、_和_。沉降法；凝膠過濾法；SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法（SDS-PAGE 法）20今有甲、乙、丙三種蛋白質(zhì)，它們的等電點分別為 8.0、4.5 和 10.0,當(dāng)在 pH8.0 緩沖液中，它們在電場中電泳的情況為：甲_不移動_，乙_陰極_，丙_陽極_。21當(dāng)氨基酸溶液的 pH=pI 時，氨基酸以_兼性離子_離子形式存在，當(dāng) pH>pI 時，氨基酸以_負(fù)_離子形式存在。22谷氨酸的pK1(-COOH)2.19, pK2 (-NH+3 ) = 9.67, pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等電點為_3.2

23、2_。23天然蛋白質(zhì)中的螺旋結(jié)構(gòu)，其主鏈上所有的羰基氧與亞氨基氫都參與了鏈內(nèi)_氫鍵_鍵的形成，因此構(gòu)象相當(dāng)穩(wěn)定。24將分子量分別為 a（90 000）、b（45 000）、c（110 000）的三種蛋白質(zhì)混合溶液進(jìn)行凝膠過濾層析，它們被洗脫下來的先后順序是_cab_。25肌紅蛋白的含鐵量為 0.34%，其最小分子量是_164.7_.血紅蛋白的含鐵量也是 0.34%，但每分子含有 4 個鐵原子，血紅蛋白的分子量是_.16 672； 66 687；26一個-螺旋片段含有 180 個氨基酸殘基，該片段中有_50_圈螺旋？該-螺旋片段的軸長為_27nm_.(三) 選擇題C：5 種氨基酸中只有賴氨酸為堿

24、性氨基酸，其等電點為 9.74,大于生理 pH 值，所以帶正電荷。2B：人（或哺乳動物）的必需氨基酸包括賴氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸 8 種，酪氨酸不是必需氨基酸。3A：酪氨酸和苯丙氨酸在 280nm 處的克分子消光系數(shù)分別為 540 何 120,所以酪氨酸比苯丙氨酸有較大吸收，而且大多數(shù)蛋白質(zhì)中都含有酪氨酸。肽鍵的最大吸收在 215nm,半胱氨酸的硫原子在 280nm 和 215nm 均無明顯吸收。4D：在此 4 種氨基酸中，只有賴氨酸的 R 基團(tuán)可接受氫質(zhì)子，作為堿，而其它 3 種氨基酸均無可解離的 R 側(cè)鏈。5B：氨基酸的-碳上連接的是亞氨基而不是

25、氨基，所以實際上屬于一種亞氨基酸，而其它氨基酸的 -碳上都連接有氨基，是氨基酸。6B：天然蛋白質(zhì)的-螺旋結(jié)構(gòu)的特點是，肽鏈圍繞中心軸旋轉(zhuǎn)形成螺旋結(jié)構(gòu)，而不是充分伸展的結(jié)構(gòu)。另外在每個螺旋中含有 3.6 個氨基酸殘基，螺距為 0.54nm,每個氨基酸殘基上升高度為 0.15nm,所以 B 不是-螺旋結(jié)構(gòu)的特點。7C：蛋白質(zhì)處于等電點時，凈電荷為零，失去蛋白質(zhì)分子表面的同性電荷互相排斥的穩(wěn)定因素，此時溶解度最??；加入少量中性鹽可增加蛋白質(zhì)的溶解度，即鹽溶現(xiàn)象；因為蛋白質(zhì)中含有酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸，所以具有紫外吸收特性；變性蛋白質(zhì)的溶解度減小而不是增加，因為蛋白質(zhì)變性后，近似于球狀的空間構(gòu)象被破

26、壞，變成松散的結(jié)構(gòu)，原來處于分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈暴露于分子表面，減小了與水分子的作用，從而使蛋白質(zhì)溶解度減小并沉淀。8C：甘氨酸的-碳原子連接的 4 個原子和基團(tuán)中有 2 個是氫原子，所以不是不對稱碳原子，沒有立體異構(gòu)體，所以不具有旋光性。9B：雙縮脲反應(yīng)是指含有兩個或兩個以上肽鍵的化合物（肽及蛋白質(zhì)）與稀硫酸銅的堿性溶液反應(yīng)生成紫色（或青紫色）化合物的反應(yīng)，產(chǎn)生顏色的深淺與蛋白質(zhì)的含量成正比，所以可用于蛋白質(zhì)的定量測定。茚三酮反應(yīng)是氨基酸的游離的-NH 與茚三酮之間的反應(yīng)；凱氏定氮法是測定蛋白質(zhì)消化后產(chǎn)生的氨；紫外吸收法是通過測定蛋白質(zhì)的紫外消光值定量測定蛋白質(zhì)的方法，因為大多數(shù)蛋白質(zhì)

27、都含有酪氨酸，有些還含有色氨酸或苯丙氨酸，這三種氨基酸具有紫外吸收特性，所以紫外吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比。10D：靡蛋白酶即胰凝乳蛋白酶作用于酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸的羧基參與形成的肽鍵；羧肽酶是從肽鏈的羧基端開始水解肽鍵的外肽酶；氨肽酶是從肽鏈的氨基端開始水解肽鍵的外肽酶；胰蛋白酶可以專一地水解堿性氨基酸的羧基參與形成的肽鍵。11A：蛋白質(zhì)的等電點是指蛋白質(zhì)分子內(nèi)的正電荷桌能總數(shù)與負(fù)電荷總數(shù)相等時的 pH 值。蛋白質(zhì)鹽析的條件是加入足量的中性鹽，如果加入少量中性鹽不但不會使蛋白質(zhì)沉淀析出反而會增加其溶解度，即鹽溶。在等電點時，蛋白質(zhì)的凈電荷為零，分子間的凈電斥力最小，所以溶解度最小，在溶液中

28、易于沉淀，所以通常沉淀蛋白質(zhì)應(yīng)調(diào) pH 至等電點。12A：在蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)中，通常是疏水性氨基酸的側(cè)鏈存在于分子的內(nèi)部，因為疏水性基團(tuán)避開水相而聚集在一起，而親水側(cè)鏈分布在分子的表面以充分地與水作用；蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是多肽鏈中氨基酸的排列順序，此順序即決定了肽鏈形成二級結(jié)構(gòu)的類型以及更高層次的結(jié)構(gòu)；維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用力主要是次級鍵。13E：脯氨酸是亞氨基酸,參與形成肽鍵后不能再與C=O 氧形成氫鍵，因此不能形成-螺旋結(jié)構(gòu);氨基酸殘基的支鏈大時，空間位阻大，妨礙螺旋結(jié)構(gòu)的形成；連續(xù)出現(xiàn)多個酸性氨基酸或堿性氨基酸時，同性電荷會互相排斥，所以不能形成穩(wěn)定的螺旋結(jié)構(gòu)。14C：-折疊結(jié)構(gòu)是一種常

29、見的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的類型，分為平行和反平行兩種排列方式，所以題中 C 項的說法是錯誤的。在-折疊結(jié)構(gòu)中肽鏈處于曲折的伸展?fàn)顟B(tài)，氨基酸殘基之間的軸心距離為 0.35nm, 相鄰肽鏈（或同一肽鏈中的幾個肽段）之間形成氫鍵而使結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。15C：蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的兩種主要類型是-螺旋結(jié)構(gòu)和 -折疊結(jié)構(gòu)。在 -螺旋結(jié)構(gòu)中肽鏈上的所有氨基酸殘基均參與氫鍵的形成以維持螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。在 -折疊結(jié)構(gòu)中，相鄰肽鏈或肽段之間形成氫鍵以維持結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，所以氫鍵是維持蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力。離子鍵、疏水鍵和范德華力在維持蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)中起重要作用，而二硫鍵在穩(wěn)定蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)中起一定作用。16E：

30、肽鍵是連接氨基酸的共價鍵，它是維持蛋白質(zhì)一級結(jié)構(gòu)的作用力；而硫鍵是 2 分子半胱氨酸的巰基脫氫氧化形成的共價鍵，它可以存在于 2 條肽鏈之間也可以由存在于同一條肽鏈的 2 個不相鄰的半胱氨酸之間，它在維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)中起一定作用，但不是最主要的。離子鍵和氫鍵都是維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素之一，但此項選擇不全面，也不確切。次級鍵包括氫鍵、離子鍵、疏水鍵和范德華力，所以次項選擇最全面、確切。17A：用凝膠過濾柱層析分離蛋白質(zhì)是根據(jù)蛋白質(zhì)分子大小不同進(jìn)行分離的方法，與蛋白質(zhì)分子的帶電狀況無關(guān)。在進(jìn)行凝膠過濾柱層析過程中，比凝膠網(wǎng)眼大的分子不能進(jìn)入網(wǎng)眼內(nèi)，被排阻在凝膠顆粒之外。比凝膠網(wǎng)眼小的顆?？?/p>

31、以進(jìn)入網(wǎng)眼內(nèi)，分子越小進(jìn)入網(wǎng)眼的機(jī)會越多，因此不同大小的分子通過凝膠層析柱時所經(jīng)的路程距離不同，大分子物質(zhì)經(jīng)過的距離短而先被洗出，小分子物質(zhì)經(jīng)過的距離長，后被洗脫，從而使蛋白質(zhì)得到分離。18A：蛋白質(zhì)的變性是其空間結(jié)構(gòu)被破壞，從而引起理化性質(zhì)的改變以及生物活性的喪失，但其一級結(jié)構(gòu)不發(fā)生改變，所以肽鍵沒有斷裂。蛋白質(zhì)變性的機(jī)理是維持其空間結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的作用力被破壞，氫鍵、離子鍵和疏水鍵都是維持蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用力，當(dāng)這些作用力被破壞時空間結(jié)構(gòu)就被破壞并引起變性，所以與變性有關(guān)。19A：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)即蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序決定蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象，因為一級結(jié)構(gòu)中包含著形成空間結(jié)構(gòu)所需要的所有

32、信息，氨基酸殘基的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)決定了所組成的蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)的類型以及三級、四級結(jié)構(gòu)的構(gòu)象；二硫鍵和次級鍵都是維持蛋白質(zhì)空間構(gòu)象穩(wěn)定的作用力，但不決定蛋白質(zhì)的構(gòu)象；溫度及 pH 影響蛋白質(zhì)的溶解度、解離狀態(tài)、生物活性等性質(zhì)，但不決定蛋白質(zhì)的構(gòu)象。20B：氨基酸即有羧基又有氨基，可以提供氫質(zhì)子也可以接受氫質(zhì)子，所以即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。由氨基酸組成的蛋白質(zhì)分子上也有可解離基團(tuán)，如谷氨酸和天冬氨酸側(cè)鏈基團(tuán)的羧基以及賴氨酸的側(cè)鏈氨基，所以也是兩性電解質(zhì)，這是氨基酸和蛋白質(zhì)所共有的性質(zhì)；膠體性質(zhì)是蛋白質(zhì)所具有的性質(zhì)，沉淀反應(yīng)是蛋白質(zhì)的膠體性質(zhì)被破壞產(chǎn)生的現(xiàn)象；變性是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)被破壞后性質(zhì)

33、發(fā)生改變并喪失生物活性的現(xiàn)象，這三種現(xiàn)象均與氨基酸無關(guān)。21E： 氨基酸分子上的正電荷數(shù)和負(fù)電荷數(shù)相等時的 pH 值是其等電點，即凈電荷為零，此時在電場中不泳動。由于凈電荷為零，分子間的凈電斥力最小，所以溶解度最小。22B：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是指蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，蛋白質(zhì)中所含氨基酸的種類和數(shù)目相同但排列順序不同時，其一級結(jié)構(gòu)以及在此基礎(chǔ)上形成的空間結(jié)構(gòu)均有很大不同。蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤繞是蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的內(nèi)容，所以 B 項正確。1在生理 pH 條件下，下列哪種氨基酸帶正電荷？CA丙氨酸D蛋氨酸B酪氨酸E異亮氨酸C賴氨酸2下列氨基酸中哪一種是非必需氨基酸？BA亮氨酸D蛋氨酸B

34、酪氨酸E蘇氨酸C賴氨酸3蛋白質(zhì)的組成成分中，在 280nm 處有最大吸收值的最主要成分是：AA酪氨酸的酚環(huán)C肽鍵B半胱氨酸的硫原子D苯丙氨酸4下列 4 種氨基酸中哪個有堿性側(cè)鏈？DA脯氨酸B苯丙氨酸C異亮氨酸D賴氨酸5下列哪種氨基酸屬于亞氨基酸？BA絲氨酸B脯氨酸C亮氨酸D組氨酸6下列哪一項不是蛋白質(zhì)-螺旋結(jié)構(gòu)的特點？BA天然蛋白質(zhì)多為右手螺旋B肽鏈平面充分伸展C每隔 3.6 個氨基酸螺旋上升一圈。D每個氨基酸殘基上升高度為 0.15nm.7下列哪一項不是蛋白質(zhì)的性質(zhì)之一？CA處于等電狀態(tài)時溶解度最小C變性蛋白質(zhì)的溶解度增加8下列氨基酸中哪一種不具有旋光性？CB加入少量中性鹽溶解度增加D有紫外

35、吸收特性ALeuBAlaCGlyDSerEVal9在下列檢測蛋白質(zhì)的方法中，哪一種取決于完整的肽鏈？BA凱氏定氮法B雙縮尿反應(yīng)C紫外吸收法D茚三酮法10下列哪種酶作用于由堿性氨基酸的羧基形成的肽鍵？DA糜蛋白酶B羧肽酶C氨肽酶D胰蛋白酶11下列有關(guān)蛋白質(zhì)的敘述哪項是正確的？AA蛋白質(zhì)分子的凈電荷為零時的 pH 值是它的等電點B大多數(shù)蛋白質(zhì)在含有中性鹽的溶液中會沉淀析出C由于蛋白質(zhì)在等電點時溶解度最大，所以沉淀蛋白質(zhì)時應(yīng)遠(yuǎn)離等電點D以上各項均不正確12下列關(guān)于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的敘述，哪一項是錯誤的？ AA氨基酸的疏水側(cè)鏈很少埋在分子的中心部位B電荷的氨基酸側(cè)鏈常在分子的外側(cè)，面向水相C蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)

36、在決定高級結(jié)構(gòu)方面是重要因素之一D蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)主要靠次級鍵維持13下列哪些因素妨礙蛋白質(zhì)形成-螺旋結(jié)構(gòu)？EAA脯氨酸的存在C酸性氨基酸的相鄰存在E以上各項都是B氨基酸殘基的大的支鏈D堿性氨基酸的相鄰存在14關(guān)于-折疊片的敘述，下列哪項是錯誤的？B CA-折疊片的肽鏈處于曲折的伸展?fàn)顟B(tài)B的結(jié)構(gòu)是借助于鏈內(nèi)氫鍵穩(wěn)定的C有的-折疊片結(jié)構(gòu)都是通過幾段肽鏈平行排列而形成的D基酸之間的軸距為 0.35nm14C：-折疊結(jié)構(gòu)是一種常見的蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的類型，分為平行和反平行兩種排列方式，所以題中 C 項的說法是錯誤的。在-折疊結(jié)構(gòu)中肽鏈處于曲折的伸展?fàn)顟B(tài)，氨基酸殘基之間的軸心距離為 0.35nm, 相鄰

37、肽鏈（或同一肽鏈中的幾個肽段）之間形成氫鍵而使結(jié)構(gòu)穩(wěn)定。15維持蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的主要作用力是：CA鹽鍵B疏水鍵C氫鍵D二硫鍵16維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)穩(wěn)定的因素是：EA肽鍵B二硫鍵C離子鍵D氫鍵E次級鍵17凝膠過濾法分離蛋白質(zhì)時，從層析柱上先被洗脫下來的是：B AA分子量大的C電荷多的B分子量小的D帶電荷少的18. 下列哪項與蛋白質(zhì)的變性無關(guān)？AA. 肽鍵斷裂C離子鍵被破壞B氫鍵被破壞D疏水鍵被破壞19蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的特征主要取決于下列哪一項？AA多肽鏈中氨基酸的排列順序C鏈內(nèi)及鏈間的二硫鍵B次級鍵D溫度及 pH20下列哪個性質(zhì)是氨基酸和蛋白質(zhì)所共有的？BA膠體性質(zhì)C沉淀反應(yīng)B兩性性質(zhì)D變性性

38、質(zhì)E雙縮脲反應(yīng)21氨基酸在等電點時具有的特點是： ECA不帶正電荷CA 和 BE在電場中不泳動22蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是指：BB不帶負(fù)電荷D溶解度最大A蛋白質(zhì)氨基酸的種類和數(shù)目C蛋白質(zhì)分子中多肽鏈的折疊和盤繞(四) 是非判斷題B蛋白質(zhì)中氨基酸的排列順序D包括 A,B 和 C(×) 1氨基酸與茚三酮反應(yīng)都產(chǎn)生藍(lán)紫色化合物。) 2因為羧基碳和亞氨基氮之間的部分雙鍵性質(zhì)，所以肽鍵不能自由旋轉(zhuǎn)。×) 3所有的蛋白質(zhì)都有酶活性。1錯：脯氨酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生黃色化合物，其它氨基酸與茚三酮反應(yīng)產(chǎn)生藍(lán)色化合物。2對：在肽平面中，羧基碳和亞氨基氮之間的鍵長為 0.132nm，介于 CN 單鍵和

39、CN 雙鍵之間，具有部分雙鍵的性質(zhì)，不能自由旋轉(zhuǎn)。3錯：蛋白質(zhì)具有重要的生物功能，有些蛋白質(zhì)是酶，可催化特定的生化反應(yīng)，有些蛋白質(zhì)則具有其它的生物功能而不具有催化活性，所以不是所有的蛋白質(zhì)都具有酶的活性。4錯：-碳和羧基碳之間的鍵是 CC 單鍵，可以自由旋轉(zhuǎn)。5對：在 20 種氨基酸中，除甘氨酸外都具有不對稱碳原子，所以具有 L-型和 D-型 2 種不同構(gòu)型，這兩種不同構(gòu)型的轉(zhuǎn)變涉及到共價鍵的斷裂和從新形成。6錯：由于甘氨酸的-碳上連接有 2 個氫原子，所以不是不對稱碳原子，沒有 2 種不同的立體異構(gòu)體，所以不具有旋光性。其它常見的氨基酸都具有不對稱碳原子，因此具有旋光性。7錯：必需氨基酸是指

40、人（或哺乳動物）自身不能合成機(jī)體又必需的氨基酸，包括 8 種氨基酸。其它氨基酸人體自身可以合成，稱為非必需氨基酸。8對：蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序，不同氨基酸的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)不同，因而決定了多肽鏈形成二級結(jié)構(gòu)的類型以及不同類型之間的比例以及在此基礎(chǔ)上形成的更高層次的空間結(jié)構(gòu)。如在脯氨酸存在的地方-螺旋中斷，R 側(cè)鏈具有大的支鏈的氨基酸聚集的地方妨礙螺旋結(jié)構(gòu)的形成，所以一級結(jié)構(gòu)在很大程度上決定了蛋白質(zhì)的空間構(gòu)象。9錯：一氨基一羧基氨基酸為中性氨基酸，其等電點為中性或接近中性，但氨基和羧基的解離度，即 pK 值不同。10錯：蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的破壞，這是由于維持蛋白

41、質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定的作用力次級鍵被破壞所造成的，但變性不引起多肽鏈的降解，即肽鏈不斷裂。11對：有些蛋白質(zhì)是由一條多肽鏈構(gòu)成的，只具有三級結(jié)構(gòu)，不具有四級結(jié)構(gòu)，如肌紅蛋白。12對：血紅蛋白是由 4 個亞基組成的具有 4 級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，當(dāng)血紅蛋白的一個亞基與氧結(jié)合后可加速其它亞基與氧的結(jié)合，所以具有變構(gòu)效應(yīng)。肌紅蛋白是僅有一條多肽鏈的蛋白質(zhì)，具有三級結(jié)構(gòu)，不具有四級結(jié)構(gòu)，所以在與氧的結(jié)合過程中不表現(xiàn)出變構(gòu)效應(yīng)。13錯：Edman 降解法是多肽鏈 N 端氨基酸殘基被苯異硫氫酸酯修飾，然后從多肽鏈上切下修飾的殘基，經(jīng)層析鑒定可知 N 端氨基酸的種類，而余下的多肽鏈仍為一條完整的多肽鏈，被回收后可繼續(xù)進(jìn)行下

42、一輪 Edman 反應(yīng)，測定 N 末端第二個氨基酸。反應(yīng)重復(fù)多次就可連續(xù)測出多肽鏈的氨基酸順序。FDNB 法（Sanger 反應(yīng)）是多肽鏈 N 末端氨基酸與 FDNB（2,4-二硝基氟苯）反應(yīng)生成二硝基苯衍生物（DNP-蛋白），然后將其進(jìn)行酸水解，打斷所有肽鍵，N 末端氨基酸與二硝基苯基結(jié)合牢固，不易被酸水解。水解產(chǎn)物為黃色的 N 端 DNP-氨基酸和各種游離氨基酸。將 DNP-氨基酸抽提出來并進(jìn)行鑒定可知N 端氨基酸的種類，但不能測出其后氨基酸的序列。14對：大多數(shù)氨基酸的-碳原子上都有一個自由氨基和一個自由羧基，但脯氨酸和羥脯氨酸的-碳原子上連接的氨基氮與側(cè)鏈的末端碳共價結(jié)合形成環(huán)式結(jié)構(gòu)，

43、所以不是自由氨基。15對：蛋白質(zhì)是由氨基酸組成的大分子，有些氨基酸的R側(cè)鏈具有可解離基團(tuán)，如羧基、氨基、咪唑基等等。這些基團(tuán)有的可釋放H+ ,有的可接受H+,所以使得蛋白質(zhì)分子即是酸又是堿，是兩性電解質(zhì)。蛋白質(zhì)分子中可解離R基團(tuán)的種類和數(shù)量決定了蛋白質(zhì)提供和接受H+ 的能力，即決定了它的酸堿性質(zhì)。16對：在具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子中，每個具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈?zhǔn)且粋€亞基。17錯：具有兩個或兩個以上肽鍵的物質(zhì)才具有類似于雙縮脲的結(jié)構(gòu)，具有雙縮脲反應(yīng)，而二肽只具有一個肽鍵，所以不具有雙縮脲反應(yīng)。18錯：二硫鍵是由兩個半胱氨酸的巰基脫氫氧化而形成的，所以兩個半胱氨酸只能形成一個二硫鍵。19對：鹽析引起

44、的蛋白質(zhì)沉淀是由于大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素（蛋白質(zhì)分子表面的水化膜及所帶同性電荷互相排斥），從而使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀，但并未破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，所以不引起變性。根據(jù)不同蛋白質(zhì)鹽析所需的鹽飽和度分段鹽析可將蛋白質(zhì)進(jìn)行分離和純化。20錯：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)包括二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)三個層次，三級結(jié)構(gòu)只是其中一個層次。21錯：維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的作用力有氫鍵、離子鍵、疏水鍵、范德華力以及二硫鍵，其中最重要的是疏水鍵。22錯：具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，只有所有的亞基以特定的適當(dāng)方式組裝在一起時才具有生物活性，缺少一個亞基或單獨(dú)一個亞基存在時都不具有生物活性。23錯：蛋白質(zhì)變性是由于

45、維持蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定的作用力（次級鍵和而硫鍵）被破壞從而使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)被破壞并山個喪失生物活性的現(xiàn)象。次級鍵被破壞以后，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)松散，原來聚集在分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈伸向外部，減弱了蛋白質(zhì)分子與水分子的相互作用，因而使溶解度將低。24錯：蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是由鏈內(nèi)氫鍵維持的，如-螺旋結(jié)構(gòu)和 -折疊結(jié)構(gòu)中的氫鍵均起到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的作用。但并非肽鏈中所有的肽鍵都參與氫鍵的形成，如脯氨酸與相鄰氨基酸形成的肽鍵，以及自由回轉(zhuǎn)中的有些肽鍵不能形成鏈內(nèi)氫鍵。(×(×(×(×(×(×) 4-碳和羧基碳之間的鍵不能自由旋轉(zhuǎn)。×) 5多

46、數(shù)氨基酸有 D-和 L-兩種不同構(gòu)型，而構(gòu)型的改變涉及共價鍵的破裂。×) 6所有氨基酸都具有旋光性。×) 7構(gòu)成蛋白質(zhì)的 20 種氨基酸都是必需氨基酸。) 8蛋白質(zhì)多肽鏈中氨基酸的排列順序在很大程度上決定了它的構(gòu)象。×) 9一氨基一羧基氨基酸的pI為中性，因為-COOH和-NH2 的解離度相同。×) 10蛋白質(zhì)的變性是蛋白質(zhì)立體結(jié)構(gòu)的破壞，因此涉及肽鍵的斷裂。) 11蛋白質(zhì)是生物大分子，但并不都具有四級結(jié)構(gòu)。×) 12血紅蛋白和肌紅蛋白都是氧的載體，前者是一個典型的變構(gòu)蛋白，在與氧結(jié)合過程中呈現(xiàn)變構(gòu)效應(yīng)，而后者卻不是。×) 13. 用

47、 FDNB 法和 Edman 降解法測定蛋白質(zhì)多肽鏈 N-端氨基酸的原理是相同的。) 14并非所有構(gòu)成蛋白質(zhì)的 20 種氨基酸的-碳原子上都有一個自由羧基和一個自由氨基。) 15蛋白質(zhì)是兩性電解質(zhì)，它的酸堿性質(zhì)主要取決于肽鏈上可解離的 R 基團(tuán)。) 16在具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)分子中，每個具有三級結(jié)構(gòu)的多肽鏈?zhǔn)且粋€亞基。) 17所有的肽和蛋白質(zhì)都能和硫酸銅的堿性溶液發(fā)生雙縮尿反應(yīng)。) 18一個蛋白質(zhì)分子中有兩個半胱氨酸存在時，它們之間可以形成兩個二硫鍵。) 19鹽析法可使蛋白質(zhì)沉淀，但不引起變性，所以鹽析法常用于蛋白質(zhì)的分離制備。) 20蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)就是它的三級結(jié)構(gòu)。) 21維持蛋白質(zhì)三級結(jié)

48、構(gòu)最重要的作用力是氫鍵。)22具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，它的每個亞基單獨(dú)存在時仍能保存蛋白質(zhì)原有的生物活性。)23變性蛋白質(zhì)的溶解度降低，是由于中和了蛋白質(zhì)分子表面的電荷及破 壞了外層的水膜所引起的。)24蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是靠鏈內(nèi)氫鍵維持的，肽鏈上每個肽鍵都參與氫鍵的形成。18錯：二硫鍵是由兩個半胱氨酸的巰基脫氫氧化而形成的，所以兩個半胱氨酸只能形成一個二硫鍵。19對：鹽析引起的蛋白質(zhì)沉淀是由于大量的中性鹽破壞了蛋白質(zhì)膠體的穩(wěn)定因素（蛋白質(zhì)分子表面的水化膜及所帶同性電荷互相排斥），從而使蛋白質(zhì)溶解度降低并沉淀，但并未破壞蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)，所以不引起變性。根據(jù)不同蛋白質(zhì)鹽析所需的鹽飽和度分段鹽

49、析可將蛋白質(zhì)進(jìn)行分離和純化。20錯：蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)包括二級結(jié)構(gòu)、三級結(jié)構(gòu)和四級結(jié)構(gòu)三個層次，三級結(jié)構(gòu)只是其中一個層次。21錯：維持蛋白質(zhì)三級結(jié)構(gòu)的作用力有氫鍵、離子鍵、疏水鍵、范德華力以及二硫鍵，其中最重要的是疏水鍵。22錯：具有四級結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)，只有所有的亞基以特定的適當(dāng)方式組裝在一起時才具有生物活性，缺少一個亞基或單獨(dú)一個亞基存在時都不具有生物活性。23錯：蛋白質(zhì)變性是由于維持蛋白質(zhì)構(gòu)象穩(wěn)定的作用力（次級鍵和而硫鍵）被破壞從而使蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)被破壞并山個喪失生物活性的現(xiàn)象。次級鍵被破壞以后，蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)松散，原來聚集在分子內(nèi)部的疏水性氨基酸側(cè)鏈伸向外部，減弱了蛋白質(zhì)分子與水分子的相互作用，

50、因而使溶解度將低。24錯：蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性是由鏈內(nèi)氫鍵維持的，如-螺旋結(jié)構(gòu)和 -折疊結(jié)構(gòu)中的氫鍵均起到穩(wěn)定結(jié)構(gòu)的作用。但并非肽鏈中所有的肽鍵都參與氫鍵的形成，如脯氨酸與相鄰氨基酸形成的肽鍵，以及自由回轉(zhuǎn)中的有些肽鍵不能形成鏈內(nèi)氫鍵。（五）問答題1什么是蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)？為什么說蛋白質(zhì)的一級結(jié)構(gòu)決定其空間結(jié)構(gòu)？2什么是蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)？蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)與其生物功能有何關(guān)系？3蛋白質(zhì)的螺旋結(jié)構(gòu)有何特點？4蛋白質(zhì)的折疊結(jié)構(gòu)有何特點？5舉例說明蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與其功能之間的關(guān)系。6什么是蛋白質(zhì)的變性作用和復(fù)性作用？蛋白質(zhì)變性后哪些性質(zhì)會發(fā)生改變？7簡述蛋白質(zhì)變性作用的機(jī)制。8蛋白質(zhì)有哪些重要功能9下

51、列試劑和酶常用于蛋白質(zhì)化學(xué)的研究中：CNBr、異硫氰酸苯酯、丹黃酰氯、脲、6mol/LHCl、-巰基乙醇、水合茚三酮、過甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一個最適合完成以下各項任務(wù)？（1）測定小肽的氨基酸序列。（2）鑒定肽的氨基末端殘基。（3）不含二硫鍵的蛋白質(zhì)的可逆變性；如有二硫鍵存在時還需加什么試劑？（4）在芳香族氨基酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（4）在蛋氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。（5）在賴氨酸和精氨酸殘基羧基側(cè)水解肽鍵。10根據(jù)蛋白質(zhì)一級氨基酸序列可以預(yù)測蛋白質(zhì)的空間結(jié)構(gòu)。假設(shè)有下列氨基酸序列（如圖）：151015Ile-Ala-His-Thr-Tyr-Gly-Pro-Glu-Ala-Ala-Met-Cys-Lys-Try-Glu-Ala-Gln-20252