薄層色譜分析步驟及注意事項(xiàng)

1、薄層色譜分析步驟及注意事項(xiàng)薄層色譜法(thin layer chromatography簡(jiǎn)寫tlc)是一種物理化學(xué)的分離技術(shù)，常 用于藥物的分離與分析?，F(xiàn)對(duì)此方法的分析步驟及注意事項(xiàng)提點(diǎn)建議。完成tlc分析通常需經(jīng)制板、點(diǎn)樣、展開、檢出4步操作。制板在一平面支持物(通常為玻璃)上，均勻地涂制硅膠、氧化鋁或其他吸附劑薄 層、樣品的分離、檢測(cè)就在此薄層色譜板上進(jìn)行。一般選用適當(dāng)規(guī)格的表面光滑平整的玻璃板。常用的薄層板規(guī)格有： 10cmx20cm> 5cmx20cm> 20cmx20cm 等。稱取適量硅膠，加入 0.2%0.5%竣 甲基纖維素鈉溶液(cmc-na),充分?jǐn)嚢杈鶆颍M(jìn)行制板

2、。一般來說10cmx20cm 的玻璃板，35g硅膠/塊；硅膠與竣甲基纖維素鈉的比例一般為1： 21： 4。 制好的玻璃板放于水平臺(tái)上，注意防塵。在空氣中自然干燥后，置110°c烘箱中 烘0.5lh,取出，放涼，并將其放于紫外光燈(254nm)下檢視，薄層板應(yīng)無花斑、 水印，方可備用。點(diǎn)樣用微量進(jìn)樣器進(jìn)行點(diǎn)樣。點(diǎn)樣前，先用鉛筆在層析上距末端lcm處輕輕畫 一橫線，然后用毛細(xì)管吸取樣液在橫線上輕輕點(diǎn)樣，如果要重新點(diǎn)樣，一定要等 前一次點(diǎn)樣殘余的溶劑揮發(fā)后再點(diǎn)樣，以免點(diǎn)樣斑點(diǎn)過大。一般斑點(diǎn)直徑大于 2mm,不宜超過5mm.底線距基線12. 5cm,點(diǎn)間距離為lcm左右，樣點(diǎn)與玻 璃邊緣距離

3、至少lcm,為防止邊緣效應(yīng)，可將薄層板兩邊刮去12cm,再進(jìn)行 點(diǎn)樣。展開將點(diǎn)了樣的薄層板放在盛在有展開劑的展開槽屮，由于毛細(xì)管作用，展開溶 劑在薄層板上緩慢前進(jìn)，前進(jìn)至一定距離后，取岀薄層板，樣品組分因移動(dòng)速度 不同而彼此分離。 展開室應(yīng)預(yù)飽和。為達(dá)到飽和效果，可在室中加入足夠量的展開劑；或者在 壁上貼兩條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開劑屮，密封室頂?shù)纳w。 展開劑一般為兩種以上互溶的有機(jī)溶劑，并且臨用時(shí)新配為宜。 薄層板點(diǎn)樣后，應(yīng)待溶劑揮發(fā)完，再放人展開室中展開。 展開應(yīng)密閉，展距一般為815cm。薄層板放入展開室時(shí)，展開劑不能沒過 樣點(diǎn)。一般情況下，展開劑浸入薄層下端的高度不宜超過0

4、.5cim 展開劑每次展開后，都需要更換，不能重復(fù)使用。 展開后的薄層板用適當(dāng)?shù)姆椒ǎ谷軇]發(fā)完全，然后進(jìn)行檢視。 rf值一般控制在0.30.8,當(dāng)rf值很大或很小時(shí)，應(yīng)適當(dāng)改變流動(dòng)相的比例。斑點(diǎn)的檢出展開后的薄層板經(jīng)過干燥后，常用紫外光燈照射或用顯色劑顯色檢出斑點(diǎn)。 對(duì)于無色組分，在用顯色劑時(shí)，顯色劑噴灑要均勻，量要適度。紫外光燈的功率 越大，暗室越暗，檢出效果就越好。展開分離后，化合物在薄層板上的位置用比移值(rf值)來表示?；衔锇唿c(diǎn) 中心至原點(diǎn)的距離與溶劑前沿至原點(diǎn)的距離的比值就是該化合物的rf值。(-)有機(jī)合成中展開劑的選擇做有機(jī)合成時(shí)走板子是常有的事，展開劑的選擇就至關(guān)重要了。選

5、擇適當(dāng)?shù)?展開劑是首要任務(wù)。一般常用溶劑按照極性從小到人的順序排列大概為：石油醯 v己烷v苯乙kthf乙酸乙酯丙酮乙醇v甲醇。使用單一溶劑，往往不能達(dá) 到很好的分離效果，往往使用混合溶劑通常使用一個(gè)高極性和低級(jí)性溶劑組成的 混合溶劑，高極性的溶劑還有增加區(qū)分度的作用，展開劑的比例要靠嘗試。一般 根據(jù)文獻(xiàn)中報(bào)道的該類化合物用什么樣的展開劑，就首先嘗試使用該類展開劑， 然后不斷嘗試比例，直到找到一個(gè)分離效果好的展開劑。展開劑的選擇條件：對(duì)所需成分有良好的溶解性；可使成分間分開； 待測(cè)組分的rf在0.20.8之間，定量測(cè)定在0.30.5之間；不與待測(cè)組分或吸 附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；沸點(diǎn)適中，黏度較?。徽?/p>

6、開后組分斑點(diǎn)圓且集中；混 合溶劑最好用新鮮配制。一般來說，弱極性溶劑體系的基本兩相由正己烷和水組成，再根據(jù)需要加入 甲醇、乙醇，乙酸乙酯來調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果，適合于生 物堿、黃酮、惦類等的分離；中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由甲醇、乙醇，乙酸乙酯等 來調(diào)節(jié)，適合于蔥釀、香豆素，以及一些極性較大的木脂素和祜類的分離；強(qiáng)極性溶劑，由正丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來調(diào)節(jié)，適 合于極性很大的生物堿類化合物的分離。很多時(shí)候，展開劑的選擇要靠自己不斷變換展開劑的組成來達(dá)到最佳效果。我們?cè)趯?shí)驗(yàn)中，為了實(shí)現(xiàn)一個(gè)配體與其他雜質(zhì)有效分離，曾經(jīng)嘗試了很多種的溶 劑組合，最

7、后才找到石油g-etoac-hcooh （5.5： 3.5： 0.1）混合溶劑。一般把 兩種溶劑混合時(shí)，采用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑，如果有分開的跡 象，再調(diào)整比例（或者加入第三種溶劑），達(dá)到最佳效果；如果沒有分開的跡象（斑 點(diǎn)較“拖最好是換溶劑。對(duì)于在硅膠中這種酸性物質(zhì)上易分解的物質(zhì)，在展 開劑里往往加一點(diǎn)點(diǎn)三乙胺，氨水，毗噪等堿性物質(zhì)來中和硅膠的酸性。（選擇 所添加的堿性物質(zhì)，還必須考慮容易從產(chǎn)品中除去，氨水無疑是較好的選擇。）分離效果的好壞和所用硅膠和溶劑的質(zhì)量很有關(guān)系：不同廠家生產(chǎn)的硅膠可 能含水量以及顆粒的粗細(xì)程度，酸性強(qiáng)弱不同，從而導(dǎo)致產(chǎn)品在某個(gè)廠家的硅膠 中分離效

8、果很好，但在另一個(gè)廠家的就不行。溶劑的含水量和雜質(zhì)含量對(duì)分離效 果都有明顯的影響。溫度，濕度對(duì)分離效果影響也很明顯，在實(shí)騎中我們發(fā)現(xiàn)有 時(shí)同一展開條件，上下午的r截然不同。展開劑的選擇主要根據(jù)樣品的極性、溶解度和吸附劑的活性等因素來考慮， 在進(jìn)行薄層層析時(shí)，首先應(yīng)該知道未知化學(xué)成分的類型，其極性的大致歸屬，從 提取液或從色譜柱的流動(dòng)相極性可知，另外某樣品里含多種化學(xué)成分先按極性不 同大致分，然后細(xì)分，對(duì)于分離未知的化學(xué)物質(zhì)，展開劑的選擇也是一個(gè)摸索的 過程，不應(yīng)該僅僅從展開劑考慮，多因素綜合衡量！溶劑：層析過程屮溶劑的選 擇，對(duì)組分分離關(guān)系極大。在柱層析吋所用的溶劑（單一劑或混合溶劑）習(xí)慣上

9、稱洗脫劑，用于薄層或紙層析時(shí)常稱展開劑。洗脫劑的選擇，須根據(jù)被分離物質(zhì) 與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結(jié)合起來加以考慮在用極性吸附劑進(jìn)行層析時(shí)，當(dāng) 被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì)，一般選用弱極性溶劑為洗脫劑；被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性 成分，則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對(duì)某一極性物質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑 （如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑的極性亦須相應(yīng)降低。在柱層操作 時(shí)，被分離樣品在加樣時(shí)可采用于法，亦可選一適宜的溶劑將樣品溶解后加入。 溶解樣品的溶劑應(yīng)選擇極性較小的，以便被分離的成分可以被吸附。然后漸增大 溶劑的極性。這種極性的增大是一個(gè)十分緩慢的過程，稱為“梯度洗脫”，使吸附 在層析柱上的各個(gè)成分逐

10、個(gè)被洗脫。如果極性增大過訣（梯度太大），就不能獲 得滿意的分離。溶劑的洗脫能力，有時(shí)可以用溶劑的介電常'數(shù)&）來表示。介 電常數(shù)高，洗脫能力就大。以上的洗脫順序僅適用于極性吸附劑，如硅膠、氧化 鋁。對(duì)非極性吸附劑，如活性炭，則正好與上述順序相反，在水或親水住溶劑中 所形成的吸附作用，較在脂溶性溶劑中為強(qiáng)。被分離物質(zhì)的性質(zhì)被分離的物質(zhì)與吸附劑，洗脫劑共同構(gòu)成吸附層析中的三個(gè)要素，彼此緊密 相連。在指定的吸附劑與洗脫劑的條件下，各個(gè)成分的分離情況，直接與被分離 物質(zhì)的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)有關(guān)。對(duì)極性吸附劑而言，成分的極性大，吸附住強(qiáng)。當(dāng)然， 中草藥成分的整體分子觀是重要的，例如極性基團(tuán)的數(shù)f

11、t愈多，被吸附的住能就 會(huì)更大些，在同系物中碳原子數(shù)目少些，被吸附也會(huì)強(qiáng)些?？倆,只要兩個(gè)成分 在結(jié)構(gòu)上存在差別，就有可能分離，關(guān)鍵在于條件的選擇。要根據(jù)被分離物質(zhì)的 性質(zhì)，吸附劑的吸附強(qiáng)度，與溶劑的性質(zhì)這三者的相互關(guān)系來考慮。首先要考慮 被分離物質(zhì)的極性。如被分離物質(zhì)極性很小為不含氧的祜烯，或雖含氧但菲極性 基團(tuán)，則需選用吸附性較強(qiáng)的吸附劑，并用弱極性溶劑如石油儲(chǔ)或苯進(jìn)行洗脫。 但多數(shù)中藥成分的極性較大，則需要選擇吸附性能較弱的吸附劑（一般iiiiv 級(jí)）。采用的洗脫劑極性應(yīng)由小到大按某一梯度遞增，或可應(yīng)用薄層層析以判斷 被分離物在某種溶劑系統(tǒng)中的分離情況。此外，能否獲得滿意的分離，述與選擇

12、 的溶劑梯度有很大關(guān)系?，F(xiàn)以實(shí)例說明吸附層析中吸附劑、洗脫劑與樣品極性之 間的關(guān)系。如有多組分的混合物，象植物油脂系由烷坯、烯坯、舀醇酯類、甘油 三酸醋和脂肪酸等組份。如對(duì)于c-27 體皂貳元類成分，能因其分字中梵基數(shù) 目的多少而獲得分離：將混合皂貳元溶于含有5%氯仿的苯中，加于氧化鋁的吸 附柱上，采用以下的溶劑進(jìn)行梯度洗脫。如改用吸附性較弱的硅酸鎂以替代氧化 鋁，由于硅酸鎂的吸附性較弱，洗脫劑的極牲需相應(yīng)降低，亦即采用苯或含5% 氯仿的苯，即可將一元拜基皂貳元從吸附劑上洗脫下來。這一例子說明，同樣的 中草藥成分在不同的吸附劑中層析吋，需用不同的溶劑才能達(dá)到相同的分離效 果，從而說明吸附劑、溶

13、劑和欲分離成分三者的相互關(guān)系。（-）簿層層析：薄層層析是一種簡(jiǎn)便、快速、微量的層析方法。一般將柱 層析用的吸附劑撒布到平面如玻璃片上，形成一薄層進(jìn)行層析時(shí)一即稱薄層層 析。其原理與柱層析基本相似。1 薄層層析的特點(diǎn)：薄層層析在應(yīng)用與操作方面的特點(diǎn)與柱層析的比較。2. 吸附劑的選擇：薄層層析用的吸附劑與其選擇原則和柱層析相同。主要區(qū)別 在于薄層層析要求吸附劑（支持劑）的粒度更細(xì)，一般應(yīng)小于250目，并要求粒 度均勻。用于薄層層析的吸附劑或預(yù)制薄層一般活度不宜過高，以iiiii級(jí)為宜。 而展開距離則隨薄層的粒度粗細(xì)而定，薄層粒度越細(xì)，展開距離相應(yīng)縮短，一般 不超過10厘米，否則可引起色譜擴(kuò)散影響分

14、離效果。3. 展開劑的選擇：薄層層析，當(dāng)吸附劑活度為一定值時(shí)（如ii或iii級(jí)），對(duì)多組 分的樣品能否獲得滿意的分離，決定于展開劑的選擇。中草藥化學(xué)成分在脂溶性 成分中，大致可按其極性不同而分為無極性、弱極性、中極性與強(qiáng)極性。但在實(shí) 際工作屮，經(jīng)常需要利用溶劑的極性大小，對(duì)展開劑的極性予以調(diào)整。展開劑的選擇：一般常用溶劑按照極性從小到大的順序排列大概為：石油醯v己烷v苯v乙醯 v乙酸乙酯v丙酮v乙醇v甲醇。使用單一溶劑，往往不能達(dá)到很好的分離效果， 往往使用混合溶劑通常使用一個(gè)高極性和低級(jí)性溶劑組成的混合溶劑，高極性的 溶劑還有増加區(qū)分度的作用，常用的溶劑組合有：<p>petrol

15、eumether/ethylacetate,petroleumether/acetone,petroleumether/ether,petroleumether/ch2cl2, ethylacetate/meoh.chch/ethylacetate展開劑的比例要靠嘗試.一般根據(jù)文獻(xiàn)中報(bào)道的該類化合物用什么樣的展開 劑，就首先嘗試使用該類展開劑，然后不斷嘗試比例，直到找到一個(gè)分離效果好 的展開劑。展開劑的選擇條件：對(duì)所需成分有良好的溶解性;可使成分間分 開;待測(cè)組分的rf在0.20.8之間，定量測(cè)定在0.30.5之間;不與待測(cè)組 分或吸附劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng);沸點(diǎn)適中，黏度較小;展開后組分斑點(diǎn)圓且集中

16、; 混合溶劑最好用新鮮配制。一般來說，弱極性溶劑體系的基本兩相由止己烷和水組成，再根據(jù)需耍加入 甲醇、乙醇，乙酸乙酯來調(diào)節(jié)溶劑系統(tǒng)的極性，以達(dá)到好的分離效果，適合于生 物堿、黃酮、帖類等的分離;中等極性的溶劑體系由氯仿和水基本兩相組成，由 甲醇、乙醇，乙酸乙酯等來調(diào)節(jié)，適合于蔥釀、香豆素，以及一些極性較大的木 脂素和祜類的分離;強(qiáng)極性溶劑，由止丁醇和水組成，也靠甲醇、乙醇，乙酸乙 酯等來調(diào)節(jié)，適合于極性很大的生物堿類化合物的分離。很多時(shí)候，展開劑的選 擇要靠自己不斷變換展開劑的組成來達(dá)到最佳效果。一般把兩種溶劑混合時(shí)，采用高極性/低極性的體積比為1/3的混合溶劑，如果 有分開的跡象，再調(diào)整比例

17、（或者加入第三種溶劑），達(dá)到最佳效果;如果沒有分開的 跡象（斑點(diǎn)較“拖”），最好是換溶劑。對(duì)于在硅膠中這種酸性物質(zhì)上易分解的物質(zhì)， 在展開劑里往往加一點(diǎn)點(diǎn)三乙胺，氨水，毗噪等堿性物質(zhì)來中和硅膠的酸性。（選 擇所添加的堿性物質(zhì)，還必須考慮容易從產(chǎn)品中除去，氨水無疑是較好的選擇。） 分離效果的好壞和所用硅膠和溶劑的質(zhì)量很有關(guān)系：不同廠家生產(chǎn)的硅膠可能含 水量以及顆粒的粗細(xì)程度，酸性強(qiáng)弱不同，從而導(dǎo)致產(chǎn)品在某個(gè)廠家的硅膠中分 離效果很好，但在另一個(gè)廠家的就不行。溶劑的含水量和雜質(zhì)盒量對(duì)分離效果都 有明顯的影響。溫度，濕度對(duì)分離效果影響也很明顯，在實(shí)驗(yàn)中我們發(fā)現(xiàn)有時(shí)同 一展開條件，上下午的rf截然不同

18、展開劑的選擇主耍根據(jù)樣品的極性、溶解度 和吸附劑的活性等因素來考慮在進(jìn)行薄層層析時(shí)，首先應(yīng)該知道未知化學(xué)成分的 類型,其極性的大致歸屬，從提取液或從色遷柱的流動(dòng)相極性可知，另外某樣品 里含多種化學(xué)成分先按極性不同大致分，然后細(xì)分，對(duì)于分離未知的化學(xué)物質(zhì)， 展開劑的選擇也是一個(gè)摸索的過程，不應(yīng)該僅僅從展開劑考慮，多因素綜合衡量!洗脫劑：層析過程中溶劑的選擇，對(duì)組分分離關(guān)系極大。在柱層析時(shí)所用的溶劑（單 一劑或混合溶劑）習(xí)慣上稱洗脫劑，用于薄層或紙層析時(shí)常稱展開劑。洗脫劑的 選擇，須根據(jù)被分離物質(zhì)與所選用的吸附劑性質(zhì)這兩者結(jié)合起來加以考慮在用極 性吸附劑進(jìn)行層析時(shí)，當(dāng)被分離物質(zhì)為弱極性物質(zhì)，一般選

19、用弱極性溶劑為洗脫 劑;被分離物質(zhì)為強(qiáng)極性成分，則須選用極性溶劑為洗脫劑。如果對(duì)某一極性物 質(zhì)用吸附性較弱的吸附劑（如以硅藻土或滑石粉代替硅膠），則洗脫劑的極性亦須 相應(yīng)降低。在柱層操作時(shí)，被分離樣品在加樣時(shí)可采用于法，亦可選一適宜的溶劑將樣 品溶解后加入。溶解樣品的溶劑應(yīng)選擇極性較小的，以便被分離的成分可以被吸 附。然后漸增大溶劑的極性。這種極性的增大是一個(gè)十分緩慢的過程，稱為“梯 度洗脫”，使吸附在層析柱上的各個(gè)成分逐個(gè)被洗脫。如果極性增大過訣（梯度太 大），就不能獲得滿意的分離。溶劑的洗脫能力，有時(shí)可以用溶劑的介電常數(shù)（£） 來表示。介電常數(shù)高，洗脫能力就大。以上的洗脫順序僅適

20、用于極性吸附劑，如 硅膠、氧化鋁。對(duì)非極性吸附劑，如活性炭，則正好與上述順序相反，在水或親 水住溶劑中所形成的吸附作用，較在脂溶性溶劑中為強(qiáng)。顯色劑的配制：顯色劑可以分成兩大類：一類是檢查一般有機(jī)化合物的通用顯色劑;另一類 是根據(jù)化合物分類或特殊官能團(tuán)設(shè)計(jì)的專屬性顯色劑。顯色劑種類繁多，本章只 能列舉一些常用的顯色劑。i.通用顯色劑 硫酸常用的有四種溶液：硫酸水（仁1）溶液;硫酸甲醇或乙醇（仁1）溶 液;1.5mol/l硫酸溶液與0.5-1.5mol/l硫酸鞍溶液，噴后110°c烤15min,不同 有機(jī)化合物顯不同顏色。 0.5%碘的氯仿溶液對(duì)很多化合物顯黃棕色。 中性0.05%高鎰

21、酸鉀溶液易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。 堿性高鎰酸鉀試劑還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色。溶液i： 1%高猛酸鉀溶液;溶液ii： 5%碳酸鈉溶液;溶液i和溶液i【等量混合 應(yīng)用。 酸性高鐳酸鉀試劑噴1.6%高鐳酸鉀濃硫酸溶液（溶解時(shí)注意防止爆炸）， 噴后薄層于180°c加熱1520mino 酸性重銘酸鉀試劑 噴5%重銘酸鉀濃硫酸溶液，必要時(shí)150°c烤薄層。 5%磷鉗酸乙醇溶液噴后120°c烘烤，述原性化合物顯藍(lán)色，再用氨氣 薰，則背景變?yōu)闊o色。 鐵氟化鉀三氯化鐵試劑 還原性物質(zhì)顯藍(lán)色，再噴2mol/l鹽酸溶液，則 藍(lán)色加深。溶液i： 1%鐵孰化鉀溶液;溶液i

22、i: 2%三氯化鐵溶液;臨用前將溶液i和溶液 ii等量混合。2 專屬性顯色劑由于化合物種類繁多，因此專屬性顯色劑也是很多的，現(xiàn)將在各類化合物中 最常用的顯色劑列舉如下：(1) 炷類 硝酸銀/過氧化氫檢出物：鹵代桂類。溶液：硝酸銀o.lg溶于水lml,加2苯氧基乙醇100ml,用丙酮稀釋至200ml, 再加30%過氧化氫1滴。方法：噴后置未過濾的紫外光下照射；結(jié)果：斑點(diǎn)呈暗黑色。 熒光素臭檢岀物：不飽和燒。溶液：i熒光素0.1g溶于乙醇100ml; 11.5%澳的四氯化碳溶液。方法：先噴(i),然后置含澳蒸氣容器內(nèi)，熒光素轉(zhuǎn)變?yōu)樗陌臒晒馑?曙紅)， 熒光消失，不飽和坯斑點(diǎn)由于漠的加成，阻止生成曙

23、紅而保留熒光，多數(shù)不飽和 坯在粉紅色背景上呈黃色。 四氯鄰苯二甲酸酹檢出物：芳香姪。溶液：2%四氯鄰苯二甲酸酢的丙酮與氯代苯(10： 1)的溶液。方法：噴后置紫外光下觀察。 甲醛僦酸檢出物：多環(huán)芳炷。溶液：37%甲醛溶液0.2ml溶于濃硫酸loml(2) 醇類 3, 5二硝基苯酰氯檢出物：醇類。溶液：1.2%本品甲苯溶液;ii .0.5%氫氧化鈉溶液;iti.0.002%羅丹明溶液。方法：先噴，在空氣中干燥過夜,用蒸氣薰2min,將紙或薄層通過試液 (ii)30s,噴水洗，趁濕通過(111)15s,空氣干燥，紫外燈下觀察。 硝酸肺鞍檢出物：醇類。溶液：1.1%硝酸鐘錢的0.2mol/l硝酸溶液

24、;ii.n,n-二甲基對(duì)苯二胺鹽酸鹽 1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128ml+25ml+1.5ml)合液中，用前將與(ii)等量混 合。噴板后于105°c加熱5mino 香草醛/硫酸檢出物：高級(jí)醇、酚、笛類及精油。溶液：香草醛溶于硫酸looml方法：噴后于120°c加熱至呈色最深。 二苯基苦基偕月井檢出物：醇類、菇烯、撥基、酯與讎類。溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。方法：噴后于110°c加熱5lomirio結(jié)果：紫色背景呈黃色斑點(diǎn)。(3) 醛酮類 品紅/亞硫酸檢出物：醛基化合物。溶液:1.0.01%品紅溶液，通入二氧化硫直至無色;ii.0.05mol/l氯化丞溶液;i11.0.05mol/l 硫酸溶液。方法：將i、ii、iii以仁1： 10混合，用水稀釋至looml 鄰聯(lián)茴香胺檢岀物：醛類、酮類。溶液：本品乙酸飽和溶液。 2, 4-二硝基苯臍檢出物：醛基、酮基及酮糖。溶液:1.0.4%本品的2mol/l鹽酸溶液；ii .本品0.1g溶于乙醇100ml中，加 濃鹽酸iml方法：噴溶液i或ii后，立即噴鐵鼠化鉀的2