細胞活性檢測

1、 細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 細胞活性檢測試劑 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價格AR1156 MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500次 200.00元 AR1157 中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500次 200.00元AR1158 WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 100次 150.00元 AR1159 WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500次 450.00元AR1160 Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒) 500次 560.00元 一. MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價格AR1156 MTT細胞

2、增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500次 200.00元 產(chǎn)品簡介： 1. MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的實驗方法。由于細胞活力與細胞數(shù)呈正相關(guān)，因此常常用來檢測細胞的增殖情況。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan。在特定溶劑存在的情況下，可以被完全溶解。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。 2. 本試劑盒采用了獨特的Formazan溶解液配方，無需去除

3、原有的培養(yǎng)液，可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時formazan被部分去除而引起的誤差。 3. 本試劑盒背景低，靈敏度高，線性范圍寬，使用方便提高了可靠性。4. 本產(chǎn)品為500 次（5個96孔細胞培養(yǎng)板）操作。 產(chǎn)品內(nèi)容： MTT染色液 5mlFormazan溶解液 55ml說明書 1份保存條件： MTT染色液需-20避光保存；Formazan溶解液可以室溫保存。 注意事項： 1. 由于使用96孔板進行檢測，如果你的細胞要養(yǎng)48 h或更長，建議不要吝嗇96-孔板的四周邊孔，這32個邊孔不能使用，建議加入滅菌PBS以飽和中間64個孔的水分。因為細胞

4、培養(yǎng)過程中，邊孔的水分蒸發(fā)很快，培養(yǎng)液及里面的藥物會出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象，細胞的狀況就復(fù)雜了2. MTT溶劑在低溫情況下會凝固，使用前請室溫放置或20-25水浴溫育片刻至全部融解后使用。 3. MTT一般最好4ºC避光保存兩周內(nèi)有效，保存在-20度長期保存，避免反復(fù)凍融，最好小劑量分裝，用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解，尤其當MTT變?yōu)榛揖G色時就絕對不能再用了。 4. Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。 5. 孵育時，須避光6. MTT有致癌性，用的時候小心,有條件最好帶那種透明的簿膜手套.配成的MTT需要無菌，MTT對

5、菌很敏感。 使用說明： 1. 收集對數(shù)期細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，每孔加入100ul,鋪板使待測細胞調(diào)密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無菌PBS填充）。2. 5%CO2，37孵育，至細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板，具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。加入濃度梯度的藥物，原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，每孔0-10ul，設(shè)3-5個復(fù)孔.建議設(shè)5個。3. 5%CO2，37孵育16-48小時，倒置顯微鏡下觀察。4. 每孔加入10微升MTT染色液，繼續(xù)培養(yǎng)4h。若藥物與MTT能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2-3遍后，再加入含M

6、TT的培養(yǎng)液。5. 每孔加入100微升Formanzan溶解液，置搖床上低速振蕩10min，使結(jié)晶物充分溶解。在酶聯(lián)免疫檢測儀570nm測定吸光度。如無570nm濾光片，可以使用560-600nm的濾光片。6. 同時設(shè)置調(diào)零孔（培養(yǎng)基、MTT染色液、Formanzan溶解液），對照孔（細胞、相同濃度的藥物溶解介質(zhì)、培養(yǎng)液、MTT染色液、Formanzan溶解液）二. 中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價格AR1157 中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500次 200.00元產(chǎn)品簡介： 1. 中性紅細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(Neutral Red Ce

7、ll Proliferation and Cytotoxicology Assay Kit)是一種基于細胞對于中性紅的攝入能力來檢測細胞增殖或細胞毒性的試劑盒。 2. 中性紅可以被活細胞所攝入，并在溶酶體中積累。在細胞增殖加快時，細胞數(shù)量增多，可以攝入的中性紅的量就會增加。在細胞受到損傷時，中性紅的攝入能力會下降。這樣通過對于中性紅攝入量的不同就可以確定細胞的增殖或毒性情況。 3. 中性紅同時也是一種pH指示劑，在酸性時呈紅色，在pH6.8升至pH8.0時由紅色逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)辄S色。細胞核中的核酸呈酸性，因此細胞核會被染成紅色。由于溶酶體(lysome)中也是酸性環(huán)境，因此溶酶體也可以被中性紅染色液

8、染成紅色。 4. 中性紅的分子式為C15H17IN4，分子量為288.8。 5. 本產(chǎn)品為500 次（5個96孔細胞培養(yǎng)板）操作。 產(chǎn)品內(nèi)容： 中性紅染色液 10ml中性紅檢測液 100ml說明書 1份保存條件： -20保存，一年有效。中性紅染色液需避光保存。 注意事項： 1. 準備一臺可以測定A540的酶標儀或微量分光光度計。 2. 初次使用建議先取少量樣品做好預(yù)實驗。 3. 使用時最好帶那種透明的簿膜手套。 使用說明： 1. 把細胞培養(yǎng)在96孔培養(yǎng)板內(nèi)，每孔加入200微升細胞培養(yǎng)液，并給予藥物刺激。 2. 至待檢測時間點，如果培養(yǎng)液中的藥物推測不會對后續(xù)檢測產(chǎn)生干擾，直接加入20微升中性紅

9、染色液；如果培養(yǎng)液中的藥物可能會對后續(xù)檢測產(chǎn)生干擾，先用PBS、DPBS或HBSS等適當溶液洗滌1-2次，隨后加入200微升細胞培養(yǎng)液，并加入20微升中性紅染色液。 3. 細胞培養(yǎng)箱內(nèi)孵育2小時。（對于細胞密度非常低，細胞代謝速率非常慢的情況，可以把孵育時間延長到3-4個小時） 4. 去除含有中性紅染色液的細胞培養(yǎng)液，用PBS、DPBS或HBSS等適當溶液洗滌1-2次。 5. 加入200微升中性紅檢測液，室溫搖床上裂解10分鐘。在搖床上搖動可以促進樣品的裂解。 6. 測定樣品的A540，可以選擇690nm作為參考波長。 7. 同時設(shè)置調(diào)零孔，對照孔常見問題： 1. 中性紅染色液長期存放會產(chǎn)生沉

10、淀?？梢灾苯游∪旧旱纳锨逡菏褂茫部梢赃^濾去除沉淀后繼續(xù)使用，不會影響使用效果。因為染色液中的中性紅本來就是過量的。 2. 96孔板在細胞培養(yǎng)過程中會存在蒸發(fā)問題。在加入中性紅染色液前，如果培養(yǎng)液存在明顯的蒸發(fā)問題，會影響細胞的生長狀態(tài)，并嚴重影響后續(xù)的檢測結(jié)果。三 WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價格AR1158 WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 100次 150.00元 AR1159 WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 500次 450.00元產(chǎn)品簡介： 1. WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(WST-1 Cell Prolif

11、eration and Cytotoxicity Assay Kit)是一種廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。 2. WST-1是一種類似于MTT的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。 3. WST-1是MTT的一種升級替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先，MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-1和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省

12、去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-1產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-1比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-1和MTT、XTT等相比，線性范圍更寬，靈敏度更高4. 本試劑盒可以用于細胞因子等誘導(dǎo)的細胞增殖檢測，也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導(dǎo)的細胞毒性檢測，或一些藥物誘導(dǎo)的細胞生長抑制檢測等。 5. 本試劑盒檢測非常便捷。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額外步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。 6. 酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

13、 7. WST-1對細胞無明顯毒性。加入WST-1顯色后，可以在不同時間反復(fù)用酶標儀讀板，使檢測時間更加靈活，便于找到最佳測定時間。 8. 本試劑盒可以測定100/500個樣品。 產(chǎn)品內(nèi)容： WST-1 (粉末) 1管電子耦合試劑 1ml/5ml說明書 1份保存條件： -20避光保存，一年有效。WST-1粉末溶解后，4避光可以保存一周，-20避光可以保存半年(宜適當分裝，盡量避免反復(fù)凍融)。 注意事項： 1. 由于使用96孔板進行檢測，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板

14、置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 2. 使用時最好帶那種透明的簿膜手套。 使用說明： 1. WST-1溶液的配制：把1ml/5ml電子耦合試劑加入到WST-1粉末中，完全溶解即成WST-1溶液。WST-1溶液4避光可保存一周，而不影響使用效果。短期內(nèi)不使用的WST-1溶液，分裝后可以-20避光保存半年(盡量避免反復(fù)凍融)。凍存的WST-1溶液溶解后可能會觀察到一些沉淀物，這是正常現(xiàn)象，37水浴孵育2-10分鐘，通?？梢酝耆芙狻?2. 收集對數(shù)期細胞，調(diào)整細胞懸液濃度，每孔加入100ul，鋪板使待測細胞調(diào)密度至1000-10000孔，（邊緣孔用無菌PBS填充）。5%CO2，37孵育，至

15、細胞單層鋪滿孔底（96孔平底板，具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。加入濃度梯度的藥物，原則上，細胞貼壁后即可加藥，或兩小時，或半天時間，每孔0-10ul，設(shè)3-5個復(fù)孔.建議設(shè)5個。3. 每孔加入10微升WST-1溶液，繼續(xù)培養(yǎng)4h。若藥物與WST-1能夠反應(yīng)，可先離心后棄去培養(yǎng)液，小心用PBS沖2-3遍后，再加入含WST-1的培養(yǎng)液。4. 在細胞培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)孵育時間長短根據(jù)細胞的類型和細胞的密度等實驗情況而定，初次實驗時可以在0.5、1、2和4小時后分別用酶標儀檢測，然后選取吸光度范圍比較適宜的一個時間點用于后續(xù)實驗。5. 把96孔板置于搖床上搖動一分鐘

16、，以充分混勻待檢測體系。 6. 在450nm測定吸光度。如無450nm濾光片，可以使用420-480nm的濾光片。可以使用大于600nm的波長作為參考波長進行雙波長測定四. Cell Counting Kit-8細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 產(chǎn)品編號 產(chǎn)品名稱 產(chǎn)品包裝 產(chǎn)品價格AR1160 Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒) 500次 560.00元 產(chǎn)品簡介： 1. Cell Counting Kit-8簡稱CCK-8試劑盒，是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的快速高靈敏度檢測試劑盒。 2. CCK-8試劑中含有WST8：化學(xué)名：2-(2-甲氧基-4

17、-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽，它在電子載體的作用下被細胞線粒體中的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。對于同樣的細胞，顏色的深淺和細胞數(shù)目呈線性關(guān)系。 3. WST-8是MTT的一種升級替代產(chǎn)品，和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點。首先，MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的，需要有特定的溶解液來溶解；而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的，可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次，WST-8產(chǎn)生的formazan

18、比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次，WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定，使實驗結(jié)果更加穩(wěn)定。另外，WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬，靈敏度更高。 4. WST-8和WST-1相比，檢測靈敏度更高，更易溶解，并且更加穩(wěn)定。 5. 本試劑盒可以用于細胞因子等誘導(dǎo)的細胞增殖檢測，也可以用于抗癌藥物等對細胞有毒試劑誘導(dǎo)的細胞毒性檢測，或一些藥物誘導(dǎo)的細胞生長抑制檢測。 6. 本試劑盒檢測非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液，無須再進行任何配制等操作。無須使用同位素，所有的檢測步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細胞，不必收集細胞，也不必采用額

19、外的步驟去溶解formazan。可以用于大批量樣品的檢測。 7. 酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。 8. WST-8對細胞無明顯毒性。加入WST-8顯色后，可以在不同時間反復(fù)用酶標儀讀板，使檢測時間更加靈活，便于找到最佳測定時間。 9. 關(guān)于不同細胞增殖和細胞毒性檢測試劑盒的比較和選擇。10. 本試劑盒可以測定500個樣品。 產(chǎn)品內(nèi)容： CCK-8溶液 5ml說明書 1份保存條件： 4避光保存一年有效，-20避光保存兩年有效。 注意事項： 1. 由于使用96孔板進行檢測，如果細胞培養(yǎng)時間較長，一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面，由于96孔板周圍一圈最容易蒸發(fā)，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養(yǎng)液；另一方面，可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方，以緩解蒸發(fā)。 2. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應(yīng)，如果