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1、實驗五白細胞分類計數(shù)12/1/20212一、白細胞分類計數(shù)一、白細胞分類計數(shù) q白細胞分類計數(shù)是將血液制備成涂片,白細胞分類計數(shù)是將血液制備成涂片,瑞氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細胞的形瑞氏染色后顯微鏡下根據(jù)白細胞的形態(tài)特征進行分類計數(shù)。通常分類態(tài)特征進行分類計數(shù)。通常分類100100個白細胞,計算得出各種白細胞所占個白細胞,計算得出各種白細胞所占百分比。百分比。 12/1/20216操作操作 v1)1)推片:血膜推片:血膜厚薄適中,邊緣整齊,厚薄適中,邊緣整齊,外觀呈舌形,頭、體、尾分明外觀呈舌形,頭、體、尾分明。v2)干燥)干燥v3)標記)標記 1. 1.制備血涂片制備血涂片 12/1/2021

2、72 2染色染色v 1 1)準備:血膜干透后,用蠟筆在兩端劃線,以防)準備:血膜干透后,用蠟筆在兩端劃線,以防止染色時染液外溢。將血涂片放染色架上。止染色時染液外溢。將血涂片放染色架上。v 2 2)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液數(shù)滴數(shù)滴,以染液,以染液覆蓋整個血膜為度,稍靜置覆蓋整個血膜為度,稍靜置1min1min。v 3 3)加緩沖液:滴加緩沖液等量或多些,與上述染)加緩沖液:滴加緩沖液等量或多些,與上述染液充分混勻。液充分混勻。v 4 4)染色:染色)染色:染色10min.10min.v 5 5)沖洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水緩)沖洗:不要先倒掉染液,平

3、持血涂片用流水緩緩沖洗干凈。緩沖洗干凈。v 6 6)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。12/1/20218血涂片制作血涂片制作12/1/20219良好血涂片外觀良好血涂片外觀羽(子彈頭)狀尾部羽(子彈頭)狀尾部周邊有空白周邊有空白無劃痕無劃痕羽羽狀狀尾尾部部12/1/202110不良血涂片不良血涂片12/1/2021112瑞氏染色操作瑞氏染色操作12/1/2021123 3白細胞分類:白細胞分類: 先用低倍鏡選擇厚薄適宜,染色先用低倍鏡選擇厚薄適宜,染色良好,細胞分布均勻的體尾交界良好,細胞分布均勻的體尾交界處,滴加香柏油一滴,處,滴加香柏油一滴,油鏡油鏡下分下

4、分類計數(shù)。分類時要有類計數(shù)。分類時要有秩序秩序的連續(xù)的連續(xù)進行,避免主觀選擇視野。通常進行,避免主觀選擇視野。通常分類計數(shù)分類計數(shù)100100個白細胞,計算并個白細胞,計算并報告各種白細胞所占比例。報告各種白細胞所占比例。 低倍鏡下所見12/1/202113體尾交界處體尾交界處理想?yún)^(qū)理想?yún)^(qū)域域 細胞重疊細胞重疊 細胞太稀細胞太稀理想?yún)^(qū)域理想?yún)^(qū)域12/1/202114各類成熟白細胞的形態(tài)學:各類成熟白細胞的形態(tài)學: q中性粒細胞(中性粒細胞(Ne):在瑞氏染色血涂片上呈圓在瑞氏染色血涂片上呈圓形,直徑形,直徑1013m,胞漿染粉紅色,核形一葉,胞漿染粉紅色,核形一葉(桿狀核)至五葉不等,以三葉者

5、多見,染成深(桿狀核)至五葉不等,以三葉者多見,染成深紫紅色,胞漿中有許多細小均勻紫紅色顆粒。紫紅色,胞漿中有許多細小均勻紫紅色顆粒。12/1/202115q嗜酸性粒細胞(嗜酸性粒細胞(Eo):較中性粒細胞稍大,胞較中性粒細胞稍大,胞核多為兩葉,核多為兩葉,呈眼鏡、八字形,核染色質粗糙呈眼鏡、八字形,核染色質粗糙染深紫紅色,染深紫紅色,胞漿內充滿粗大均勻的嗜酸性顆胞漿內充滿粗大均勻的嗜酸性顆粒,瑞氏染色時呈桔紅色,有折光性。粒,瑞氏染色時呈桔紅色,有折光性。 12/1/202116q嗜堿性粒細胞(嗜堿性粒細胞(Ba):胞漿中含有大小不等胞漿中含有大小不等的嗜堿性顆粒,瑞氏染色時呈蘭黑色。于光學

6、顯的嗜堿性顆粒,瑞氏染色時呈蘭黑色。于光學顯微鏡下常見胞漿中有小空泡,乃因嗜堿性顆粒易微鏡下常見胞漿中有小空泡,乃因嗜堿性顆粒易溶于水或因功能活動而脫顆粒所致;核呈淡紫紅溶于水或因功能活動而脫顆粒所致;核呈淡紫紅色??床磺?,呈桿狀或分葉狀。色常看不清,呈桿狀或分葉狀。 12/1/202117q淋巴細胞(淋巴細胞(Ly):胞體呈圓形,直徑介于胞體呈圓形,直徑介于615m之間,在成人血涂片中以小淋巴細胞之間,在成人血涂片中以小淋巴細胞為多見,直徑為多見,直徑69m,核大呈深紫色致密而濃,核大呈深紫色致密而濃染,胞漿量極少;大淋巴細胞胞漿量較多,呈染,胞漿量極少;大淋巴細胞胞漿量較多,呈清澈的淡藍色

7、,可見少量嗜苯胺藍顆粒,胞核清澈的淡藍色,可見少量嗜苯胺藍顆粒,胞核圓或橢圓,常偏向細胞一側,染色較深。圓或橢圓,常偏向細胞一側,染色較深。 12/1/202118q單核細胞(單核細胞(Mo):在瑞氏染色涂片上為在瑞氏染色涂片上為1220m,胞體圓形、橢圓形或不規(guī)則形;核形多種,胞體圓形、橢圓形或不規(guī)則形;核形多種多樣,最重要的特點是染色質較細致疏松,呈絲多樣,最重要的特點是染色質較細致疏松,呈絲網(wǎng)狀或條縷狀,著色較淡胞漿較多,淡蘭色,含網(wǎng)狀或條縷狀,著色較淡胞漿較多,淡蘭色,含大量細小塵土樣顆粒大量細小塵土樣顆粒。12/1/202119正常成人外周血白細胞分類參考值:正常成人外周血白細胞分類

8、參考值: Ne 50%70% Ly 20%40% Mo 3%8% Eo 0.5%5% Ba 0%1%12/1/202120 1.血涂片制備要厚薄適宜、均勻、頭體尾分血涂片制備要厚薄適宜、均勻、頭體尾分明,無溶血、無空洞。明,無溶血、無空洞。 2.很多因素影響涂片時血膜的厚度。很多因素影響涂片時血膜的厚度。血滴大、血滴大、血粘度高、推片角度大、速度快則血膜厚血粘度高、推片角度大、速度快則血膜厚,反之則血膜薄。反之則血膜薄。 3.按一定順序,有秩序地連續(xù)進行,避免選按一定順序,有秩序地連續(xù)進行,避免選擇視野。擇視野。 4.分類計數(shù)時應同時報告分類計數(shù)時應同時報告RBC和和WBC的形態(tài)的形態(tài)是否有異常。退化細胞不計數(shù)。是否有異常。退化細胞不計數(shù)。12/1/202121RBC異常12/

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