加校正因子的主成分自身對照法

1、加校正因子的主成分白身對照法一、定義及適用范圍加校正因子的主成分自身對照法，即以主成分作為對照的內(nèi)標法，校正因子 可以在檢測時測定，但需提供雜質(zhì)對照品，也可在建立方法時將測得的校正因子 載入質(zhì)量標準，供以后常規(guī)檢驗使用，無需長期提供雜質(zhì)對照品，但也僅適用丁 已知雜質(zhì)的控制。建議：校正因子在 0.8-1.2時可不予校正。校正因子計算公式： AsXCr f= :- Cs*r式中：f一校正因子；As雜質(zhì)對照品峰面積或峰高；Cs一雜質(zhì)對照品濃度；Ar一待測成分對照品峰面積或峰高； Cr一待測成分對照品濃度。二、校正因子的測定在校正因子的研究和使用中，標準物質(zhì)、色譜條件、溶劑、檢測波長等均是 重要的影響

2、因素，研究中需要予以關(guān)注。2.1校正因子的測定需要用到特定雜質(zhì)及主成分的標準物質(zhì)，這些標準物質(zhì)應(yīng)具備量值準確的特點，符合標準物質(zhì)(對照品)的相關(guān)要求；其次，確定校正因子的分析方法應(yīng)與最終確定的質(zhì)量標準方法一致，色譜條件等需經(jīng)篩選優(yōu)化 后確定，如有變更，需考慮對校正因子的影響，必要時重新確定；第三，要關(guān)注 影響待測物UV吸收的各種因素，如溶液制備所用溶劑最好與最終確定的流動相 相同，檢測波長最好在特定雜質(zhì)及主成分 UV曲線的峰或谷處，避開吸收值急劇 變化波段，以保證測定方法具有較好的耐用性，并保持測定結(jié)果的包定。2.2 一般情況下，校正因子可視具體情況通過如下幾種方法確定：(1) 單濃度點測定：

3、制備適當濃度的特定雜質(zhì)對照品溶液和主成分對照品溶液， 分別進樣測定，照上式計算，得到校正因子。(2) 多濃度點測定：制備適當?shù)母?、中、低三水平濃度的特定雜質(zhì)對照品溶液 和主成分對照品溶液(涵蓋定量限、標準限度)，分別進樣測定，照上式計算各 校正因子，計算RSD,求平均值，得到校正因子。(3) 標準曲線法測定：精密稱取雜質(zhì)對照品和主成分對照品，分別制備系列溶液(涵蓋定量限、標準限度)，分別進樣后，按最小二乘法以進樣量對響應(yīng)值(峰 面積等)進行線性回歸，求得兩條標準曲線，兩曲線斜率之比即為校正因子。(4) 吸收系數(shù)比值法：對丁 UV檢測器來講，兩物質(zhì)的相對校正因子實際上也 是兩物質(zhì)以流動相為溶劑，

4、在檢測波長處的紫外吸收系數(shù) E1%1cm之比，故可按吸 收系數(shù)法測定法的相關(guān)技術(shù)要求測定各自吸收系數(shù)，如對照品級別的標準物質(zhì)、 高中低三水平濃度測定、吸收度介丁 0.30.8之間、至少5臺不同型號的UV分 光光度計、2份供試液同時平行制備測定、同臺儀器 2份供試液的平行測定結(jié)果 不超過坦.5%等。測定兩物質(zhì)的吸收系數(shù)后，經(jīng)統(tǒng)計分析確定兩物質(zhì)吸收系數(shù)， 計算比值，求得校正因子。上述各方法中，（1）和（2）法較為簡捷，可以快捷地量化特定雜質(zhì)與主成 分紫外吸收特征的差異，多用丁評估采用主成分自身對照法定量雜質(zhì)時是否需要 校正。但如采用加校正因子的主成分自身對照法定量雜質(zhì)，需將標準物質(zhì)賦值 信息轉(zhuǎn)化為

5、校正因子固化在質(zhì)量標準中，那么校正因子的準確性非常關(guān)鍵，校 正因子的準確計算應(yīng)符合更為嚴格的要求，需要考慮并控制求算校正因子過程 中的各種誤差因素，以及儀器通用性和色譜系統(tǒng)的耐用性等因素，以便使求得 的常數(shù)更為準確并具代表性，此時采用（3）、（4）法更為適宜，如能考慮到測定 人員、不同試驗室因素的影響，會更加符合常數(shù)求算的基本要求。三、方法驗證校正因子的測定屆丁有關(guān)物質(zhì)方法驗證中的一個項目，一般采用有關(guān)物質(zhì)的測定方法，雜質(zhì)對照品和主成分對照品線性濃度從定量限至限度的120%或150%, 一股取5-6個點，使用3臺不同的儀器測定，按照上述方法（3）,計算 平均校正因子。有關(guān)物質(zhì)方法學(xué)驗證主要包括

6、：系統(tǒng)適用性、方法專屆性、精密度（儀器精密度、方法精密度和中間精密度） 線性、準確度（已知雜質(zhì)的回收試驗）、檢測限和定量限、溶液穩(wěn)定性和耐用性。試驗內(nèi)容概念溶液配制份數(shù)進樣針數(shù)評定標準系統(tǒng)適用性系統(tǒng)適用性是 對分析設(shè)備、 電子儀器與實 驗操作、測試 樣品等整個系 統(tǒng)進行評估的指標空白溶液1份 供試液1份進1針進6針雜質(zhì)峰峰面積RSDW 2.0%, 保留時間RSD< 1.0%;雜質(zhì) 峰的拖尾因子<2.0%,理論塔板數(shù)應(yīng)符合 質(zhì)量標準的規(guī)定方法專屆性1專屆性系指在 其他成分（如 雜質(zhì)、降解物、 輔料等）可能 存在卜，米用 的分析方法能 夠正確鑒定檢 出被分析物質(zhì)空白對照1份 輔料溶液（

7、或 起始原料、中問體）1份 供試液1份每份各1針空白對照無干 擾；主峰與相 鄰雜質(zhì)峰的分離度>2.0方法專屆性2未破壞樣品、 光濕熱10天 破壞樣品和酸每份供試液進 1針；空白溶 液、酸堿空白降解雜質(zhì)峰與主峰的分離度> 2.0的特性堿氧化破壞樣品各1份及氧化空白各1針精密度在規(guī)定的測試條件下，同一均質(zhì)供試品，經(jīng)多次取樣進行一系列 檢測所得結(jié)果之間的接近程度（離散程度）儀器精密度在同樣的操作 條件下，在較 短時間間隔 內(nèi)，由同一分 析人員測定所 得結(jié)果的精密 度1%對照液儀 器精密度進6針峰面積RSDV2.0%供試液儀器精 密度進6針（同系 統(tǒng)適用性）峰面積RSDV2.0%,保留時問

8、 RSDW 1.0%方法精密度供試液6份每份1針雜質(zhì)含量RSD< 15%中間精密度同一實驗室， 由丁實驗室內(nèi) 部條件改變， 如時間、分析 人員、儀器設(shè) 備、測定結(jié)果 的精密度換儀器，換人6份供試液每份1針12份供試液響 應(yīng)因子RSDV20%線性在設(shè)計的測定 范圍內(nèi)，檢測 結(jié)果與供試品 中被分析物的 濃度（量）直 接呈線性關(guān)系 的程度1%對照線性 溶液5份每份1針相關(guān)系數(shù)（R）> 0.990, Y 軸截距應(yīng)在100%響應(yīng)值的25%以內(nèi)， 響應(yīng)因子RSD< 10%已知雜質(zhì)的線性溶液5份準確度用該方法測定 的結(jié)果與真實 或認可的參考 值之間的接近 程度對照液1份；本底供試液1份；供

9、試液3份每份2針；每份2針；每份3針平均回收率均 應(yīng)在80%-120% 之 問，9個回收 率 RSD< 10%檢測限與定量 限均指試樣中的 被分析物能夠 被檢測到的最 低量；檢測限 不一定要準確aEM； aEMPU 測定結(jié)果應(yīng)具1%對照檢測 限、定量限基線1針；檢測限2針；切限6針應(yīng)不小丁 3應(yīng)不小丁 10 雜質(zhì)峰保留時 問V 2.0%,峰已知雜質(zhì)對照 液檢測限、定有一定的準確 度和精密度量限面積 5.0%溶液穩(wěn)定性供試液經(jīng)X小 時放谿，含量 的變化供試液1份0, 1, 2, 4,6X小時各進1針主成分的含量 變化的絕對值 <2.0%,雜質(zhì) 含量的絕對值在土 0.1%以 內(nèi)，并不得出 現(xiàn)新的大丁報 告限度的雜質(zhì)耐用性測定條件發(fā)生小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度調(diào)流