常用緩沖溶液配制方法

1、常用緩沖溶液的配制方法1.甘氨酸-鹽酸緩沖液(0.05mol/L)X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀釋至 200毫升pHXYpHXY2.05044.03.05011.42.45032.43.2508.22.65024.23.4506.42.85016.83.6505.0甘氨酸分子量 =75.07 , 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。2.鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液(0.05 mol/L)X0.2 mol/L鄰苯二甲酸氫鉀 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀釋到 20毫升pH(20 C )XYpH(20 C)XY2.254.0703.251

2、.4702.453.9603.450.9902.653.2953.650.5972.852.6423.850.2633.052.022鄰苯二甲酸氫鉀分子量=204.23, 0.2 mol/L鄰苯二甲酸氫溶液含40.85克/升3.磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液pH0.2 mol/LNa2HPO4(<#)0.1mol/L檸檬酸(<#)pH0.2 mol/LNa2HPO4(<#)0.1 mol/L檸檬酸(<#)2.20.4010.605.210.729.282.41.2418.765.411.158.852.62.1817.825.611.608.402.83.1716.835.8

3、12.097.913.04.1115.896.012.637.373.24.9415.066.213.226.783.45.7014.306.413.856.153.66.4413.566.614.555.453.87.1012.906.815.454.554.07.7112.297.016.473.534.28.2811.727.217.392.614.48.8211.187.418.171.834.69.3510.657.618.731.274.89.8610.147.819.150.855.010.309.708.019.450.55Na2HPO4分子量 =14.98 , 0.2 mol

4、/L 溶液為 28.40 克/升。Na2HPO4 - 2H2O 分子量 =178.05, 0.2 mol/L 溶液含 35.01 克/升。C4H2O7 H2O 分子量 =210.14, 0.1 mol/L 溶液為 21.01 克/升。4 .檸檬酸-氫氧化鈉-鹽酸緩沖液pH鈉離子濃度（mol/L）檸檬酸（克）C6H8O7，H2。氫氧化鈉（克）NaOH 97%鹽酸（量升）HCl （濃）最終體積（升）2.20.2021084160103.10.2021083116103.30.2021083106104.30.202108345105.30.3524514468105.80.452851861051

5、06.50.3826615612610 使用時可以每升中加入 1克克酚，若最后pH值有變化，再用少量50%氫氧化鈉溶液或濃鹽酸調節(jié)，冰箱保存。5 .檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液（0.1 mol/L ）pH0.1 mol/L檸檬酸(<#)0.1 mol/L檸檬酸鈉(<#)pH0.1 mol/L檸檬酸(<#)0.1 mol/L檸檬酸鈉(<#)3.018.61.45.08.211.83.217.22.85.27.312.73.416.04.05.46.413.63.614.95.15.65.514.53.814.06.05.84.715.34.013.16.96.03.816.24

6、.212.37.76.22.817.24.411.48.66.42.018.04.610.39.76.61.418.64.89.210.8檸檬酸C6H8O7 - H2O：分子量210.14, 0.1 mol/L溶液為21.01克/升。檸檬酸鈉Na3 C6H5O7 - 2H2O：分子量294.12, 0.1 mol/L溶液為29.41克/毫升。6.乙酸-乙酸鈉緩沖液（0.2 mol/L）pH(18 C )0.2 mol/LNaAc心)0.3 mol/LHAc()pH(18 C)0.2 mol/LNaAc日)0.3 mol/LHAc()2.60.759.254.85.904.103.81.208.

7、805.07.003.004.01.808.205.27.902.104.22.657.355.48.601.404.43.706.305.69.100.904.64.905.105.89.400.60Na2Ac 3H2O 分子量 =136.09, 0.2 mol/L 溶液為 27.22 克/升。7.磷酸鹽緩沖液(1)磷酸氫二鈉-磷酸二氫鈉緩沖液(0.2)pH0.2 mol/LNa2HPO4 心)0.2 mol/LNaH 2PO4 ()5.88.092.05.910.090.06.012.387.76.115.085.06.218.581.56.322.577.56.426.573.56.53

8、1.568.56.637.562.56.743.556.56.849.551.06.955.045.0pH0.2 mol/LNa2HPO4日)0.2 mol/LNaH2PO4 ()7.061.039.07.167.033.07.272.028.07.377.023.07.481.019.07.584.016.07.687.013.07.789.510.57.891.58.57.993.07.08.094.75.3Na2HPO4 2H2O 分子量 =178.05 , 0.2 mol/L 溶液為 85.61 克/升。Na2HPO 4 12H2O 分子量 =358.14, 0.2 mol/L 溶液為

9、 71.628 克/升。NaH 2PO42H2O 分子量 =156.01 , 0.2 mol/L 溶液為 31.202 克/升。磷酸鹽是生物化學研究中使用最廣泛的一種緩沖劑，由于它們是二級解離，有二個pKa值，所以用它們配制的緩沖液， pH范圍最寬：NaH2PO4 : pKal = 2.12 , pKa2 = 7.21; Na2HPO4： pKa1 = 7.21, pKa2= 12.32配酸性緩沖液：用 NaH2PO4, pH = 14,配中性緩沖液：用混合的兩種磷酸鹽，pH = 68,配堿性緩沖液：用 Na2HPO4, pH = 1012。用鉀鹽比鈉鹽好，因為低溫時鈉鹽難溶，鉀鹽易溶，但若配

10、制SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳的緩沖液時，只能用磷酸鈉而不能用磷酸鉀，因為SDS(十二烷基硫酸鈉)會與鉀鹽生成難溶的十二烷基硫酸鉀。磷酸鹽緩沖液的優(yōu)點為： 容易配制成各種濃度的緩沖液；適用的pH范圍寬；pH受溫度的影響??；緩沖液稀釋后pH變化小，如稀釋10倍后pH的變化小于0.1。其缺點為：易與常見的鈣Ca2+離子、鎂 Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀;會抑制某些生物化學過程，如對某些酶的催化作用會產生某種程度的抑制作用。(2)磷酸氫二鈉-磷酸二氫鉀緩沖液(1/15 mol/L)pHmol/L/15Na 2HPO4日)mol/L/15KH 2PO4()pHmol/L/15Na 2HPO4(

11、)mol/L/15KH 2PO4()4.920.109.907.177.003.005.290.509.507.388.002.005.911.009.007.739.001.006.242.008.008.049.500.506.473.007.008.349.750.256.644.006.008.679.900.106.816.985.006.005.004.008.1810.000Na2HPO4 2H2O 分子量 =178.05 , 1/15M 溶液為 11.876 克/升。KH 2PO4 分子量 =136.09, 1/15M 溶液為 9.078 克/升。8.磷酸二氫鉀-氫氧化鈉緩沖液

12、(0.05M)X毫升0.2M K 2PO4 + Y毫升0.2N NaOH加水稀釋至29毫升pH(20 C)X ()Y (<#)pH(20 C)X (計)Y (<#)5.850.3727.052.9636.050.5707.253.5006.250.8607.453.9506.451.2607.654.2806.651.7807.854.5206.852.3658.054.6809.巴比妥鈉-鹽酸緩沖液(18C)pH0.04M巴比妥鈉溶液0.2V鹽酸pH0.04M 巴比妥鈉溶液(毫升)0.2N鹽酸(毫 升)6.810018.48.41005.217.010017.88.61003.8

13、27.210016.78.81002.527.410015.39.01001.657.610013.49.21001.137.810011.479.41000.708.01009.399.61000.358.21007.21100巴比妥鈉鹽分子量=206.18;0.04M溶液為8.25克/升10. Tris-鹽酸緩沖液(0.05M , 25C)50毫升0.1M三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液與X毫升0.1N鹽酸混勻后，加水稀釋至100毫升。pHX(裕)pHX()7.1045.78.1026.27.2044.78.2022.97.3043.48.3019.97.4042.08.4017.27.5

14、040.38.5014.77.6038.58.6012.47.7036.68.7010.37.8034.58.808.57.908.0032.029.28.907.0三羥甲基氨基甲烷(Tris) HOCH2 CH2OHCHOCH2 NH2分子量=121.14;0.1M溶液為12.114克/升。Tris溶液可從空氣中吸收二氧化碳，使用時注意將瓶蓋嚴。11.硼酸-硼砂緩沖液（0.2M硼酸根）pH0.05M 硼砂(<#)0.2M 硼酸(<#)pH0.05M 硼砂(<#)0.2M 硼酸(<#)7.41.09.08.23.56.57.61.58.58.44.55.57.82.08

15、.08.76.04.08.03.07.09.08.02.0硼砂 Na2B4O710H2O,分子量=381.37;0.05M 溶液（=0.2M 硼酸根）含 19.07 克/升。硼酸H3BO3,分子量=61.83,0.2M溶液為12.37克/升。硼砂易失去結晶水，必須在帶塞的瓶中保存。12.甘氨酸-氫氧化鈉緩沖液（0.05M）X毫升0.2M甘氨酸+Y毫升0.2NnaOH加水稀釋至200毫升pHXYpHXY8.6504.09.65022.48.8506.09.85027.29.0508.810.05032.09.25012.010.45038.69.45016.810.65045.5甘氨酸分子量=7

16、5.07;0.2M溶液含15.01克/升。13.硼砂-氫氧化鈉緩沖液（0.05M硼酸根）X毫升0.05M硼砂+Y毫升0.2NNaOH加水稀釋至200毫升pHXYpHXY9.3506.09.85034.09.45011.010.05043.09.65023.010.15046.0硼砂 Na2B4O710H2O,分子量=381.43;0.05M 溶液為 19.07 克/升。14.碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液（0.1M）Ca2+、Mg2+存在時不得使用pH0.1MNa2CO3(日*)0.1MN 2HCO3(日*)20C37 C9.168.77199.409.12289.519.40379.789.5046

17、9.909.725510.149.906410.2810.087310.5310.288210.8310.5791Na2CO2l0H2O 分子量=286.2;0.1M 溶液為 28.62 克/升。N2HCO3分子量=84.0;0.1M溶液為8.40克/升。15.“PBS緩沖液pH7.67.47.27.0H2O100010001000100mlNaCl8.58.58.58.5gNa2HPO42.22.22.22.2gNaH2PO40.10.20.30.4gpH標準緩沖溶液Standard pH Buffer Solutions名稱(Name)配制(Compounding way)不同溫度時的 p

18、H 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C草酸鹽標準緩沖溶液cKH3(C2Q)2 2H2O 為 0.05mol/L 。稱取 12.71g四草酸鉀 KH3(C2Q) 2 2H2O溶 于無二氧化碳的水 中，稀釋至 1000ml1.671.671.671.671.681.681.691.691.69不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-1.701.711.721.721.741.771.791.81-酒石酸

19、鹽標準 緩沖溶 液在25C時，用無二 氧化碳的水溶解外 消旋的酒石酸氫鉀 (KHC4H4C6),并劇烈 振搖至成飽和溶液不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C-3.563.553.553.55不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-3.553.553.553.563.583.613.653.67-苯二甲酸氫鹽標準緩沖溶液c(C6HCOHCOK)為 0.05mol/L ,稱取于 (115

20、.0 士 5.0) C干 燥23h的鄰苯二 甲酸氫鉀(KHCHLQ) 10.21g，溶于無CO 的蒸彳留水，并稀釋至 1000ml(注：可用于酸度計 校準)不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)0 C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C4.004.004.004.004.004.014.014.024.04不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-4.054.064.084.094.134.164.214.23-磷酸鹽標準緩沖

21、溶液分別稱取在(115.0 士 5.0) C干燥2 3h的磷酸氫二鈉(N&HPO) (3 . 53 士 0. 01)g和磷酸二 氫鉀(KHPQ) (3 . 39 士 0. 01)g ,溶于預 先煮沸過15不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)0 C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C6.986.956.926.906.886.866.856.846.84不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-30min并迅速冷卻的蒸

22、偕水中，并稀釋至1000ml (注：可用于酸度計校準)6.836.836.836.846.856.866.886.89-硼酸鹽標準緩沖溶液c(Na2BQ I0H2O)稱 取硼砂(N&B4。 10H2。) (3 . 80 ± 0 . 01)g(注意：不能烘！)， 溶于預先煮沸過1530min并迅速 冷卻的蒸偕水中，并 稀釋至1000ml。置 聚乙烯塑料瓶中密 閉保存。存放時要防 止空氣中的CO2的進 入(注：可用于酸度計校準)不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C9.469.

23、409.339.279.229.189.149.109.06不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-9.049.018.998.968.928.898.858.83-氫氧化 鈣標準 緩沖溶 液在25 C,用無二氧 化碳的蒸偕水制備 氫氧化鈣的飽和溶 液。氫氧化鈣溶液的 濃度 c1/2Ca(OH) 2 應在(0.04000.0412 ) mol/L。氫 氧化鈣溶液的濃度 可以酚紅為指示劑， 用鹽酸標準溶液 c(HCl)=0.1mol/L 滴定測出。存放時要 防止空氣中的二氧化碳的進入。出現

24、混 濁應棄去重新配制不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)0C5C10C15 C20C25 C30 C35 C40 C13.4213.2113.0012.8112.6312.4512.3012.1411.98不同溫度時的 pH 值(pH in different temperatures)45 C50 C55 C60 C70 C80 C90 C95 C-11.8411.7111.5711.45-注：為保證pH值的準確度，上述標準緩沖溶液必須使用pH基準試劑配制常用pH緩沖溶液的配制和 pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions序號(No.)溶液名稱(Solution name)配制方法(Preparation)pH值(pH value)1氯化鉀-鹽酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl與 25.0 ml 0.2mol/L KCl混合均勻后，加水稀釋至100 ml1.72氨基乙酸-鹽酸在500 ml水中溶解氨基乙酸150 g,加48