花卉的組培技術(shù)應用

1、會計學1花卉的組培技術(shù)應用花卉的組培技術(shù)應用第1頁/共52頁第一節(jié)第一節(jié) 花卉的組培技術(shù)應用花卉的組培技術(shù)應用（以非洲菊、百合組培為例）（以非洲菊、百合組培為例） 第2頁/共52頁第3頁/共52頁第4頁/共52頁第5頁/共52頁非洲菊，又名太陽花、扶郎花，屬多年生草本非洲菊，又名太陽花、扶郎花，屬多年生草本花卉。重瓣花，花色有紅、橙紅、淡紅、白色，花花卉。重瓣花，花色有紅、橙紅、淡紅、白色，花色艷麗，經(jīng)濟效益高，占世界切花銷量第五位，是色艷麗，經(jīng)濟效益高，占世界切花銷量第五位，是近年來發(fā)展迅速的重要切花種類之一。近年來發(fā)展迅速的重要切花種類之一。第6頁/共52頁第7頁/共52頁傳統(tǒng)的繁殖方法為

2、播種或分株繁殖，但非洲菊種子傳統(tǒng)的繁殖方法為播種或分株繁殖，但非洲菊種子壽命短、發(fā)芽率低，而且播種繁殖變異率很高，難以得壽命短、發(fā)芽率低，而且播種繁殖變異率很高，難以得到性狀一致的種苗，因而不能用于規(guī)模生產(chǎn)；而分株繁到性狀一致的種苗，因而不能用于規(guī)模生產(chǎn)；而分株繁殖則存在繁殖慢，易退化和傳播病害，也不適于現(xiàn)代的殖則存在繁殖慢，易退化和傳播病害，也不適于現(xiàn)代的大規(guī)模生產(chǎn)，因而目前國外一般都采用大規(guī)模生產(chǎn)，因而目前國外一般都采用組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)的方法的方法來生產(chǎn)種苗。來生產(chǎn)種苗。第8頁/共52頁一外植體的選擇一外植體的選擇 l莖尖是一種較好的外植體，出愈率最高、繁殖速度快，但取材有限、滅菌很易產(chǎn)生

3、藥害；l幼葉、幼葉柄、花梗作為外植體，可誘導產(chǎn)生愈傷組織，但是誘導成苗難；l花托是非洲菊組織培養(yǎng)中比較理想的外植體，其好處在于花托較大且量多，易于剝?nèi)?，并有花被包裏，污染程度輕，易于消毒，污染率低。第9頁/共52頁首先要選擇花大、花色艷麗、市場流行的品種，然后再選擇無病蟲害、植株生長健壯、花色純正的優(yōu)良品種單株進行取材。作為外植體的花蕾要選取直徑在1.0 cm左右，而且未露心的小花蕾，太大或是太小的花蕾均不能獲得滿意的效果。外外植植體體的的選選擇擇方方法法 第10頁/共52頁 二外植體的消毒二外植體的消毒方法方法1 1、剝?nèi)ネ鈱虞嗥?，在自來水下沖洗干凈 2、置75%酒精浸泡30秒 3、置0.1

4、%的升汞溶液中浸泡58分鐘 4、取出后剝?nèi)ネ獠克休嗥?在1%的次氯酸鈉溶液中再次消毒10分鐘 5、放入無菌水中充分洗滌5次第11頁/共52頁方法方法2n1、剝?nèi)ネ鈱虞嗥谧詠硭聸_洗干凈n2、置75%酒精浸泡30秒n3、用0.1%升汞加數(shù)滴吐溫浸泡1215分鐘n4、無菌水沖洗56次第12頁/共52頁三外植體的初代培養(yǎng)三外植體的初代培養(yǎng)1、將滅菌后的花蕾剝?nèi)ニ休嗥?、管狀花和舌狀花，將花托外植體切成0.5cm2長的小塊接種。2、誘導培養(yǎng)基：MS+BA10mg/L+IAA0.5mg/L第13頁/共52頁四試管苗的增殖與繼代培養(yǎng)四試管苗的增殖與繼代培養(yǎng) 培養(yǎng)67周以后，外植體脫分化形成愈傷組織，

5、并陸續(xù)有小芽分化，此時將帶有小芽的愈傷組織團切成24個小塊，分別移到增殖與繼代培養(yǎng)基上。 培養(yǎng)基：MS+BA 0.21/L+NAA0.2mg/LKT0.3mg/L第14頁/共52頁培養(yǎng)一段時間后，又有小芽陸續(xù)分化。培養(yǎng)4周后，把這些繼代培養(yǎng)的芽叢分割，并移到新鮮的培養(yǎng)基上。每次繼代培養(yǎng)時間約為4周，芽叢的發(fā)生力可保持半年左右。第15頁/共52頁注意注意:1、隨6-BA濃度的提高，增殖速度相應提高。但在較高的6-BA濃度條件下芽苗會變細、變?nèi)酢?、生產(chǎn)中在努力提高芽苗增殖率的同時，還應保證分生芽苗的健壯。根據(jù)品種不同,一般把增殖倍數(shù)控制在3.0-5.0倍之間。第16頁/共52頁五試管苗的壯苗與生

6、根五試管苗的壯苗與生根 將長高的無根苗(23)轉(zhuǎn)移到生根培養(yǎng)基，誘導根培養(yǎng)基：1/2MS+NAA0.1mg/L。78 天后，小苗基部會長出35條不定根，1215天就可以出瓶，生根率達到95%以上。在無糖的MS培養(yǎng)基上,植株生根快,且生根率高。無糖或低糖培養(yǎng)所誘導的根系發(fā)達，呈白色，試管苗過渡成活率高。糖的濃度以01.5%為好,低鹽培養(yǎng)基生根效果較好。第17頁/共52頁六試管苗的移栽與田間管理六試管苗的移栽與田間管理欲移栽的組培苗先去掉瓶蓋通風煉苗，3天后將生根苗洗凈根部附著物，移入溫室內(nèi)的珍珠巖+腐殖土（1：1）基質(zhì)中。一周內(nèi)保持遮光75和適當?shù)臐穸?，濕度?0%95%為宜，溫度2025。一周

7、后，適當增加光照，且每周淋一次無機液肥。第18頁/共52頁在2周內(nèi)保持較高的空氣相對濕度，3周時幼苗長出白根，新葉抽出。一個月左右長出4片新葉，株高68厘米，可大定植或上市出售，移栽成活率可達95%以上。第19頁/共52頁第20頁/共52頁百合繁殖方法主要有分球繁殖、鱗心繁殖、百合繁殖方法主要有分球繁殖、鱗心繁殖、鱗片繁殖等，但經(jīng)多代無性繁殖以后，導致病毒鱗片繁殖等，但經(jīng)多代無性繁殖以后，導致病毒積累、種性退化，嚴重地制約著百合產(chǎn)量和質(zhì)量積累、種性退化，嚴重地制約著百合產(chǎn)量和質(zhì)量的提高。利用組織培養(yǎng)與脫毒技術(shù)相結(jié)合，能夠的提高。利用組織培養(yǎng)與脫毒技術(shù)相結(jié)合，能夠迅速去除無性繁殖體內(nèi)病毒，復壯品

8、種，并可加迅速去除無性繁殖體內(nèi)病毒，復壯品種，并可加快百合的快速繁殖速度?？彀俸系目焖俜敝乘俣?。第21頁/共52頁百合特征百合特征:鱗莖，無皮，廣卵形，莖高鱗莖，無皮，廣卵形，莖高90厘米左厘米左右，直立莖上葉多而散生，披針形，葉色從濃綠右，直立莖上葉多而散生，披針形，葉色從濃綠，光滑?；ǘ涑世葼铋L筒形，顏色豐富，有清，光滑?；ǘ涑世葼铋L筒形，顏色豐富，有清香。香。 第22頁/共52頁一、外植體的選擇一、外植體的選擇百合的許多器官、組織都可作為外植體，如鱗片百合的許多器官、組織都可作為外植體，如鱗片、花梗、葉片、莖尖、腋芽、花瓣、花托、花藥、花梗、葉片、莖尖、腋芽、花瓣、花托、花藥、胚、等

9、，其中采用鱗片作外植體的較多。胚、等，其中采用鱗片作外植體的較多。注：以脫毒培養(yǎng)為主的應以注：以脫毒培養(yǎng)為主的應以莖尖莖尖作為外植體作為外植體第23頁/共52頁以以鱗片鱗片為例，在選取外植體時，要選擇無病蟲害為例，在選取外植體時，要選擇無病蟲害危害的種球。外部鱗片易污染要將其剝離，中部鱗危害的種球。外部鱗片易污染要將其剝離，中部鱗片肉質(zhì)厚，生長勢強，易誘導小鱗莖，是最佳的外片肉質(zhì)厚，生長勢強，易誘導小鱗莖，是最佳的外植體。內(nèi)部鱗片幼嫩，誘導率低，不易產(chǎn)生小鱗莖植體。內(nèi)部鱗片幼嫩，誘導率低，不易產(chǎn)生小鱗莖，故不宜采用。就季節(jié)性而言，以秋、冬季的鱗片，故不宜采用。就季節(jié)性而言，以秋、冬季的鱗片分化

10、成小鱗莖的能力最強。分化成小鱗莖的能力最強。第24頁/共52頁二、外植體的消毒二、外植體的消毒 由于百合鱗莖都生長由于百合鱗莖都生長在土中，受土壤微生物的在土中，受土壤微生物的影響，所以一般都會有污影響，所以一般都會有污染。為此外植體消毒要嚴染。為此外植體消毒要嚴加注意，鱗片先用流線形加注意，鱗片先用流線形自來水沖洗自來水沖洗12小時以上進小時以上進行預滅菌行預滅菌第25頁/共52頁先用先用70%酒精消毒酒精消毒30秒，再用秒，再用0.1%升汞升汞消毒消毒1520 分鐘。分鐘。第26頁/共52頁最后用無菌水沖洗最后用無菌水沖洗46次，用無菌吸水紙吸干水分。次，用無菌吸水紙吸干水分。第27頁/共

11、52頁三、外植體的初代培養(yǎng)三、外植體的初代培養(yǎng)在同一塊鱗片上，其基在同一塊鱗片上，其基部被誘導產(chǎn)生小鱗莖的能部被誘導產(chǎn)生小鱗莖的能力最強，中部次之，而頂力最強，中部次之，而頂部及邊緣位置相對要差些部及邊緣位置相對要差些，所以在進行原代培養(yǎng)時，所以在進行原代培養(yǎng)時，要取已消毒外植體的基，要取已消毒外植體的基部或中部。部或中部。第28頁/共52頁將其切成將其切成12cm2大小，大小，背部朝下背部朝下接種。接種。培養(yǎng)基：培養(yǎng)基：MS+2,4D0.3mg/L+瓊脂瓊脂0.7%+蔗糖蔗糖3%第29頁/共52頁培養(yǎng)條件為：溫度控制在培養(yǎng)條件為：溫度控制在232，光照控制，光照控制在在30005000Lx進

12、行脫分化，之后溫度控制進行脫分化，之后溫度控制在在252，每天，每天10h小時小時1500Lx光照。光照。第30頁/共52頁在百合組織培養(yǎng)過程在百合組織培養(yǎng)過程中，鱗片誘導產(chǎn)生小中，鱗片誘導產(chǎn)生小鱗莖的過程是比較緩鱗莖的過程是比較緩慢的，一般為慢的，一般為30天以天以上，在鱗片上分化出上，在鱗片上分化出多個肉眼可見的針尖多個肉眼可見的針尖大小的小突起。大小的小突起。第31頁/共52頁40天左右發(fā)育成球狀的可見鱗片的小鱗莖。天左右發(fā)育成球狀的可見鱗片的小鱗莖。第32頁/共52頁四、繼代培養(yǎng)四、繼代培養(yǎng)1）分離小鱗莖培養(yǎng)）分離小鱗莖培養(yǎng) 選擇直徑達到選擇直徑達到0.5cm大小的小鱗莖，用鑷子將其大

13、小的小鱗莖，用鑷子將其輕輕剝離，置于增殖培養(yǎng)基中。輕輕剝離，置于增殖培養(yǎng)基中。 第33頁/共52頁把原來的鱗片重新轉(zhuǎn)到新鮮的誘導培養(yǎng)基上繼續(xù)誘導把原來的鱗片重新轉(zhuǎn)到新鮮的誘導培養(yǎng)基上繼續(xù)誘導小鱗莖，小鱗莖還會在其他的部位產(chǎn)生，整個生長周小鱗莖，小鱗莖還會在其他的部位產(chǎn)生，整個生長周期可以延續(xù)期可以延續(xù)56個月。個月。第34頁/共52頁 小鱗莖繼代培養(yǎng)小鱗莖繼代培養(yǎng)30天左右可增殖天左右可增殖12倍。開始是在倍。開始是在鱗莖基部產(chǎn)生小鱗莖，鱗莖基部產(chǎn)生小鱗莖，40天左右小鱗莖長大，形成叢天左右小鱗莖長大，形成叢鱗莖。小鱗莖慢慢抽出新芽，然后形成小植株。此時鱗莖。小鱗莖慢慢抽出新芽，然后形成小植株

14、。此時可把叢芽切割繼續(xù)培養(yǎng)增殖?？砂褏惭壳懈罾^續(xù)培養(yǎng)增殖。第35頁/共52頁2）再生小鱗片剝離培養(yǎng)）再生小鱗片剝離培養(yǎng)選擇直徑達到選擇直徑達到0.5cm大小的小鱗莖，將其小大小的小鱗莖，將其小鱗片分離下來，不用切鱗片分離下來，不用切割，直接接種到分化培割，直接接種到分化培養(yǎng)基上。養(yǎng)基上。第36頁/共52頁20d后，在小鱗片基部后，在小鱗片基部會出現(xiàn)會出現(xiàn)35個小突起，以個小突起，以后發(fā)育成小鱗莖。多數(shù)后發(fā)育成小鱗莖。多數(shù)次生小鱗莖會抽生細長次生小鱗莖會抽生細長葉片，造成小鱗莖不飽葉片，造成小鱗莖不飽滿；不抽生葉片的小鱗滿；不抽生葉片的小鱗莖相對要肥厚一些。莖相對要肥厚一些。如此反復進行如此反復

15、進行,可以使繁可以使繁殖中間體得到快速增殖殖中間體得到快速增殖,但不可超過但不可超過6代以上代以上,否否則分化率下降，小鱗莖則分化率下降，小鱗莖細弱。細弱。第37頁/共52頁4、增重培養(yǎng)、增重培養(yǎng)直徑達到1cm以上即可進行生根培養(yǎng)，對于達不到此標準的小鱗莖，接種到增重培養(yǎng)基中，在此種培養(yǎng)基上，小鱗莖較少長葉而明顯增重。第38頁/共52頁五、試管苗的生根與練苗五、試管苗的生根與練苗將叢生的試管芽切成單株，接種在將叢生的試管芽切成單株，接種在1/2MS+IBA 0.5mg/L+活性炭活性炭0.5%生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基上，7天后芽基部天后芽基部開始形成根尖。慢慢伸長成輻射狀白色的小根。開始形成根

16、尖。慢慢伸長成輻射狀白色的小根。20天后根長達天后根長達710cm，基部稍膨大。溫度設置為，基部稍膨大。溫度設置為2528，光照強度為，光照強度為1500Lx每天給予每天給予1012h光照。光照。第39頁/共52頁當試管苗長成具當試管苗長成具45片葉，片葉，34條根條根，7cm左右高時，左右高時，在自然光照和溫度在自然光照和溫度條件下煉條件下煉20d可移可移栽。栽。第40頁/共52頁六、試管苗的移栽與田間管理六、試管苗的移栽與田間管理移栽時將試管苗根部的培養(yǎng)基洗干凈再移栽。百合移栽時將試管苗根部的培養(yǎng)基洗干凈再移栽。百合試管苗比較嬌嫩，移栽幼苗最好用消毒的腐殖土或試管苗比較嬌嫩，移栽幼苗最好用

17、消毒的腐殖土或草炭草炭+蛭石蛭石(2:1)的基質(zhì)中，育苗盤必須清洗消毒。的基質(zhì)中，育苗盤必須清洗消毒。第41頁/共52頁水分管理水分管理 栽后應澆一次定根水，同時保持較高的空氣濕栽后應澆一次定根水，同時保持較高的空氣濕度（度（90%以上）。在棚室栽培中如土壤干燥，應在以上）。在棚室栽培中如土壤干燥，應在晴天上午澆水，切忌在中午日照強烈、氣溫很高時晴天上午澆水，切忌在中午日照強烈、氣溫很高時澆水或噴水，否則易引起百合芽枯病等生理性病害澆水或噴水，否則易引起百合芽枯病等生理性病害的發(fā)生。的發(fā)生。第42頁/共52頁光照管理光照管理 在日照充足的棚室和夏季，要注意適當遮蔭在日照充足的棚室和夏季，要注意

18、適當遮蔭。否則強光照和短日照都會使百合植株矮小，產(chǎn)。否則強光照和短日照都會使百合植株矮小，產(chǎn)量明顯下降。量明顯下降。 第43頁/共52頁溫度管理溫度管理 生長初期給予生長初期給予913低溫，可促使其發(fā)根；低溫，可促使其發(fā)根；栽培時應保持在晝溫栽培時應保持在晝溫2025、夜溫、夜溫 1015。若由于白天溫度過高。超過若由于白天溫度過高。超過30，則應以通風及，則應以通風及遮蔭來防止高溫；遮蔭來防止高溫；第44頁/共52頁鱗莖初代培養(yǎng)形成小鱗莖小鱗莖繼代培養(yǎng)馴化移栽大田培植百合組織培養(yǎng)百合組織培養(yǎng)技術(shù)路線回顧技術(shù)路線回顧鱗片繼代培養(yǎng)生根第45頁/共52頁非洲菊，又名太陽花、扶郎花，屬多年生草本非洲菊，又名太陽花、扶郎花，屬多年生草本花卉。重瓣花，花色有紅、橙紅、淡紅、白色，花花卉。重瓣花，花色有紅、橙紅、淡紅、白色，花色艷麗，經(jīng)濟效益高，占世界切花銷量第五位，是色艷麗，經(jīng)濟效益高，占世界切花銷量第五位，是近年來發(fā)展迅速的重要切花種類之一。近年來發(fā)展迅速的重要切花種類之一。第46頁