美國(guó)CLIA88臨床檢驗(yàn)室內(nèi)質(zhì)量控制文件

1、美國(guó)CLIA' 88臨床檢驗(yàn)各專(zhuān)業(yè)室內(nèi)質(zhì)雖控制文件(一) 美國(guó)CLIA' 88質(zhì)量控制要求美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室改進(jìn)修正法案最終規(guī)則(CLIA final rule)于2003年1月24日通過(guò)，2003年4月24日實(shí)施。其中K-非豁免試驗(yàn)的質(zhì)量體系，分析系統(tǒng)中493.1256標(biāo)準(zhǔn)：控制程序(control procedures)對(duì)各專(zhuān)業(yè)質(zhì)量控制提出具體要求。1、控制程序根據(jù)美國(guó)CLIA' 88最終規(guī)則Sec.493.1256標(biāo)準(zhǔn)：控制程序(a) 對(duì)于每一檢測(cè)系統(tǒng)，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)制定控制程序，監(jiān)測(cè)整個(gè)分析過(guò)程的準(zhǔn)確度和精密度。(b) 實(shí)驗(yàn)室必須建立檢測(cè)控制物的數(shù)量、類(lèi)型和頻率，如果適

2、合，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按Sec.493.1256(b) (3)規(guī)定驗(yàn)證或建立性能規(guī)范。(c) 控制程序必須(1) 立即檢測(cè)出由于檢測(cè)系統(tǒng)故障、不利的環(huán)境條件及操作者性能而產(chǎn)生的誤差。(2) 長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)由于檢測(cè)系統(tǒng)性能和環(huán)境條件改變和操作者性能變化而可能影響到的準(zhǔn)確度 和精密度性能。(d) 除了 CMS比準(zhǔn)的程序，如國(guó)家操作手冊(cè)附錄C中規(guī)定(CMS Pub. 7)的外，提供了等效質(zhì)量檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)室必須(1) 執(zhí)行本節(jié)規(guī)定的質(zhì)量控制程序，除非在 493.1261到493.1278部分其他專(zhuān)業(yè)和亞專(zhuān)業(yè) 有其他的規(guī)定。(2) 對(duì)于每一檢測(cè)系統(tǒng)，當(dāng)他們滿足或超出本節(jié)(d)(3)部分要求時(shí)，執(zhí)行的質(zhì)量控制程序使用廠家規(guī)

3、定或?qū)嶒?yàn)室建立的個(gè)數(shù)和頻率。(3) 每天檢測(cè)患者標(biāo)本時(shí)至少每天檢測(cè)一次控制品，或執(zhí)行如下的步驟(i) 每一定量檢測(cè)程序，包括兩個(gè)不同濃度水平的控制品；(ii) 對(duì)每一定性的檢測(cè)程序，包括一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性控制品；(iii) 對(duì)于產(chǎn)生分級(jí)或滴度結(jié)果的檢測(cè)程序，分別包括陰性控制品和具有分級(jí)或滴度反應(yīng) 性的控制品；(iV)對(duì)于具有提取階段的每一檢測(cè)系統(tǒng)，包括兩個(gè)控制品，其中一種能夠檢出提取階段的誤差；(v)對(duì)于每一種分子擴(kuò)增程序，包括兩個(gè)控制品，如果反應(yīng)抑制性是假陰性結(jié)果的顯著性 來(lái)源，一個(gè)控制品能夠檢出抑制性作用。(4) 對(duì)于薄層層析(i) 如果適當(dāng)時(shí)，在每一板或卡上點(diǎn)上含有所有已知的物質(zhì)或藥物組

4、的校準(zhǔn)品，其經(jīng)薄層層析識(shí)別，由實(shí)驗(yàn)室報(bào)告；(ii) 適當(dāng)時(shí)，在每板或卡上包括至少一個(gè)控制品，應(yīng)與患者標(biāo)本檢測(cè)步驟一樣處理，包括提取過(guò)程。(5) 對(duì)于每個(gè)電泳程序，和患者標(biāo)本一樣處理，至少有一個(gè)控制品，其含有確定或檢測(cè)的 物質(zhì)。(6) 當(dāng)引入完全改變的試劑，執(zhí)行了主要的預(yù)防性維護(hù)；或更換影響試驗(yàn)性能的任何關(guān)鍵 部件時(shí)，在恢復(fù)患者檢測(cè)之前，應(yīng)按照本節(jié)的規(guī)定進(jìn)行控制品的檢測(cè)。(7) 在整個(gè)檢測(cè)時(shí)間內(nèi)，所有進(jìn)行試驗(yàn)的檢驗(yàn)人員均使用相同的控制品進(jìn)行檢測(cè)。(8) 應(yīng)與檢測(cè)患者標(biāo)本一樣的方式來(lái)檢測(cè)控制品。(9) 當(dāng)校準(zhǔn)品作為控制品時(shí)，使用與用于建立切值或校準(zhǔn)檢測(cè)系統(tǒng)不同批號(hào)的校準(zhǔn)品。(10) 建立或驗(yàn)證所有

5、控制品的可接受的標(biāo)準(zhǔn)。(i) 當(dāng)使用的控制品提供定量的結(jié)果時(shí)，必須確定每一批號(hào)控制品的統(tǒng)計(jì)參數(shù)(如：均值 和標(biāo)準(zhǔn)差)。(ii) 實(shí)驗(yàn)室可使用商品化定值的控制品，其定值是與實(shí)驗(yàn)室所使方法和儀器有關(guān)；實(shí)驗(yàn)室需要對(duì)其值進(jìn)行驗(yàn)證。(iii) 通過(guò)長(zhǎng)時(shí)期同時(shí)檢測(cè)已有統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)的控制品，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建立起非定值控制品的 統(tǒng)計(jì)學(xué)參數(shù)。(e) 對(duì)于試劑、培養(yǎng)基和供應(yīng)品的檢查，實(shí)驗(yàn)室必須做如下的工作：(1) 當(dāng)制備或打開(kāi)時(shí)，若合適，檢查每批自制的、或商品的每個(gè)批號(hào)的試劑、培養(yǎng)基平板、染色液、抗血清和鑒定系統(tǒng)(使用兩個(gè)或更多物質(zhì)、或兩個(gè)或更多以上的試劑、或各種組合的系統(tǒng))的陽(yáng)性和陰性反應(yīng)性，以及反應(yīng)性等級(jí)。(2) 每

6、個(gè)工作日(除了本亞章的規(guī)定外)，檢查染色物質(zhì)的反應(yīng)性以保證出現(xiàn)預(yù)期的染色 特征。如適當(dāng)，應(yīng)包括陽(yáng)性和陰性反應(yīng)性的控制品。(3) 每次使用時(shí)，檢查熒光和免疫組織化學(xué)染色劑對(duì)反應(yīng)陰性和陽(yáng)性時(shí)的反應(yīng)性。(4) 在之前，或與最初同時(shí)使用(i) 如果檢測(cè)要求無(wú)菌，應(yīng)對(duì)每一批號(hào)培養(yǎng)基進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)；(ii) 檢測(cè)每批培養(yǎng)基對(duì)各菌種的支持生長(zhǎng)的能力，必要時(shí)，可選擇或抑制特定的生物， 或產(chǎn)生生化反應(yīng)。(iii) 當(dāng)向廠家報(bào)告培養(yǎng)基任何的變質(zhì)時(shí)，文件記錄培養(yǎng)基的物理特征。(5) 按照制造商說(shuō)明書(shū)，使用試劑、培養(yǎng)基和供應(yīng)品，并對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果負(fù)責(zé)。(f) 在報(bào)告患者試驗(yàn)結(jié)果之前，控制品的結(jié)果必須滿足實(shí)驗(yàn)室的，以及必要時(shí)，

7、廠家檢 測(cè)系統(tǒng)可接受準(zhǔn)則的要求。(g) 實(shí)驗(yàn)室必須記錄執(zhí)行的所有控制程序。(h) 如果無(wú)法獲得控制品，實(shí)驗(yàn)室必須有替代機(jī)制檢出即刻的誤差及長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)檢測(cè)系統(tǒng) 性能。必須文件記錄替代控制程序的性能。2 、Sec.493.1261 標(biāo)準(zhǔn)：細(xì)菌學(xué)(a) 實(shí)驗(yàn)室必須使用控制生物體來(lái)檢查下列的陽(yáng)性和陰性的反應(yīng)性：(1) 每日檢查所使用的6-內(nèi)酰胺酶。(2) 每周要檢查所做的革蘭染色。(3) 當(dāng)制備或打開(kāi)每一批(實(shí)驗(yàn)室自制)、批號(hào)(商品制備)和抗血清的運(yùn)輸時(shí)，需要每 6個(gè) 月檢查一次。(b) 對(duì)于抗生素敏感試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室必須在之前、同時(shí)、最初使用時(shí)，使用批準(zhǔn)的控制生物 體，來(lái)檢查每批培養(yǎng)基、抗生素。(1) 對(duì)

8、于每天進(jìn)行的試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室必須使用適當(dāng)?shù)目刂频纳矬w來(lái)檢查程序。(2) 在報(bào)告患者結(jié)果之前，實(shí)驗(yàn)室控制生物體的區(qū)帶大小或最低抑制濃度必須在規(guī)定的界限之內(nèi)。(c) 實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。3、Sec.493.1262 標(biāo)準(zhǔn)：分枝桿菌學(xué)(a) 每日檢查，實(shí)驗(yàn)室必須用至少一種快酸生物體，其可產(chǎn)生陽(yáng)性反應(yīng)和一種快酸生物體 產(chǎn)生陰性反應(yīng)來(lái)檢查用于分枝桿菌鑒定的所有試劑或檢測(cè)程序。(b) 對(duì)于抗分枝桿菌敏感試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室必須在之前、或同時(shí)在最初使用，使用批準(zhǔn)的控制生物體，來(lái)檢查每批培養(yǎng)基、抗分支桿菌劑。(1) 實(shí)驗(yàn)室必須建立可接受控制結(jié)果的界限。(2) 每周執(zhí)行的試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室必須使用適

9、當(dāng)?shù)馁|(zhì)控生物體來(lái)檢查程序。(3) 在報(bào)告患者結(jié)果之前，控制生物體的結(jié)果必須在建立的界限之內(nèi)。(c) 實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。4、Sec.493.1263 標(biāo)準(zhǔn)：真菌學(xué)(a) 當(dāng)制備或打開(kāi)時(shí)，用控制生物體檢查每批自制的、或商品的每個(gè)批號(hào)的試劑和乳(酸)酚棉藍(lán)的運(yùn)輸?shù)姆磻?yīng)性。(b) 對(duì)于真菌敏感試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室必須在之前或同時(shí)、最初使用，使用適當(dāng)?shù)目刂粕矬w， 來(lái)檢查每一批號(hào)的培養(yǎng)基、抗真菌試劑。(1) 實(shí)驗(yàn)室必須建立可接受質(zhì)控結(jié)果的界限。(2) 每天執(zhí)行的試驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)室必須使用適當(dāng)?shù)馁|(zhì)控生物體來(lái)檢查程序。(3) 在報(bào)告患者結(jié)果之前，質(zhì)控生物體的結(jié)果必須在建立的界限之內(nèi)。(c)

10、實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。5、Sec.493.1264 標(biāo)準(zhǔn)：寄生蟲(chóng)學(xué)(a) 實(shí)驗(yàn)室必須具有可獲得的參考標(biāo)本的載物片或照片，如果可獲得寄生蟲(chóng)鑒定的粗的標(biāo)本，可使用這些作為實(shí)驗(yàn)室與診斷標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)比較的參考。(b) 實(shí)驗(yàn)室必須校準(zhǔn)和使用校準(zhǔn)的目鏡測(cè)微計(jì)來(lái)確定卵和寄生蟲(chóng)的大小，如果大小是關(guān)鍵參數(shù)。(c) 每月使用，實(shí)驗(yàn)室必須使用糞便樣本控制品檢查永久的染色將證實(shí)染色特征。(d) 實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄如本節(jié)規(guī)定執(zhí)行的所有控制程序。6 、Sec.493.1265標(biāo)準(zhǔn)：病毒學(xué)(a) 當(dāng)使用細(xì)胞培養(yǎng)來(lái)分離或鑒定病毒時(shí)，實(shí)驗(yàn)室必須同時(shí)培養(yǎng)一種細(xì)胞底物的控制品 或非接種的細(xì)胞作為陰性控制品

11、。(b) 實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的執(zhí)行的所有控制程序。7、Sec.493.1267標(biāo)準(zhǔn)：常規(guī)化學(xué)對(duì)于血?dú)夥治觯瑢?shí)驗(yàn)室必須執(zhí)行如下步驟：(a) 根據(jù)廠家的說(shuō)明書(shū)和廠家推薦的最少的頻次進(jìn)行校準(zhǔn)或驗(yàn)證校準(zhǔn)。(b) 每8小時(shí)檢測(cè)一個(gè)控制品樣本，每天檢測(cè)應(yīng)使用低和高值的控制品。(c) 除非自動(dòng)化儀器至少每30分鐘內(nèi)部驗(yàn)證校準(zhǔn)，每次檢測(cè)標(biāo)本都應(yīng)同時(shí)測(cè)一份控制品。(d) 文件記錄本部分規(guī)定的執(zhí)行的所有控制程序。8 、Sec.493.1269標(biāo)準(zhǔn)：血液學(xué)(a) 對(duì)于使用血球計(jì)數(shù)器手工進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)的(1) 每8個(gè)小時(shí)操作必須檢測(cè)一個(gè)控制品。(2) 患者標(biāo)本和控制品必須進(jìn)行雙份檢測(cè)。(b) 對(duì)于所有非手工的凝

12、血檢測(cè)系統(tǒng)，每 8個(gè)小時(shí)的操作和每次更換試劑，實(shí)驗(yàn)室必須 包括兩個(gè)水平的控制品。(c) 對(duì)于手工凝血試驗(yàn)(1) 在檢測(cè)患者樣本和每次更換試劑之前，每次執(zhí)行的試驗(yàn)必須檢測(cè)兩個(gè)水平的控制品；(2) 患者標(biāo)本和控制品必須以雙份進(jìn)行檢測(cè)。(d) 實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的所執(zhí)行的所有控制程序。9 、Sec.493.1271 標(biāo)準(zhǔn)：免疫血液學(xué)(a)患者檢測(cè)(1) 實(shí)驗(yàn)室必須按照廠家的說(shuō)明書(shū)執(zhí)行AB0型，D(Rho)型，未預(yù)見(jiàn)到抗體檢測(cè)、抗體識(shí)別和相容性試驗(yàn)，如果適用，從21 CFR 606.151(a)到(e)。 I(2) 實(shí)驗(yàn)室必須通過(guò)用抗-A和抗-B試劑與未知紅細(xì)胞同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)來(lái)確定AB0血型。對(duì)

13、于確認(rèn)AB0血型，用已知 Al和B紅細(xì)胞與未知血清進(jìn)行檢測(cè)。l(3) 實(shí)驗(yàn)室必須通過(guò)未知紅細(xì)胞與抗-D(抗-RhD)血型試劑一起檢測(cè)來(lái)確定D(RhD)型(b) 免疫血液學(xué)檢測(cè)和血液和血制品的分配。血液和血產(chǎn)品的檢測(cè)和分配必須遵守21CFR606.100(b)(12); 606.160(b)(3)(ii) 和(b)(3)(v); 610.40 ; 640.5(a) , (b) , (c),和(e) ;和 640.11(b)。(c) 血液和血液產(chǎn)品的保存。血液和血液產(chǎn)品必須保存在適當(dāng)?shù)臈l件下，應(yīng)包括適當(dāng)?shù)?溫度警報(bào)系統(tǒng)，并定期對(duì)其檢查。(1) 可聽(tīng)見(jiàn)的警報(bào)系統(tǒng)必須監(jiān)測(cè)適當(dāng)?shù)难汉脱寒a(chǎn)品24小時(shí)時(shí)

14、間內(nèi)的保存溫度。(2) 必須文件記錄警報(bào)系統(tǒng)的檢查。(d) 保留輸血的樣本。根據(jù)實(shí)驗(yàn)室已建立的程序，輸完血的每一單位的樣本必須保留為 出現(xiàn)輸血反應(yīng)后的進(jìn)一步檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室必須立即處理已過(guò)有效期不用保留作進(jìn)一步檢測(cè)的血 液。(e) 輸血反應(yīng)的調(diào)查。(1) 根據(jù)其已建立的程序，實(shí)驗(yàn)室執(zhí)行相容性試驗(yàn)，或發(fā)出血液或血液產(chǎn)品，必須迅速地 調(diào)查機(jī)構(gòu)內(nèi)發(fā)生的所有輸血反應(yīng)，機(jī)構(gòu)有調(diào)查責(zé)任及給醫(yī)護(hù)人員提供關(guān)于輸血程序改進(jìn)的建 議。(2) 若適用時(shí)，實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄采取所有必需的糾正措施，防止輸血反應(yīng)的再發(fā)生， 以及審核所有的政策和程序確保它們對(duì)于保證輸血安全是適當(dāng)?shù)摹?f) 實(shí)驗(yàn)室必須文件記錄本節(jié)規(guī)定的所執(zhí)行的

15、所有控制程序。(二) 臨床化學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制根據(jù)美國(guó)CLIA' 88最終規(guī)則規(guī)定的質(zhì)量控制程序如下：每一定量檢測(cè)程序，包括兩個(gè)不同濃度的控制品。通過(guò)上述的質(zhì)量控制方法選擇和設(shè)計(jì)指南(允許總誤差、不精密度和不準(zhǔn)確度，90%誤差檢出概率和小于 5%的假失控概率等)對(duì)常規(guī)化學(xué)檢驗(yàn)項(xiàng)目設(shè)計(jì)質(zhì)控方法， 其誤差檢出概率可滿足要求。如果選擇的質(zhì)控方法其誤差檢出概率處于中度和低度的情況， 根據(jù)全面質(zhì)控策略(total QC strategy) ,可采用其他的質(zhì)量控制方法和質(zhì)量改進(jìn)措施。(三) 臨床血液學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制其統(tǒng)計(jì)質(zhì)控方法設(shè)計(jì)方案同常規(guī)化學(xué)檢測(cè)項(xiàng)目。由于控制品有效期較短，不可能完全使用上述臨床化學(xué)

16、使用的繪制質(zhì)控圖方法，此時(shí)可采用短期控制品繪制質(zhì)控圖的方式，另一方面可采用保留患者樣品、患者樣品雙份測(cè)定的方法進(jìn)行質(zhì)量控制。對(duì)于紅細(xì)胞指數(shù)項(xiàng)目更多的是采用患者數(shù)據(jù)方式，即 Bull ' S移動(dòng)均值法。(四) 臨床免疫學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制定性檢驗(yàn)項(xiàng)目的質(zhì)量控制根據(jù)美國(guó)CLIA' 88最終規(guī)則規(guī)定的質(zhì)量控制程序如下：對(duì)每一定性的檢測(cè)程序，每一分析批應(yīng)包括一個(gè)陰性和一個(gè)陽(yáng)性控制品；對(duì)于產(chǎn)生分級(jí)或滴度結(jié)果的檢測(cè)程序，分別包括陰性控制品和具有分級(jí)或滴度反應(yīng)性的陽(yáng)性控制品。兩種控制品的選擇應(yīng)基于雙重反應(yīng)的不可靠性，即控制品在C0和Ci濃度應(yīng)可獲得來(lái)執(zhí)行這一方法：在 G濃度的控制品A(+)(臨界值

17、控制品)，在。濃度的控制品B(-).通過(guò)使用這兩個(gè)控制品，可制作如圖17-3所示的圖形，根據(jù)可建立四種不同的區(qū)間： 區(qū)間(1)代表處于控制狀態(tài)； 區(qū)間 和，相當(dāng)于單一假反應(yīng)：區(qū)間 (2)為假陽(yáng)性反應(yīng)，區(qū)間(3)為假陰性反應(yīng)； 區(qū)間(4)，代表雙重的假反應(yīng)：假陽(yáng)性及假陰，性(此種控制圖可由 Clinet -IQC軟件制 作)。在定性分析中這種質(zhì)控圖的主要目的是控制提供雙重反應(yīng)的儀器/系統(tǒng)的性能。這 種質(zhì)控圖的目的是檢出假陽(yáng)性反應(yīng)和假陰性反應(yīng)，看來(lái)為了這一目的同時(shí)使用兩個(gè)控制品是非常方便的。樣本M+) '在控制暇陽(yáng)性反應(yīng)樣本BH(4)假陰性反應(yīng)嵌陽(yáng)性和俱陰性11圖17-3雙重反應(yīng)室內(nèi)質(zhì)控制

18、的質(zhì)控圖(五) 臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)質(zhì)量控制中國(guó)合格評(píng)定國(guó)家認(rèn)可委員會(huì)CNAS-CL31醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量和能力認(rèn)可準(zhǔn)則在臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)領(lǐng)域的應(yīng)用說(shuō)明。I、檢驗(yàn)前程序1. 檢驗(yàn)申請(qǐng)單應(yīng)包括標(biāo)本來(lái)源，必要時(shí)說(shuō)明感染類(lèi)型和/或目標(biāo)微生物。2. 除一般要求外，微生物標(biāo)本的采集及運(yùn)送指南，應(yīng)特別注意以下內(nèi)容：(1) 不同部位標(biāo)本的采集方法。如：血培養(yǎng)應(yīng)明確說(shuō)明并執(zhí)行標(biāo)本采集的消毒技術(shù)、 合適的標(biāo)本量；(2) 合格的標(biāo)本類(lèi)型、送檢次數(shù)、標(biāo)本量。如：糞便常規(guī)培養(yǎng)宜包括未向?qū)I(yè)人員咨詢前。每位患者采集標(biāo)本不多于 2份；(3) 應(yīng)明確規(guī)定需要盡快運(yùn)送的標(biāo)本，以便最大程度地減少延誤并盡快處理；(4) 合適的運(yùn)送培養(yǎng)基

19、；(5) 延退運(yùn)送時(shí)，標(biāo)本的貯藏方法；(6) 安全運(yùn)送標(biāo)本的方法(如：密封容器、無(wú)標(biāo)本外漏等 )；(7) 標(biāo)本標(biāo)識(shí)。3 .應(yīng)制定標(biāo)本接收標(biāo)準(zhǔn)，如無(wú)肉眼可見(jiàn)的滲漏、合適的標(biāo)本類(lèi)型/量、正確的保存、預(yù)防拭子干燥、正確的運(yùn)送培養(yǎng)基等。應(yīng)評(píng)估標(biāo)本合格與否。不合格的痰標(biāo)本應(yīng)盡快通知醫(yī)生、 護(hù)士或患者(門(mén)診)以便重新采集。n、檢驗(yàn)程序細(xì)菌：所選擇的涂片、染色技術(shù)、培養(yǎng)基應(yīng)能從標(biāo)本中分離、識(shí)別相應(yīng)的病原菌鑒定方法應(yīng)符合要求(如：通過(guò)血清學(xué)、革蘭染色、茵落形態(tài)、生長(zhǎng)條件、代謝反應(yīng)、生化和酶活 性、抗茵藥物耐藥性譜等特性鑒定)；應(yīng)能處理組織標(biāo)本。抗菌藥物敏感性試驗(yàn)方法包括紙片擴(kuò)散法、稀釋法(瓊脂稀釋法、液體稀釋

20、法 )、濃度梯度擴(kuò)散法(E試驗(yàn))或自動(dòng)化儀器檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)室應(yīng)遵循一定的準(zhǔn)則，提供與服務(wù)相適應(yīng) 的抗菌藥物敏感性試驗(yàn)，并能檢測(cè)苯哩西林耐藥金黃色葡萄球菌、萬(wàn)古霉素耐藥腸球菌 青霉素不敏感肺炎鏈球菌等病原菌。痰培養(yǎng)應(yīng)包括肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、腸桿菌科細(xì)菌的分離，若 標(biāo)本被唾液嚴(yán)重污染，可以不鑒定全部細(xì)菌或不做藥敏試驗(yàn)；呼吸道和耳鼻喉標(biāo)本應(yīng)能分 離6溶血鏈球菌和嗜血桿菌；支氣管肺泡灌洗液和支氣管鏡檢查標(biāo)本應(yīng)能定量培養(yǎng)。尿液常規(guī)進(jìn)行定量培養(yǎng)(菌落計(jì)數(shù))，應(yīng)能分離、鑒定革蘭陽(yáng)性和/或革蘭陰性細(xì)菌。泌尿生殖道標(biāo)本應(yīng)有合適條件培養(yǎng)淋病奈瑟菌；陰道炎患者標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行革蘭染色；最好 能開(kāi)展孕婦（

21、懷孕3537周）B群鏈球菌的篩查，藥敏實(shí)驗(yàn)應(yīng)包括林可霉素和紅霉素。糞便標(biāo)本應(yīng)能分離、鑒定腹瀉相關(guān)病原菌（如沙門(mén)菌、志賀菌、耶爾森桿菌、彎曲菌、腸出血性大腸桿菌、嗜水氣單胞菌），結(jié)果報(bào)告應(yīng)標(biāo)明具體的細(xì)菌名稱(chēng)，如未檢出沙門(mén)菌、志賀菌等；無(wú)癥狀攜帶者，常規(guī)使用增菌培養(yǎng)基或選擇培養(yǎng)基；應(yīng)能檢測(cè)霍亂弧菌、艱難梭 菌；粘性較低的培養(yǎng)標(biāo)本，宜進(jìn)行直接顯微鏡檢查。年齡大于6個(gè)月，有抗菌藥物治療史的嚴(yán)重腹瀉患者，糞便常規(guī)培養(yǎng)無(wú)異常發(fā)現(xiàn)時(shí)，可檢測(cè)艱難梭菌毒素。腦脊液培養(yǎng)標(biāo)本應(yīng)立即處理，常規(guī)進(jìn)行革蘭染色， 培養(yǎng)基和孵育條件確保能培養(yǎng)常見(jiàn)苛養(yǎng)菌（腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌、單核細(xì)胞李斯特菌、 奴卡菌等）；應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室

22、制定的 危急值處理規(guī)程報(bào)告陽(yáng)性結(jié)果 （包括顯微鏡檢查結(jié)果）；抗原試驗(yàn)，無(wú)論結(jié)果為陽(yáng)性還是陰性， 都應(yīng)再進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)；最好有其他方法檢測(cè)不能培養(yǎng)或難培養(yǎng)的細(xì)菌。傷口標(biāo)本應(yīng)明確培養(yǎng)程序，深部傷口感染應(yīng)至少包括標(biāo)本采集、需氧菌及厭氧菌的培養(yǎng)及鑒定。如果不具備厭氧培養(yǎng)條件，則應(yīng)有程序表明，標(biāo)本置合格的運(yùn)送系統(tǒng)迅速送有條件 的實(shí)驗(yàn)室。應(yīng)有適當(dāng)?shù)姆椒z測(cè)苛養(yǎng)菌 （如放線菌，快速生長(zhǎng)的分枝桿菌）。最好進(jìn)行直接涂 片革蘭染色檢查并報(bào)告結(jié)果。厭氧菌培養(yǎng)時(shí)間與標(biāo)本類(lèi)型、診斷有關(guān)，但在第一次培養(yǎng)評(píng)估之前應(yīng)有足夠的培養(yǎng)時(shí)間 （至少48小時(shí)）。應(yīng)有合適的液體培養(yǎng)基 （如疏基乙酸鹽培養(yǎng)基），有合適的鑒定方法（適用 時(shí)）。

23、分枝桿菌：檢查標(biāo)本應(yīng)置密閉的防滲漏容器內(nèi)；某些標(biāo)本（如：尿液、痰液）抗酸染色及培養(yǎng)前應(yīng)濃縮。應(yīng)以密閉的螺旋蓋試管置密封的離心架內(nèi)離心，以最大程度減少氣溶膠危害。應(yīng)進(jìn)行原始標(biāo)本涂片分枝桿菌熒光染色；常規(guī)培養(yǎng)在3537C,當(dāng)臨床有特殊說(shuō)明（某些特殊菌屬）時(shí)，可置3032。C或42C。標(biāo)本量大時(shí)，宜至少接種 2類(lèi)培養(yǎng)基。應(yīng)在收到標(biāo)本 24小時(shí)內(nèi)報(bào)告抗酸染色結(jié)果。真菌：應(yīng)選擇適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基和環(huán)境，以保證分離重要的致病菌，并盡量減少污染；分離和鑒定程序應(yīng)包括直接或染色 （如10% KOH墨汁染色或吉姆薩染色）初篩、合適的選擇性培 養(yǎng)基、孵育溫度以及藥敏試驗(yàn)。應(yīng)準(zhǔn)備兩種培養(yǎng)基（含或不含抗菌藥物）。如果在室溫

24、下培養(yǎng)， 應(yīng)每天監(jiān)測(cè)并記錄室溫（2226C）以確定室溫持續(xù)滿足真菌的生長(zhǎng)。提供鑒定服務(wù)的實(shí)驗(yàn)室， 應(yīng)建立完善的真菌鑒定程序，包括玻片培養(yǎng)（必要時(shí)），生化反應(yīng)，營(yíng)養(yǎng)試驗(yàn)（必要時(shí)）。否則應(yīng)送有條件的實(shí)驗(yàn)室鑒定。經(jīng)空氣傳播有高度傳染性的微生物標(biāo)本、含菌絲體的真菌應(yīng)在生物安全柜或安全罩內(nèi)處理。若采用平板培養(yǎng)，應(yīng)有適當(dāng)?shù)陌踩胧ㄈ绶馍w），以防止平板意外打開(kāi)。 只有具備嚴(yán)格的、適當(dāng)?shù)陌踩胧┎拍苓M(jìn)行玻片培養(yǎng)。病毒：?jiǎn)螌蛹?xì)胞應(yīng)孵育一定時(shí)間，以滿足相應(yīng)病毒的生琵要求；應(yīng)詳細(xì)記錄細(xì)胞類(lèi)型、 傳代數(shù)、細(xì)胞來(lái)源、培養(yǎng)基及生長(zhǎng)狀況；應(yīng)檢測(cè)并記錄培養(yǎng)基和稀釋劑的無(wú)菌試驗(yàn)和pH;應(yīng)監(jiān)測(cè)細(xì)胞病變效應(yīng)，以優(yōu)化培養(yǎng)的最佳時(shí)f

25、B3。宜比較未經(jīng)接種或接種無(wú)菌物質(zhì)的單層細(xì)胞與接種臨床標(biāo)本的培養(yǎng)物。應(yīng)建立程序，對(duì)定量血清試驗(yàn)的紅細(xì)胞懸液進(jìn)行檢測(cè)并標(biāo)準(zhǔn)化。工作表和/或記錄應(yīng)顯示試劑或參比血清的滴度 （如果可能），以及檢測(cè)結(jié)果的實(shí)際滴度。所有血清學(xué)試驗(yàn)檢測(cè)抗原或抗體，應(yīng)設(shè)立陽(yáng)性和陰性對(duì)照。寄生蟲(chóng)：實(shí)驗(yàn)室應(yīng)與臨床醫(yī)師協(xié)商制定寄生蟲(chóng)常規(guī)檢驗(yàn)操作規(guī)程并遵循，其中包括 常規(guī)寄生蟲(chóng)學(xué)試驗(yàn)糞便標(biāo)本的采集時(shí)間、次數(shù)、標(biāo)本量。糞便顯微鏡檢查蟲(chóng)卵和寄生蟲(chóng)，應(yīng)包括濃縮過(guò)程和固定染色試驗(yàn)；新鮮稀便顯微鏡檢查應(yīng)包括直接濕片檢查，以觀察寄 生蟲(chóng)的動(dòng)力。血液寄生蟲(chóng)（瘧原蟲(chóng)或其他血源性寄生蟲(chóng)）顯微鏡檢查應(yīng)制備厚血涂片和薄血涂片， 陽(yáng)性結(jié)果應(yīng)執(zhí)行危急值報(bào)告

26、程序。血涂片檢驗(yàn)瘧原蟲(chóng)陽(yáng)性時(shí)，應(yīng)同時(shí)報(bào)告鑒定結(jié)果。分子微生物學(xué)：每次患者標(biāo)本核酸提取、準(zhǔn)備過(guò)程（手工或自動(dòng)化），應(yīng)平行設(shè)立陰陽(yáng)性質(zhì)控。應(yīng)規(guī)定并記錄所有孵育 （反應(yīng)）溫度。如果孵育溫度超出規(guī)定范圍，應(yīng)在發(fā)報(bào) 告前采取糾正措施。試驗(yàn)操作和結(jié)果報(bào)告應(yīng)遵循制造商的建議，而不用其他試劑、探針 取代。應(yīng)制定程序驗(yàn)證所有環(huán)節(jié)，包括染色、試劑、培養(yǎng)基、抗血清和分析軟件等符合預(yù) 期性能。應(yīng)規(guī)定特殊病原體的識(shí)別、隔離、報(bào)告，以及特殊處理程序。除一般內(nèi)容外， 程序還應(yīng)包括適宜的培養(yǎng)環(huán)境和足夠的培養(yǎng)時(shí)間；非選擇性培養(yǎng)基（平板直徑大于9cm）宜只接種一份標(biāo)本。應(yīng)能夠盡快完成白喉?xiàng)U菌、氣性壞疽菌群、炭疽桿菌、肉毒梭菌和

27、破傷風(fēng)桿菌檢測(cè)；痰標(biāo)本應(yīng)進(jìn)行常規(guī)涂片、革蘭染色，以確定標(biāo)本的可接受性或培養(yǎng)范 圍。m、檢驗(yàn)程序的質(zhì)量保證實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)部質(zhì)量控制體系應(yīng)以文件形式明確規(guī)定，包括整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程，如實(shí) 驗(yàn)分析前、中、后（報(bào)告），以及病人識(shí)別及準(zhǔn)備；標(biāo)本采集、標(biāo)識(shí)、保存、運(yùn)送、處理、 檢測(cè)后貯藏；報(bào)告發(fā)送時(shí)間。這些內(nèi)容應(yīng)符合相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。如：應(yīng)對(duì)檢測(cè)儀器進(jìn)行維護(hù)、 功能評(píng)估及溫度監(jiān)測(cè)；在報(bào)告患者結(jié)果之前，應(yīng)確認(rèn)質(zhì)控在可接受范圍；缺乏審核者的 報(bào)告結(jié)果，應(yīng)由適當(dāng)人員在24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行評(píng)估；應(yīng)有措施發(fā)現(xiàn)并更正重大的文字錯(cuò)誤、 實(shí)驗(yàn)錯(cuò)誤以及可能影響患者處理的不尋常的檢測(cè)結(jié)果。標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程內(nèi)容應(yīng)包括：實(shí)驗(yàn)原理、臨床意義、標(biāo)本類(lèi)型、

28、檢測(cè)試劑、定標(biāo)試 劑、質(zhì)控、操作步驟、計(jì)算方法、生物參考區(qū)間及檢測(cè)結(jié)果的解釋?zhuān)⒆⒚鞣治銮昂笞?意事項(xiàng)。操作者應(yīng)能方便取閱，實(shí)際操作應(yīng)與之相符。應(yīng)有文檔資料證明，工作人員了解其操作活動(dòng)涉及的所有文件。質(zhì)量管理體系文件 應(yīng)至少每年一次由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定人員評(píng)估。新的制度、操作規(guī)程或原有文件的重要變更實(shí)施前，應(yīng)由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或其指定人員評(píng)估并批準(zhǔn)。應(yīng)有措施保證所有工作人員顯微鏡檢查結(jié)果判斷及報(bào)告的一致性。試劑：所有試劑應(yīng)標(biāo)注：名稱(chēng)和質(zhì)量、 濃度或滴度；存放條件；配制時(shí)間；失效期。 以上內(nèi)容亦應(yīng)記錄。若試劑啟封，改變了有效期和儲(chǔ)存條件，應(yīng)記錄新的有效期。試劑 的儲(chǔ)存條件應(yīng)遵循生產(chǎn)商的建議，并在標(biāo)

29、明的有效期內(nèi)使用。新批號(hào)或貨次的試劑使用前，應(yīng)通過(guò)直接分析參考物質(zhì)、新舊批號(hào)平行實(shí)驗(yàn)或常規(guī) 質(zhì)控等方法進(jìn)行性能驗(yàn)證， 并記錄。定性試驗(yàn)試劑應(yīng)至少檢測(cè)一個(gè)已知陽(yáng)性和一個(gè)已知 陰性樣本。直接抗原檢測(cè)試劑，若含內(nèi)質(zhì)控，每一新批號(hào)或相同批號(hào)不同貨次應(yīng)檢測(cè)陽(yáng)性和陰 性外質(zhì)控并記錄。若不含內(nèi)質(zhì)控，實(shí)驗(yàn)應(yīng)每天檢測(cè)陽(yáng)性和陰性質(zhì)控并記錄。培養(yǎng)基：外觀應(yīng)良好（平滑、水分適宜、無(wú)污染、適當(dāng)?shù)念伾秃穸?，試管培養(yǎng)基濕度 適宜），應(yīng)有明確標(biāo)簽，根據(jù)標(biāo)簽應(yīng)能獲得生產(chǎn)日期（批號(hào)）、保質(zhì)期、配方（適用時(shí)）、質(zhì)量控制、貯存條件等信息。購(gòu)買(mǎi)的有質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)保存制造商所遵循的質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)，以及每批號(hào)產(chǎn)品完成無(wú)菌試

30、驗(yàn)、生長(zhǎng)試驗(yàn)、生化反應(yīng)及質(zhì)量控制性能的合格證明等文件；無(wú)質(zhì)量保證標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基，每批號(hào)和/或每次購(gòu)買(mǎi)的產(chǎn)品應(yīng)檢測(cè)相應(yīng)的性能，包括生長(zhǎng)試驗(yàn)或與舊批號(hào)平行試驗(yàn)、生長(zhǎng)抑制試驗(yàn) （適用時(shí)）、生化反應(yīng)（適用時(shí)）等。每個(gè)批號(hào)和/或每次購(gòu)買(mǎi)時(shí)， 應(yīng)檢查并記錄產(chǎn)品的破損、污染，及外觀、冷凍或加熱現(xiàn)象。自制培養(yǎng)基，每批號(hào)產(chǎn)品應(yīng)檢測(cè)相應(yīng)的性能，包括無(wú)菌試驗(yàn)、生長(zhǎng)試驗(yàn)或與舊批號(hào)平行試驗(yàn)、生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)（適用時(shí)）、生化反應(yīng)（適用時(shí)）等。細(xì)菌：所有染色劑（革蘭染色、特殊染色、熒光染色 ）的新批號(hào)，以及使用中的染色劑， 應(yīng)至少每周用已知陽(yáng)性和陰性 （適用時(shí)）的質(zhì)控菌株檢測(cè)染色程序； 使用的每種染色方法， 應(yīng) 有操作程序（如：每種試劑作用時(shí)間等），并遵循。新批號(hào)及每一貨次的試劑、紙片，如呵噪試劑，桿菌肽，奧普托辛，X、V、XV因子紙片等應(yīng)有陰陽(yáng)性質(zhì)控。凝固酶、過(guò)氧化氫酶、氧化酶、|3內(nèi)酰胺酶，除新批號(hào)及每一貨次外，使用每天應(yīng)做陰性和陽(yáng)性質(zhì)控，但商業(yè)頭弛菌素試劑的 8內(nèi)酰胺酶試驗(yàn)可遵循制造商的奄議。應(yīng)驗(yàn)證商業(yè)鑒定系統(tǒng) （包括自動(dòng)、半自動(dòng)、手 32）結(jié)果的可靠性。診斷性抗血清試驗(yàn)應(yīng)設(shè)陰陽(yáng)性，尤其是陰性對(duì)照。有多種組成部分的試劑盒，應(yīng)使用同-于tL號(hào)的成分，除非生產(chǎn)商有特別說(shuō)明。應(yīng)每天監(jiān)測(cè)并記錄 CO孵育箱內(nèi)的C02濃度?？咕幬锩舾行栽囼?yàn)：