18學時藥理實驗

1、18學時藥理實驗實驗一 不同給藥途徑對藥物作用的影響【目的】1 觀察給藥途徑不同對藥物作用的影響.2練習小鼠的捉拿方法及腹腔注射法、灌胃注射法、皮下注射法。【原理】戊巴比妥鈉為鎮(zhèn)靜催眠藥，依據(jù)不同劑量及吸收情況的不同依次會出現(xiàn)：鎮(zhèn)靜-催眠-抗驚厥抗癲癇-麻醉-麻痹-死亡作用。用相同劑量，不同給藥途徑的藥物，從而觀察其差異?！緦嶒灢牧稀?、動物：小鼠2、藥品：0.4%戊巴比妥鈉溶液3、器材：電子秤1臺、1ml注射器2支、灌胃器1支、苦味酸1瓶、棉簽1根?！痉椒ㄅc步驟】1、取小鼠6只，雌雄各半，稱重.編號，分成3組。2、甲組-腹腔注射一乙組-皮下注射卜 0.4%戊巴比妥鈉溶液0.10ml/10g丁

2、組-灌胃'3、立即記錄時間，觀察每只動物翻正反射消失時間及翻正反射恢復時間【結(jié)果與處理】組別鼠號途徑0.4%戊 巴體重翻正反射消失（t）翻正反射恢復（t）給藥劑量時間（m）平均值時間（m平均值1甲2ip1乙2iH1丙2ig【注意事項】1、注意給藥途徑的正確操作。2、注意小鼠翻正反射消失時間判定1min。實驗二藥物的抗炎作用（足腫脹法）【目的】熟悉致炎物質(zhì)致大鼠后肢足跖炎癥性腫脹模型制作方法。了解糖皮質(zhì)激素的抗炎作用?！驹怼旷r蛋清等致炎物質(zhì)被注入大鼠后肢足跖后，可引起局部血管擴張，通透性增強，組織 水腫等炎癥反應，最后致足跖體積變大。糖皮質(zhì)激素通過抑制炎癥產(chǎn)生的多個環(huán)節(jié)，從而 避免致炎

3、物質(zhì)的致炎作用?！緦嶒灢牧稀?. 動物：$大鼠2只。2. 藥品：10%鮮蛋清、0.5%氫化可的松溶液、生理鹽水、。3. 器材：大鼠固定器1臺，1ml注射器3支，PV-200足趾容積測量儀，苦味酸、棉簽1根、 手套1只?！痉椒ㄅc步驟】1. 取大鼠2只，稱重，做好標記。一只大鼠腹腔注射生理鹽水0.3mL/ 100g，另一只腹腔注射0.5%氫化可的松溶液0.3mL/ 100g。2. 在鼠足某處用記號筆畫線作為測量標線，將鼠足緩緩放如測量筒內(nèi)，當水平面與鼠足上的 測量標線重疊時，踏動腳踏開關(guān)，記錄足趾容積，為正常值。3. 待二鼠注射藥物30min后，從右后足掌心向踝關(guān)節(jié)方向皮下注射 10%鮮蛋清0.l

4、mL/只。4. 在注射致炎物后的15min、30min、45min分別測量足趾容積。5. 計算：足跖腫脹度及腫脹率。腫脹度=致炎后的足趾容積一致炎前足趾容積 腫脹率=（致炎后的足趾容積一致炎前足趾容積） 十致炎前足趾容積x 100%【結(jié)果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表內(nèi)并加以比較得出結(jié)論。表1氫化可的松對大鼠足跖腫脹的影響體正常右致炎后足跖腫脹度致炎后足跖腫脹率鼠號重藥物藥量(mL)后足跖(mL)(%)(g)容積15mi n 30mi n 45min15mi n 30mi n 45min甲乙【注意事項】1抗炎實驗中動物性別的選擇：雄性2測定大鼠足體積時，選定統(tǒng)一測量位置（大鼠足外踝關(guān)節(jié)突起）3. 1

5、0%鮮雞蛋清溶液需在臨用前配制。4. 體重120150g的$大鼠對致炎劑最敏感，腫脹度高，差異性小。5. 測量時，應固定1人完成所有測量任務。6. 注射致炎劑時注意藥液勿外漏。實驗三藥物的抗炎作用（耳片法）【目的】熟悉二甲苯致大鼠耳廓炎癥性腫脹模型制作方法。了解糖皮質(zhì)激素的抗炎作用。【原理】化學刺激物可致動物急性炎癥；毛細血管擴張，滲出增加，出現(xiàn)局部腫脹，重量改變。 比較給予藥物前后動物局部腫脹程度的變化從而觀察到藥物的抗炎作用?！緦嶒灢牧稀?. 動物：$小鼠4只。2. 藥品：0.1%地塞米松、二甲苯、生理鹽水。3. 器材：分析天平1臺、稱量紙1張、打孔器1支、眼科鑷1把、打孔墊1個、手術(shù)剪1

6、 把、1mL注射器3支、苦味酸1瓶、棉簽1根。【方法與步驟】1. 取$小鼠4只，稱重，做好標記，分成2組。2. 一組腹腔注射0.1%地塞米松0.1ml/10g體重，另一組腹腔注射生理鹽水 0.1ml/10g體重。3. 給藥30min后，用二甲苯0.05ml均勻涂抹每只鼠的右耳內(nèi)外兩面。4. 涂抹45min后，小鼠脫臼處死，分別用打孔器取相同部位左右耳片，電子天平稱重。5. 計算：腫脹度二右耳重量-左耳重量腫脹率=（右耳重量-左耳重量）-左耳重量x 100%【結(jié)果與處理】將所得數(shù)據(jù)填入表內(nèi)并加以比較得出結(jié)論。地塞米松對小鼠耳片腫脹重量的影響耳片重量各組腫組別鼠號體重（g）藥物劑量-脹率平右左腫脹

7、度腫脹率均值甲12生理鹽水乙12地 塞 米 松【注意事項】1、小鼠耳廓滴加二甲苯時，正反面均勻涂抹。避免滴入耳廓內(nèi)2、小鼠左右耳打耳片位置統(tǒng)一（耳廓中間部位）。實驗四 傳出神經(jīng)藥物對離體腸肌的作用【目的】 觀察乙酰膽堿、阿托品、氯化鋇對胃腸平滑肌的作用，了解阿托品的作用機制。 掌握離體器官的測定方法?！緦嶒灢牧稀?、動物：家兔。2、藥品： 001氯化乙酰膽堿溶液、 0 05硫酸阿托品溶液、 1%氯化鋇溶液、 臺氏液。3、器材：離體平滑肌槽1臺、420E型生物機能實驗系統(tǒng)1套、肌張力換能器1支、 電腦 1 臺、雙凹夾 1 個、手術(shù)剪 1 把、注射器 3支、燒杯 1 個、縫線 2根?！痉椒ㄅc步驟】

8、1、 將離體平滑肌槽加水，通電加熱，設(shè)定溫度為37± 0.5 C。2、安裝換能器，與420E型生物機能實驗系統(tǒng)第一通道連接。3、離體腸肌的制備：取家兔 1 只，頸椎脫臼處死，立即打開腹腔，找到幽門部，分離十二指腸，以 2cm 左右穿線，分段結(jié)扎，剪取腸段。將腸段一端連結(jié)固定鉤上，置測定管（麥氏浴槽）中。 另一端連結(jié)張力換能器彈簧片上。上下調(diào)節(jié)雙凹夾，控制張力的大小。打開氣量調(diào)節(jié)旋鈕， 讓氣泡緩慢通入。4、離體腸肌收縮力測定：打開電腦，點擊桌面中BL-420圖標，進入主菜單，點擊工具欄上的“實驗項目”， 消化道實驗，消化道平滑肌生理特性（ 2）。腸管穩(wěn)定 10分鐘左右，記錄一段正常收縮

9、曲線，然后依次用藥。1加 0.01 氯化乙酰膽堿溶液 0.2ml ，觀察結(jié)果如何。2 當腸段收縮明顯時，立即加入 0. 05%硫酸阿托品溶淡0. 2ml，觀察對腸段收縮 的影響3當描筆下降到基線時，再次加人 0. 01%氯化乙酰膽堿溶液0. 2ml，觀祭結(jié)果。4更換浴槽中的臺氏液3次，待腸段恢復收縮后，加人I %氯化鋇溶液0. 2ml，觀 察腸段有何反應。5. 當作用出現(xiàn)后，立劇加人 0. 05%硫酸阿托品溶液 0.2ml ，觀察結(jié)果如何。 實驗結(jié)束后，暫停記錄，打開反演窗口，尋找所需波形的開始處，壓縮圖形，剪切整 理圖形，保存資料?！窘Y(jié)果】描繪或剪貼腸肌活動曲線圖，標明所給藥物的名稱和劑量，

10、分折討論所得結(jié)果。【注意事項】1、沖洗和分離腸管時動作應輕柔，盡量避免牽拉腸管。2、如需換液，臺氏液液面高度及溫度應與以前保持一致。3、加藥時不要把藥液直接加到標本上，以免影響結(jié)果。4、浴溫和腸肌的張力均可影響實驗結(jié)果，應注意調(diào)節(jié)。實驗五 鎮(zhèn)痛藥實驗（熱板法）【目的】觀察嗎啡的鎮(zhèn)痛作用掌握鎮(zhèn)痛藥實驗（熱板法）操作方法?！驹怼坷靡欢ǖ臏囟却碳游镘|體的某一部位以產(chǎn)生疼痛反應。把小鼠放在事先加熱到55C的金屬盤上，以舔后足為 疼痛”反應指標，以產(chǎn)生痛反應所需的時間為痛閾值。通過 測定給藥前后痛閾值的變化而反映藥物的鎮(zhèn)痛作用?！緦嶒灢牧稀?、動物：小鼠（雌性）2、藥品：0.1%嗎啡溶液、生理鹽水

11、。3、器材：RB-200智能熱板儀1臺、1mL注射器3支、電子稱1臺、苦味酸1瓶、棉簽1根?！痉椒ㄅc步驟】將智能熱板儀溫設(shè)定為55E，儀器升溫至設(shè)定值后，取雌性小鼠若干只，逐一將小鼠置 熱板儀上,按下計時開關(guān)（T）記錄時間，觀察小鼠對熱刺激的反應，以小鼠舔后足作為痛覺 指標，一旦出現(xiàn)舔后足動作，再次按下計時開關(guān)停止計時，立即將鼠取出。5分鐘后重新測試,如果兩次痛覺反應均發(fā)生在530秒內(nèi)，則為合格。對痛覺過分敏感或遲鈍及喜跳竄小 鼠，應棄去。將合格鼠兩次正常痛覺反應時間的均數(shù)算做給藥前的平均痛覺反應時間（既 痛閾值）。將挑選合格的小鼠4只稱重、標號，分成二組，分別給各小鼠下列藥物：甲組鼠： 腹腔

12、注射0.1%嗎啡溶液0.1mL/10g。乙組鼠： 腹腔注射生理鹽水0.1mL/10g作對照。分別在給藥后15、30、45分鐘各測痛覺反應（痛閾值）一次，如小鼠在60秒內(nèi)不出現(xiàn)痛覺反應，則按60秒計，取出實驗鼠，不再繼續(xù)刺激?！窘Y(jié)果與處理】痛閾值提高百分率用藥后平均痛閾值-用藥前平均痛閾值x 100%用藥前平均痛閾值嗎啡的鎮(zhèn)痛作用（熱板法）藥前平藥后痛閾值提高百分率組別劑量動藥后平均痛閾值（s）物 均痛閾（）數(shù)值（s）15min 30min 45min 15min30min 45min0.1% 嗎啡 0.1ml/10g2生理鹽水 0.1ml/10g2（另外，也可根據(jù)給藥后不同時間的痛閾提高百分率

13、作圖，橫坐標表示時間，縱坐標表示 痛閾提高百分率，觀察嗎啡的鎮(zhèn)痛作用，作用起始時間及維持時間。與生理鹽水組的曲線 比較。）【注意事項】1、熱板法小鼠個體差異較大，應選擇痛閾值在530秒之間的實驗動物，凡特別喜跳躍 的小鼠應淘汰。2、實驗應選擇雌性小鼠，因雄性小鼠在遇熱時睪丸下降，陰囊觸及熱板反應過敏，易致跳 躍，影響實驗準確性。3、室溫以1520C為宜。4、作用較弱的鎮(zhèn)痛藥此法不太敏感。實驗六鎮(zhèn)痛藥實驗（小鼠扭體法）許多刺激性化學物質(zhì)（如醋酸、酒石酸銻鉀、緩激肽、鉀離子等）腹腔注射刺激腹膜， 均能使動物產(chǎn)生疼痛反應，可用作疼痛模型，研究疼痛生理及篩選鎮(zhèn)痛藥物。其中小鼠扭 體法最常用。【目的】觀

14、察藥物的鎮(zhèn)痛作用，掌握小鼠扭體法實驗方法。【原理】小鼠腹腔注射一定容積和濃度的化學物質(zhì)，由于刺激腹膜而致小鼠出現(xiàn)腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢伸張、臂部高舉等行為反應，稱為扭體反應。鎮(zhèn)痛藥可抑制這種反應【實驗材料】1動物：小鼠2藥品：0.1%嗎啡溶液、生理鹽水3器材：1mL注射器3支、電子稱1臺、苦味酸1瓶、棉簽1根?！痉椒ㄅc步驟】取體重18-22g的健康小白鼠4只，稱重，編號。分成二組。甲組各鼠；腹腔注射0.1%嗎啡溶液0.1mL/10g。乙組各鼠； 腹腔注射生理鹽水0.1mL/10g，作對照。給藥后30min，各鼠腹腔注射0.7%冰醋酸溶液（或0.1%酒石酸銻鉀）0.2mL/只記錄小鼠出現(xiàn)疼痛的時間（潛伏期），給致痛劑后15min內(nèi)產(chǎn)生扭體反應（腹部收縮內(nèi)凹、軀干與后肢