高效液相色譜分離苯二甲苯

1、高效液相色譜法分離苯、甲苯實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?. 了解高效液相色譜儀器的組成部分。2. 掌握高效液相色譜儀器的使用方法及軟件操作方法。3. 掌握分離樣品的流動(dòng)相的配置方法。實(shí)驗(yàn)儀器介紹：高效液相色譜儀的組成如下圖：色譜泵進(jìn)樣器制坦知訥一數(shù)據(jù)處理V«s7l7 | c地叫制IIILd *檢測(cè)器/ 、Waters 996PDA梯度混含器豚沖阻用舞A色譜泵：本實(shí)驗(yàn)室色譜泵型號(hào)： Waters 1525 Binary HPLC Pump 其組成部分如下圖：排液冏(B)手動(dòng)堆樣器參比閥去進(jìn)樣器-或去廢液排液同(A)B進(jìn)樣器：本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)樣器型號(hào)：Waters 2707 Autosampler其組成部分如下

2、圖：組件列表自動(dòng)姓樣器的卷排宰包站以F都件&側(cè)面圖如下:自動(dòng)進(jìn)樣器有三種進(jìn)樣模式：充滿定量環(huán)：具有最高的進(jìn)樣體積精度 不充滿定量環(huán)針頭溢出：具有最大的靈活性 不充滿定量環(huán)：具有零樣品的損失了解注射器和at沖管儀器有謝神K1、的注駙器， 頗澹升（豚祁）,2&00做I包括備用套件中）果用標(biāo)推的1000撅升堵神骨和標(biāo)帶的100傲升樣品定母蝦,送作體稅的卷闈如h =， 充滿定通環(huán)-E0尚樣 本充輛r，GH*什氏汕出-o貧50他計(jì) 小充滿定最膝0到£7做升最枳的£1算方法址卜：- 充湖E於環(huán)-定#卜體積 不充滿定摧環(huán)代義滴出一定如可體枳的一V, 小先摘定蛀庫(kù)一（定置蝦

3、體祝T3X計(jì)頭體羯）也使用過(guò)程：3.將門涓人由體C 檢測(cè)器型號(hào)：Atltech ELSD 2000 ES其組成部分如下圖：儀器外觀粕功能錘蒸發(fā)光散射檢測(cè)器的原理：首先將柱洗脫霧化形成氣溶膠，然后在加熱的漂移管 中將溶劑蒸發(fā)，最后余下的不揮發(fā)性溶質(zhì)顆粒在光散射監(jiān)測(cè)池中得到監(jiān)測(cè)。1. LCD （液晶顯示）：在儀器使用中液晶顯示的主窗口為操作窗口。操作窗口列出了儀器的狀態(tài)和參數(shù)，如方法的名稱，漂移管溫度，氣體流量， 撞擊器位置，增益， 信號(hào)輸出, 滿量程輸出設(shè)置，和操作錯(cuò)誤總數(shù)（如發(fā)生）。液晶屏也顯示所有相關(guān)的子窗口：方法窗口，參數(shù)設(shè)置窗口，和診斷窗口。2. 數(shù)字鍵盤：觸摸鍵盤提供0-9數(shù)字，&qu

4、ot;*”，和“ Enter ”鍵調(diào)整儀器參數(shù)。3. 窗口鍵：前面板上有四個(gè)圓形觸摸窗口鍵。每個(gè)窗口鍵的功能是基于屏幕。如果該鍵在 當(dāng)前窗口中是可執(zhí)行的，當(dāng)前的功能會(huì)顯示在該鍵上方的窗口屏幕上。液相色譜法分離苯與甲苯原理：試樣中苯、甲苯用甲醇溶解,以甲醇 +水為流動(dòng)相，使用C18柱為填充的 不銹鋼柱和紫外檢測(cè)器，對(duì)試樣中的苯、甲苯進(jìn)行高效液相色譜分離和外標(biāo)法定 量。試劑和溶液苯、甲苯（色譜純）甲醇（色譜純）水（新蒸二次蒸僻水）儀器高效液相色譜儀：具有可變波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器色譜柱：250 mm * 4.6 mm （id），不銹鋼柱，內(nèi)裝 C18填料，粒徑 5 m超聲波活洗器微孔過(guò)濾器：濾膜孔徑為0.

5、45 m分析步驟高效液相色譜操作條件流動(dòng)相：甲醇+水=70+30 （ V /V ）,使用前經(jīng)0.45 m濾膜并超聲脫氣。柱溫：室溫。流速：1.0 ml/min檢測(cè)波長(zhǎng)：254 nm進(jìn)樣量：10 L標(biāo)準(zhǔn)溶液配制稱取色譜純苯、甲苯各0.05g （精確至0.0001 g）于50 ml容量瓶中，此溶液質(zhì) 量濃度C （苯、甲苯）為1.00 mg/ml,用甲醇溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻備用。 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備分別吸取苯、甲苯標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.5、1.00、1.50、2.00、2.50、3.00 ml,置于50 ml容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，配置成分別含苯、甲苯 10.00以g/ml、 20.00 g/ml、30.00 g/ml、40.00 g/ml、50.00 g/ml、60.00 g/ml 的標(biāo)準(zhǔn)溶 液，用0.45 m濾膜過(guò)濾，濾液待用。在上述色譜條件下，待儀器基線穩(wěn)定后注入標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，記錄色譜峰面積， 以苯、甲苯的質(zhì)量濃度（g/ml）為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的色譜峰面積為縱坐標(biāo)，繪制 標(biāo)準(zhǔn)曲線。試驗(yàn)的測(cè)定在與測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液相同的條件下注入待測(cè)溶液,根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間 定性，記錄色譜峰面積，并從標(biāo)準(zhǔn)曲線查的苯、甲苯的濃度。結(jié)