分光光度法測(cè)鐵ppt課件

1、分光光度法測(cè)鐵分光光度法測(cè)鐵一、一、 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康亩?、?shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 在在 pH=911.5 的的 NH3.H2O-NH4Cl 溶液中，溶液中，F(xiàn)e3+與磺基水楊酸反響生成組成比與磺基水楊酸反響生成組成比1:3的黃色穩(wěn)定配合物。的黃色穩(wěn)定配合物。Fe3+3COO-OHSO3-Fe36-COO-O-SO3-+ 3 H+(黃色配合物) 該配合物在堿性溶液中的最大吸收波長(zhǎng)為該配合物在堿性溶液中的最大吸收波長(zhǎng)為 420 nm，可在此波長(zhǎng)下丈量吸光度，由朗伯可在此波長(zhǎng)下丈量吸光度，由朗伯-比耳定律計(jì)算鐵含比耳定律計(jì)算鐵含量。量。1 1分光光度計(jì)儀器構(gòu)造分光光度計(jì)儀器構(gòu)造三、分光光度計(jì)的運(yùn)用方法

2、三、分光光度計(jì)的運(yùn)用方法2 2分光光度計(jì)運(yùn)用方法分光光度計(jì)運(yùn)用方法 通電通電-儀器自檢儀器自檢-預(yù)熱預(yù)熱20 min； 用用鍵設(shè)置測(cè)試方式為透射比鍵設(shè)置測(cè)試方式為透射比TMODE MODE 鍵鍵透射比透射比T T 波長(zhǎng)選擇：用波長(zhǎng)調(diào)理旋鈕設(shè)置所需的波長(zhǎng)波長(zhǎng)選擇：用波長(zhǎng)調(diào)理旋鈕設(shè)置所需的波長(zhǎng) 調(diào)零調(diào)零 翻開(kāi)樣品室蓋，在翻開(kāi)樣品室蓋，在“Transmittance方式下按方式下按“0%鍵，此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示鍵，此時(shí)儀器自動(dòng)校正后顯示“000.0?！?%鍵鍵T T方式方式 調(diào)滿調(diào)滿 在比色皿槽中，依次放入?yún)⒈纫海瑯悠芬涸诒壬蟛壑?，依次放入?yún)⒈纫海瑯悠芬? 1和樣品液和樣品液2 2等，蓋上樣品室

3、蓋等，蓋上樣品室蓋( (留意透光截面垂直于光路方向留意透光截面垂直于光路方向) )。參比液參比液樣品液樣品液1 1樣品液樣品液2 2樣品液樣品液3 3 將參比液拉入光路中，按將參比液拉入光路中，按“100%T鍵調(diào)鍵調(diào)T為為100%，此，此時(shí)儀器顯示時(shí)儀器顯示“BLA，表示儀，表示儀器正在自動(dòng)校正，校正終了后器正在自動(dòng)校正，校正終了后顯示顯示“100.0。 樣品測(cè)定：樣品測(cè)定： 將將MODE轉(zhuǎn)換為轉(zhuǎn)換為“ABSORBANCE，顯色屏讀，顯色屏讀數(shù)為數(shù)為0.000，然后將樣品液分別拉入光路中，此時(shí)顯，然后將樣品液分別拉入光路中，此時(shí)顯示測(cè)得的樣品吸光度。示測(cè)得的樣品吸光度。分光光度計(jì)的運(yùn)用本卷須知

4、：分光光度計(jì)的運(yùn)用本卷須知： (1) 比色皿的清潔程度，直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，比色皿的清潔程度，直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。因此，特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處置：自來(lái)水反復(fù)沖特別要將比色皿清洗干凈。裝樣前處置：自來(lái)水反復(fù)沖洗洗蒸餾水漂洗蒸餾水漂洗2次次待裝溶液漂洗待裝溶液漂洗2次。必要時(shí)，需用次。必要時(shí)，需用濃硝酸或鉻酸洗液短時(shí)間浸泡。濃硝酸或鉻酸洗液短時(shí)間浸泡。 用完后用自來(lái)水和蒸餾用完后用自來(lái)水和蒸餾水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。水洗凈并用檫鏡紙檫干放回比色皿盒中。 (2) 拿放比色皿時(shí)，應(yīng)持其拿放比色皿時(shí)，應(yīng)持其“毛面，不要接觸毛面，不要接觸“光面。光面。光面光面毛面毛面3假設(shè)比色皿外

5、外表有液體，運(yùn)用擦鏡紙朝同一方假設(shè)比色皿外外表有液體，運(yùn)用擦鏡紙朝同一方向拭干，以保證吸光度丈量不受影響。向拭干，以保證吸光度丈量不受影響。 (4) 比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的比色皿內(nèi)盛液應(yīng)為其容量的2/3，過(guò)少會(huì)影響實(shí)，過(guò)少會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，過(guò)多易在丈量過(guò)程中外溢，污染儀器。驗(yàn)結(jié)果，過(guò)多易在丈量過(guò)程中外溢，污染儀器。容容量量的的2/32/3 (5) 比色皿的光面要與光源在一條線上。比色皿的光面要與光源在一條線上。光透過(guò)窗口光透過(guò)窗口四、實(shí)驗(yàn)步驟四、實(shí)驗(yàn)步驟 取系列取系列50 mL容量瓶并編號(hào)，按下表配制系列溶液。容量瓶并編號(hào)，按下表配制系列溶液。以試劑空白作參比溶液，在以試劑空白作參比溶液，在420 nm波長(zhǎng)下測(cè)定各溶液波長(zhǎng)下測(cè)定各溶液的吸光度。的吸光度。xA 以吸