血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在胃癌患者血清中的表達(dá)及意義

1、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在胃癌患者血清中的表達(dá)及意義【摘要】 目的 探討血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)在胃癌患者血清中的表達(dá)及其臨床意義。方法 應(yīng)用ELISA法對(duì)52例胃癌患者血清中的VEGF表達(dá)進(jìn)行測(cè)定,并與30名健康人VEGF水平對(duì)照。結(jié)果 胃癌患者血清中VEGF水平明顯高于正常人(P<0.01);術(shù)后VEGF水平明顯低于術(shù)前(P<0.01);VEGF水平與胃癌腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)受累程度密切相關(guān),隨著臨床病理分期的上升,VEGF水平亦明顯升高。VEGF水平與組織學(xué)分化程度及患者的性別等因素?zé)o關(guān)。結(jié)論 血清VEGF水平與胃癌的浸潤(rùn)程度密切相關(guān),術(shù)前檢測(cè)血清VEGF水

2、平對(duì)預(yù)測(cè)胃癌的侵襲和轉(zhuǎn)移情況具有重要意義。 胡敏(1981),女,漢族,湖北籍,青海大學(xué)醫(yī)學(xué)院2005級(jí)研究生 【關(guān)鍵詞】 胃癌 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定 Abstract Objective To determine the serum vascular endothelial growth factor (VEGF) level in patients with gastric carcinoma and to analyze its clinical significance. Methods The levels of serum VEGF were measured by

3、enzyme-linked immunosorbent assay in 52 patients with gastric carcinoma and 30 normal persons as the control group. Results The level of serum VEGF in gastric carcinoma was significantly higher than that of normal control(P<0.01).The level of postoperative serum VEGF was significantly lower t

4、han preoperative one(P<0.01). The level of serum VEGF was positively correlated with size of tumor, depth of invasion, lymph-node metastasis. With up-grading of clinical pathological stage, the level of VEGF increased significantly, but its relation to histological type and sex was not signif

5、icant . Conclusion The level of serum VEGF is closely correlated to invasion of gastric carcinoma. Serum VEGF assay may be used to preoperatively predict invasion and metastasis of gastric carcinoma.2 / 10 Key words Gastric cancer Vascular endothelial growth factor Enzyme-linked immunosorbent assay

6、新生血管的形成是由于促血管生成因子增多所致,在這些因素中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)作用最強(qiáng)1。研究表明,腫瘤細(xì)胞能合成并周期性分泌VEGF,所分泌VEGF與血管內(nèi)皮細(xì)胞上的VEGF受體結(jié)合,促進(jìn)腫瘤新生血管形成2。而VEGF能特異性促使內(nèi)皮細(xì)胞增殖及直接參與血管增生,它與腫瘤的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移有密切關(guān)系3。我們采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)了52例胃癌初治患者術(shù)前、術(shù)后和30例健康獻(xiàn)血者VEGF的含量,來(lái)探討VEGF與胃癌的關(guān)系。 1 材料與方法 1.1 臨床資料 胃癌病例52例,男38例,女14例;年齡4178歲,

7、中位年齡59歲。病例為2006年4月至2007年3月在青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤外科治療的住院患者,診斷均經(jīng)內(nèi)鏡或病理檢查證實(shí)。組織學(xué)類型:高中分化腺癌18例,低分化腺癌34例。分期按TNM分期(術(shù)后臨床病理分期),期2例、期10例、A期22例、B期6例、期12例。對(duì)照組選擇同期正常健康人30名,均為正常體檢者。 1.2 主要試劑 人血清VEGF定量試劑盒(購(gòu)于美國(guó)TPI公司)。 1.3 方法 全部患者(52例)均在術(shù)前1天及術(shù)后1周晨起自肘靜脈處抽取空腹外周血3 ml(收集血液的試管應(yīng)為無(wú)熱原和內(nèi)毒素試管)于室溫下靜置1 h,離心(3000r/min)10 min,分離血清后,放置于冰箱（-80）

8、中保存待查。嚴(yán)格按照試劑盒操作說(shuō)明采用雙抗夾心ELISA法定量測(cè)定胃癌患者血清中VEGF的水平。 1.4 結(jié)果判定 加入底物待酶解反應(yīng)終止后，陽(yáng)性孔顏色明顯深于陰性對(duì)照者或與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。以P(patient)/N(negative)值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1者為陽(yáng)性;P/N值小于2.1,但大于1.5者為可疑;P/N小于1.5者為陰性。最終反應(yīng)板放在ELx800型酶標(biāo)定量測(cè)定儀中于450nm波長(zhǎng)處讀取OD值。所測(cè)值按標(biāo)準(zhǔn)曲線換算成VEGF含量。 1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,采用t檢驗(yàn)。 2 結(jié)

9、果 正常健康人血清VEGF測(cè)定值為(170.42±15.37)pg/L,胃癌患者血清VEGF測(cè)定值為(559.04±92.16)pg/L,明顯高于正常人,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。術(shù)后血清VEGF測(cè)定值為(483.79±83.07)pg/L,較術(shù)前明顯降低(P<0.01),結(jié)果詳見(jiàn)表1。 表1正常人和胃癌患者VEGF(pg/ml)的關(guān)系 例數(shù)VEGF(pg/ml)正常30170.42±15.37胃癌患者術(shù)前52559.04±92.16胃癌患者術(shù)后52483.79±83.07注: 胃癌患者術(shù)前與正常人

10、比較P0.01; 胃癌患者術(shù)前與術(shù)后比較P0.01. VEGF水平與腫瘤大小、浸潤(rùn)深度有關(guān)(P<0.05);有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者VEGF水平明顯高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P<0.01);VEGF水平隨著胃癌臨床病理分期的上升而升高,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。VEGF水平與性別及組織學(xué)分化程度因素?zé)o明顯相關(guān)性,結(jié)果詳見(jiàn)表2。 3 討論 腫瘤的生長(zhǎng)有兩個(gè)明顯不同的階段,即從無(wú)血管的緩慢生長(zhǎng)期轉(zhuǎn)為有血管的快速增殖期,血管的生長(zhǎng)使腫瘤能獲得足夠的營(yíng)養(yǎng)而完成血管切換期4。因此,血管形成在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移中發(fā)揮著重要作用,已成為腫瘤治療的新靶點(diǎn)之一。VE

11、GF是二硫鍵連接的同源二聚體糖蛋白,通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞的3種受體（FLT-1、KDR 和FLT-4）在腫瘤血管形成中起重要作用。最近有學(xué)者5采用ELISA方法檢測(cè)腫瘤患者術(shù)前血清VEGF值,結(jié)果表明術(shù)前血清VEGF可作為一種新的腫瘤標(biāo)志物,對(duì)腫瘤診斷及預(yù)后判斷具有重要的臨床價(jià)值。 表2胃癌患者臨床病理參數(shù)與VEGF水平的關(guān)系 本實(shí)驗(yàn)采用ELISA法檢測(cè)胃癌患者與健康人血清VEGF水平,結(jié)果顯示胃癌患者VEGF水平較健康人明顯為高(P<0.01),這可能是由于腫瘤細(xì)胞分泌的VEGF穿過(guò)血管壁進(jìn)入血液循環(huán), 或是由于VEGF使血管壁通透性增加所致,因此血清VEGF可作為一個(gè)早期預(yù)測(cè)指標(biāo)。其

12、表達(dá)水平與胃癌的腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床病理分期密切相關(guān)(P<0.05或0.01),提示血清VEGF的檢測(cè)對(duì)預(yù)測(cè)胃癌的侵襲程度具有重要的臨床意義。術(shù)后血清VEGF水平較術(shù)前明顯降低(P<0.01),提示血清VEGF可作為胃癌惡性生物學(xué)行為的血清學(xué)參考指標(biāo)。本次實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示VEGF與性別無(wú)關(guān),但由于所取例數(shù)有限,此結(jié)論還需要進(jìn)一步證實(shí)。大多數(shù)胃癌患者在診斷時(shí)已經(jīng)處于疾病晚期。化療仍是晚期胃癌的主要治療方法,但是化療的效果不明顯。分子靶向治療是近年來(lái)在治療血液和實(shí)體腫瘤中涌現(xiàn)出的新治療手段。VEGF是目前所知作用最強(qiáng)、特異性最高的一種促血管內(nèi)皮生長(zhǎng)的細(xì)胞因

13、子,在胃癌等多種實(shí)體瘤組織中均有VEGF及其受體的表達(dá)。血管生成抑制劑可作用于腫瘤內(nèi)皮細(xì)胞,阻止其增殖、遷移、出芽及形成新生血管,并誘導(dǎo)不成熟的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡,抑制腫瘤生長(zhǎng),尤其是胃癌6。本實(shí)驗(yàn)血清VEGF值與腫瘤分化程度無(wú)關(guān),提示VEGF不參與腫瘤分化的調(diào)控,但本實(shí)驗(yàn)樣本含量較少,缺少未分化組,此結(jié)論有待進(jìn)一步證實(shí)。【參考文獻(xiàn)】 1McNeish IA,Bell SJ,Lemoine NR.Gene therapy progress and prospects: cancer gene therapy using tumour suppressor genes.Gene Ther,2004,1

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