常用發(fā)酵產(chǎn)品配方和工藝

1、部分發(fā)酵產(chǎn)品配方和工藝；青霉素菌種：產(chǎn)黃青霉H一110；培養(yǎng)基：發(fā)酵培養(yǎng)；65，空氣流量6Lmin，轉(zhuǎn)速300rmi；發(fā)酵培養(yǎng)：種子培養(yǎng)基移入發(fā)酵罐后(接種量為：1O；罐頂壓力006Mpa，用4molLNaoH和；發(fā)酵培養(yǎng)基：黃豆粉1.5%，棉籽粉2%，花生粉3；種子培養(yǎng)階段通風(fēng)1：0.5/min.；頭孢菌素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速1部分發(fā)酵產(chǎn)品配方和工藝青霉素菌種：產(chǎn)黃青霉H一110 ；培養(yǎng)基：發(fā)酵培養(yǎng)基，一玉米漿，磷酸二氫鉀，碳酸鈣，麩質(zhì)粉，葡萄糖。將長好的種子移入5m。自動發(fā)酵罐。發(fā)酵過程各參數(shù)控制：PH值6065，空氣流量6Lmin，轉(zhuǎn)速300rmin，培養(yǎng)溫度25 ，單糖

2、濃度468%，發(fā)酵全過程采用控制補料。從60小時帶放后每4小時補加一次玉米漿，每次補入35ml直到放罐。發(fā)酵單位測定是利用高壓液相色譜儀用外標(biāo)法測定。發(fā)酵培養(yǎng)：種子培養(yǎng)基移入發(fā)酵罐后(接種量為：1O%)，培養(yǎng)溫度維持在26，通氣率為Ivvm，罐頂壓力006Mpa，用4molLN aoH 和1molL H2SO4維持PH65左右。發(fā)酵培養(yǎng)基：黃豆粉1.5%，棉籽粉2%，花生粉3%，磷酸二氫鉀0.15%，硫酸銨1%，碳酸鈣0.15%，葡萄糖0.30%，苯氧乙酸0.57%，硫酸鈉0.54%，發(fā)酵菌種：產(chǎn)黃青霉，發(fā)酵周期140小時。種子培養(yǎng)階段通風(fēng)1：0.5/min.頭孢菌素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐

3、，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，罐壓0.5公斤，最高通風(fēng)量1：1/分，pH在7左右，(1)種子培養(yǎng)基：玉米漿、蔗糖、葡萄糖、DL一蛋氨酸、豆油、CaCO3，pH：6.56.6。(2)發(fā)酵培養(yǎng)基：玉米漿、淀粉、糊精、蛋氨酸、葡萄糖、豆油、CaCO3, MgSO4,(NH4)2S04,FeSO4,MnSO4,ZnSO4,CuSO4，pH：6.06.1。發(fā)酵菌種采用頂頭孢霉，周期150小時螺旋霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，罐壓0.5公斤，最高通風(fēng)量1：1/分，pH在7左右，培養(yǎng)基主要成分為？，發(fā)酵菌種采用螺旋霉素鏈霉菌，發(fā)酵周期130小時左右。根據(jù)螺旋霉素生物合成的研究結(jié)果， 短鏈脂

4、肪酸是合成螺旋霉素的前體,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在發(fā)酵培養(yǎng)48h后添加O5%濃度的乙醇， 能夠提高其發(fā)酵效價1O%左右(表2) 加入豆油能較大幅度地提高螺旋霉素的發(fā)酵效價。在培養(yǎng)48 h時加入較在基礎(chǔ)料中加入更能提高螺旋霉素發(fā)酵效價，豆油的濃度以1%為好。新霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，罐壓0.5公斤，最高通風(fēng)量1：1/分，pH在7左右，培養(yǎng)基主要成分為熱榨的黃豆餅粉，廣東的酵母粉，福建的蛋白胨，發(fā)酵菌種采用？菌，發(fā)酵周期130小時左右。推薦產(chǎn)品：DF6000K。在新霉素發(fā)酵過程中，需不斷補充碳源(糖)和氮源(硫酸銨)。若一次補人的糖量太多且供氣不足時，碳源氧化不完全，會導(dǎo)致有機酸堆

5、積，則pH值下降；當(dāng)培養(yǎng)基中的蛋白質(zhì)、氨基酸或其它含氮的有機物中碳被利用后，將釋放出游離NH 使pH值上升。同樣，一次補人糖和硫酸銨量的多少，也會使發(fā)酵液的pH值發(fā)生波動。因此，為了使產(chǎn)生菌生命活動及合成新霉素的各種酶活力發(fā)揮得好，必須控制一定的補入量，以補充產(chǎn)生菌正常營養(yǎng)，調(diào)節(jié)發(fā)酵液pH值適合菌體的生長，發(fā)育，繁殖和新霉素的合成。在生產(chǎn)中控制pH值的最佳適宜范圍在6568之間。利福霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，罐壓0.5公斤，最高通風(fēng)量1：1/分，pH在7左右，培養(yǎng)基主要成分為葡萄糖10%,液化淀粉2%，黃豆餅粉1%，蛋白胨1%，魚粉0.5%，各種無機鹽適量，發(fā)酵菌種

6、采用地中海諾卡氏菌，發(fā)酵周期130小時左右。紅霉素發(fā)酵參考環(huán)境：10100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，最高通風(fēng)量1：1/分，pH自然，發(fā)酵菌種采用紅色鏈霉菌；培養(yǎng)基主要成分A:液化淀粉4%，葡萄糖4%，黃豆餅粉4%，正丙醇1%，無機鹽適量 B:黃豆餅粉4.0、葡萄糖4.0、淀粉4.0、糊精2.0% 、CaCO3 0.6 、(NH4)2SO4 0.15%、KH2PO4 0.02、NaC1 0.2% 、MgSO 0.02%，28，周期160小時。潔霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，最高通風(fēng)量1：1/分，pH在7左右，發(fā)酵菌種采用鏈霉菌,發(fā)酵周期150小時。培養(yǎng)基( %) 黃豆餅

7、粉2.5，玉米漿0.6，(NH )2 SO4 0.5，NaNO3 0.4，NaC1 0.6，CaCO3 0.9，玉米淀粉2.5，葡萄糖 3.0，KH2PO4 0.07。發(fā)酵工藝 FBC;培養(yǎng)溫度：o60 h，31 ；6O 13Oh，30 ;130 h至放罐31 。種子培養(yǎng)基淀粉20 g/L ，葡萄糖15 g/L 豆餅粉25 g/L ，CSL 30 g/L ，caco3 50 g/L ，pH7072133 發(fā)酵培養(yǎng)基可溶性淀粉30 g/I ，葡萄糖100 g/L ，豆餅粉30 g/L ，(N H4)2SO4 8.0 g/L ，NaNO3 8.0 g/L KCI 5.0 g/L CaCO3 9.0

8、 g/L ，pH 6570菌種Lin一337：皖北藥業(yè)股份有限公司選育、保存。112 發(fā)酵培養(yǎng)基玉米淀粉，2.0 ；葡萄糖，4.0 ；黃豆餅粉，2.0 ；去酚棉子餅粉，0.5 ；玉米漿，0.6 ；氯化鈉，0.5 ；碳酸鈣，0.5；硫酸銨，0.3 ；磷酸二氫鉀，0.02 ；玉米油，0.06 ；GP，0.03 發(fā)酵液初期粘度最大到130mPas推薦產(chǎn)品：DF6000K。配合豆油使用。潔霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速100轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1：0.5/分，罐壓0.7公斤， pH在6.57，培養(yǎng)基( %) 黃豆餅粉2.5%，玉米漿0.6%，(NH )2 SO4 0.5%，NaNO3 4%，NaC

9、1 0.6%，CaCO3 0.9%，玉米淀粉2.5%，葡萄糖 3.0%，KH2PO4 0.07%。培養(yǎng)溫度：060 h，31 ；6O 13Oh，30 ;130 h至放罐31 。發(fā)酵液初期粘度最大到130mPas，發(fā)酵菌種采用鏈霉菌,發(fā)酵周期150小時。土霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1：0.7/分，罐壓0.7公斤，培養(yǎng)基主要成分為黃豆餅粉3.0%，玉米漿0.65%， 淀粉8.0%，(NH4)2SO41.2%，NaCl 0.2%，CaCO3 1.1%， KH 2PO4 0.015%，每罐外加CoCl2 500g。環(huán)孢素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分

10、，通風(fēng)量1：0.7/分，罐壓0.7公斤，發(fā)酵培養(yǎng)基組成：葡萄糖2.0%，面粉4.0%，干酪素0.61 .2%，NaNO3 015%，KH2PO4 0.2%， KCl 0.05%，MgSO4·7H2O 0.005%，CaCO3 0.2%；pH 6.5，發(fā)酵時間4天左右，溫度25度左右。通氣和培養(yǎng)溫度對CyA 的生物合成量影響非常大，納他霉素發(fā)酵培養(yǎng)基：大豆蛋白胨l.8%，酵母粉0.45%，葡萄糖3.6%，pH75，2接種量接種，進行納他霉素發(fā)酵生產(chǎn)96h，菌體生物量為l265 /L，最終產(chǎn)量為28gL。發(fā)酵菌種：褐黃孢鏈霉菌。慶大霉素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分，通

11、風(fēng)量1：1/分，罐壓0.5公斤，培養(yǎng)基主要成分為淀粉4.0%，玉米粉2%， 黃豆餅粉3.0%，蛋白胨0.3%，(NH4)2SO40.1%，CaCO3 0.5%，每罐外加CoCl2 810g/噸。PH7.58.0。發(fā)酵菌種采用慶大小單孢菌,發(fā)酵周期80小時。金霉素金色鏈霉菌 經(jīng)正交法篩選得到發(fā)酵培養(yǎng)基配方()：玉米淀粉85，花生粉15，黃豆粉25，淀粉酶(沈丘酶制劑廠生產(chǎn)，酶活力2000IumL)O004，氯化鈉025，硫酸銨05，碳酸鈣07，蛋白胨10，酵母粉02，硫酸鎂0025，豆油1OmL25mL培養(yǎng)基(見表4)。在溫度29 ±05 ，半徑25mm偏心運動旋轉(zhuǎn)搖床(ZP一96型)

12、，轉(zhuǎn)速260rmin條件下培養(yǎng)166h。小諾霉素11 菌種:棘孢小單孢(Micromonospora echinospora)12 培養(yǎng)基種子培養(yǎng)基：黃豆餅粉l5g，葡萄糖1g，玉米粉20g，魚粉2g，淀粉40g，pH75，定容1L 發(fā)酵培養(yǎng)基：葡萄糖5g，淀粉40g，玉米粉1 5g，黃豆餅粉25g，蛋白胨2g，硫酸銨O.5g，pH7.2，定容1L再生培養(yǎng)基：斜面培養(yǎng)基添加蔗糖68g，氯化鎂10g，定容1LP穩(wěn)定液：見文獻2。篩選出的MS一116菌株生理特性與出株有所不同，對其發(fā)酵條件進行研究，認為最適宜溫度應(yīng)控制在34，其對氧的需求量較大，應(yīng)注意改善供氧狀況；培養(yǎng)基中應(yīng)使用熱榨黃豆粉餅，濃度

13、為30；葡萄糖濃度為0，2。核黃素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1：1/分，罐壓0.5 公斤，培養(yǎng)基主要成分為葡萄糖30.0%，玉米漿2%，無機鹽適量。發(fā)酵菌種采用細菌, 發(fā)酵周期40小時。四環(huán)素發(fā)酵參考環(huán)境：5100噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速140轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1：0.7/分，罐壓0.7公斤，培養(yǎng)基主要成分為液化淀粉，玉米漿，黃豆粉， KH2PO4，每罐外加二巰基苯并噻唑和NaBr。pH在6左右。推薦產(chǎn)品：DF204K。紅曲紅色素菌種：Monascus ruber 6一X4(由寧夏瑞德公司提供)培養(yǎng)基 固態(tài)培養(yǎng)基各成分質(zhì)量分數(shù)：可溶性淀粉5 ，麥芽糖4 ，蛋白胨2 ，瓊脂I8一

14、2%。液體發(fā)酵培養(yǎng)基 種子培養(yǎng)基各成分質(zhì)量濃度：豆粉20 g/L，大米粉50 g/L ，KH2PO425 g/L ，NaNO3 g/L，MgSO4·7H2 0 4 g/L，調(diào)節(jié)pH值為45左右。液體發(fā)酵培養(yǎng)基各成分質(zhì)量濃度：大米粉100 g/·L，NaNO3 7 g/L，調(diào)節(jié)pH值為35左右。多粘菌素發(fā)酵參考環(huán)境：1060噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1：1/分，pH在7左右，發(fā)酵培養(yǎng)基主要成分為玉米粉、液化淀粉、尿素、玉米漿，CaCO3。發(fā)酵溫度30度左右，周期32小時。在25 m3發(fā)酵罐中發(fā)酵42小時，硫酸粘桿菌素效價達15.88萬u/ml硫酸粘桿菌素 是第二代抗菌

15、促生長類飼料添加劑，是由多黏芽孢桿菌所產(chǎn)生的堿性多肽抗生素，對畜禽等動物體內(nèi)有害的革蘭氏陰性菌具有強大的對抗殺菌作用。分子式及分子量：COLISTIN C53H100N16O13 1169 COLISTIN B C52H98N16O131155硫酸粘桿菌素又名硫酸粘菌素、克利斯汀(Colistin)、多粘菌素E(Polymyxin E)、抗敵素等,系由多粘軒菌培養(yǎng)液中獲得的堿性瑣環(huán)狀多肽類(po1ypeptide system)抗生素, 是多粘菌素E1和E2的混合物。為白色粉末,易溶于水,耐熱, 消化道不易吸收, 排泄迅速, 毒性小, 無副作用, 不易產(chǎn)生耐藥菌株, 是最安全的畜禽促生長抗生素

16、之一。粘菌素主要對革蘭氏陰性菌有很強的抗菌作用, 幾乎對所有革蘭氏陰性菌有效 ,對綠膿桿菌有顯著作用。治療時常與抗革蘭氏陽性菌的桿菌肽鋅合用; 用作飼料添加劑可刺激幼畜生長. 提高飼料效率, 防止肉雞、豬、牛等畜禽傳染性腸炎; 防治大腸桿菌、綠膿桿菌、沙門氏菌等革蘭氏陰性菌引起的腸道疾病。硫酸粘菌素的抗菌作用機理colistin屬于polymyxins抗生素, 故其抗菌作用機理與polymyxin B 相似, 首先吸附細菌細胞璧，結(jié)合細胞膜中脂蛋白的游離磷酸鹽，使細胞成分(嘌呤和嘧啶)脫逸，從而細胞死亡, 故具有殺菌作用, 其最低的抑菌濃度為每升0.2一80單位。硫酸粘菌素的配伍性Colist

17、in不可與Soluble barbiturates(可溶性巴比妥類)及 Cyanocobalaml (VitaminB12)合做成溶液使用。臨床應(yīng)用硫酸粘菌素屬于狹效性抗生素, 它對革蘭氏陰性菌如: Ecoil、Pseudomonas、Salmonella、Shigella、Aerobactor 等引起的疾病有效, 對革蘭氏陽性菌無效, 由于其毒性、副作用較低, 故它在禽、畜的臨床應(yīng)用上較多,它主要用于防治禽、畜的細菌性腸炎。我國1958年才開始赤霉素的研究、生產(chǎn)和推廣應(yīng)用，并于1969年因為黨的“九大召開及國慶20周年，故把赤霉素稱之為 九二O”2 5n m發(fā)酵罐工業(yè)化生產(chǎn)試驗21 試驗材料

18、與方法211 菌種：Gl14212 試驗地點：213 培養(yǎng)基 種子培養(yǎng)基(ww)：葡萄糖15,糊精10,花生粉15,MgSO4·7HzO 01,KH2PO4 01,消泡劑02,自來水配制，自然pH值,6m3種子罐中投料3m3 ，實罐消毒121 ，30分鐘，冷卻至28待接種。 發(fā)酵培養(yǎng)基(ww)：玉米淀粉70,飴糖25；豆餅粉03,花生粉10,MgSO4·7H2O 007,KH2PO4 014；消沫劑005， a一淀粉酶0.05，50m3發(fā)酵罐投料40m3。pH值自然，實罐消毒121"C，30分鐘，冷卻至28后接入種子培養(yǎng)液2，14 發(fā)酵設(shè)備；種子罐6 m3，二檔攪

19、拌 發(fā)酵罐體積50m3。，三檔攪拌 流加罐用 另一種子罐代替215 發(fā)酵條件種子罐：培養(yǎng)溫度28 士I ，通風(fēng)量l：I vv，罐壓0405 kgcm2 發(fā)酵罐：培養(yǎng)溫度28士l ，通風(fēng)量l：07 vv，罐壓01015 kgcm2赤霉素發(fā)酵參考環(huán)境：1060噸罐，攪拌轉(zhuǎn)速115轉(zhuǎn)/分，通風(fēng)量1：1/分， 培養(yǎng)溫度大多采用2932 。培養(yǎng)基的起始pH值控制在5.5左右，而將發(fā)酵過程的pH值維持在3.54.5之間為宜。種子培養(yǎng)基：葡萄糖0.3g，蒸餾水lOOml。豆餅粉1.5g，淀粉1.Og，葡萄糖1.Og，KH2PO4 0.lg，(NH4)2SO4 005g，MgSO4 0.1g，自來水lOOml

20、。發(fā)酵培養(yǎng)基：豆餅粉0.9淀粉7.0，葡萄糖1.0，KH2PO4 0.15，MgSO40.08，a-淀粉酶0.003，pH 55.5發(fā)酵周期130小時阿維菌素：種子培養(yǎng)基( g/L)：淀粉30，豆餅粉20，酵母粉2.0，CoCl2·6H20 0.0005,pH 7072。 發(fā)酵培養(yǎng)基(gL)：淀粉50，玉米粉l0，酵母粉l0，豆餅粉10CaCO3 2.0，CoCl2·6HaO 00005，pH 7.0 7.2。妥布霉素發(fā)酵培養(yǎng)基：黃豆餅粉2.5；葡萄糖1.O； 玉米粉1.O； 玉米淀粉1.5；(NH4)2SO4 0.5；魚粉O.4；MgS04 0.6； 油1.0；ZnSO4

21、 0.05；CaCO3 0.6;溫度37,發(fā)酵時間112h左右。發(fā)酵菌種采用黑暗鏈霉菌。洛伐他汀培養(yǎng)基：淀粉，黃豆餅粉，葡萄糖，玉米漿，K2HPO4，(NH4)2S04，CaCO3，發(fā)酵菌種采用紅曲菌株，M.ruber。發(fā)酵周期10天。甾體激素氫化可的松菌種:藍色犁頭霉(As365)，培養(yǎng)基(%) 葡萄糖1.O，酵母膏0.23，玉米漿1.5，硫酸銨0.5；pH值6.46.5；m1)，28 培養(yǎng)24h，投入0.25%的RSA（發(fā)酵底物醋酯化合物：17a一羥基孕甾一4一烯一3，2O一二酮一21一醋酸酯，RSA），然后轉(zhuǎn)化3642h。綜上所述，在利用整腸生菌(Bacillus Licheniformis)等桿菌發(fā)酵生產(chǎn)桿菌肽中，由于前期微生物生長繁殖迅速，碳源消耗量較大。在發(fā)酵中后期的碳源主要用于桿菌肽次級代謝產(chǎn)物的合成，故碳耗較平穩(wěn)。所以碳源不宜過多，23 為宜。同時桿菌肽生產(chǎn)與其它抗菌素生長碳源不同，實驗表明，加入3檸檬酸作為碳源最佳，以保證菌體迅速生長。如果中后期碳濃度過高，會引起菌體生長太快，而減少桿菌肽合成。所以，對碳源種類的選擇和控制至關(guān)重要，在選擇適合種類碳源的條件下，碳源量的控制方法可采用碳比消耗速率、菌體